不同柞蚕品种幼虫期血淋巴雌特异蛋白的研究

对10个柞蚕品种的雌特异蛋白进行了测定,同时对血淋巴雌特异蛋白含量与若干经济性状的相关性进行了分析。结果表明,柞蚕雌特异蛋白含量与某些经济性状密切相关。因此,柞蚕雌特异蛋白含量可以作为一项生理指标,在柞蚕育种中加以应用,对某些经济性状进行早期预测或选择。     

不同生境及木麻黄浸提液影响下的青皮幼苗叶片差异蛋白质组分析

采用蛋白质的双向电泳和质谱技术分析了不同生境及木麻黄浸提液处理下的青皮幼苗叶片差异蛋白质组,鉴定出差异蛋白47个,特异蛋白11个,差异蛋白多与光合作用相关、与物质代谢相关; 特异蛋白多与抗逆及次生代谢物合成相关。与原生地比较,迁入地幼苗叶片未出现特异蛋白。为在分子水平上探讨化感物质的作用机制提供了基础。     

利用双向电泳技术分离桃不同生长型差异蛋白

采用双向电泳技术(2-DE)对桃4种生长型的叶片蛋白质进行了分离,通过TCA/丙酮沉淀法,以180 μg上样量进行双向电泳,成功获得桃不同生长型的2-DE图谱.经Image Master 2D软件分析,发现大多数蛋白点分布于pI 4～7,分子量在14.3～66.4 kD 范围内;普通型(毛桃、大久保)2-DE图谱间蛋白点匹配率为64.86%,垂枝型(红垂枝、朱粉垂枝)为71.62%,矮化型(红寿星、粉红寿星)为70.28%,紧凑型(豫矮砧1号、紧凑罗曼)为53.92%;初步鉴定出9个差异蛋白点,其中包括1个普通型特异蛋白,3个垂枝型特异蛋白,1个矮化型特异蛋白,1个豫矮砧1号特异蛋白.     

基于LC-ESI-MS/MS技术与生物信息学的蚕豆种子贮藏蛋白亚基鉴定

蚕豆蛋白亚基是蚕豆种子贮藏蛋白重要组成部分,深入鉴定蚕豆蛋白亚基,对了解蚕豆种子蛋白不同亚基的结构和功能具有重要意义。本研究应用液相色谱、电喷雾离子化与串联质谱联用技术和生物信息技术对蚕豆种子贮藏蛋白6个特异亚基进行了质谱鉴定。结果表明:这些特异亚基中的64、47、42及38ku分别鉴定出4个蛋白:豌豆球蛋白、豆球蛋白前体、假定糖结合蛋白、LEGB7_VICFA;97ku亚基蛋白为分子伴侣GroEL;96ku亚基蛋白由6个具有不同代谢功能的蛋白组成。     

榧树雄球花发育过程中可溶性蛋白的动态变化

[目的]研究榧树雄球花发育过程中可溶性蛋白的动态变化,以进一步分离与花芽分化相关的特异蛋白。[方法]以榧树雄株花芽及芽基部叶片为材料,测定分析雄球花发育过程中可溶性蛋白含量以及特异蛋白组分的动态变化。[结果]在雄球花发育过程中,花枝叶片的可溶性蛋白存在2个表达高峰,分别在鳞片分化期和二核期花粉粒形成期;而花芽中的可溶性蛋白含量呈现一直下降的趋势。SDS-PAGE分析结果也表明,在雄球花发育的不同阶段,在花枝叶片和花芽中均出现了特异的蛋白谱带。[结论]为了解榧树雄球花发育的生理过程和进一步研究香榧成花调控提供了依据。     

2个水稻器官特异表达基因的鉴定及分析

研究组织特异表达基因对揭示植物生长发育机制具有重要的意义。通过生物信息学、RT-PCR及荧光定量PCR方法鉴定了2个水稻特异表达基因,即Os01g18840叶特异和Os01g28500茎叶颖特异表达基因。通过检测它们在PEG、NaCl、ABA及暗处理下的表达情况,发现在各种胁迫处理下,Os01g18840基因的表达受到抑制,Os01g28500基因的表达受到诱导。进一步分析它们的基因及蛋白结构特点,发现Os01g18840蛋白含有1个卷曲螺旋结构域,是1个中间纤维蛋白;Os01g28500蛋白含有1个SCP类似结构域,是与病原反应相关的蛋白。另外,对它们上游启动子区的顺式元件进行分析,结果表明它们都含有大量的与叶片、叶肉细胞或绿色组织中表达相关的顺式作用元件。     

短期低浓度混合重金属污染对鲫鱼肝、肾和肌肉内可溶性蛋白的影响

为了探讨短期低浓度混合重金属污染物对鲫鱼(Carassius auratus)肝脏、肾脏和肌肉内可溶性蛋白的影响,以煤矸石浸出液作为低浓度混合重金属污染物,在实验室条件下研究了鲫鱼肝、肾和肌肉中可溶性蛋白的变化。结果表明:试验组肝脏出现5种特异表达蛋白、3种表达丰度降低蛋白;肾脏出现3种特异表达蛋白、1种表达丰度增高蛋白;肌肉中蛋白质的表达虽有细微变化但差异不明显。表明短期低浓度混合重金属污染对鲫鱼肝、肾中蛋白质的合成和表达产生了一定的影响。     

青海不同基因型蚕豆蛋白组成及清蛋白和球蛋白亚基的SDS-PAGE分析

采用连续提取蛋白法和SDS-PAGE技术分析了青海省11个不同基因型蚕豆的蛋白质组成以及清蛋白、球蛋白亚基的差异.结果表明:蚕豆蛋白主要由清蛋白、球蛋白、谷蛋白、醇溶蛋白和其他蛋白组成,不同基因型蚕豆的蛋白质含量及其组成存在一定的变异,其中清蛋白和球蛋白是蚕豆蛋白主要组成部分,占总蛋白的75.08%.不同基因型蚕豆的清蛋白和球蛋白亚基存在一定的差异,蚕豆清蛋白亚基由97、66+67、63、50、45、38+41、22ku等7个基本亚基组成外,还有96ku特异亚基;球蛋白亚基由63、56、52、47、22ku等5个基本亚基组成外,还有46ku的特异亚基.     

哲罗鲑雌性蛋白的研究

采用柱层析、蛋白质免疫印迹和电泳等方法,对哲罗鲑Hucho taimen的雌性蛋白进行了系统研究。结果表明：哲罗鲑血清和卵黄中均存在雌性蛋白,其雌性蛋白的性质相同,均为糖脂磷蛋白;与血清雌性特异蛋白一样,卵黄雌性特异蛋白的相对分子质量也为460 000,由相对分子质量分别为137 800、84 200和10 800的3个亚基组成,等电点为5.60;卵黄雌性蛋白的兔抗血清均与哲罗鲑雌性血清发生免疫反应,不与雄性血清发生免疫反应,表明这两种蛋白均具有雌性特异性;两种蛋白的抗血清可以相互检测,表明哲罗鲑雌鱼血清中雌性蛋白与卵黄中的雌性蛋白在免疫原性上和结构上具有较高的同源性。     

利用SDS-PAGE电泳快速检测茎用芥菜细胞质雄性不育系特异表达蛋白(英文)

本研究利用SDS-PAGE电泳直接检测到茎用芥菜细胞质雄性不育系花器中存在两种特异表达白,分子量约分别为14.4 kD和43.0 kD,其中14.4 kD蛋白在不育系花器中存在明显的过量表达现象;而不育系和保持系营养生长和生殖生长期叶片和根中蛋白电泳谱带未发现差异,特异蛋白的表达有很强的器官特异性.我们推测此两种特异蛋白的产生可能与茎用芥菜细胞质胞质雄性不育的表达有关.     

Profile Analysis of the Proteome of the Egg of the High Royal Jelly Producing Bees （Apis mellifera L.）

The protein composition of the egg development in the high royal jelly producing bees （Apis mellifera L.） was investigated. This pioneer study was to separate and quantify the proteins in the egg of the high royal jelly producing worker bees （Apis mellifera L.） by using two-dimensional gel electrophoresis along with their three-day development. The results showed that 160, 195, and 176 proteins, with a wide range of molecular weight （17-80 KDa） and relatively narrow scope of pI （4. 00-8.40） could be detected on day 1, day 2, and day 3, respectively, during the developmental process of the egg. Meanwhile 44 protein spots were constantly detected along with the egg development. Among them 36% were in the uptrend along with the egg development, 14% were in the downtrend, and 39% were of the largest expressed volume on day 2. In addition, the specific proteins were expressed on day 1, day 2, and day 3 （89, 77, and 80, respectively）. Besides the coexistent and specific proteins, 24 proteins were expressed on day 1 and day 2, but silenced on day 3, 49 proteins were expressed on day 2 and day 3, but silenced on day 1, only 3 proteins were expressed on day 1 and day 3, but silenced on day 2. The result indicates that egg development is a sequential and complex gene controlled process, where the eggs of day 2 express the most active proteins. The coexistent proteins suggest that it is conservative and indispensable for this event. These specific proteins suggest that the different developmental stage needs specific proteins to regulate it.     

Comparative Analyses of Proteome Complement Between Worker Bee Larvae of High Royal Jelly Producing Bees （A. m. ligustica） and Carniolian Bees （A. m. camica）

This study is to compare the protein composition of the high royal jelly producing bee （A. m. ligustica） with that of Carniolian bee （A. m. carnica） during their worker larval developmental stage. The experiment was carried out by two- dimensional gel electrophoresis. The results showed that significant higher numbers of total proteins （283） were detected in larvae of high royal jelly producing bees （Jelly bee） than those of Carniolian bees （152） on 2-d-old larvae. Among them, 110 proteins were presented on both strains of bee larvae, whereas 173 proteins were specific to larvae of Jelly bees, and 42 proteins were exclusive to Carniolian larvae. However, on the 4th d, a significant higher number of total proteins （290） were detected in larvae of Jelly bees than those of Carniolian bees （240）, 163 proteins resolved to both bee larvae, and 127 proteins were specific to Jelly bees and 77 proteins to Camiolian bees. Until the 6th d, also a significant higher number of total proteins （236） were detected in larvae of Jelly bees than those of Carniolian bees （180）, 132 proteins were constantly expressed in two bee larvae, whereas 104 and 48 proteins are unique to Jelly bee and Carniolian bee larvae, respectively. We tentatively concluded that the metabolic rate and gene expression of Jelly bees larvae is higher than those of Carniolian bees based proteins detected as total proteins and proteins specific to each stage of two strains of bee larvae. Proteins constantly expressed on 3 stages of larval development with some significant differences between two bee strains, and proteins unique to each stage expressed differences in term of quality and quantity, indicating that larval development needed house keeping and specific proteins to regulate its growth at different development phage, but the expression mold is different between two strains of larval development.     

蜜蜂（Apis mellifera L.）幼虫级型分化差异蛋白质组分析

【目的】对蜜蜂（Apis mellifera L.）蜂王与工蜂级型分化期的蛋白质组进行比较,以探明蜂王和工蜂在级型分化时期蛋白质表达调控方面的异同。【方法】采用双向电泳建立蜂王和工蜂级型分化期蛋白质组表达 谱,获得图谱中蛋白质表达的数量、表达量、等电点和分子量等信息,然后进行比较蛋白质组研究。【结果】在幼虫3日龄,蜂王表达288个蛋白质,工蜂表达259个蛋白质,2种级型蜂共有蛋白质为156个,其中25个蛋白质在蜂王中的表达量显著大于（P＜0.05）工蜂,34个蛋白质工蜂表达量显著大于（P＜0.05）蜂王,而蜂王和工蜂的特异蛋白质分别为132个和103个;到幼虫5日龄时,蜂王表达274个蛋白质,工蜂为236个,这2种级型蜂共有蛋白质点为95个,其中蜂王15个蛋白质的表达量显著大于（P＜0.05）工蜂,工蜂26个蛋白质的表达量显著大于（P＜0.05）蜂王,而蜂王特异蛋白质点为179个,工蜂特异蛋白质点为141个;到蛹11日龄时,蜂王蛋白质组有311个蛋白质点,而工蜂则有278个蛋白质点,2种蜂共有蛋白质点为194个,其中蜂王45个蛋白质的表达量显著大于（P＜0.05）工蜂,工蜂35个蛋白质的表达量显著大于（P＜0.05）蜂王,而蜂王的特异蛋白质点为117个,工蜂特异蛋白质点为84个。【结论】在蜜蜂3日龄、5日龄、11日龄时,蜂王和工蜂的蛋白质表达谱存在显著差异,蜂王表达的蛋白质总数和特有蛋白质数都较工蜂多,说明蜂王幼虫的基因表达和代谢比工蜂幼虫更加旺盛。2种级型蜂发育中所表达的共有蛋白质可能是它们发育所必须的管家蛋白质,但级型间部分共有蛋白质的表达模式存在较大差异,在3个日龄中蜂王和工蜂中所表达的特异蛋白质表明在级型分化中,不同级型需要不同的蛋白质来调节各自的发育。这些特异蛋白质是否是级型发育相关的功能蛋白质,还有待进一步的研究。     

无核雪柑与普通雪柑种胚发育过程蛋白质的差异

采用考马斯亮蓝G 250法测定胚胎蛋白质含量,并用双向电泳技术分析胚胎的特异蛋白质。结果表明:无核雪柑种胚早期的蛋白质含量相对较高,其胚胎不同发育阶段出现了P1~P6 6个特异蛋白质;另外发现了4个特异于普通雪柑胚胎发育的蛋白质P11~P14。认为P11~P14与无核雪柑的无核密切相关,分别是P11(67.0 kD,pI 5.1)、P12(65.5 kD,pI 5.4)、P13(97.0 kD,pI 5.8)及P14(64.3 kD,pI 5.9)。     

免疫吸附对新月弯孢菌抗血清非特异性抗体阻断作用研究

用新月弯孢菌Curvularialunata(Wakke)Boed可溶性蛋白质作为免疫抗原免疫家兔,获得兔抗C.lunata抗血清(PAbs);抗血清经近似菌可溶性蛋白质吸附后获得对C.lunata菌株可溶性蛋白质具有特异性的抗血清(A PAbs),可应用于C.lunata菌株的鉴定;用玉米种子可溶性蛋白质对APAbs进行进一步吸附纯化,获得了与玉米种子蛋白质无交叉反应的特异性抗血清(DAPAbs),可用于对带菌玉米种子的检测鉴定。     

Comparative Analyses of Proteome Complement Between Worker Bee Larvae of High Royal Jelly Producing Bees (A. m. ligustica) and Carniolian Bees (A. m. carnica)

This study is to compare the protein composition of the high royal jelly producing bee (A. m. ligustica) with that of Carniolian bee (A. m. carnica) during their worker larval developmental stage. The experiment was carried out by two-dimensional gel electrophoresis. The results showed that significant higher numbers of total proteins (283) were detected in larvae of high royal jelly producing bees (Jelly bee) than those of Camiolian bees (152) on 2-d-old larvae. Among them, 110 proteins were presented on both strains of bee larvae, whereas 173 proteins were specific to larvae of Jelly bees, and 42 proteins were exclusive to Carniolian larvae. However, on the 4th d, a significant higher number of total proteins (290) were detected in larvae of Jelly bees than those of Camiolian bees (240), 163 proteins resolved to both bee larvae, and 127 proteins were specific to Jelly bees and 77 proteins to Camiolian bees. Until the 6th d, also a significant higher number of total proteins (236) were detected in larvae of Jelly bees than those of Carniolian bees (180), 132 proteins were constantly expressed in two bee larvae, whereas 104 and 48 proteins are unique to Jelly bee and Camiolian bee larvae, respectively. We tentatively concluded that the metabolic rate and gene expression of Jelly bees larvae is higher than those of Carniolian bees based proteins detected as total proteins and proteins specific to each stage of two strains of bee larvae. Proteins constantly expressed on 3 stages of larval development with some significant differences between two bee strains, and proteins unique to each stage expressed differences in term of quality and quantity, indicating that larval development needed house keeping and specific proteins to regulate its growth at different development phage, but the expression mold is different between two strains of larval development.     

家蚕五龄幼虫中部丝腺细胞的蛋白质组成比较

 对家蚕5龄期中部丝腺细胞不同区段的蛋白质组成研究，有利于发现与丝胶蛋白合成和分泌有关的功能蛋白质。本研究采用蛋白质双向电泳和图像分析技术，发现家蚕中部丝腺前、中、后3个不同区段的细胞的蛋白质组成具有显著差异；仅在前段表达的20个特异性蛋白质，可能与Ser2A、Ser2B、S4和S5这4种丝胶蛋白的合成与分泌有关；仅在中段表达的22个特异性蛋白质，可能与Ser1B、Ser1C、Ser1D和S3这4种丝胶蛋白的合成与分泌有关；仅在后段表达的27个特异性蛋白质，可能与Ser1A和S3这2种丝胶蛋白的合成与分泌有关。另外，在中段和后段表达、前段不表达的51个差异性蛋白质、表达量在中段和后段比在前段高的20个差异性蛋白质，可能参与了中、后段相应的丝胶蛋白的合成。     

王浆高产蜜蜂与意大利蜜蜂卵期蛋白质组比较

 【目的】比较王浆高产蜜蜂（Apis mellifera L.浆蜂）与原种意大利蜜蜂（Apis mellifera L.原种意大利蜜蜂）工蜂卵期3 d发育阶段蛋白质组。【方法】采用双向电泳的方法比较两个蜂种卵期发育蛋白质组。【结果】结果显示，两个蜂种卵期3 d所得6张胶图检测到的蛋白点均具有相同的分子量与等电点范围，分子量范围为11.00～94.00 kD，等电点范围为3.40～8.60。在工蜂卵3 d的发育过程中，浆蜂分别检测到502、523和516个蛋白点，而原种意大利蜜蜂分别检测到349、361和354个蛋白点。同时，卵期3天发育过程中，两个蜂种分别检测到180、151和197个共有的表达蛋白。此外，浆蜂还检测到322、372和319个特有蛋白，而原种意大利蜜蜂也分别检测到169、210、157个特有蛋白，这些蛋白90%以上都是低表达量蛋白。【结论】在工蜂胚胎发育过程中，浆蜂有更多的基因参与表达调控，特有蛋白可能与调节王浆产量相关的基因相关。     

王浆高产蜜蜂（Apis mellifera L.）工蜂幼虫发育期蛋白质组分析

 【目的】20世纪90年代中国成功培育出的王浆高产蜜蜂（Apis mellifera L.）是当今世界最优良的蜂种,使中国的王浆年产量高达2 600多吨,占世界总产量的90%以上,稳居世界第一,通过对该蜂种不同发育日龄工蜂幼虫的蛋白质组进行研究,以探明其发育机理。【方法】采用双向电泳法对王浆高产蜜蜂（Apis mellifera L.）不同发育期的工蜂幼虫进行蛋白质组研究。【结果】在幼虫期6 d的发育过程中,2日龄、4日龄、6日龄幼虫中分别检测到了262、418、194个蛋白点。这些蛋白的分子量在12.2～88.2 kD的较大范围之间,等电点在pH 4.00～9.24之间。有84个蛋白在幼虫期整个发育过程中均有表达,其中33%呈上调趋势,21%呈下调趋势,46%蛋白的表达没有规律。2日龄、4日龄、6日龄幼虫中分别有88、209、63个特异表达的蛋白。除此之外,有84个蛋白在幼虫发育的6日龄表达关闭,而在2日龄和4日龄幼虫中表达;有41个蛋白在2日龄表达关闭,而在4日龄和6日龄中表达;仅有6个蛋白在4龄日表达关闭,而在2日龄和6日龄表达。【结论】幼虫的发育过程有大量基因参与表达和调控,是一个复杂而动态有序的过程,且发育到4日龄的幼虫蛋白表达最为活跃。幼虫整个发育过程中的共有蛋白是发育必需的保守蛋白。幼虫不同的发育阶段由不同的特异蛋白进行调控。