病犬大肠杆菌16S rRNA甲基化酶基因检测研究

摘要：为了解郑州市发病犬大肠杆菌对氨基糖苷类药物高度耐药的16S rRNA甲基化酶流行情况,本研究测定了分离自河南郑州市宠物医院发病犬的123株大肠杆菌对氨基糖苷类代表药物阿米卡星的敏感性;分别设计6种16S rRNA甲基化酶基因特异性引物,对耐药分离株进行16S rRNA甲基化酶基因PCR扩增检测。检测结果显示,在发病犬大肠杆菌中仅检测到armA和rmtB,其检出率分别为3.25%（4/123）和38.2%（47/123）。其中,有3.25%（4/123）的大肠杆菌可同时检测到armA和rmtB。这些结果提示,此地区发病犬大肠杆菌16S rRNA甲基化酶基因以rmtB为主。病犬细菌一旦携带这些耐药基因,可导致对氨基糖苷类药物高度耐药,应引起重视。     

质粒介导的喹诺酮类耐药基因在猪源大肠杆菌中的检测

为了解河南地区质粒介导的喹诺酮类耐药基因(qnrA、qnrB、qnrS、qepA和aac(6′)-Ib-cr)在健康猪源大肠杆菌中的流行与分布,分别设计特异性引物对2009年在河南地区2个规模化猪场猪群的肛门拭子中分离保存的109株猪源大肠杆菌进行聚合酶链式反应扩增。检测结果显示,仅检测到qnrB、qnrS和aac(6′)-Ib-cr,检出率分别为2.8%、10.1%和24.8%。提示质粒介导的喹诺酮类耐药基因在河南地区健康猪源大肠杆菌中有一定的发生率,且以qnrS和aac(6′)-Ib-cr为主。质粒介导的喹诺酮类耐药基因的出现,可导致耐药基因的水平扩散,势必造成兽医临床用药的难度加大。     

首届农民工大学生毕业 140名农民工圆了大学梦

<正>2014年7月19日,140名农民工在北京市总工会职工大学迎来了他们的毕业典礼。"早就梦想成为大学生了,现在终于领到毕业证了!"40岁的韩飞云摸着毕业证书,难以掩饰自己激动的心情。韩飞云在北京方地建筑设计有限公司做模型设计工作,2011年他在公交车上的     

牛副流行性感冒的防控措施

牛副流行性感冒疾病是牛养殖过程中一种常见的呼吸道传染性疾病,主要会导致牛只出现呼吸道感染、体温升高、咳嗽以及肺炎等症状,严重降低了牛只的生产性能和健康状况,阻碍了牛只养殖产业的科学发展。牛副流行性感冒主要由3型牛副流感病毒(BPIV3)所导致,在牛只的发病初期合理使用抗生素可以获得良好的治疗效果。本文将对牛养殖过程中牛副流行性感冒疾病出现的诊断措施以及相关的防治措施进行介绍,旨在为牛只的健康养殖带来帮助。     

质粒介导的tet(A)突变体对肺炎克雷伯氏菌替加环素耐药的影响

替加环素是治疗多重耐药肺炎克雷伯氏菌感染的为数不多的抗菌药物之一,但替加环素耐药肺炎克雷伯氏菌的出现给临床治疗带来了严重威胁。本实验从临床分离到1株替加环素耐药肺炎克雷伯氏菌,电转化实验获得了一个对替加环素耐药的质粒,功能性分析发现该质粒中的tet(A)基因发生了双移码突变,且药敏实验证实这些突变可单独使替加环素的MIC值增加8倍,米诺环素和四环素的MIC值增加128倍。研究证实,质粒介导的tet(A)突变体可导致肺炎克雷伯氏菌对替加环素耐药,扩宽了对肺炎克雷伯氏菌替加环素耐药机制的认识,并为该类型耐药基因在革兰氏阴性菌中的扩散控制提供了依据。     

鸡沙门菌16S rRNA甲基化酶的检测及扩散机制

为了解鸡沙门菌16S rRNA甲基化酶基因(armA,rm tA,r m tB,rmtC,rmtD,rmtE和mpmA)的扩散机制,在分离鉴定沙门菌的基础上,分别进行药敏试验、耐药基因检测、质粒接合及电转化、质粒分型、Southern blot以及耐药基因遗传环境分析等.结果显示,在分离的21株沙门菌中,只有1株对阿米卡星和庆大霉素高度耐药,且armA基因阳性.多次尝试进行质粒接合试验均未获成功,但质粒转化试验成功获得了转化子.质粒分型和Southern blot证实armA位于IncFⅡ质粒上.armA基因的遗传背景分析表明,该基因位于一个两端具有插入序列IS26的复合转座子上.本研究在动物源沙门菌检测到16S rRNA甲基化酶基因armA,且证实armA基因位于IncFⅡ质粒的复合转座子上,提示转座子和质粒均可在armA基因的水平扩散中发挥重要作用.     

热应激对兔垂体和下丘脑CAT与SOD水平的影响

为研究不同热应激温度及持续时间对兔下丘脑与垂体抗氧化能力的影响,选用80日龄~90日龄的健康新西兰兔60只,随机分为3组,高热组、低热组和常温对照组。每天热应激3 h,分别在处理后15、30、45、60 d处死,取下丘脑和垂体组织,研究热应激对组织的损伤机制。结果表明,下丘脑与垂体过氧化氢酶(CAT)的活性随着温度的升高显著降低,相同应激温度条件下,随着应激时间的延长其CAT活性显著降低;下丘脑和垂体中超氧化物歧化酶(SOD)的活力随着温度升高显著降低,相同应激温度条件下,随着应激时间的延长同一应激组中其活性也显著降低。说明随着应激时间的延长,应激温度的增加,垂体与下丘脑的抗氧化能力呈下降趋势。     

鸡源葡萄球菌携带cfr与tet(M)基因于同一质粒的检测

为了解鸡源葡萄球菌中多药耐药基因cfr的流行及耐药情况,采用提取细菌基因组DNA、PCR检测、药物敏感性检测、质粒提取、电转化试验、全质粒测序及分析等方法进行了研究。分离并鉴定出了1株多药耐药表型葡萄球菌,其含有cfr与tet(M)基因,且cfr与tet(M)耐药基因位于同一质粒上。     

猪源大肠杆菌质粒和染色体介导的喹诺酮类药的耐药机制

采用微量肉汤稀释法对31株猪源大肠杆菌进行6种喹诺酮类药物的敏感性测定,聚合酶链式反应检测质粒介导的喹诺酮类耐药（PMQR）基因qnr、qepA和aac（6′）-Ib-cr,并分析PMQR基因阳性菌株染色体gyrA、gyrB、parC、parE基因的喹诺酮耐药决定突变区（QRDRs）突变。结果显示,31株猪源大肠杆菌对兽医临床常用的氟喹诺酮类药物均呈现耐药。在31株猪源肠杆菌中共检测到2株携带qnrB10和4株携带qnrS1基因的大肠杆菌,未检测到qnrA、qepA和aac（6′）-Ib-cr。在PMQR阳性菌株gyrA基因的QRDRs中,低耐药菌株的gyrA基因出现83位S→W突变,高耐药菌株的gyrA基因同时出现83位S→L和87位D→N突变。而在parC基因的QRDRs中,大部分耐药菌株出现80位S→I突变,1株耐药菌株出现45位V→L突变。gyrB和parE基因的QRDRs未检测到突变。结果表明,本地区猪源大肠杆菌对兽医临床常用的氟喹诺酮类药物耐药严重,PMQR的出现和QRDRs的点突变可同时协同贡献对喹诺酮类耐药,而PMQR的出现加速了喹诺酮类耐药基因的快速传播。     

鸡源奇异变形杆菌16S rRNA甲基化酶基因的扩散机制

从某鸡场9日龄鸡群的粪便样本中分离、鉴定出奇异变形杆菌22株,并进行药敏试验和耐药基因(16S rRNA甲基化酶基因和超广谱β-内酰胺酶基因)的PCR检测.然后通过接合试验、电转化试验以及脉冲场凝胶电泳来分析16S rRNA甲基化酶基因的扩散机制.结果显示,22株鸡奇异变形杆菌对庆大霉素、阿米卡星、卡那霉素均呈现高水平耐药,对头孢噻呋、头孢噻肟、环丙沙星、氟苯尼考、多西环素呈现不同程度的耐药.PCR检测表明,在7种16S rRNA甲基化酶基因中仅扩增出rmtB基因;同时,这些菌株也携带有blaCTX-M基因.接合试验和电转化试验重复多次均未成功.脉冲场凝胶电泳结果显示,这些菌株具有相近的亲缘关系,提示该场鸡源奇异变形杆菌16SrRNA甲基化酶基因rmtB的扩散以克隆传播为主.