壳寡糖对植物病原真菌抑制效果的影响因素研究

[目的]研究低分子量水溶性壳寡糖对植物病原真菌菌丝生长的影响因素。[方法]系统地研究了壳寡糖的分子量、药物浓度、作用时间对水稻恶苗菌、尖孢镰刀菌和水稻纹枯菌菌丝生长的抑制率,统计分析各影响因素的显著性。[结果]壳寡糖对3种测试菌均有较好的抑制作用。不同分子量的壳寡糖抑菌效果不同,其中分子量3 000和5 000的壳寡糖抑菌率显著高于分子量2 000和7 000的壳寡糖。不同菌对壳寡糖的敏感性不同,壳寡糖对水稻恶苗菌、尖孢镰刀菌的抑制率显著高于水稻纹枯菌。[结论]壳寡糖抑菌的效果与壳寡糖分子量、药物浓度、作用时间和菌种之间的关系不是线性关系,而是2次方以上的高阶关系。     

壳寡糖对杏果实采后主要病原菌抑菌作用的研究

[目的]研究壳寡糖对引起杏果实采后病害主要病原真菌抑菌作用的影响因素.[方法]将供试菌种扩展青霉(Penicillium expansum)、胶孢链格孢(Alternaria alternata)和匍枝根霉(Rhizopus stolonifer)活化培养后接种到含有壳寡糖的PDA培养基上,观察不同分子量及不同浓度的壳寡糖对不同病原菌菌落生长的影响.[结果]壳寡糖对3种供试菌均有较好的抑制作用.不同分子量的壳寡糖抑菌效果不同,分子量5000和10000壳寡糖的抑菌率显著高于分子量3 000的壳寡糖.在供试壳寡糖浓度中,处理效果表现为剂量依赖关系,三种分子量的壳寡糖均以2.0;浓度对三种供试菌的抑菌效果最好.不同病原菌对壳寡糖的敏感性不同,供试壳寡糖对胶孢链格孢(A.alternata)和匍枝根霉(R.stolonifer)的抑制率明显高于扩展青霉(P.expansu).[结论]不同分子量的壳寡糖对病原菌的菌落生长均有较好的抑制作用,抑制作用的大小因壳寡糖分子量、浓度、病原菌的不同而有差异.     

两种海洋寡糖对植物病原真菌的抑制作用

在马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基上,采用生长速率法研究了两种海洋寡糖(壳寡糖Ⅰ、卡拉胶寡糖)对水稻稻瘟菌Pyricularia oryzae、棉花黄萎菌Verticillium dahliae、小麦赤霉菌Fusarium graminearum和番茄灰霉菌Botrytis cinerea的体外抑菌作用。结果表明,聚合度为2~20的壳寡糖Ⅰ对供试的4种植物病原真菌均有一定的抑制作用,抑制强度随壳寡糖Ⅰ浓度的升高而增强,壳寡糖Ⅰ可明显抑制番茄灰霉菌菌丝的生长(EC50=680 mg/L)和孢子的萌发(EC50=162 mg/L);而聚合度低的壳寡糖Ⅱ(聚合度为2~10)对番茄灰霉菌菌丝的生长抑制作用较低;卡拉胶寡糖对3种植物病原真菌菌丝的生长不仅没有抑制作用,反而对水稻稻瘟菌和番茄灰霉菌菌丝的生长有明显促进作用。     

聚合度4～6壳寡糖的制备及其活性研究

制备高活性壳寡糖并对其生物活性进行研究。采用专一性壳聚糖酶酶解壳聚糖制备壳寡糖,乙酰丙酮法测定壳寡糖的数均分子量,用不同剂量壳寡糖灌喂小鼠,探讨壳寡糖对小鼠免疫功能的影响以及对小鼠肝脏的保护作用。结果表明,所得壳寡糖的数均分子量为1 246.38,聚合度为4~6;该壳寡糖对小鼠免疫器官具有明显的保护和促进生长作用,显著提高了小鼠的抗疲劳能力以及抗菌活力,对小鼠肝脏具有显著的保护作用。可见,专一性壳聚糖酶酶解所得聚合度4~6的壳寡糖具有较高的生物活性,壳寡糖在保健食品开发及医药等领域的应用前景广阔。     

菠萝蛋白酶降解壳聚糖条件的研究

[目的]为菠萝蛋白酶降解壳聚糖制备壳寡糖提供工艺参数和科学依据。[方法]用DNS比色法测定还原糖的含量,探讨不同条件对菠萝蛋白酶降解壳聚糖的影响。用端基分析法测定壳寡糖的分子量,研究菠萝蛋白酶降解壳聚糖过程中壳聚糖分子量的变化。[结果]菠萝蛋白酶降解壳聚糖的最适pH为7.1,最适温度为53℃,最适酶浓度为0.30 g/L。在最适条件下,降解反应进行6 h以上,可以得到平均聚合度为8,平均分子量为1 306的壳寡糖。[结论]菠萝蛋白酶能有效降解壳聚糖,制备壳寡糖。     

褐藻胶寡糖制备及抑菌活性研究

以平均聚合度10以下的寡糖为目标产物,将褐藻胶经不同浓度过氧化氢,在不同温度和反应时间下降解,筛选出最佳降解条件,以此降解条件下制备的寡糖对7种常见细菌和真菌进行抑菌实验.结果表明:过氧化氢体积百分比浓度3%、温度80℃、反应1.5～2 h为最佳降解条件;寡糖对细菌的生长有明显的抑制作用,最低抑菌浓度金黄色葡萄球菌、大肠杆菌及藤黄微球菌为0.625%、枯草芽孢杆菌为2.5%,寡糖对真菌抑制作用不显著.     

壳寡糖对玉米种子萌发及幼苗生长的影响

[目的]研究壳寡糖对玉米（Zea mays L.）种子萌发及幼苗生长的影响。[方法]利用不同浓度壳寡糖处理玉米种子及幼苗,研究壳寡糖对玉米种子萌发及幼苗生长的影响。[结果]壳寡糖能够有效地提高玉米种子胚乳淀粉酶活力,提高胚根、胚芽的生长速率,促进玉米种子萌发;同时,壳寡糖还可提高玉米幼苗叶片叶绿素含量以及根系活力,促进幼苗生长。其中,浓度为0.1μg/ml壳寡糖的促进作用最为明显。[结论]壳寡糖具有促进玉米种子萌发及幼苗生长的作用。该研究可为壳寡糖的应用提供理论支持。     

壳寡糖对小麦种子萌发及幼苗生长的影响

[目的]研究壳寡糖对小麦（Triticum aestivum）种子萌发及幼苗生长的影响。[方法]利用不同浓度壳寡糖处理小麦种子及幼苗,研究壳寡糖对小麦种子萌发及幼苗生长的影响。[结果]壳寡糖能够有效地提高小麦种子胚乳淀粉酶活力,提高胚根、胚芽的生长速率,促进小麦种子萌发;同时,壳寡糖还可提高小麦幼苗叶片叶绿素含量以及根系活力,促进幼苗生长。其中浓度为0.1μg/m l壳寡糖的促进作用最为明显。[结论]壳寡糖具有促进小麦种子萌发及幼苗生长的作用。该研究可为壳寡糖的应用提供理论支持。     

不同分子量壳寡糖对黑麦草种子萌发和幼苗抗病酶活性影响的研究

采用平均分子量分别为3000、5000、10000的0.3%(w/v)壳寡糖溶液处理黑麦草种子并对处理过的种子进行发芽试验和幼苗抗病酶活性的测定。结果表明:三种不同分子量壳寡糖溶液处理黑麦草种子,均可以提高黑麦草种子的发芽率、发芽指数和活力指数,并且提高了幼苗的叶绿素、可溶性蛋白的含量。增强了幼苗的过氧化物酶(POD)活性,诱导了病程相关蛋白(即,几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶及苯丙氨酸解氨酶)的表达。其中,以平均分子量为10000的壳寡糖对种子活力及幼苗的生长和抗病酶活性的影响最好,其发芽指数和活力指数分别比对照提高了32.64%、60.47%;苗高、可溶性蛋白含量、苯丙氨酸解氨酶、几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶活性分别比对照提高了20.98%、33.80%、43.17%、15.73%、26.41%。     

土壤中产壳聚糖酶菌株的筛选、鉴定及抑菌活性研究

采用透明圈法,通过大量筛选得到9株产壳聚糖酶的野生菌株,对其中产壳聚糖酶酶活最高的菌株BS-0409的菌株形态特征和生理生化特征及16S rDNA序列进行了测定分析,并对该菌的酶解产物壳寡糖进行了抑菌试验。结果表明,该菌株呈短杆状,革兰氏染色阴性,端生鞭毛。经16SrDNA序列分析表明,BS-0409菌株为巨大芽孢杆菌,该菌的酶解产物壳寡糖对17种植物病原真菌都有较强的抑制作用,抑制率为29.6%～100.0%。     

壳寡糖对杏鲍菇液体菌种活性的影响

[目的]研究不同浓度的壳寡糖对杏鲍菇液体茵种活性的影响。[方法]以杏鲍菇母种“农杏”为供试菌种,将不同浓度寡聚糖添加到培养基中,观察杏鲍菇液体茵种萌发时间,测定茵丝生长速度。[结果]浓度为0．001mg/ml的壳寡糖能明显缩短杏鲍菇液体菌种的萌发时间并促进其茵丝生长。[结论]壳寡糖作为天然生物物质的降解产物,对食用茵具有生长调节作用。     

壳寡糖对试验性糖尿病大鼠餐后血糖及肝肌糖原含量的影响

[目的]研究不同剂量的壳寡糖对链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病大鼠餐后2h血糖及肝、肌糖原水平的影响。[方法]按65mg／kg体重一次性腹腔内注射（ip）STZ制备糖尿病大鼠模型,随机分成糖尿病治疗组和糖尿病对照组。治疗组分别按每日250、500、1500mg／kg灌胃壳寡糖水溶液,正常对照组、阴性对照组按体重灌胃等体积蒸馏水（10ml／k）,阳性对照组按每日200mg／k灌胃二甲双胍水溶液,连续60d,每10d测1次餐后2h血糖值。60d后对肝脏等脏器称重,计算器官系数。蒽酮试剂法测定肝、肌糖原含量。肝脏、骨骼肌PAS染色,做病理组织学检查。[结果]不同剂量的壳寡糖均能不同程度改善糖尿病大鼠的体重减轻、多饮、多食等症状,降低餐后2h血糖值。中、高剂量组的降糖效果优于低剂量组。PAS染色显示,壳寡糖各组肝索排列整齐,脂变程度低,骨骼肌和肝组织糖原比模型组明显增多。[结论]壳寡糖可以减少肝、肌糖原分解,减轻肝脏、肌肉组织的胰岛素抵抗,使血糖浓度下降。     

低聚壳寡糖植物生长调节剂对丹参生长及次生代谢产物的影响

[目的]研究低聚壳寡糖植物生长调节剂对丹参（Salvia miltiorrhiae Bge.）生长及次生代谢产物的影响。[方法]采用拌种加叶喷等方法施用不同浓度低聚壳寡糖植物生长调节剂,观察丹参生长情况及对次生代谢产物丹参酮IIA含量的累积变化情况。[结果]低聚壳寡糖植物生长调节剂较显著地促进了丹参酮IIA含量的提高。适宜浓度的低聚壳寡糖植物生长调节剂能促进丹参植株及根系的生长。[结论]该研究对揭示低聚壳寡糖植物生长调节剂对丹参活性成分的累积效应形成和积累机制,以完善中药材质量调控与药用植物栽培的理论和技术体系,建立优质丹参的规范化栽培技术,同时对促进中药材规范化的优良种植都具有重要的价值和意义。     

蝇蛆低聚几丁糖对烟草赤星病菌的毒力测定

采用生长速率法测定了蝇蛆低聚几丁糖对烟草赤星病菌Alternaria alternata的毒力。结果表明,蝇蛆低聚几丁糖对烟草赤星病菌有一定的抑制作用,在一定浓度范围(1~16 mg/mL)内,随着浓度的提高,蝇蛆低聚几丁糖抑制率随之升高。观察发现,受抑制的菌丝均有不同程度的缩短、变粗及扭曲等症状,且产生的畸形分生孢子数随浓度的升高而增加。     

不同提取方法研究甘青青兰中多糖含量

[目的]对比不同提取方法对甘青青兰中多糖含量的影响。[方法]采用不同提取方法提取甘青青兰中的多糖,用硫酸-苯酚法测定多糖的含量。[结果]利用超声提取得到的甘青青兰中多糖含量最高,为15.6%;其次是回流得到的多糖含量,为10.4%;最后是浸渍法所得的多糖,含量为4.2%。[结论]利用超声提取甘青青兰中的多糖,含量高于传统的浸渍法提取的量,为进一步研究甘青青兰的最佳提取工艺奠定了试验基础。     

紫外光谱法测定钾盐中钾含量的方法研究

[目的]研究用紫外光谱法测定钾盐中钾的含量。[方法]采用分光光度导数法,选择276 nm作为一阶导数测定波长进行扫描测量,对试验样品进行微量分析,并对其准确度和精密度进行评价。[结果]紫外光谱法数据准确,重复性好。与重量法相比,该方法使用的试剂少、检测时间短。[结论]该方法可用于日常检测分析。     

中药紫茉莉花根的鉴别研究

[目的]研究紫茉莉花根的生药学特性。[方法]采用显微鉴别法、理化检识法、薄层层析法和紫外光谱法对紫茉莉花根进行定性分析。[结果]紫茉莉花根中含有酚类、醛类和内酯类不饱和化合物。[结论]采用显微鉴别法、理化检识、薄层层析法和紫外光谱法对紫茉莉花根进行质量标准研究,方法简单结果准确。     

一种高效·快速回收DNA片断的方法

[目的]介绍一种高效、快速回收DNA片段的方法。[方法]在0.5 ml的EP管的管底用大头针扎孔,将一小块玻璃棉纸放入管中,把含有DNA片段的凝胶放在纸上,速冻后离心,收集从管底流出的液体,用乙醇沉淀回收,并且与TaKaRa回收试剂盒的结果做对比。[结果]该方法与试剂盒产量相当。[结论]该方法是一种经济、快速、高效回收DNA片段的方法。     

应用热乙醇法提取浮游植物中叶绿素a的探讨

[目的]利用热乙醇法提取浮游植物中叶绿素a。[方法]对叶绿素a的测定方法进行改进,通过对比试验探寻热乙醇法提取叶绿素a的最佳温度和反应时间,同时与现行规范法进行比较。[结果]用热乙醇法提取浮游植物中的叶绿素a,操作简便,安全可靠,萃取温度为75℃时,用热乙醇加热3 min提取时,叶绿素a提取效率最高。规范法和热乙醇法提取的叶绿素a存在显著正相关,热乙醇法且比规范法提取效率更高。[结论]该研究为地表水浮游植物中叶绿素a的提取提供了理论参考。