鸭Ⅰ型肝炎病毒、鸭圆环病毒和番鸭细小病毒三重RT PCR检测方法的建立

为建立可同时鉴别检测鸭Ⅰ型肝炎病毒、鸭圆环病毒和番鸭细小病毒的三重RT-PCR方法,根据基因库中鸭Ⅰ型肝炎病毒、番鸭细小病毒和鸭圆环病毒的基因序列,分别设计3对特异性引物,通过三重RT-PCR扩增条件优化、敏感性和特异性试验,建立了鸭Ⅰ型肝炎病毒、鸭圆环病毒和番鸭细小病毒三重RT-PCR方法。使用该方法对同一样品中的鸭Ⅰ型肝炎病毒、鸭圆环病毒和番鸭细小病毒模板进行扩增,结果均得到与试验设计相符的202bp(鸭Ⅰ型肝炎病毒),351bp(鸭圆环病毒)和474bp(番鸭细小病毒)的特异性扩增条带,对小鸭温病毒、鸭副粘病毒、鸭瘟病毒和禽流感病毒等病原体的检测全为阴性。敏感性试验结果表明,该方法最低能检测到1pg的鸭Ⅰ型肝炎病毒RNA、鸭圆环病毒和番鸭细小病毒DNA。建立的鸭Ⅰ型肝炎病毒、鸭圆环病毒及番鸭细小病毒的三重RT-PCR方法,具有快速、敏感、特异、定量和重复性好等优点,可用于临床鸭Ⅰ型肝炎病毒、鸭圆环病毒及番鸭细小病毒感染的检测。     

水貂阿留申病PCR完全诊断技术

本研究参考并分析GENBANK中阿留申病毒、肠炎细小病毒的序列及本实验室测序的两种病毒序列，设计并实验筛选出阿留申病毒诊断引物2对和肠炎细小病毒1对；其中阿留申病毒诊断引物ADV537与肠炎细小病毒引物PAR593组成联合诊断引物。由于2种病毒同属细小病毒属，基因某些区段相似，用于2种病毒的鉴别诊断、阿留申病毒与肠炎细小病毒混合感染的诊断。     

葡萄糖促进猪瘟病毒增殖的研究

病毒依赖宿主细胞代谢以获取复制所需的能量和生物合成分子。为探索葡萄糖和谷氨酰胺在猪瘟病毒增殖中的作用,将剥夺了葡萄糖和谷氨酰胺或加有不同浓度葡萄糖和葡萄糖类似物2-脱氧葡萄糖(2-Deoxy-D-glucose,2-DG)的培养基用于猪瘟病毒感染细胞的培养,感染后24 h收集样品,进行病毒滴度和基因组拷贝数测定,以及病毒蛋白表达的鉴定。结果表明:与正常对照相比,谷氨酰胺剥夺对病毒滴度没有显著影响,而葡萄糖剥夺时病毒滴度和基因组拷贝数分别降低30倍和20倍,同时病毒滴度与葡萄糖的浓度呈正相关。表明葡萄糖是猪瘟病毒增殖的必需营养物质。2-DG处理也能显著抑制猪瘟病毒的增殖。综上,葡萄糖对猪瘟病毒增殖至关重要,缺少葡萄糖则猪瘟病毒无法正常复制,而谷氨酰胺对猪瘟病毒增殖并无影响。     

论病毒与人类的关系及其在今后一个阶段的研究热点

介绍了病毒的感染、繁殖和传播以及几个对人类危害重大的典型的病毒性疾病,总结了人类对病毒的利用。并就人类最新阶段对病毒的研究进行了展望。     

中国主要大蒜品种和品系的病毒检测

对 96份大蒜品种和品系进行了病毒病症状及有关农艺学性状观察记载 ,其中 6 6份用 5种病毒抗血清作Dot-ELISA和免疫电镜检测及观察 ,发现大蒜不同品种 (系 )对不同种类病毒侵染存在明显差异 ,84.8%的大蒜品种 (系 )受 2种以上病毒侵染。韭葱黄条斑病毒 (LYSV) ,洋葱螨传潜隐病毒 (OMbFV)和洋葱黄矮病毒 (OYDV)是侵染中国大蒜的主要病毒种类 ,大蒜普通潜隐病毒 (GCLV)和青葱潜隐病毒 (SLV)也有检出     

马铃薯病毒的传播途径

1认识病毒传播途径的重要性 病毒的传播方式取决于病毒的性质,对病毒的鉴定很有用,特别是对不能汁液传染和不能制成抗血清的病毒更重要,是防治病毒的重要依据,是无毒马铃薯原种生产中建立隔离条件和设计保种措施的依据。在留种和生产种子的各种措施中极其重要。     

坦布苏病毒感染DF-1细胞入侵途径的初步研究

坦布苏病毒是我国新发易引起家禽出现严重产蛋下降和中枢神经系统异常的重要传染病病原.通过特异性的化学阻断剂预处理DF-1细胞,噬斑计数法检测其对病毒滴度的影响,相对荧光定量RT-PCR检测其对病毒核酸表达的影响,并对影响显著的结果进行吸附和内吞试验.结果显示,网格蛋白抑制剂氯丙嗪和动力蛋白抑制剂dynasore可显著降低病毒滴度和病毒核酸表达,且主要作用于内吞过程,对病毒吸附无影响.胆固醇抽提剂甲基-β-环糊精、小窝蛋白抑制剂genistein及胞吞抑制剂EIPA对病毒滴度无明显影响.结果表明,坦布苏病毒入侵DF-1细胞依赖于网格蛋白和动力蛋白,而不依赖于胆固醇、小窝蛋白和胞吞作用.     

番鸭呼肠孤病毒通用RT-PCR检测方法的建立

根据经典和新型水禽呼肠孤病毒σA基因的保守序列设计一对PCR引物,通过优化病毒RNA提取方法和PCR条件,建立了番鸭呼肠孤病毒通用RT-PCR检测方法。该方法可自1株经典型或4株新型水禽呼肠孤病毒特异性扩增出436 bp条带,其最低病毒检出量为3.6 TCID50,而对鸭甲肝病毒、鸭瘟病毒、新城疫病毒、坦布苏病毒、番鸭细小病毒、产蛋下降综合征病毒和H9N2亚型禽流感病毒扩增均为阴性。对2011~2012采集的224份(番鸭74、鹅68、鸭82)疑似临床病料进行检测,结果 56份为阳性,番鸭、鸭和鹅阳性率分别为59.5%(44/74),11.0%(9/82)和4.4%(3/68),表明水禽呼肠孤病毒主要在番鸭中流行。     

一种新的丹顶鹤病毒病的研究

本病是在我国发现的尚未见报道的丹顶鹤病毒性传染病。患鹤肝脏肿大。实验表明,人工感染雏鹅和成年鹅能引起发病和死亡;该病毒还可致死鹅胚、鸭胚和鸡胚,并能在鹅胚和鸭胚成纤维细胞上产生细胞病变。该病毒有囊膜,呈球形,大小约为130-180nm,无囊膜颗粒为95-105nm在CsCl里浮密度为1.29-1.34g/cm#+3,沉降系数为83.4s,对pH3.0敏感,而对pH5.0有抵抗力,1克分子MgCl#-2溶液对病毒无保护作用。该病毒不凝集禽类及动物红细胞。中和试验表明本病毒与小鹅瘟病毒、新城疫病毒、鸡马立克氏病病毒、法氏囊病病毒、鸭瘟病毒、小鸭肝炎病毒和猪瘟病毒没有抗原关系。     

一种黄病毒引起鸭产蛋下降的诊断报告

2010年以来湖北省部分地区蛋鸭群出现了严重的产蛋下降以及持续性死亡,对发病鸭进行了病理剖检以及病毒的PCR鉴定.其中用RT-PCR检测鸭黄病毒为阳性,禽流感病毒、新城疫病毒和减蛋综合征病毒均为阴性.对PCR扩增的鸭黄病毒目的片段进行回收测序,将测序结果与黄病毒属的7个不同的病毒群进行序列比对,表明该病毒与黄病毒科黄病...     

海洋病毒生态学动态参数和研究技术的进展

病毒在海洋中无处不在,是海洋生态系统中丰度和基因多样性最高的生命粒子。病毒是海洋生态系统中的活跃分子,通过感染和裂解宿主细胞使生命颗粒有机碳再返回到非生命的溶解有机碳,形成了微食物环中的"病毒回路"。病毒丰度,多样性和分布是海洋病毒生态学研究中重要的基本参数,但是由于病毒对生态系统的影响是一个动态过程,上述静态参数无法满足病毒生态学研究的需要,因此对病毒生态过程中的动态参数进行研究有着至关重要的意义。文章介绍了近20年来海洋病毒生态学研究中的主要动态参数包括接触率、感染率、裂解量、病毒引起的宿主死亡率以及病毒自身的生产率和降解率的研究进展及相关研究技术。     

植物病毒载体系统的研究及应用

随着对植物病毒基因组结构的深入认识和病毒与植物之间相互作用分子机制的阐明,对植物病毒的遗传操作成为可能。通过基因替代、插入融合、基因互补、抗原展示等方法构建的植物病毒载体系统在基础生物学研究领域和应用研究领域发挥着重大的作用。对植物病毒系统载体构建策略及其应用进行综述,以期对研究者有所启发。     

常见植物病毒冷冻干燥方法的改进与效果观察

在植物病毒研究中,病毒毒源的保藏是很重要的一环。保藏的目的不仅要维持病毒的侵染性,还要使病毒不产生变异和污染混杂［１］。在国外对植物病毒的保存方法和效果的研究较多［２,３］,而国内则少见报道。本试验采用冷冻干燥法对我国常见２０多种植物病毒长期保存的效...     

动物细小病毒致病机制的研究进展

因动物细小病毒的高危害性、高传染性,使其得到越来越多的关注与研究。为了给诊断技术、疫苗预防的研究提供借鉴,对猪细小病毒、犬细小病毒、猫细小病毒和鹅细小病毒从病原学、分子生物学特征方面进行介绍,并对4种动物细小病毒致病机制进行综述。     

多重PCR快速诊断猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒2型与猪细小病毒方法的建立

利用PrimerPremier5．0及DNAstar软件对猪伪狂犬病毒gB基因、猪圆环病毒2型ORF2基因和猪细小病毒VP2基因的保守区进行引物设计,选出扩增序列为猪伪狂犬病毒（373bp）、猪圆环病毒2型（430bp）和猪细小病毒（495bp）的3对引物．敏感性和特异性试验结果表明,mPCR对3种病毒的核酸检测限量从猪伪狂犬病毒至猪细小病毒分别为1．62×10-6、1．47×10-6和1．28×10-4 ng,对灭菌双蒸水、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒eDNA和猪瘟病毒eDNA的mPCR扩增结果均为阴性．mPCR可作为临床上猪伪狂犬病、猪圆环病毒2型感染和猪细小病毒病的病原学快速诊断方法．     

"病毒克"颗粒剂对新城疫病毒在鸡胚中复制的影响

将新城疫病毒和“病毒克”颗粒剂一同注入9日龄的鸡胚,结果与仅接种新城疫病毒的鸡胚比较,“病毒克”颗粒剂能延长接种过新城疫病毒的鸡胚的存活时间,说明“病毒克”颗粒剂对新城疫病毒在鸡胚中的复制有抑制作用。     

双夹心ELISA检测鸡EDS-76病毒抗原的研究

应用鸡抗EDS-76病毒、兔抗EDS-76病毒抗体和羊抗兔抗体,建立了检测EDS-76的双夹心ELISA方法,本试验确定的鸡抗EDS-76病毒抗体、兔抗EDS-76病毒抗体和HRP-羊抗兔抗体的最佳工作浓度分别为1∶160、1∶300和1∶1000。本法对纯化EDS-76病毒的最低检出量约为5 ng/孔。通过对EDS-76病毒试验感染鸡脏器带毒、排毒情况和临床样本的检测,表明双夹心ELISA方法对EDS-76病毒的检测特异性强、敏感度高、适合于成批样本的检测。     

贵州省健康仔猪病毒宏基因组学研究

为了初步了解贵州省规模化猪场健康仔猪携带病毒的病原本底,在贵州4个猪场采集了151头健康仔猪的咽拭子和肛拭子。病毒宏基因组学分析显示这些仔猪共携带25个科的病毒,包括噬菌体、昆虫病毒、脊椎动物病毒等。在脊椎动物相关的病毒科中,其中4个猪场共同存在星状病毒、冠状病毒、微小核糖核酸病毒等11个病毒科。此外,在每个猪场中,疱疹病毒、黄病毒在咽拭子中的reads数均大于肛拭子中的reads数;数圆环病毒、呼肠弧病毒、微小核糖核酸病毒、星状病毒、冠状病毒在肛拭子中的reads数均大于咽拭子中的reads数,提示这些病毒的组织嗜性。对猪瘟病毒、类圆环病毒、博卡细小病毒、星状病毒、萨佩罗病毒的contigs进行进化分析,结果发现星状病毒具有丰富的遗传多样性,而其他病毒与各自参考毒株进化关系较近;猪类圆环病毒与牛类圆环病毒核苷酸同源性很高,提示存在跨种传播或基因重组。对突隆病毒进行了检测,发现其广泛分布于4个猪场健康仔猪的咽拭子和肛拭子,阳性率为75%～100%。研究为健康仔猪携带病毒的多样性和本底情况提供了重要的基础数据。     

茶小卷叶蛾颗粒体病毒的感染试验

<正> 昆虫病毒对宿主的侵染力,除因宿主品种不同而受感染的程度各异之外,取决于病毒、昆虫生理状态、环境条件和三者之间的复杂关系.宿主昆虫感病率因病毒株系毒力强弱及感染病毒剂量的不同而异;同时,也因宿主昆虫的虫态龄不同而异.然而病毒和宿主昆虫又都受到环境条件各种因子的影响.为了解和掌握茶小卷叶蛾颗粒体病毒以下简括AOGV不同剂量对不同虫龄的感染效果及某些理化因子对病毒侵染力的影响,为病毒的生产和应用提供依据,我们进行了下述感染试验.     

猪常见病毒性疾病防治的几点思考

猪发烧、口蹄疫、胃肠炎、腹泻、哮喘和猪流感是猪中最常见的病毒性疾病。分析病毒性疾病的实际损失,判断细菌性病毒的严重程度,有助于加强对猪常见病毒性疾病的预防和分析,提高猪常见病毒性疾病的治疗水平,有效治疗猪常见病毒性疾病。本文将分析猪常见病毒性疾病的流行问题,以加强对常见猪病毒性疾病的有效防治。