草莓枯萎病菌的分离鉴定及防治药剂筛选

草莓枯萎病是目前危害北京草莓产业的主要病害,为筛选出安全有效的杀菌剂,采用组织分离法从北京昌平地区采集的草莓枯萎病株中分离到引起草莓枯萎病的病原菌。经形态学和分子生物学手段鉴定该病原菌为尖孢镰刀菌草莓专化型(Fusarium oxysporum Schlecht f.sp.fragariae Winks et Williams)。采用菌丝生长速率法对14种杀菌剂进行筛选,其中,206.7g/L噁酮·氟硅唑、寡雄腐霉、φ=25%腈菌唑、w=60%嘧菌酯、w=70%代森锰锌、w=75%百菌清、w=50%异菌脲7种杀菌剂对草莓枯萎病具有显著的抑菌效果,其EC50值分别为0.003、0.63、0.73、5.91、8.90、78.54、229.09mg/L;另外,206.7g/L噁酮·氟硅唑、寡雄腐霉、w=70%代森锰锌和w=75%百菌清4种杀菌剂的药效可持续96h以上,其他3种药剂处理48h后对草莓枯萎病的抑制效果显著下降。因此,206.7g/L噁酮·氟硅唑、寡雄腐霉、w=70%代森锰锌和w=75%百菌清是草莓枯萎病防治的优先选择。     

小麦根腐病菌鉴定及其生物学特性测定

分离鉴定小麦根腐病菌，并对其进行生物学特性测定，结果表明，小麦根腐病菌属于半知菌亚门平脐蠕孢属麦根腐平脐蠕孢（Bipolaris sorokiniana(Sacc.)Shoemakey)。该菌生长的最适温度为30℃，最适PH值为7，最适培养基为PDA，60℃5min为致死温度。分生孢子在水滴中才能萌发，萌发的最适PH值为7，最适温度为25℃，在供试的营养液中，以土壤浸液中萌发率最高。     

向日葵菌核病生防放线菌的分离筛选及拮抗作用的初探

根据微生物间的拮抗作用,试从病地土壤中分离拮抗放线菌,探索利用放线菌对向日葵菌核病进行生物防治的途径。从内蒙古呼和浩特市、巴彦淖尔、包头等地所采集的土壤中分离出38个放线菌菌株,经过平板拮抗作用初测,有8个菌株(F-1、F-3、F-6、F-8、F-11、F-15、F-21、F-25)对向日葵核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)有拮抗作用。选出其中2个作用最明显的菌株(F-6、F-8),观察其在平板对峙培养中对向日葵核盘菌的抑制作用及其代谢产物对向日葵核盘菌的作用。结果表明:F-6、F-8菌株及其代谢产物对向日葵核盘菌均有明显的抑菌作用。同时,对F-6、F-8两菌株的培养性状和形态特征进行了初步观察。     

2,4-二乙酰基藤黄酚产生菌在番茄根部的定殖及对番茄青枯病的防治

2，4-二乙酰基藤黄酚(2，4-DAPG)产生菌是荧光菌对土传病害进行生物防治的主要类群之一。室内筛选结果表明：供试的12个2，4-DAPG产生菌菌株对番茄青枯病菌均有不同程度的抑制作用，其中CPF、10抑菌效果最佳，抑菌带宽为3．5mm；而2P24、5J10次之，抑菌带宽为3．0mm。CPF10和2P24培养原液对番茄胚根的生长均有明显的抑制作用。CPF10和2P24根部定殖结果表明，两菌株均可在番茄幼苗根部大量定殖，根表细菌数量随着时间延长呈下降趋势但仍维持较高数量；而根内细菌数量有明显上升的趋势。CPF10和2P24对番茄青枯病均有一定的防治效果，其中2P24的防治效果最好。而CPF10在所有的处理中变异系数(CV)最小，防治效果最稳定。     

植物根际土壤细菌的分离与鉴定

为了揭示不同植物根际土壤细菌的群落结构和多样性,以期为更好地利用植物根际土壤细菌奠定基础。笔者采用稀释分离法,对12种不同植物的根际土壤细菌进行了分离,并采用16S r DNA序列测定与系统发育分析法初步确定了细菌的分类地位。结果表明,不同种类植物的根际土壤中,可培养细菌的多样性不同,重茬地和多年生植物的根际土壤中细菌的种类和数量较多;12种植物的根际土壤中共分离得到芽孢杆菌属(Bacillus)、假单胞菌属(Pseudomonas)、短杆菌属(Brevibacterium)、节杆菌属(Arthrobacter)、沙雷氏菌属(Serratia)、类芽孢杆菌属(Paenibacillus)、不动杆菌属(Acinetobacter)和Massilia等8个属的137株细菌,其中,芽孢杆菌属为优势属,占81.0%。芽孢杆菌属内占主要比例的有:B.megaterium、B.aryabhattai、B.subtilis、B.amyloliquefaciens等种,其中B.subtilis,B.amyloliquefaciens等细菌种类据文献报道为有益微生物,可以在今后的研究中进行开发和利用。植物根际土壤中的可培养细菌种类丰富多样,有望成为有益微生物资源库进行开发利用。     

苏丹草大斑病菌的生物学特性研究

对苏丹草大斑病菌生物学特性的研究,为进一步探讨该病的流行规律及制定综合防治措施提供理论依据.本试验研究了温度、pH、光照、营养条件对苏丹草大斑病菌营养生长的影响及温度、pH、湿度、营养条件对该菌孢子萌发的影响.结果表明,苏丹草大斑病菌生长的温度范围为10～35℃,最适温度为25℃;pH范围5.0～9.0,最佳为8.0;光照对菌丝生长无显著影响.在试验的培养基中以PDA+苏丹草种子煎汁是生长最好的.该菌孢子萌发的温度为10～35℃,最适温度为20℃;pH范围3.0～9.0;在相对湿度为100%的条件下容易萌发,水滴中更易萌发.1%的葡萄糖液、1%乳糖液、1%蔗糖液及2%苏丹草种子煎汁都能促进孢子萌发,而1%蔗糖液是最适宜该菌孢子萌发的液体环境.生物学特性表明,该菌对营养要求不高,对环境适应力较强的病原菌.     

三种中药提取物对桃褐腐菌（Monilinia fructicola）的抑菌作用

为筛选出对桃褐腐病菌具有抑制作用的中草药抑菌活性物质，采用三次浸渍提取法对中草药进行提取，通过菌丝生长速率法、单位面积产孢量计算法和凹玻片悬低法进行抑菌活性测定，再经过光学显微镜观察抑菌活性物质对桃褐腐菌的形态、结构的破坏作用，得出结果：黄芩、甘草和威灵仙的4种溶剂提取物对桃褐腐病菌（M. fructicola）均有不同程度的抑制作用，其中黄芩丙酮提取物和黄芩80％乙醇提取物的抑制作用较强，抑菌率达到80％以上，对菌丝细胞有明显的破坏作用，且能够抑制分生孢子的产生与萌发；同时对供试的16种植物病原真菌也有不同程度的抑制效果，抑菌谱较广。说明黄芩丙酮和黄芩80%的乙醇提取液中均含有抗菌成分。     

三种中药提取物对桃褐腐菌（Monilinia fructicola）的抑菌作用

为筛选出对桃褐腐病菌具有抑制作用的中草药抑菌活性物质,采用三次浸渍提取法对中草药进行提取,通过菌丝生长速率法、单位面积产孢量计算法和凹玻片悬低法进行抑菌活性测定,再经过光学显微镜观察抑菌活性物质对桃褐腐菌的形态、结构的破坏作用,结果标明:黄芩、甘草和威灵仙的4种溶剂提取物对桃褐腐病菌(M.fructicola)均有不同程度的抑制作用,其中黄芩丙酮提取物和黄芩80%乙醇提取物的抑制作用较强,抑菌率达到80%以上,对菌丝细胞有明显的破坏作用,且能够抑制分生孢子的产生与萌发;同时对供试的16种植物病原真菌也有不同程度的抑制效果,抑菌谱较广.说明黄芩丙酮和黄芩80%的乙醇提取液中均含有抗菌成分.     

与桃树再植病相关的根际微生物的分离鉴定及相互作用

 【目的】研究桃树再植病与根际微生物的关系。【方法】以Mфller氰化钾培养基为选择培养基进行桃根际微生物的筛选，采用16S rDNA 序列分析并结合生物学特性对所获菌株进行鉴定，并通过温室盆栽试验对所获拮抗菌的生防效果进行初步观察。【结果】从桃根际土壤中分离筛选出3株能以扁桃苷为碳源产生氢化氰（HCN）的细菌（CN-X4、CN-X9、CN-X17）和3株分别能对上述细菌有不同抑制作用的放线菌（CN-G2、CN-G3、CN-G5）。鉴定结果表明菌株CN-X4、CN-X17均为农杆菌属中的根癌农杆菌（Agrobacterium tumefaciens），但分属不同的变种;菌株CN-X9为假单胞杆菌（Pseudomonas sp.），菌株CN-G2和CN-G5分别为细黄链霉菌（Streptomyces microflavus）、淡紫灰链霉菌（Streptomyces lavendulae），菌株CN-G3可能是灰色链霉菌(Streptomyces griseus)的近缘种;拮抗菌盆栽生防效果显著。【结论】桃根际不仅存在能以扁桃苷为碳源并产生HCN的细菌而且同时存在与其相拮抗的耐氰放线菌，根际微生物区系平衡的破坏是导致再植病的关键因素之一。     

从盾壳霉中克隆耐碱相关的基因Ⅰ——突变体的筛选

试验主要是从盾壳霉中克隆耐碱柑关基因，找到耐碱突变体，了解盾壳霉耐碱功能基因。采用基因标签法生成众多突变体，然后在预先确定好的一定碱性pH值PDA培养基上筛选功能基因缺失或不能正常表达的突变体，对于获得的突变体提取DNA，利用Tail—PCR技术扩增目的片段，利用获得的阳性克隆片段为探针．采用同位素示踪法分离目的基因。