PCR和ELISA法检测畜禽类乙型肝炎病毒的研究

从河南省部分地区收集鸡血清３１２份，猪血清２０４份，奶牛血清２００头份，分别用人乙型肝炎“两对邓ＨＢｓＡｇ，抗－ＨＢｓ，ＨＢｅＡｇ，抗－ＨＢｅ抗－ＨＢｃ试验盒检测。然后取经”两对半”系统检测有“＋”的鸡血清２６份，猪血清２５头份，奶牛血清２５头份，人血清４份，进行ＰＣＲ扩增，其扩增片断选择以ＨＢＶ－ＤＮＡ相对保守区域，扩增后的产物电泳３０ｍｉｎ，紫外灯下观察６００ｂｐ的片断为阳性，ＨＢＶ－ＤＮＡ阳     

某猪场乙型肝炎病毒感染的血清流行病学调查报告

于某大型养猪场随机抽样人血清１２０份，猪血清２０４份，分别进行乙肝病毒“两对半”检测。１２０份人血清阳性数：ＨＢｓＡｇ１９份，抗－ＨＢｓ３４人份；ＨＢｅＡｇ７人份，抗ＨＢｅ２６人份；抗－ＨＢｃ１７人份。其中ＨＢｓＡｇ，ＨＢｅＡｇ，抗－ＨＢｅ的三阳性为５人份。２０４份猪血清阳性数：ＨＢｓＡｇ２４份，抗－ＨＢｓ３２份；ＨＢｅＡｇ１４份，抗－ＨＢｅ１份；抗－ＨＢｃ零份。     

奶牛类乙型肝炎病毒感染的诊断

河南省某奶牛场，采成年母牛血清２００份，鲜牛分，用ＥＬＩＳＡ法检测乙型肝炎“两对半”，阳性结果如下：牛血清ＨＢｓＡｇ７份，抗－ＨＢｓＡｇｌ份，抗－ＨＢｅ２份，抗－ＨＢｃ零份。１００份鲜牛奶阳性数：ＨＢｓＡｇ２份，抗－ＨＢｓ１０份，ＨＢｅＡｇ１份，抗－ＨＢｅ２，抗－ＨＢｃ零份。电镜观察到ＨＢＶ核心抗原阳性血清中有球形病毒颗粒。     

乙型肝炎与戊型肝炎病毒重叠感染者血清HBV标记物结果分析

目的：观察乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）与戊型肝炎病毒（ＨＥＶ）重叠感染对ＨＢＶ复制的影响。方法：以血清ＨＢｓＡｇ和抗ＨＥＶ均阳性患者３６例作为重叠组,以单纯ＨＢＶ感染患者３６例作为对照组。两组病例抗ＨＡＶ－ＩｇＭ和抗ＨＣＶ均为阴性。采用ＥＬＩＳＡ法测定两组的ＨＢＶ－Ｍ。结果：重叠组血清ＨＢｓＡｇ的阳性率明显低于对照组（Ｐ〈０．００１）,抗ＨＢｅ阳性率明显高于对照组（Ｐ〈０．０５）。结论：ＨＢＶ与ＨＥＶ重     

双峰驼类人乙型肝炎的检测

用放射免疫分析方法测定了４５峰双峰驼血清样品中类人乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）、乙型肝炎表面抗体（抗－ＨＢｓ）、乙型肝炎核心抗原（ＨＢｃＡｇ）、乙型肝炎核心抗体（抗－ＨＢｃ．ＩｇＭ）、乙型肝炎ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）和乙型肝炎ｅ抗体（抗－ＨＢｅ）,结果仅检测到１例抗－ＨＢｓ阳性样品,总阳性率为２．１１％,其ＳＸ／ＮｃＸ＝１２．２３３。     

乙型肝炎与戊型肝炎病毒重叠感染者血清HBV标记物结果分析

目的：观察乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）与戊型肝炎病毒（ＨＥＶ）重叠感染对ＨＢＶ复制的影响。方法：以血清ＨＢｓＡｇ和抗ＨＥＶ均阳性患者３６例作为重叠组,以单纯ＨＢＶ感染患者３６例作为对照组。两组病例抗ＨＡＶ－ＩｇＭ和抗ＨＣＶ均为阴性。采用ＥＬＩＳＡ法测定两组的ＨＢＶ－Ｍ。结果：重叠组血清ＨＢｅＡｇ的阳性率明显低于对照组（Ｐ＜０．００１）,抗ＨＢｅ阳性率明显高于对照组（Ｐ＜０．０５）。结论：ＨＢＶ与ＨＥＶ重叠感染后,ＨＢＶ的复制受到一定程度的抑制     

用PCR和ELISA方法分析奶牛血清和奶中类乙型肝炎病毒

用人乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）表面抗原（ＨＢｓＡｇ）和ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）ＥＬＩＳＡ试剂盒检测８５份奶牛血清和９３份奶样。结果测出３３份血清为ＨＢｓＡｇ阳性，其中４价亦为ＨＢｅＡｇ阳性；２２份奶样为ＨＢｓＡｇ阳性，其中１１份亦为ＨＢｓＡｇ阳性。７个双阳性的样本，用针对ＨＢＶ表面抗原基因不同部位的两对引物作ＰＣＲ分析，结果未能扩增出特异片段，排除了奶牛ＨＢＶ血清学阳性是由人ＨＢＶ感染所致。     

绵羊血清,肝,肌肉中HBsAg的初步调查

应用ＥＬＩＳＡ技术对３０份羊血清，肌肉肝脏标本进行了ＨＢＶ－ＨＢｓＡｇ水平检测，结果血清阳性率２０％，肝脏阳性率１０％。表明羊体内含有ＨＢＶ－ＨＢｓＡｇ相似的类属抗原及相关抗体，提示对羊体内检出ＨＢＶ－ＨＢｓＡｇ应起重视，建议对羊开展乙肝的在ＨＢＣ与人ＨＢＶ的异同及关系，寻找ＨＢＶ动物模型．     

鸡传染性支气管炎病毒单克隆抗体的研制与鉴定

用经蔗糖密度梯度离心纯化的鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ，Ｍ４１）作为抗原免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，通过常规淋巴细胞杂交瘤技术产生杂交瘤细胞，经ＥＬＩＳＡ筛选，获得了４株能分泌特异性抗ＩＢＶ单克隆抗体的细胞系，分别命名为４ＡＣ１、４ＡＦ１、６ＤＨ８及２ＤＨ１０。４株单抗的亚类都属于ＩｇＧ２ｂ，在Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ试验中，４ＡＦ１、６ＤＨ８２株单抗特异性地识别ＩＢＶ的核衣壳蛋白（Ｎ）；经ＥＬＩＳＡ测定，各株单抗４０ｈ培养上清效价达１０－２～１０－４，第７天腹水效价达１０－５～１０－６，４ＡＦ１、６ＤＨ８与所试７个ＩＢＶ标准株及２个ＩＢＶ分离株都发生反应     

间接ELISA法检测人血清抗HBcIgA及其应用

目的：改良抗ＨＢｃＩｇＡ的检测方法，并探讨抗ＨＢｃＩｇＡ与肝脏损伤程度的关系，方法：通过预测处理患者血清，以羊抗人ＩｇＡ－ＨＲＰ（ＳＡＨ－ＩｇＡ－ＨＲＰ）为指示系统，建立间接ＥＬＩＳＡ法，并对２８０例临床血清进行检测。结果：经与抗体捕获酶联夹心法相比较，两种方法所检测出的抗ＨＢｓＩｇＡ阳性率之间及Ｓ／Ｎ值之间的差异均我显著性，在２８０例临床血清标本中，重症乙型肝炎，慢性活动性肝炎（简称慢活肝）合并     

猪苓多糖单用或与乙肝免疫球蛋白联用治疗乙型肝炎病毒感染的疗效比较

比较猪苓多糖单用或与乙肝免疫球蛋白联用治疗乙型肝炎病毒感杂的疗效。结论ＨＢＩＧ 猪苓多糖单用猪苓多糖对慢性ＨＢＶ感染者ＨＢｅＡｇ的转阴有一定效果，且以前者为优。但对ＨＢｓＡｇ转阴无效，未能诱导产生抗ＨＢｓ，对ＨＢＶ－ＤＮＡ的转阴效果不够理想。     

鸭乙型肝炎病毒的致病性及致癌性研究──鸭乙型肝炎病毒表面抗原的纯化

应用氯化铭密度梯度离心技术，结合Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ试验、￣（３２）Ｐ标记的鸭乙型肝炎病毒（ＤＨＢＶ）ＤＮＡ探针进行斑点杂交试验，从ＤＨＢＶ阳性的启东鸭血清中分离得到高纯度的ＤＨＢｓＡｇ颗粒，直径范围４０～６０ｎｍ，在ＣｓＣｌ溶液中的浮密度为１．１５ｋｇ／Ｌ，大多数呈１０ｎｍ厚的空心结构，形态不规则，近似球形，部分颗粒表面有凹陷结构，少数颗粒表面出现缺刻。以纯化的ＤＨＢｓＡｓ免疫新西兰大白兔，制备了高度特异性的兔抗ＤＨＢｓ血清及其纯化的兔抗ＤＨＢｓＩｇＧ。     

斑点ELISA检测鸡传染性支气管炎病毒及抗体

采用鼠抗鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）高免血请作第１抗体，利用酶标羊抗鼠ＩｇＧ作第２抗体，建立间接法Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ程序检测ＩＢＶ抗原；利用鸡抗ＩＢＶ血清阻断试验检测ＩＢＶ抗体。试验表明，本程序检测ＩＢＶ抗原及其抗体具有高度过感性和特异性。最低抗原检出量达１０￣（－８）ｇ数量级，阳性检出率９８％，阳性阻断率１００％。     

乙肝病毒感染者血清s,e抗原抗体系统与HBV—DNA的相关性

乙肝病毒感染者血清ｓ、ｅ抗原抗体系统与ＨＢＶ－ＤＮＡ的相关性黄静，龙尧，张武英（广东医学院附属医院感染内科，湛江５２４００１）以往临床上乙肝病毒（ＨＢＶ）感染者病毒标记物的检测主要利用反向血凝法（ＲＰＨＡ）和酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）检测血清ＨＢｓ...     

鸡传染性支气管炎病毒单克隆抗体的研制与鉴定

用经蔗糖密度梯度离心纯化的鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ，Ｍ４１）作为抗原免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，通过常规淋巴细胞发校瘤技术产生杂交瘤细胞，经ＥＬＩＳＡ筛选，获得了４株能分泌特异性抗ＩＢＶ单克隆抗体的细胞系，分别命名为４ＡＣ、４ＡＦ１、６ＤＨ及２ＤＨ１０。４株单抗的亚类都属于ＩｇＧ２ｂ，在Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ试验中，４ＡＦ１、６ＤＨ６２株单抗牧场卉性地识别ＩＢＶ的核衣壳蛋白（Ｎ）；经ＥＬＩ     

鸡群类甲、乙、丙型肝炎病毒感染的血清流行病学调查

从河南省部分地区收集鸡血清312份,用ELISA法分别检测:①抗甲型肝炎病毒抗体-IgM(HAVIgM);②乙型肝炎病毒“两对半”(HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc);③抗丙型肝炎病毒抗体。其结果312份鸡血清抗HAVIgM和抗HCVAb全部阴性。乙肝病毒“两对半”血清阳性数分别为:HBsAg18份,抗-HBs16份;HBeAg14份,抗-HBe2份;抗-HBc零份。     

嗜水气单胞菌HEC毒素单克隆抗独特型抗体研究

用嗜水气单胞菌ＨＥＣ毒素免疫Ｂａｌｂ／Ｃ小鼠，通过一次性杂交瘤融合，在筛选ＨＥＣ毒素单克隆抗体（ＭｃＡｂ１）的同时，用兔抗ＨＥＣ毒素血清（ＰＡｂ）包板的ＥＬＩＳＡ方法，筛选到两株抗ＨＥＣ毒素的单克隆抗独特型抗体（ＭｃＡｂ２）。两株ＭｃＡｂ２腹水ＥＬＩＳＡ效价分别为１：２０４８０和１：５１２０，属于ＩｇＧ１亚类。ＨＥＣ毒素的模拟抗原ＭｃＡｂ２不能溶解人的Ｏ型红细胞，但能与相应的ＰＡｂ反应，并能阻断ＰＡｂ与ＨＥＣ毒素的结合。将ＭｃＡｂ２连接到同源小鼠红细胞（ＭＲＢＣ）后免疫小鼠，用ＨＥＣ毒素包板的ＥＬＩＳＡ检测其血清，呈阳性结果，说明ＭｃＡｂ２能模拟ＨＥＣ刺激机体产生抗ＨＥＣ毒素的抗体（Ａｂ３）。     

UV－B辐射对农垦58s某些生理特性和育性的影响

ＵＶ－Ｂ辐射对农垦５８ｓ某些生理特性和育性的影响李合生１）岳兵１）曾汉来１）戴秋杰２）（１）华中农业大学农学系，武汉４３００７０；２）江苏省农科院，南京２１００１４）ＥＦＦＥＣＴＯＦＵＶ－ＢＲＡＤＩＡＴＩＯＮＯＮＳＯＭＥＰＨＹＳＩＯＬＯＧＩＣＡＬＣＨ...     

鸭乙型肝炎病毒的致病性及致癌性研究：鸭乙型肝炎病毒表面抗…

应用氯化铯密度梯度离心技术，结合Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ试验，３２Ｐ标记的鸭乙型肝炎病毒（ＤＨＢＶ）ＤＮＡ探针进行斑点杂交试验，从ＤＨＢＶ阳性的的启东鸭血清中分离得到高纯度的ＤＨＢｓＡｇ颗粒，直径范围４０－６０ｎｍ，在ＣｓＣｌ溶液中的浮密度为１．１５ｋｇ／Ｌ大多数呈１０ｎｍ厚的密心结构，形态不规则，近似球形，部分颗粒表面有凹陷结构，少数颗粒表面出现缺刻。以纯化的ＤＨＢｓＡｇ免疫新西兰大白兔，制备了高度特     

黄瓜花叶病毒（CMV）高效价抗血清的制备及其在ELISA中的应用

以提纯的ＣＭＶ作为抗原，经静脉注射，肌肉注射和足垫注射等对家兔进行免疫，获得高效价的抗血清（琼脂双扩散效价为１／２５６），在间接ＥＬＩＳＡ试验过程中，用ＰＢＳ＋０．０５％，ＴｒｉｔｏｎＸ－１００作为样本研磨液，用１：１６０００稀释度的ＣＭＶ抗血清或２μｇ／ｍｌＣＭＶ抗血清的ＩｇＧ作为第一抗体，用１：１０００稀释度的冻干辣根过氧化物酶标记的羊抗兔的ＩｇＧ作为第二抗体，以待测样本光密度值与阴性对照光密