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1.
【目的】探索微流控芯片电泳方法在PCR产物检测方面的效果,并建立针对番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf curl virus,TYLCV)的微流控芯片电泳检测方法,弥补琼脂糖凝胶电泳方法在试剂消耗、所用时间、安全性方面的缺陷。【方法】通过对TYLCV的基因组进行分析后,在该基因组中相对稳定的位置设计引物,同时兼顾引用已被研究者研究过的引物,对这些选择的引物进行特异性、稳定性、灵敏度等方面的验证,筛选出用于后续试验的引物。选择DNA标准物φX174/BsuR I(Hae Ⅲ) marker,分别进行琼脂糖凝胶电泳和微流控芯片电泳,对二者在耗材、耗时和灵敏度方面进行比较,确定微流控芯片电泳在核酸检测方面的应用价值。利用筛选出的其中1对引物对番茄叶片的实际样品进行PCR扩增,随后通过微流控芯片电泳对其进行检测,以此探讨微流控芯片电泳在病毒检测方面的检测效果。【结果】共筛选出14对TYLCV备用引物,其中2对引自文献,12对为本文设计,每对引物均可满足微流控芯片检测要求。选择其中1对引物TYLCV-T作为随后的研究对象。利用琼脂糖凝胶电泳和微流控芯片电泳对DNA标准物检测,结果表明微流控芯片电泳在耗时方面不足琼脂糖凝胶电泳的1/10,约为13 min,试剂消耗为琼脂糖凝胶电泳的1/8,检测灵敏度方面至少比琼脂糖凝胶电泳高103倍,根据DNA标准物原液浓度计算可知,微流控芯片电泳至少可准确检测到浓度为5×10-6 μg?μL-1的核酸样品。利用微流控芯片电泳对TYLCV-T扩增的TYLCV PCR产物进行检测,将检测峰值图与DNA标准物的峰值图时间比较,就可判断出产物峰的大小范围。【结论】筛选出的关于TYLCV的备用引物可作为进一步研究微流控芯片技术在该病毒检测方面的基础;通过将琼脂糖凝胶电泳和微流控芯片电泳进行比较,确立了后者在核酸检测方面的应用价值;通过微流控芯片电泳对TYLCV PCR产物的检测,建立了基于微流控芯片电泳的TYLCV快速检测方法,为TYLCV的快速检测提供新的技术支持。 相似文献
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4.
本文在充分阐述建立环境和经济协调发展示范区重要性的基础上,着重分析目前示范区建设过程中存在的一些突出矛盾,提出今后进一步完善和发展的措施。 相似文献
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通过"3414"回归最优设计原理设置的作物肥效试验结果,获得肥料效应函数方程,由此数学模型得出理论氮磷钾最佳施肥量,其中纯N 317.55kg/hm2、P2O5 69.6kg/hm2、K2O 115.95 kg/hm2,最佳产量9948kg/hm2.综合分析不同推荐施肥方法的推荐施肥量,结合本地农业生产实际,氮、磷、钾建议推荐量分别为277.5-322.5kg/hm2、69-115.5kg/hm2 、165-195kg/hm2 . 相似文献
6.
翻译起始因子4E在植物病毒侵染中的作用 总被引:1,自引:0,他引:1
在自然演化发展的过程中,植物进化产生了一系列抗外界微生物侵染的能力,其中包括抵抗依靠植物的生物合成及能量的病毒。植物突变产生的隐性抗性基因可以表达破坏或限制病毒的侵染所必须的翻译起始因子4E,从而达到抑制病毒在体内增殖的效果。综述了翻译起始因子4E在植物病毒侵染过程中的作用。 相似文献
7.
本文根据我省农业环境质量日趋恶化和管理现状,分析其对农业可持续发展的影响,阐述了农业环境保护立法的重要性,必要性和紧迫性。 相似文献
8.
大丽轮枝菌酯酶同工酶的测定 总被引:6,自引:1,他引:5
对棉花黄萎病菌不同致病力及致病类型菌系,不同寄主上的大力轮枝菌共14个菌系的酯酶,进行了聚丙烯酰胺胶平板电泳。结果表明棉花黄萎病不同致病类型菌系有其独特的酯酶同工酶谱。E6酶带的有无与致病力类型有关,E3酶带活性与病菌致病力有关,E3酶带活性与棉花发病病指关联度为0.85。不同寄主大丽轮枝菌酯酶同工酶总酶带数在7 ̄12条之间,主酶带数在2 ̄4条之间,按E3酶带活性强、中、弱划分为3个类型。E3酶带 相似文献
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龙泉市地处浙西南山区,土地总面积458.85万亩,其中山林面积388.65万亩,占84.67%,耕地面积25.31万亩,仅占6.53%,是典型的“九山半水半分田”的山区市。2003年,全市共有16个乡镇,3个街道,共442个行政村,总人口27.55万人,其中60%以上的人居住在海拔高低不同的山上或山坳中。随着浙江农业和农村现代化建设步伐的加快,龙泉这个山区市与全省经济社会发展平均水平差距有拉大的趋势,面对这个问题,笔者对龙泉市农业和农村状况进行了调查,并就如何建设山区农业和农村现代化进行了探讨。 相似文献