生物有机肥中微生物的分离鉴定及液体菌剂的构建

【目的】了解生物有机肥中微生物的种类及各种微生物之间的关系,并借此构建一种高效便捷的 液体菌剂。【方法】采用平板划线法从肥料中分离出菌种,并通过菌落观察、革兰氏染色法及 16SrDNA 基因同 源序列比对方法对其中的微生物进行鉴定,同时运用菌饼法和平板涂布法对各菌种之间的拮抗作用及培养条件 进行研究。【结果】分离得到 4 种菌落,分别为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）和巨大芽孢杆菌（Bacillus megaterium）,这 4 种菌之间均无拮 抗作用。地衣芽孢杆菌：枯草芽孢杆菌：巨大芽孢杆菌：植物乳杆菌按 1∶1∶1∶1 添加到不同 pH 的牛肉膏蛋 白胨培养基液体培养基中进行培养,并用稀释涂布平板法测定有效活菌数,最终得到最适 pH 为 7.0。【结论】 从生物有机肥中分离得到 4 种菌种,它们之间均无拮抗作用,采用等比例的菌种配比,在 pH 为 7.0 的牛肉膏蛋 白胨液体培养基进行培养,各菌种都能很好地生长,从而得到一种高效的液体菌剂。     

降解牛粪纤维素的复合微生物菌剂制备

[目的]制备降解牛粪纤维素的复合微生物菌剂.[方法]通过正交试验,确定地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和放线菌属4株菌的最优配比,制成降解牛粪纤维素的复合微生物菌剂.[结果]复合微生物菌剂中HP2菌的所占比例为主要因素,各菌种最佳配合比例为TG1∶P3∶HP2∶HN1 =3∶1∶1∶1.[结论]该研究为复合微生物菌剂在牛粪堆肥中的应用提供了理论依据.     

复合菌剂青贮沙棘鲜叶的研究

采用复合乳杆菌及酿酒酵母菌青贮沙棘鲜叶,确定复合乳杆菌中植物乳杆菌、德氏乳杆菌保加利亚亚种和嗜酸乳杆菌的配比比例以及复合乳杆菌与酿酒酵母菌的配比.结果表明,当植物乳杆菌、德氏乳杆菌保加利亚亚种和嗜酸乳杆菌的配比为4∶2∶4,复合乳杆菌与酿酒酵母的配比为3∶2时,粗蛋白含量为21.58％,发酵剂用量为2.0％,青贮沙棘叶的总体评价为优级,青贮质量最好.     

复合微生物菌剂对河道底泥资源化 堆肥效果的影响

研究了外源添加不同配比的复合微生物菌剂对河道底泥堆肥发酵的影响,为筛选促腐效果更好的优质微生物菌种配方提供依据。通过不同比例组成的微生物菌剂进行底泥堆肥试验,并对堆肥温度、水分、p H值、电导率、可溶性有机碳、氮等进行分析。结果表明,添加的复合菌剂以嗜热脂肪芽孢杆菌∶枯草芽孢杆菌∶地衣芽孢杆菌∶巨大芽孢杆菌=2∶1∶1∶1的配比效果最好,2 d就能达到最高温度63.3℃,明显加速堆肥的腐熟;以底泥为原料的堆肥过程升温迅速,具备堆肥资源化利用的良好前景。可望为城市河道底泥的科学处理,纯净城市水体和陆地生态环境提供有用的数据支持,为开发相应的技术,缓解城市生态环境的容量压力,促进城市社会、经济可持续发展做出贡献。     

多菌复合固态发酵富硒豆粕的工艺优化

研究了移动袋装多菌复合固态发酵富硒豆粕的最佳生产工艺条件。选用地衣芽孢杆菌、酿酒酵母、产朊假丝酵母、嗜酸乳杆菌4种菌株,通过移动袋装固态发酵技术复合发酵富硒豆粕,利用响应面分析法对其发酵条件进行优化,并对产品进行品质检验。结果表明,豆粕富硒发酵的最优菌株配比为地衣芽孢杆菌∶酿酒酵母∶产朊假丝酵母∶嗜酸乳杆菌=2∶1∶2∶2;亚硒酸钠、豆粕、菌液接种量为影响发酵过程中重要的3个因素,其最佳配比为亚硒酸钠19.43 mg/kg、豆粕91.38%、菌液接种量11.62%,经验证试验,在该条件下有机硒转化率能达到55.48%;富硒豆粕发酵产品经检验,其直观评价、有机硒含量、营养成分、有害物质等指标均得到明显改善,符合国家《饲料添加剂安全使用规范》。豆粕经多菌株联合富硒发酵,其产品性能得到明显改善,是一种优质的富硒菌制剂和功能性蛋白饲料。     

杨树林土壤微生物及优势菌对小穴壳菌抑制作用的研究

本文对毛白杨树林土壤内主要微生物的数量及种类进行了分析。并在实验室条件下通过琼脂培养、孢子萌发及杨树枝条接种等实验,筛选出对杨树水泡溃疡病病原小穴壳菌(Dothiorellagregaria)有拮抗作用的微生物为链霉菌和芽孢杆菌。为杨树溃疡病的微生物防治提供了菌剂生产的菌种。     

我国微生物菌肥登记现状及其在果树减肥增效中的应用

本文通过梳理我国微生物菌肥产品登记情况,详细分析了登记微生物菌肥产品类型、使用的有效菌种及登记适用的作物范围,并重点关注果树微生物菌肥产品的登记应用情况。截至2020年9月,我国共登记了7 608个微生物菌肥产品,分为6个菌剂类(菌根菌剂、土壤修复菌剂、光合细菌剂、根瘤菌剂、有机物料腐熟剂和复合微生物菌剂)及2个菌肥类(复合微生物肥料、生物有机肥料),共8大类。有效菌种涉及60个属、160个种,链霉菌属(Streptomyces)、芽孢杆菌属(Bacillus)和乳酸杆菌属(Lactobacillus)3个属的菌种应用最多,占全部菌种的39.3%。有52.7%的产品有效菌种为1种,主要为枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌;有38.2%的产品为2种有效菌种;3种及以上有效菌种的产品占9.1%,其中有4个登记产品的有效菌种达到了6种。产品适用范围涵盖了蔬菜、果树、中药、绿化树种、绿肥等142种经济作物,其中有1 808种产品分别在19种果树上登记适用,占全部登记产品的23.8%。讨论了现有微生物菌肥在果树减肥增效生产实际中的应用情况,以期帮助果树生产者、农技推广人员进一步认识并掌握微生物菌肥的特征特性。     

饲用微生态制剂生产用酵母菌与乳酸菌的特性研究

对2株乳酸菌(植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌)和2株酵母菌(产朊假丝酵母、酿酒酵母)的抑菌、产酸、产脂及发酵特性进行了研究.结果表明:2株乳酸菌能够对大肠杆菌产生一定的抑菌效果;2株酵母菌均具有较好的生产性能;4种菌之间没有相互拮抗作用,均可以用于做饲用微生物制剂的生产菌种.     

苹果渣发酵法制备黄腐酸的工艺

从实际应用的角度出发,以黑曲霉、绿色木霉、酿酒酵母、枯草芽孢杆菌和假单胞菌组成复合菌剂,对利用苹果渣进行混合发酵生产黄腐酸的工艺进行了研究.试验结果表明,苹果渣发酵制备黄腐酸最佳工艺为:黑曲霉、绿色木霉、酿酒酵母、枯草芽孢杆菌和假单胞菌按1∶1∶1∶2∶2配成复合菌剂,按5％的接种量接入发酵培养基,物料含水量调至50％,以尿素为氮源,添加量1％,发酵时间25 d.     

高效降解厨余垃圾复合菌剂的构建及应用

选取10种微生物菌株，分析其产淀粉酶、蛋白酶、纤维素酶和脂肪酶的能力，根据厨余垃圾中有机质成分及酶活功能信息构建一种高效降解厨余垃圾复合菌剂，并进行厨余垃圾堆肥的应用研究。结果表明：酿酒酵母产淀粉酶的能力最高，地衣芽孢杆菌产蛋白酶的能力最高，米曲霉产纤维素酶的能力最高，枯草芽孢杆菌产脂肪酶能力最高。拮抗性试验发现只有短芽孢杆菌属与地衣芽孢杆菌存在拮抗性关系。分别选取5株高酶活微生物构建4组复合菌剂，酶活测定结果表明，由盐居固氮菌（Azotobacter salinestris）、绿色木霉（Trichoderma viride）、地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）、蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereus）和米曲霉（Aspergillus oryzae）组配的F2微生物复合菌剂的产酶能力较好，其中淀粉酶为25.0 U/mL，蛋白酶为0.13U/mL，纤维素酶为1 244 U/mL，脂肪酶为4.09 U/mL。堆肥结果表明：添加复合菌剂F2组最高温达到67℃，高温期持续14 d,C/N为18.31,pH值为9.08，种子发芽指数为103.17%，相较于CK组堆...     

香蕉枯萎病拮抗菌筛选试验

将从香蕉土壤中分离出的7个不同性状的芽孢杆菌菌株以及荧光假单孢菌、枯草芽孢杆菌、细黄链霉菌等分别用于测试对香蕉枯萎病生理小种4号的拮抗作用。结果表明,10个菌株中荧光假单孢菌表现出对香蕉枯萎病生理小种4号菌丝生长有良好、稳定的抑制作用;荧光假单孢菌和XP菌株混合后,其抑菌作用得到加强,抑菌效果最好。     

山药腐烂微生物的分离、鉴定及抑制研究

山药作为药食兼用性植物,含有丰富的营养成分和独特的功能。本研究以4个山药品种为试材,分离出采后山药腐烂病原微生物,通过形态学、18S rRNA序列测序和构建系统进化树的方法对分离菌株进行了生物学鉴定,结果表明,引起山药腐烂的微生物与青霉菌家族Penicillium sclerotigenum亲缘关系最近,确定该菌株为Penicillium sclerotigenum。利用不同pH(3、5、7、9、11)和不同生防剂(EM原液、多粘芽孢杆菌、哈茨木霉菌、枯草芽孢杆菌、细黄链霉菌)对山药青霉菌生长特性进行研究,结果表明,青霉菌生长最适pH值在5-7之间,培养42 h的最适pH是5；枯草芽孢杆菌和细黄链霉菌对山药腐烂微生物青霉菌有较好的抑菌效果。     

MS-D活性糖对肠道菌生长及部分生物学特性影响的初步探究

为研究MS-D活性糖对肠道细菌生长及其生物活性的影响,选择大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌和嗜酸乳杆菌4种肠道菌的标准菌株作为受试菌种,进行MS-D对细菌的生长、酸碱耐受性、温度耐受性及耐盐性的影响等试验。结果表明:MS-D对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、嗜酸乳杆菌和金黄色葡萄球菌有增菌作用,最适作用量分别为5%、2%、0.1%和0.4%;MS-D对4种细菌的耐酸碱能力均有一定的保护作用;提高了对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的温度耐受能力;对嗜酸乳杆菌和枯草芽孢杆菌的胆盐耐受能力有一定的保护作用。     

牛粪堆肥高效降解菌的筛选及复合微生物菌剂的制备

[目的]确定最佳菌种复配比例。[方法]从牦牛粪自然堆肥中筛选菌株。以新鲜牛粪和稻壳粉为堆肥原料,以不加复合菌剂的处理为对照,将不同复合微生物菌剂以3‰的总接种量接入到堆肥中,观察不同处理对堆肥腐熟过程的影响。[结果]牦牛粪自然堆肥中的绿色木霉和米曲霉的生长速率和活性较高。绿色木霉∶米曲霉∶枯草芽孢杆菌∶假单胞菌=2∶2∶1∶1的处理,发酵过程中升温最快、温度最高。温度升高到55℃仅用6 d,高温维持8 d,最高温度为65.5℃。堆肥腐熟后,植物种子发芽指数为92.3%。[结论]复合微生物菌剂的最佳比例为绿色木霉∶米曲霉∶枯草芽孢杆菌∶假单胞菌=2∶2∶1∶1。     

8种菌株代谢物对茄链格孢菌菌丝生长及孢子萌发的抑制

为防治由茄链格孢菌(Alternaria solani)引起的番茄早疫病,研究了8株有益微生物的代谢产物对茄链格孢菌菌丝生长及孢子萌发的抑制,并且测定了曲霉、细黄链霉菌对病菌的持续抑菌作用。结果发现5株芽孢杆菌代谢物原液对茄链格孢菌菌丝生长均有一定的抑制作用,茄链格孢菌分生孢子萌发的受抑制率分别为:地衣芽孢杆菌44.87%、胶冻样芽孢杆菌51.97%、枯草芽孢杆菌55.44%。细黄链霉菌对茄链格孢菌具有较强的持续抑制作用,且黑曲霉、米曲霉、细黄链霉菌作用后茄链格孢菌菌丝发生了畸变、原生质浓缩等现象。表明8种微生物代谢物对茄链格孢菌具有抑菌活性,且效果明显。     

辣椒连作土壤微生物群落及土壤离子对微生物菌剂的响应

【目的】筛选1～2种微生物配比,以减缓辣椒连作障碍。【方法】以辣椒连作8年大棚为对象,通过不同微生物菌剂配比的施用,研究连作辣椒土壤对不同微生物菌剂用量的影响特征,测定辣椒连作土壤中细菌、真菌和放线菌数量、土壤酶活性、土壤离子变化。【结果】胶质芽孢杆菌∶巨大芽孢杆菌∶枯草芽孢杆菌=2∶1∶2,土壤中细菌数量最多,为8.1×10~6,真菌数量最少,为1.2×10~6,可显著增加土壤中细菌数量,降低土壤中有害真菌和放线菌数量,防止土壤由细菌型向真菌型转变;胶质芽孢杆菌∶巨大芽孢杆菌∶枯草芽孢杆菌=2∶1∶2,蔗糖酶活性、脲酶活性最强,分别为777.07、201.53 mg/g·24h。【结论】胶质芽孢杆菌∶巨大芽孢杆菌∶枯草芽孢杆菌=2∶1∶2处理,提高了土壤酶活性,减少了土壤中离子的富集,能有效减缓辣椒土壤连作障碍。     

复合微生态制剂对异育银鲫肠道菌群和消化机能的影响

为了研究复合微生态制剂对异育银鲫肠道菌群和消化机能的影响,在饲料中添加不同水平的酿酒酵母(0.04%、0.06%、0.08%)、嗜酸乳酸菌(0.01%、0.02%、0.03%)以及枯草芽孢杆菌(0.01%、0.03%、0.05%)3种益生菌制剂,采用L9(34)正交设计法配制成9种复合微生态制剂。结果表明,酿酒酵母对肠道乳酸菌和芽孢杆菌含量的影响达到极显著水平(P<0.01),枯草芽孢杆菌对肠道乳酸菌含量的影响达到显著水平(P<0.05)。3种益生菌对大肠杆菌和气单胞菌含量的影响均显著(P<0.05)。3种试验益生菌对异育银鲫前、中、后肠段的淀粉酶、脂肪酶及蛋白酶均有不同程度的影响,但差异不显著(P>0.05)。酿酒酵母对肠道消化酶和营养物质表观消化率的影响最大,对磷表观消化率影响的极显著(P<0.01),对干物质表观消化率影响显著(P<0.05)。酿酒酵母、嗜酸乳杆菌和枯草芽孢杆菌3菌种适当搭配可改善异育银鲫肠道微生态环境,有益于消化酶的分泌和饲料养分的消化,较优的组合为酿酒酵母0.08%、嗜酸乳杆菌0.03%、枯草芽孢杆菌0.01%。     

辣椒枯萎病主要致病菌的分离鉴定及农用拮抗菌筛选

[目的]分离鉴定辣椒枯萎病主要致病菌,探寻能够有效抑制该致病菌的生防菌株.[方法]采用植物病害组织致病菌划线分离方法分离致病菌,经形态学以及ITS区域PCR检测,确定菌株属性,通过平板拮抗筛选,确定对该致病菌具有拮抗作用的农用生防菌株.[结果]初步鉴定该致病菌为尖孢镰刀(Fusarium oxysporum),将该致病菌与11株农用微生物芽孢杆菌和3株农用微生物木霉菌进行拮抗试验,发现枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)、解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)、海洋芽孢杆菌(Bacillus marinus)、坚强芽孢杆菌(Bacillus firmus)、甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)6株芽孢杆菌对该致病菌拮抗效果明显,长枝木霉(Trichoderma longibrachiatum)与哈茨木霉(Trichoderma harzianum)2株木霉菌对该致病菌具有明显的拮抗效果.[结论]筛选到了8株能够有效抑制该病原菌的生防菌株,为以后研究生防肥料奠定了基础.     

与桃树再植病相关的根际微生物的分离鉴定及相互作用

 【目的】研究桃树再植病与根际微生物的关系。【方法】以Mфller氰化钾培养基为选择培养基进行桃根际微生物的筛选,采用16S rDNA 序列分析并结合生物学特性对所获菌株进行鉴定,并通过温室盆栽试验对所获拮抗菌的生防效果进行初步观察。【结果】从桃根际土壤中分离筛选出3株能以扁桃苷为碳源产生氢化氰（HCN）的细菌（CN-X4、CN-X9、CN-X17）和3株分别能对上述细菌有不同抑制作用的放线菌（CN-G2、CN-G3、CN-G5）。鉴定结果表明菌株CN-X4、CN-X17均为农杆菌属中的根癌农杆菌（Agrobacterium tumefaciens）,但分属不同的变种;菌株CN-X9为假单胞杆菌（Pseudomonas sp.）,菌株CN-G2和CN-G5分别为细黄链霉菌（Streptomyces microflavus）、淡紫灰链霉菌（Streptomyces lavendulae）,菌株CN-G3可能是灰色链霉菌(Streptomyces griseus)的近缘种;拮抗菌盆栽生防效果显著。【结论】桃根际不仅存在能以扁桃苷为碳源并产生HCN的细菌而且同时存在与其相拮抗的耐氰放线菌,根际微生物区系平衡的破坏是导致再植病的关键因素之一。     

环境温度和酸碱变化适应性广的纤维素降解菌复合系筛选

【目的】外源微生物在生物堆肥过程中的作用是否稳定对生物堆肥意义重大,本研究旨在获得具有较好环境耐受性的复合微生物菌,增强菌剂在生物堆肥中的竞争力和实用效果。【方法】将前期从自然环境中分离到的具有纤维素分解能力的20株菌,构建25组复合微生物菌剂,经过拮抗关系试验筛选到21组复合微生物剂,并通过液体发酵培养,采用DNS法测定复合菌的纤维素酶活:包括滤纸酶活(FPA)和不同环境条件下(温度、酸碱)的羧甲基纤维素钠酶活(CMC酶活)。【结果】筛选得到的复合微生物CM17,该菌系在35、45、55℃,pH值6、7.5、10,都能正常分解纤维素,具有良好的环境耐受性。16SrDNA分子鉴定表明,CM17复合菌剂中包含有链格孢菌(Alternaria alternate)、链霉菌(Streptomyces sp.)、厄氏菌(Oerskovia sp.)和短梗霉菌(Aureobasidium sp.)等。CM17复合菌剂的纤维素酶活远远比单菌株强,当4种菌的混合体积配比为1∶1∶1∶1时,其分解纤维素的酶活功能表现最佳。【结论】CM17复合菌剂具有较强的环境耐受性,对复杂环境下生物堆肥具有一定的理论和应用价值。