| 正交设计优化番茄基因组DNA SSR-PCR反应体系 |
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| 引用本文： | 王欢欢,姜晶,王慧,孙周平.正交设计优化番茄基因组DNA SSR-PCR反应体系[J].江苏农业科学,2009(2). |
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| 作者姓名： | 王欢欢 姜晶 王慧 孙周平 |
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| 作者单位： | 沈阳农业大学园艺学院,辽宁沈阳,110161 |
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| 基金项目： | 辽宁省教育厅项目(编号:05L412) |
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| 摘 要： | 以21份番茄品种为材料，应用正交试验设计对影响番茄SSR—PCR的主要参数进行优化，建立适于番茄的SSR反应体系和扩增程序。在15μl体系中各反应的最适合含量为：2．5μl ddH2O，1μl 40ng模板DNA，3μl 200μmol／L dNTP，3μl 0．8μmol／L SSR引物，0．1μl 0．5U／μl Taq DNA聚合酶，1．5μl 10×PCR Buffer，0．9μl 1．5mmol／L MgCl2。PCR适宜扩增程序为：94℃预变性2min；94℃变性1min，45℃退火25s，共35个循环；68℃延伸25s，68℃延伸10min，然后4℃保存。利用此反应体系对21个番茄品种进行PCR扩增并电泳检测，扩增结果清晰且有较高的多态性，表明该体系适合番茄的遗传多样性研究。
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| 关 键 词： | 番茄 SSR 体系研究 优化 |
Optlimization of ISSR-PCR reaction system in tomato genomic DNA by orthogonal design |
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