流动注射化学发光法测定水中的甲萘威

在酸性介质中硫酸铈与甲萘威作用,有微弱的发光现象,基于罗丹明B对该发光反应有明显的增敏效果,结合流动注射技术建立了一种测定甲萘威的简便快捷灵敏的方法。该方法的检出限为5．6×10^-9mol／L,线性范围是2．0×10^6～1．0×^10^-4～mol／L。对1．0×10^-5mol／L的甲萘威进行了11次连续平行测定,相对标准偏差为1.8％。对饮用水源中甲萘威的测定,回收率为95．4％～104．0％,其结果令人满意。     

几种糖业有机物料对蔗田土壤微生物数量的影响

采用尼龙网袋法研究了几种糖业有机物料（蔗叶、蔗根、宿根蔗头、糖厂滤泥和酒精废液）对蔗田土壤微生物数量的影响,探讨不同有机物料对蔗田土壤微生物的作用效应。结果表明：8次采样蔗叶、蔗根、宿根蔗头、糖厂滤泥、酒精废液、对照（不加物料）处理的细菌数量平均值分别为5．75×10^6、8．01×10^6、11．99×10^6、59．55×10^6、14．3×10^6、1．09×10^6个／g干土,放线茵数量平均值分别为0．436×10^6、1．138×10^6、1．096×10^6、6．349×10^6、3．433×10^6、0．185×10^6个／g干土,真菌数量平均值分别为0．433×10^6、2．312×10^6、2．015×10^6、1．973×10^6、0．487×10^6、0．069×10^6个／g干土。说明糖业有机物料能增加土壤微生物数量,与蔗叶、蔗根、宿根蔗头相比,施用糖厂有机废料（滤泥或酒精废液）能使土壤细菌及放线菌数量明显增多,而对真菌的影响则以蔗根和宿根蔗头更有效。     

荧光法测定当归中阿魏酸的含量

根据在一定条件下阿魏酸的相对荧光强度与其浓度在3．0×10^-7到5．0×10^6 mol／L浓度范围内呈线性关系,建立起一种荧光法测定阿魏酸含量的新方法,方法的检测限为9×10^9 mol／L,同时测定1．0×10^-6 mol／L阿魏酸10次,相对标准偏差为2．1％．该法操作简便,灵敏,迅速,用于当归中阿魏酸含量的测定,得到了比较满意的结果．     

鸡p15INK4B蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

用制备并纯化的鸡p15^INK4B蛋白免疫BALB／c小鼠,制备了p15^INK4B蛋白的单克隆抗体,并进行了鉴定。结果表明：2株分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株105和3F5分别属于IgG1和IgM抗体亚类;培养上清的效价分别为1：820和1：680,腹水的效价分别为1：4×10^6和1：7×10^5;2株单克隆抗体亲和力常数分别为3．13×10^9L/mol（1C6）和1．24×10^8L／mol（3F5）,相对亲和力1C6〉3F5,且具有不同的抗原识别位点;Westem-blot鉴定表明,1C6和3F5这2株单克隆抗体均能与原核表达纯化的和杆状病毒表达的p15^INK4B蛋白结合,而不与其他蛋白结合,说明本研究成功制备了鸡p15^INK4B的单克隆抗体,可作为深入研究鸡p15^INK4B蛋白的功能提供特异的抗体材料。     

薄片镜蛤人工育苗技术的初步研究

于2007年5月-9月,对薄片镜蛤Dosinia laminata的室内人工育苗技术进行了初步研究,并成功培育出壳长1．2～1．5mm的稚贝300万粒。平均壳长为（60．90±2．24）mm的雌性个体每次产卵量为200万粒;在水温24．5～25．5℃、盐度27、pH7．5的条件下,受精卵约经过22h40min发育为D形幼虫;薄片镜蛤的卵径、D形幼虫、变态规格、单水管稚贝和双水管稚贝大小（壳长×壳高,下同）分别为（70．33±1．06）μm、（100．33±1．30）μm×（81.07±1．72）μm、（213．33±8．02）μm×（202．00±5．96）μm、（309．17±9．17）μm×（301．67±10．81）μm、（1158．33±9．31）μm×（1067．50±10．84）μm。浮游期间（0～10日龄）,幼虫壳长、壳高的生长速度分别为（8．28±0．70）μm／d、（9．19±0．76）μm／d,存活率为（36．8±3．78）％;变态期间（10～14d）,幼虫壳长、壳高的生长速度分别为（8．46±0．42）μm、（8．04±0．45）μm,变态率为（5．0±1．25）％,变态持续时间为4～5d;稚贝期间（14～40日龄）,单水管、双水管稚贝的生长快于幼虫期,单水管稚贝壳长、壳高生长速度分别为（32．19±2．06）μm／d、（28．75±1．97）μm／d,双水管稚贝壳长、壳高生长速度分别为（53．07±40．43）μm／d、（47．86±38．22）μm／d,存活率为（81．2±3．36）％。以海泥为附着基采苗效果较好。     

基于铝酞菁为载体的亚硝酸根选择性电位传感器的研制

制备了基于铝酞菁为中性载体对亚硝酸根离子（NO2^-）具有独特选择性的一种聚合膜（PVC）电极。该电极对NO2^-呈现出反-Hofmeister选择性行为和近Nernst电位响应,其线性范围为1．0×10^-1～1．5×10^-6mol／L,检测下限为9．5×10-^-7mol／L,斜率为（-58．3±0．5）mV／decade。该电极作为直接电位法的指示电极,能运用于废水中亚硝酸的测定,结果令人满意。     

Ghrelin对大鼠胃蛋白酶和H+-K+-ATP酶活性的体外作用

从断奶大鼠中获得新鲜的胃粘膜,分离培养胃粘膜上皮细胞,培养30 h后,试验组换为分别含有1×10^-4、1×10^-3、1×10^-2和1×10^-1μmol/L生长素（Ghrelin）的新鲜培养液,对照组换为不含Ghrelin的正常新鲜培养液。继续培养4 h,收集培养液和细胞,分别测定培养液中胃蛋白酶活性和细胞中H^＋-K^＋-ATPase活性。试验结果表明：1×10^-3μmol/L的Ghrelin可显著提高胃蛋白酶的活性（P〈0.05）,1×10^-4、1×10^-3和1×10^-2μmol/L的Ghrelin显著提高胃黏膜上皮细胞中H^＋-K^＋-ATPase的活性（P〈0.05）。表明Ghrelin体外作用于胃粘膜上皮细胞可刺激胃蛋白酶和胃酸的分泌。     

流动注射化学发光法测定秋水仙碱

甲醛存在时,高锰酸钾可在酸性介质中氧化秋水仙碱产生较强的化学发光．根据这一实验现象并结合流动注射技术,建立了一种高锰酸钾-甲醛-秋水仙碱化学发光测定秋水仙碱的分析方法．在最优化条件下,化学发光强度与秋水仙碱浓度在1．0×10^-7～6．0×10^-5mol／L范围内呈线性关系．方法的检出限为3．0×10^-8mol／L,相对标准偏差为1．90A（c=1．0×10^-6mol／L,n=11）．该方法用于药物制剂中秋水仙碱含量的测定,其分析结果与药典方法比较具有很好的一致性．     

动物源性人兽共患细菌病防控生物新制剂的研究Ⅰ．分泌抗大肠杆菌O157：H7单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

将E．coli O157：H7（EHEC—O157：H7）用甲醛灭活、超声破碎,免疫BALB／c小鼠,制备免疫脾细胞;与SP2／0骨髓瘤细胞融合后,获得7株分泌抗E．coli O157：H7单克隆抗体（mAbs）的杂交瘤细胞株,分别命名为F5、B8、E7、G9、G11、F1和C3,Ig亚类分别是IgG2ak、IgG2aK、IgG1K、IgMK、IgMh、IgMK和IgG2aK。用间接ELISA检测,E7和F1细胞培养上清液的效价为1．6×10^3,腹水效价均为1×10^11;C3、F5、B8、G9和G11细胞培养上清液的效价为1×10～2×10^2,腹水效价均为1×10^3。相加ELISA结果显示,F1、G9和G113株mAbs对应相同的抗原表位,而其它4株对应不同的抗原表位。用间接ELISA分析特异性,7株mAbs与某些其他血清型的大肠杆菌有交叉反应。Westernblotting表明,c3、E7和F13株mAbs在蛋白分子量28×10^3处有特异性条带,而其它4株mAbs则未显示蛋白带。     

底物浓度对月鳢主要消化酶活性的影响

分别采用干酪素、TAME、可溶性淀粉和橄榄油为底物,对月鳢（Channa asiatica）成鱼各消化酶活性在胃粘膜、前肠粘膜和肝胰脏等组织中的最适底物浓度进行了测定。结果表明,在胃粘膜、前肠粘膜和肝胰脏组织中,蛋白酶的最适底物浓度分别为2％、2％和1％的干酪素,胰蛋白酶的分别为0．52×10^-3mol／L、0．52×10mol／L和1．56×10^-3mol／L的TAME,淀粉酶的分别为3．00％、0．25％和0．25％的可溶性淀粉,脂肪酶的分别为11．4％、17．6％和39．1％的橄榄油;同一消化酶所对应的最适底物浓度在不同组织存在一定差异。     

地衣芽孢杆菌和荚膜红假单胞菌对异育银鲫鱼种非特异性免疫机能的影响

本试验主要研究芽孢杆菌和光合细菌对异育银鲫鱼种血液白细胞数量、白细胞吞噬活性及血清溶菌酶活性的影响。600尾异育银鲫鱼种,随机分成9个试验组,一个对照组,每组设一平行。试验组在水中添加不同浓度（5×10^8、5×10^9、5×10^10 CFU／m^3）的芽孢杆菌和光合细菌及两种菌1：1的混合制剂,饲养49d后,测定异育银鲫血液白细胞数目、白细胞的吞噬活性、血清溶菌酶活性等各项免疫指标。试验结果表明：光合细菌、芽孢杆菌及其1：1的混合制剂均能提高异育银鲫鱼种血液中白细胞的免疫机能,其中混合制剂作用效果最佳,其次芽孢杆菌,效果最差的是光合细菌,且在5×10^8、5×10^9、5×10^10 CFU／m^3。浓度范围内,微生态制剂的作用效果随着添加量的增加而增加。     

地衣芽孢杆菌和荚膜红假单胞菌对异育银鲫鱼种非特异性免疫机能的影响

本试验主要研究芽孢杆菌和光合细菌对异育银鲫鱼种血液白细胞数量、白细胞吞噬活性及血清溶菌酶活性的影响。600尾异育银鲫鱼种,随机分成9个试验组,一个对照组,每组设一平行。试验组在水中添加不同浓度（5×10^8、5×10^9、5×10^10 CFU／m^3）的芽孢杆菌和光合细菌及两种菌1：1的混合制剂,饲养49d后,测定异育银鲫血液白细胞数目、白细胞的吞噬活性、血清溶菌酶活性等各项免疫指标。试验结果表明：光合细菌、芽孢杆菌及其1：1的混合制剂均能提高异育银鲫鱼种血液中白细胞的免疫机能,其中混合制剂作用效果最佳,其次芽孢杆菌,效果最差的是光合细菌,且在5×10^8、5×10^9、5×10^10 CFU／m^3。浓度范围内,微生态制剂的作用效果随着添加量的增加而增加。     

漆黄素的高效液相色谱化学发光检测法研究

研究发现,漆黄素在碱性条件下能大大增强Luminol-K3Fe（CN）6化学发光强度,基于此,并结合HPLC分离技术,建立起漆黄素的HPLC-L分析新方法。在C18反相键合相色谱柱,甲醇为流动相的条件下,实现了对人体血清中的漆黄素的分离与测定,方法的线性范围为7．7×10^-6～9．6×10^-4g／L,相关系数为r=O．9998,检出限为2.7×10^-7g／L,相对标准偏差为2．41％（n=11）。     

蛇莓ISSR-PCR反应体系的建立与优化

采用单因素试验对蛇莓ISSR—PCR反应体系中的6种主要反应因子（模板DNA、Mg^2＋、Taq DNA聚合酶、BSA、dNTP及引物）进行优化筛选，确立了适合蛇莓ISSR分析的最佳PCR扩增反应体系，即10μl PCR反应体积中含：1×TaqDNA聚合酶配套缓冲液（10mmol／L Tris·HCl，pH值9．0；50mmol／L KCl；0．1％Triton X-100），1．75mmol／L Mg^2＋，2mg／ml BSA，0．2mmoL／L 4×dNTP，10ng模板DNA，18pmol引物，0．5U Taq DNA聚合酶。     

以双安息香缩三乙四胺为中性载体的铈离子电极的研究

研究了以双安息香缩三乙四胺[BBS]为中性载体,制备一种对铈离子（Ce^3＋）具有优良的电位响应特性的离子电极,其选择性从大到小次序为：Ce^3＋,La^3＋,Sr^2＋,Cu^2＋,Cd^2＋,Ag^＋,Ni^2＋,Cr^3＋,Mn^2＋,Ca^2＋,K^＋,Li^＋,Hg^2＋.该电极在pH=3．0的NaOH-HNO3溶液体系中具有最佳的电位响应,在1．0×10^-1～4．0×10^-5mol／L Ce^3＋浓度范围呈近能斯特响应,斜率为32．9mV／pCe^3＋（25℃）,检测下限为1．25×10^-5mol／L．采用交流阻抗和紫外光谱分析技术研究了配合物对电极电位响应行为的作用机理．将该电极用于实际样品的测定,获得满意的结果．     

猪舍环境中气载需氧菌及气载葡萄球菌的研究

本研究采用Andersen-6空气微生物收集器,选用血-葡萄糖-琼脂培养基为采样介质,对两个不同猪场8个猪舍环境空气中需氧菌总数和葡萄球菌总数进行了检测,并对葡萄球菌的菌群组成进行了分析,评价气载需氧菌和气载葡萄球菌对猪舍环境的污染及对饲养人员健康的潜在危害。结果表明,2个猪场气载需氧菌的浓度分别为2．87×10^4、12．65×10^4CFU／m^2,葡萄球菌的浓度分别为1．94×10^4、5．74×10^4CFU／m^3。猪舍空气中葡萄球菌主要包括金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、猪葡萄球菌、木葡萄球菌、头状葡萄球菌、科氏葡萄球菌、肉葡萄球菌,其中金黄色葡萄球菌的浓度占葡萄球菌总浓度的24％和27％,其次是表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌。从葡萄球菌菌在Andersen-6空气微生物收集器层级上的分布规律来看,主要分布在B—E级（36．9％）,气溶胶颗粒直径在0．2—6μm之间,可以进入到人、畜的气管、支气管,甚至细支气管,对养殖人员和动物呼吸道存在严重危害。     

珍稀濒危植物连香树RAPD反应体系的优化

按照L25（5^6）的正交试验设计方法,对珍稀濒危植物连香树RAPD反应20止体系中Mg^2＋浓度、dNTPs浓度、10×Buffer缓冲液用量、Taq酶用量、模板浓度和引物浓度的不同梯度组合进行了筛选。在此基础上对退火温度、退火时间和循环次数等条件进行了优化。最后得到优化的20μl连香树RAPD反应体系为：25mmol／L Mg^2＋2μl,dNTPs0．4μl,1U的TaqDNA酶1μl,10×Buffer缓冲液2．5μl,0．5OD引物0．8μl,约25ng模板0．6μl。优化的退火温度为37℃,退火时间为15s,循环次数为40次。     

正交设计优化番茄基因组DNA SSR-PCR反应体系

以21份番茄品种为材料,应用正交试验设计对影响番茄SSR—PCR的主要参数进行优化,建立适于番茄的SSR反应体系和扩增程序。在15μl体系中各反应的最适合含量为：2．5μl ddH2O,1μl 40ng模板DNA,3μl 200μmol／L dNTP,3μl 0．8μmol／L SSR引物,0．1μl 0．5U／μl Taq DNA聚合酶,1．5μl 10×PCR Buffer,0．9μl 1．5mmol／L MgCl2。PCR适宜扩增程序为：94℃预变性2min;94℃变性1min,45℃退火25s,共35个循环;68℃延伸25s,68℃延伸10min,然后4℃保存。利用此反应体系对21个番茄品种进行PCR扩增并电泳检测,扩增结果清晰且有较高的多态性,表明该体系适合番茄的遗传多样性研究。     

月季SSR反应体系的优化

以月季品种‘月月粉’为试材,利用CTAB法提取DNA,对影响SSR—PCR扩增体系的主要因子设计了多梯度的优化实验,建立了适用于月季的SSR反应体系：总反应体积为25μL,包括模板DNA溶液（20ng／μL）2μL,10×PCR buffer（Mg^2＋free）2．5μL,MgCl2（25mmol／L）2．0μL,dNTPs（10mM）0．5μL,正反引物各（10μmol／L）1μL,TaqDNA聚合酶（5U／μL）0．3μL．利用该优化体系对部分月季品种进行PCR扩增和电泳检测,扩增结果清晰且有较高的多态性,表明该体系适合用于分析月季的遗传多样性．     

丽格海棠叶片光合特性及其与生长环境研究

运用LI-6400便携式光合作用测定系统,研究了温室栽培条件下丽格海棠的光合特性。结果表明：叶片净光合速率的日变化呈双峰型,有明显的“光合午休”现象。丽格海棠的光饱和点约为327μmol／（m^2·S）,光补偿点约为28．3μmol／（m^2·S）;CO2饱和点约为1200~l／L,补偿点约为60～70μl／L,对高温（〉25℃）的反应敏感。