巴西橡胶树树根组织培养外植体消毒研究

[目的]寻找一条降低橡胶树树根组织培养中外植体污染的有效途径。[方法]对巴西橡胶树树根进行组织培养,取林段断根处理30d后的新根为外植体,采用1g/L多菌灵、0.1%HgCl2和不同浓度益培隆对其进行了消毒试验。[结果]在常规消毒前先采用1g/L多菌灵对外植体处理2.5h,再用75%乙醇消毒30s及0.1%HgCl2消毒6min,然后接种到添加0.1%益培隆的固体愈伤诱导培养基上,培养30d后外植体污染率下降至44.59%,存活率达25.60%。[结论]该研究为降低橡胶树树根组织培养中外植体污染提供了理论依据。     

巴西橡胶树离体茎段培养研究

[目的]诱导橡胶树茎段腋芽分化增殖,为橡胶树栽培提供大量优良的新型无性系种植材料。[方法]以橡胶树优良单株带芽茎段作外植体,以MS为基本培养基,研究不同激素配比的培养基对橡胶树腋芽分化增殖的影响。[结果]以多茵灵2．0g／L＋青霉素400．0mg／L预处理＋O．1％HgCl2表面消毒,污染率降至29％;以MS＋6一BA2．0mg／L为启动培养基,腋芽萌动率达85％。以MS＋6-BA3．0mg／L＋NAA0．1mg／L为生长增殖培养基,萌动腋芽生长发育正常。[结论]多菌灵和抗生素预处理,可以明显降低外植体污染率和死亡率。6-BA对腋芽的萌动和生长起重要作用,而添加2,4一D则抑制腋芽萌发及生长。     

无花果组织培养中防止外植体褐化的研究

[目的]探讨防止无花果组织培养中外植体褐化的最佳方法。[方法]以无花果幼树顶芽为试材,研究了2种外植体类型、4种消毒方法、同一种消毒剂的不同消毒时间、5种激素组合和3种防褐化剂对无花果组织培养中外植体褐化的影响。[结果]与刚长出幼叶的项芽相比,未发芽的顶芽适宜作防褐化外植体;先将外植体用1000mg／L维生素C溶液浸泡30min,再用浓度0．1％升汞消毒为最佳消毒方法;在一定时间范围内。外植体用浓度10％次氯酸钠消毒时间越长防褐化效果越好;防褐化的最佳激素搭配为6-BA和NAA;3种防褐化荆中以1500mg／L维生素C的抗褐化效果最明显。[结论]选用未分化的顶芽为外植体,浓度0．1％的升汞为消毒剂,MS为基本培养基并附加6-BA1．0mg／L和NAA0．1mg／L进行组织培养。防止外植体褐化的效果最佳。     

山梨酸钾在红豆杉开放式组织培养中的应用

[目的]确定山梨酸钾作为开放式组织培养抑菌剂的最佳浓度。[方法]通过在培养基中添加不同浓度的山梨酸钾代替高压灭菌,研究了山梨酸钾在红豆杉开放式组织培养中的抗菌作用。[结果]0．02和0．04g/L山梨酸钾的抑菌效果较好,抑菌时间最长,在红豆杉的开放式组织培养中未出现青霉和黑曲霉,且菌块生长较慢。在含0．02g／L山梨酸钾的培养基上培养的红豆杉外植体在第16天出现愈伤组织。在含0．02和0．04g/L山梨酸钾的培养基上外植体的存活率分别为13％和3％,其余培养基上的外植体全部死亡。在含0．02和0．04g／L山梨酸钾的培养基上外植体的污染率分别为87％和97％。0．02g／L山梨酸钾的抑菌效果明显好于其他浓度。[结论]山梨酸钾可以作为红豆杉开放式组织培养的前期抑菌剂。     

红肉苹果的组织培养快繁技术

[目的]建立红肉苹果的高效植株再生体系。【方法]以红肉苹果的茎尖和带腋芽的茎段为外植体，通过组织培养试验筛选出最佳的灭菌时间、基础培养基、增殖培养基和生根培养基。[结果]随着消毒时间的延长，外植体的污染率明显下降，但外植体受到的伤害显著增加。用0．1％HgCl2灭菌5rain的外植体生长正常，污染率仅为3．3％。在增殖培养基MS＋6一BA0．5mg／L＋NAA0．1mg／L、MS＋6．BA0．5mg／L＋NAA0．2mg／L和MS＋6一BA0．5mg／L＋NAA0．5mg／L中。每个外植体平均增殖不定芽4．1、6．8和3．3个。在生根培养基1／2MS＋0．1mg／LIBA＋0．1mg／LNAA、1／2MS＋0．2mg／LIBA＋0．2mg／LN从和1／2MS＋0．5mg／LIBA＋0．5mg／LNAA上幼苗的生根率分别为56．7％、96．7％和83．3％。[结论]该研究为红肉苹果的快速离体扩繁和工厂化育苗以及园林应用奠定了良好的基础。     

野生渥丹离体培养再生体系的研究

[目的]探索适合的渥丹组织培养方法。[方法]以野生渥丹不同部位的鳞片为外植体,研究不同灭茵时间、不同培养基对外植体组织培养过程的影响。[结果]不同的灭菌时间对鳞片污染率的影响不同,均随着灭菌时间的延长呈显著下降的趋势。不同部位的鳞片污染率差异较大,外部鳞片污染率最高,其次是中部,内部鳞片污染率最低。随着升汞溶液消毒时间的增加,各部位鳞片的增殖系数呈逐渐降低的趋势。以中部鳞片为外植体,灭茵时间为6＋6（min）的效果较好,污染率为59．5％,增殖系数为2．57。诱导不定芽的最适培养基为MS＋NAA0．1mg／L＋6-BA2．0mg／L,增殖系数为4．08。[结论]该研究为保护渥丹种质资源和研发具有自主知识产权的品种奠定了基础。     

菩提树组织培养技术研究

以菩提树的带芽茎段为外植体,研究了不同外植体消毒时间及外源激素水平对菩提树组织培养的影响。试验结果表明,外植体以0．1％的HgCl2消毒10min可获得较低的污染率和较高的成活率;初代培养与分化增殖均采用MS为基本培养基,适宜的激素组合分别为NAA0．1mg/L＋6-BA1,0mg／L、NAA0．3mg/L＋6-BA1．O～2．0mg／L;试管苗生根培养以1／2MS＋NAA0．5mg／L为最佳,生根率达92．5％,植株生长健壮,适于移栽。污染的试管苗在移栽前进行灭菌药剂浸根处理,也可达到较高的成活率,可避免种苗的浪费。     

几种防褐剂对马铃薯愈伤组织培养褐化现象的抑制效应

[目的]在马铃薯的组织培养过程中存在着严重的外植体褐化现象。外植体表面的酚类物质容易氧化而生成褐色醌类,严重影响愈伤组织的诱导过程,适当控制培养条件可抑制褐化。[方法]选取硫代硫酸钠（Na2S2O3）、活性炭、维生素c、柠檬酸、聚乙烯吡咯烷酮（PVP）5种抗褐剂进行防褐化效果的研究。每种抗褐剂都取不同的浓度进行平行试验。培养基为1／2MS＋0．3％琼脂＋1．5％蔗糖＋1．0mg／LNAA＋2．0mg／L2,4-D,于15℃下暗培养,每周转瓶1次。最后,统计褐化率,比较不同抗褐剂的作用效果。[结果]各种抗褐剂对马铃薯的生长均有一定的抗褐效果,其中,2．0g／L的硫代硫酸钠和8．0mg／L柠檬酸的防褐效果最好,可以将褐化率降低到15％以下。[结论]对生长的外植体添加一定的防褐剂有助于抑制组织培养中外植体的褐化现象。     

长春花高效快繁技术研究

[目的]建立长春花高效的组织培养与无性快繁体系。[方法]以长春花种子为外植体,分别用1．1％有效氧的次氧酸钠溶液和0．196HgCl2溶液对长春花种子进行消毒,以MS为基本培养基,通过添加不同浓度的6-BA、IBA和N从,对脱毒后的长春花试管苗进行增殖和生根培养试验,确定长春花种子的最佳消毒时间,筛选长春花快繁的最佳培养基。[结果]用1．1％有效氯的次氯酸钠消毒长春花种子的最佳消毒时间是30min,种子发芽率达96．7％;最适宜的增殖培养基为MS＋0．40mg／L6-BA＋0．05mg／LIBA,外植体的增殖敷最多,且长势旺;诱导生根的最佳培养基为1／2MS＋0．10mg／L1BA＋0．10mg／LNAA,试管苗生根率达100％。[结论]次氯酸钠是长春花种子最好的消毒剂,最适宜的增殖培养基和生根培养基分别为MS＋0．40mg／L6-BA＋0．05mg／LIBA和I／2MS＋0．10mg／LIBA＋0．10mg／LNAA。     

石栗树腋芽外植体消毒方法的筛选

[目的]筛选石栗树腋芽外植体的消毒方法,解决石栗组织培养中大田外植体污染问题,提高石栗组织培养的成活率.[方法]设计3因子3水平的正交试验,3因子分别是自来水冲洗、0.1% HgCl2和10% NaClO3溶液;3水平是自来水冲洗时间分别为60、120、180 min,0.1% HgCl2溶液浸泡时间分别为0、8、16 min,10% NaClO3溶液浸泡时间分别为0、12、24 min.观察9种处理后石栗枝条表面消毒效果.[结果]自来水冲洗120 min,0.1% HgCl2溶液浸泡16 min,10%NaClO3溶液浸泡24 min,可使污染率降到最低,为16.67%,而诱导愈伤组织成功率达到80.00%.[结论]石栗外植体灭菌的最佳组合能在外植体的承受范围之内使污染率降低到16.67%;在低温干燥和树龄小的植株上取材,污染率较低.     

柑橘品种茎段离体培养条件的优化及微芽嫁接试验

[目的]优化柑橘品种茎段离体培养条件并开展微芽嫁接(试管内茎尖嫁接)试验,为培育无毒柑橘组培种苗提供参考依据.[方法]对温州蜜柑和纽荷尔脐橙成年态枝条进行不同浓度HgCl2和NaClO消毒,筛选适宜组培利用的柑橘外植体消毒方式、采集季节及激素配比;开展嫁接砧木种子消毒和微芽嫁接试验,分析两个柑橘品种微芽嫁接的萌发状况.[结果]温州蜜柑外植体的最适消毒方法为70%酒精+1.0‰HgCl2消毒6 min处理两次;纽荷尔脐橙外植体的最佳消毒方法为70%酒精+15.0%NaClO处理两次;采集成年态柑橘茎段进行离体培养的最佳时期为夏季;在MS固体培养基中添加1.0 mg/L 6-苄氨基嘌呤(6-BA)和0.1 mg/L萘乙酸(NAA)均有利于两个柑橘品种外植体腋芽萌发.砧木种子最适消毒方法为剥去内外种皮+70%酒精+1.5%NaClO溶液处理;两个柑橘品种微芽嫁接的萌发率较低,分别为10.00%和6.67%,但嫁接成功后柑橘苗长势良好.[结论]于夏季剪取温州蜜柑和纽荷尔脐橙成年态枝条带芽茎段,分别经70%酒精+1.0‰HgCl2消毒6 min处理两次、70%酒精+15.0%NaClO处理两次,在添加1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA的MS固体培养基中接种,可获得最佳的培养效果.利用微芽嫁接技术嫁接的柑橘苗长势良好,可在提高其嫁接萌发率基础上推广应用.     

黄菖蒲的组织培养与快速繁殖

以黄菖蒲种子萌发的小苗作为外植体进行组织培养与快速繁殖。结果表明：外置最佳消毒时间为0.1%氯化汞溶液6 min;不定芽分化最佳培养基为MS＋6-BA 1.5 mg/L＋NAA 0.2 mg/L;生根最佳培养基为MS＋NAA 0.5 mg/L,生根率达100%,生根数3~4条,移栽于栽培基质（蛭石∶草炭=1∶1）中,成活率达95%以上。     

三角梅外植体消毒和愈伤组织诱导研究

[目的]探索三角梅的最佳消毒时间和最佳愈伤组织诱导培养基。[方法]采用不同消毒时间对三角梅的7种外植体进行灭菌,并用不同激素与浓度组合的培养基诱导愈伤。[结果]三角梅的最佳外植体为半木质化茎段;最佳消毒方法为先用浓度75%酒精溶液灭菌30 s,无菌水冲洗5次,再用浓度0.1%升汞溶液消毒9 min,最后用无菌水冲洗7~8次;最佳诱导培养基为MS＋2.0 mg/L 6-BA＋1.0 mg/L NAA。[结论]获得了三角梅外植体的最佳消毒方式和最佳愈伤组织诱导培养基,为三角梅组织培养体系的建立奠定了基础。     

牛大力茎段组织培养技术研究

[目的]为牛大力的规模化生产提供依据,保护牛大力野生资源。[方法]以牛大力的幼嫩茎段作为外植体,研究其组织培养和离体快繁技术。[结果]用0.1%升汞处理外植体20 min,可获得无菌材料。以MS+6-BA1.0 mg/L+IBA0.1 mg/L为启动培养基,诱导率可达100%,接种后20 d,腋芽开始萌发,且生长正常。以MS+6-BA2.0 mg/L+IBA0.1 mg/L为增殖培养基,培养30 d后,增殖系数达7.0,有少量的愈伤组织产生,但不定芽生长发育正常。用1/2MS+IBA0.5 mg/L+IAA0.5 mg/L培养基进行生根培养,生根效果最好,生根率达80%,根生长状态良好。将生根的小苗移栽到椰糠∶砂为3∶1的基质中,覆盖地膜保湿15 d,成活率达85%以上。[结论]牛大力茎段组织培养的最佳生根培养基为:1/2 MS+IBA0.5 mg/L+IAA0.5 mg/L。     

贺州大肉姜的组培快繁技术研究

[目的]研究大肉姜组培快繁技术,为贺州大肉姜规模化生产提供技术支持。[方法]以贺州大肉姜的芽作为外植体,研究不同消毒液和激素组合对外植体污染率、芽分化和生根的影响。[结果]外植体用0.1%HgCl2消毒12min效果最好,诱导芽分化的最佳培养基为MS＋2.0mg/L6-BA＋0.1mg/LNAA,最佳生根培养基为1/2MS＋1.0mg/LNAA,生根率可达100%。[结论]该组培快繁技术可用于贺州大肉姜的规模化生产。     

常绿杂交杜鹃组培快繁技术研究

[目的]研究常绿杂交杜鹃的组培快繁技术.[方法]以常绿杂交杜鹃一年生半木质化茎段为外植体,进行组织培养技术研究.[结果]外植体在1/2MS+ 1.8 mg/L ZT+O.1 mg/L IBA +30 g/L蔗糖+4 g/L琼脂,pH 5.0的培养基上诱导率可达96.67％;最佳继代培养基为1/2MS+ 1.2 mg/L ZT +0.1 mg/L NAA +30 g/L蔗糖+4 g/L琼脂,pH 5.0,此时芽苗生长健壮;最适生根培养基为1/2MS+ 1.0mg/L IBA+ 1.5 mg/L NAA +30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂+3 g/L活性炭,pH 5.0,此时生根率可达95％.[结论]为常绿杂交杜鹃的快速繁殖提供技术支持.     

蛇足石杉茎尖灭菌方法与组织培养的研究

[目的]研究蛇足石杉组织培养的灭菌方法和培养条件。[方法]以野生孢子体茎尖为外植体,先用不同灭菌液单独或配合使用对外植体进行表面灭菌,将表面无菌外植体转到添加多种抗生素和孔雀石绿的培养基上杀灭内生菌,然后将外植体分别接种到不同的培养基上,筛选茎尖培养的最佳灭菌方法和培养条件。[结果]最佳表面灭菌方法为70%乙醇灭菌40 s,0.1%升汞溶液灭菌8 min,70%双氧水溶液灭菌10 min,培养2周,表面无菌率为63%。适宜的杀灭内生菌方法为表面无菌的外植体在附加0.5 mg/L孔雀石绿和100 mg/L抗生素AAS的培养基上培养4~6周,无菌率达52%。适宜的培养基为1/4MS矿质元素+1/2MS有机元素+2%蔗糖+4.5 g/L琼脂,pH5.8。在此培养基上茎尖外植体可生长出新枝,并可再生根。[结论]建立了蛇足石杉茎尖组织培养的灭菌方法且筛选出适合其生长的适宜培养基,为蛇足石杉组织培养的深入研究提供实验基础。     

沈氏栎组培快繁技术的初步研究

[目的]对沈氏栎组培快繁技术进行初步研究,以期为该物种的快速繁殖和优良性状的保持奠定基础。[方法]以引自北美的沈氏栎(Quercus shumardi'Shumard Oak')为试验材料,从外植体接种试验、试管苗的增殖与生根等技术环节进行了探索,研究沈氏栎瓶内培养技术体系。[结果]用作外植体的理想材料为带腋芽茎段;最佳灭菌方式是用75%的酒精消毒1 min后再用0.1%升汞消毒6 min;试管苗增殖(诱导丛生芽)的最佳培养基为MS+6-BA 0.80 mg/L+NAA 0.45 mg/L;诱导生根的最佳培养基组合为1/2 MS+NAA 0.40mg/L;瓶苗培养的理想温度为26～28℃。[结论]该研究初步建立了沈氏栎瓶内培养技术体系,同时为该物种的快速繁殖和优良性状的保持奠定基础。     

垂枝侧柏离体再生体系建立初探

以垂枝侧柏[Platycladus orientalis (L) Francocv Pendula]当年生鳞叶茎段作为外植体,探索灭菌和愈伤组织诱导的最佳条件.结果表明,茎段经1 g/L HgCl2和7.5 g/L多菌灵组合处理8 min,灭菌效果最好,污染率仅为10.8％;愈伤组织诱导的最佳配方是1/2MS+BA 0.1 mg/L+NAA 0.1 mg/L.