| 番鸭呼肠孤病毒通用RT-PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 叶伟成,余斌,刘跃生,华炯钢,云涛,张存.番鸭呼肠孤病毒通用RT-PCR检测方法的建立[J].浙江农业学报,2014(6). |
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| 作者姓名： | 叶伟成 余斌 刘跃生 华炯钢 云涛 张存 |
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| 作者单位： | 浙江省农业科学院畜牧兽医研究所;嘉兴职业技术学院; |
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| 基金项目： | 浙江省重点科技创新团队(2012R10031-04);浙江省科技计划项目(2011C14011);浙江省“三农六方”项目;嘉兴市科技研究计划(2012AY1063);宁波市科技计划项目(2014C10033) |
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| 摘 要： | 根据经典和新型水禽呼肠孤病毒σA基因的保守序列设计一对PCR引物,通过优化病毒RNA提取方法和PCR条件,建立了番鸭呼肠孤病毒通用RT-PCR检测方法。该方法可自1株经典型或4株新型水禽呼肠孤病毒特异性扩增出436 bp条带,其最低病毒检出量为3.6 TCID50,而对鸭甲肝病毒、鸭瘟病毒、新城疫病毒、坦布苏病毒、番鸭细小病毒、产蛋下降综合征病毒和H9N2亚型禽流感病毒扩增均为阴性。对2011~2012采集的224份(番鸭74、鹅68、鸭82)疑似临床病料进行检测,结果 56份为阳性,番鸭、鸭和鹅阳性率分别为59.5%(44/74),11.0%(9/82)和4.4%(3/68),表明水禽呼肠孤病毒主要在番鸭中流行。
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| 关 键 词： | 番鸭呼肠孤病毒 RT-PCR σA基因 通用检测方法 |
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