规模牛场产气荚膜梭菌耐药性及其ERIC-PCR指纹图谱分型

[目的 ]了解不同规模牛场分离的产气荚膜梭菌耐药性及其耐药基因分型,为临床治疗和感染控制提供依据。[方法 ]收集2014—2016年来自不同规模牛场分离的产气荚膜梭菌25株,采用K-B法检测其对9种常用抗生素的敏感性;应用基因间重复序列聚合酶链反应(ERIC-PCR),对菌株进行DNA分型及同源性分析。[结果]分离到25株产气荚膜梭菌;在耐药检测的9种药物中,耐药率超过50%的有4种,其中对庆大霉素耐药率最高(92%),其次是对青霉素(84%),而对氨苄青霉素耐药率最低(4%),对其余药物的耐药率在12%~52%之间;ERIC-PCR谱型表现为9个基因型(Ⅰ~Ⅸ),其中大部分来源于不同的克隆株,且有2个克隆株的相似度为100%。[结论 ]奶牛场的产气荚膜梭菌多重耐药现象比较严重,分子多样性复杂;产气荚膜梭菌来源广泛,不同地区、环境和条件下,同一种病原菌的基因型存在一定差异,可能存在多个基因型。     

畜禽舍空气细菌内毒素两种检测方法的比较研究

[目的 ]比较气相色谱-串联质谱法(GC-MSMS)与鲎试验(LAL)在检测畜禽舍空气内毒素中的应用效果及相关性,以及气载内毒素是否对环境和饲养人员健康构成危害。[方法 ]通过国际标准AGI-30液体冲击式空气采样器,在4个养殖场16个畜禽舍采集空气样品,采用GC-MSMS与LAL测定空气细菌内毒素浓度。[结果 ]LAL测定的牛舍、猪舍、羊舍和禽舍空气细菌内毒素浓度中间值分别为1.85×10~5 EU/m~3、2.76×10~6 EU/m~3、4.82×10~5 EU/m~3、6.55×10~6 EU/m~3;而GC-MSMS测定的分别为3.3×10~4 EU/m~3、1.26×10~5 EU/m~3、2.4×10~4EU/m~3和8.21×10~5 EU/m~3。GC-MSMS在禽舍检测出的空气内毒素浓度显著大于其他畜舍(p0.05)。用LAL和GC-MSMS分析测定的空气中内毒素浓度超过了对大多数动物和人体有威胁的阈限值1.0×10~3EU/m~3。用GCMSMS与LAL测定的禽舍和羊舍空气样品中细菌内毒素浓度之间存在显著相关(p0.05),而牛舍和猪舍之间浓度没有显著相关性。GC-MSMS主要检测存在于动物舍空气内毒素中含有C_(14)-C_(18)链的3-羟基脂肪酸。LAL测定的内毒素浓度与含有C_(14)-C_(16)链3-羟基脂肪酸量之间有显著相关(p0.05)。[结论 ]GC-MSMS与LAL联合应用可以提高检测气载内毒素的准确性,且本研究表明畜禽舍中检测到的空气细菌内毒素浓度可以危害人类和家畜动物健康。     

养殖环境细菌微生物气溶胶粒径分布及其健康危害评估

为深入了解畜禽舍环境中气载细菌微生物的空气动力学粒径分布规律,并评估其潜在的健康危害风险,采用Andersen-6级微生物空气采样器以血-琼脂培养基、沙氏培养基和高氏合成1号培养基为采样介质,对鸡舍、猪舍、牛舍环境中空气样品进行系统定点取样、测定及分析。研究结果表明,鸡舍环境中气载需氧菌含量最高,猪舍次之,牛舍最低;空气细菌粒径分布均为第Ⅰ级最高,鸡舍空气粒径呈偏态分布,牛舍、猪舍分别在第Ⅲ级和第Ⅳ级出现第2个峰值。携带细菌可吸入微粒在猪舍环境中比例最大。空气真菌与放线菌均在第Ⅳ级最高,携带真菌和放线菌可吸入粒子的比例显著大于细菌（P<0.05）。鸡舍、猪舍、牛舍空气微生物粒径各级分布比例基本一致。在鸡舍、猪舍、牛舍每天约有6.1×105CFU、4.7×104CFU和3.6×104CFU气载细菌微生物可分别进入人和动物小支气管或直接进入肺泡,从而对人和动物健康构成潜在危害。     

规模羊场环境气载产气荚膜梭菌耐药性及其ERIC-PCR分型

为监测不同规模羊场空气中分离的气载产气荚膜梭菌耐药性变迁及不同菌株间的遗传相似性,从而为临床治疗和控制感染提供依据,收集了2016—2017年来自不同规模羊场分离的气载产气荚膜梭菌30株,采用K-B法进行药敏试验,应用基因间重复序列聚合酶链反应(ERIC-PCR),对菌株进行DNA分型及同源性分析。结果显示:30株气载产气荚膜梭菌在监测的9种药物中,对庆大霉素的耐药性最强(86.7%),其次为青霉素(43.3%),对头孢噻肟耐药率最低(1%),对其他药物耐药率在3.3%~36.7%之间;ERIC-PCR谱型表现为14个基因型(Ⅰ~XIV),其中大部分来源于不同的克隆株,且有2个克隆株的相似度为99.0%。本研究结果表明:规模羊场的气载产气荚膜梭菌多重耐药较严重,分子多样性复杂;气载产气荚膜梭菌来源广泛,不同地区、环境和条件下,同一种病原菌的基因型也存在一定差异,可能存在多个基因型;同一个规模羊场的基因型也不同,不同羊场之间也存在相同的基因型。     

规模场奶牛O-AsiaⅠ、A型口蹄疫免疫抗体消长规律观察

本试验对犊牛母源抗体及不同阶段奶牛口蹄疫免疫抗体效价变化规律进行了观察研究。结果表明,犊牛出生吃初乳7d后具有免疫意义的抗FMD母源抗体,且群体抗体保护率在一个较高的水平,随后降低,但仍在临界值以上,一直持续到60日龄回落近临界值,因此30日龄进行首次免疫,首免后1个月进行二免,以后每4个月加强免疫1次。     

猪合环境中气载需氧菌及气载葡萄球菌的研究

本研究采用Andersen-6空气微生物收集器,选用血-葡萄糖-琼脂培养基为采样介质,对两个不同猪场8个猪舍环境空气中需氧菌总数和葡萄球菌总数进行了检测,并对葡萄球菌的菌群组成进行了分析,评价气载需氧酋和气载葡萄球菌对猪舍环境的污染及对饲养人员健康的潜在危害.结果表明,2个猪场气载需氧菌的浓度分别为2.87×104、12.65×104CFu/m3,葡萄球菌的浓度分别为1.94×104、5.74×104 CFU/m3.猪舍空气中葡萄球菌主要包括金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、猪葡萄球菌、木葡萄球菌、头状葡萄球菌、科氏葡萄球菌、内葡萄球菌,其中金黄色葡萄球菌的浓度占葡萄球菌总浓度的24%和27%.其次是表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌.从葡萄球菌菌在Andemen-6空气微生物收集器层级上的分布规律来看,主要分布在B-E级(36.9%),气溶胶颗粒直径在0.2～6μm之间.可以进入到人、畜的气管、支气管.甚至细支气管,对养殖人员和动物呼吸道存在严重危害.     

猪舍环境中气载需氧菌及气载葡萄球菌的研究

本研究采用Andersen-6空气微生物收集器,选用血-葡萄糖-琼脂培养基为采样介质,对两个不同猪场8个猪舍环境空气中需氧菌总数和葡萄球菌总数进行了检测,并对葡萄球菌的菌群组成进行了分析,评价气载需氧菌和气载葡萄球菌对猪舍环境的污染及对饲养人员健康的潜在危害。结果表明,2个猪场气载需氧菌的浓度分别为2．87&#215;10^4、12．65&#215;10^4CFU／m^2,葡萄球菌的浓度分别为1．94&#215;10^4、5．74&#215;10^4CFU／m^3。猪舍空气中葡萄球菌主要包括金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、猪葡萄球菌、木葡萄球菌、头状葡萄球菌、科氏葡萄球菌、肉葡萄球菌,其中金黄色葡萄球菌的浓度占葡萄球菌总浓度的24％和27％,其次是表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌。从葡萄球菌菌在Andersen-6空气微生物收集器层级上的分布规律来看,主要分布在B—E级（36．9％）,气溶胶颗粒直径在0．2—6μm之间,可以进入到人、畜的气管、支气管,甚至细支气管,对养殖人员和动物呼吸道存在严重危害。     

牲畜重大动物疫病强制免疫副反应处理方法及死亡因素探讨

随着重大动物疫病强制免疫的深入开展,出现了免疫副反应及死亡。泰安市岱岳区从过去每年的十几头,到现在的几十头发生死亡,而且有逐年增多的趋势。妥善处置好动物强制免疫副反应问题,才能有效保障重大动物疫病强制免疫工作的顺利进行。     

原料乳中主要微生物和理化指标的季节性变化及与奶厅环境的关系

本研究的目的是分析奶牛场生产的原料乳中主要微生物及理化指标的季节性变化规律和影响因素。采集奶牛场的奶样及奶厅环境空气样品,在实验室检测原料乳中的主要微生物及理化指标,并进行对比,分析影响其指标的主要因素。检测结果表明,冬季牛乳的营养成分高于春、夏、秋三季,微生物各项指标优于春、夏、秋三季,而且未检测到沙门氏菌、蜡样芽孢杆菌和单增李斯特菌。奶厅环境空气中的细菌含量冬季最高,夏季最低。得出结论:原料乳的理化指标和微生物指标在不同季节间有较大差异,乳中细菌含量与奶厅环境空气中的细菌含量没有必然的关系,只要严格执行原料乳生产过程的卫生管理规范,就能有效控制和减少原料乳细菌总数和病原菌的数量,生产出安全合格的牛乳产品。