利用无致病力青枯菌株防治番茄青枯病的研究

自发突变的无致病力番茄青枯菌株Ｔｍ３具有产生细菌素的能力,对番茄青枯菌株Ｔｍ４６有较强的抑菌作用,且能诱导烟草植株产生过敏性反应。盆栽和小区试验结果表明,Ｔｍ３具有较好的防治番茄青枯病的能力。防病机理可能是细菌素的抗生素和诱导植物抗病性的双重作用。     

青枯假单胞杆菌产生细菌素的研究

测定来自全国不同寄主和地区的211个青枯病细菌(Pseudomonassolanacearum)菌株产生细菌素的能力,结果表明,有80％分属于不同小种和生物型的8个指示菌能产生细菌素,其中能产生细菌素的桑菌株占其总数的94.2％。 用7个拮抗作用强而稳定的菌株测定对211个供试菌株的拮抗作用,结果表明,不同菌株产生细菌素的能力和拮抗范围有差异。其中油橄榄菌株(OE-104)和桑菌株(MA-1、MA-701)拮抗能力最强,拮抗范围最广。不同小种、生物型及寄主来源的菌株间的桔抗作用大于来源相同菌株间的拮抗作用。此外,试验证明培养温度、培养基成分和培养时间对菌株产生抑制圈的大小有影响。这些结果对筛选青枯病细菌的产细菌素拮抗菌有参考价值。     

山东省烟草青枯病的发生和病原菌鉴定研究

１９９０年在山东沂南县调查发现烟草枯萎的病株，分离到细菌菌株。经对各菌株致病性测定，格兰氏染色反应，细菌形态，培养性状，生理生化测定和血清学反应鉴定，结果表明，这５个菌株均属于青枯假单胞杆菌Ｐｅｓｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｏｌａｎａｃｅａｒｉｕｍＥ．Ｆ．Ｓｍｉｔｈ。     

抗生细菌的拮抗机制研究

本文报道了二十七种细菌菌株对六种植物致病细菌的拮抗作用。其中两株同时拮抗四种指示菌,五株同时拮抗三种指示菌,九株对两种指示菌超抑制作用,拮抗机制的研究表明,在九种产荧光素的菌株中只有P_5的荧光圈与其抑菌圈吻合。E_61和G_1的抑制作用为噬菌体所致,E_21,G_1,G_(10)和Ec四个菌株的拮抗物质对胰蛋白酶敏感,E_(21),M—1产生细菌素,CA和Ec产生缺陷噬菌体,E_(21)鉴定到属,M—1和CA鉴定到种。     

海洋放线菌抗菌活性菌株的筛选及南-148菌株的鉴定

以桉树青枯病菌和金黄色葡萄球菌为指示菌,对从广东湛江近海海泥中分离得到的135株放线菌的抗菌活性进行测定,并对南-148菌株进行形态观察和生理生化特性鉴定。结果表明,135株海洋放线菌中有15株对桉树青枯病菌有抑制作用,24株对金黄色葡萄球菌有抑制作用,12株对两种病菌均有抑制作用,其中南-148菌株的抑菌效果最好,对桉树青枯病菌的抑菌圈直径为20．0mm,对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径为37．3mm;对南-148菌株进行了鉴定,初步确定南-148菌株为弗氏链霉菌（Streptomyees fradiae）。     

湖南烟草青枯病菌的致病性及生物型研究

从湖南省１２个县、市采集分离烟草青枯病菌菌株５６个．根据其致病性测定结果分为强、中、弱３个类群，分别占４６．４％，１６．１％和３７．５％．大多数调查地点强、弱致病类群并存．对其中５１个菌株进行生理生化测定，根据其对乳糖、麦芽糖、纤维二糖和甘露醇、山梨醇、卫茅醇的利用能力以及对硝酸盐的还原作用，判定其生物型分别属于生物型Ⅲ，Ⅲ－１，Ⅲ－２，Ⅲ－３，Ⅲ－４．     

甘薯青枯菌的生理小种研究

从闽、粤、赣、江、浙５省甘薯青枯病区采集分离到甘薯青枯菌株（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｏｌａｎａｃｅａｒｕｍ）通过对寄主范围，浸润反应和黑色素形成的测定，结果表明，参试的６３个甘薯青枯菌株均能侵染烟草和多种茄科植物，但侵染力的大小因菌株间致病力的差异而不同，６３个菌株均不能侵染香蕉，参试的２６个菌株浸润烟叶２４～６０ｈ均能产生淡褐色至深褐色的坏死枯斑反应，浸润烟叶能力的大小各菌株间略有差异，参试的２     

产细菌素乳酸菌的筛选

[目的]开发出更加高效、抑菌谱更广、可做天然防腐剂的细菌素。[方法]以泡菜、酸奶为原料,利用MRS选择培养基从试材中筛选出能够抑制指示菌的细菌,通过排除酸抑制作用、过氧化氢抑制作用和蛋白酶敏感性试验证明该菌株是否产生有抑菌作用的细菌素。[结果]筛选得到的菌株经鉴定证明是乳酸菌,其产生的细菌素对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌都有抑制作用,是一株产广谱细菌素的乳酸菌。[结论]筛选得出的乳酸菌细菌素在抑制各种病原菌和食品腐败等方面具有重要作用。     

药用植物马蔺的内生真菌分离及其抑菌活性的研究

[目的]研究药用植物马蔺内生真菌资源的多样性及其抑菌活性特征。[方法]通过组织块法对内生真菌进行分离,并选择小麦全蚀病菌、枸杞黑果病菌、番茄灰霉病菌、黄瓜枯萎病菌和黄瓜立枯病菌5种植物病原真菌和枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌4种细菌作为指示菌,采用对峙法和改进的菌块法测定抑菌活性。[结果]从马蔺不同组织器官中分离出32株内生真菌,以根部的最多,茎叶次之;经形态学初步分类鉴定其属于3个目,3个科,4个属。其中,有22株内生真菌对2种或2种以上的植物病原真菌指示菌有不同程度的抑制作用,占菌株总数的68.8%;有12株内生真菌对2种或2种以上的供试细菌指示菌具有不同程度的抑制作用,占分离菌株总数的37.5%;有7株内生真菌对3种以上的植物病原真菌指示菌具有明显的抑制作用,占菌株总数的21.9%;有2株内生真菌对2种供试细菌指示菌有明显的抑制作用,占分离菌株总数的6.3%。马蔺内生真菌对供试植物病原真菌指示菌和供试细菌指示菌有明显抑制作用,且抑制植物病原真菌的范围较宽;2株高活性菌株来源于马蔺叶部,对5种供试真菌指示菌具有明显抑制作用;2株高活性菌株来源于马蔺根部,对2种供试细菌指示菌具有明显抑制作用;1株高活性菌株对4种供试真菌指示菌和1种供试细菌指示菌有明显抑制作用。这5株高活性内生真菌菌株属于束丝菌属、镰孢霉属、梭孢霉属和组丝核菌属。[结论]药用植物马蔺具有丰富的内生真菌资源,并具有明显的抑菌活性。     

山东姜瘟病病原菌的研究

1998－2000年从山东省莱芜、泰安、滕州和安丘等6个地（市）县采集姜瘟病株，室内分离纯化获得107个菌株，从中选出部分菌株，对病原细菌形态、培养性状、染色反应、生理生化反应和致病性等性状进行测定，并与番茄青枯病菌Tm2和烟草青枯病菌P.s3作了比较研究。结果表明：上述菌株均属于青枯假单胞杆菌（Pseudomonas solanacearum(Smith)Smith）。根据对其6种糖和醇的作用以及脱氮作用。明确山东姜瘟病菌有Ⅱ和Ⅲ两个生物型，比例分别为42．31和57．69％。不同地区间生物型有一定差异。     

姜瘟致病菌高毒力菌株及拮抗菌的分离

[目的]筛选强拮抗能力强的芽孢杆菌。[方法]从山东莱芜采集病姜及附近土壤中分离出姜瘟致病菌高毒力菌株,并利用芽孢杆菌进行了拮抗试验。[结果]LW-4、LW-7、LW-32这3株菌对姜瘟致病菌有较强的拮抗能力,其抑菌圈面积较其他菌株大。[结论]为防治姜瘟病提供了理论依据。     

青枯雷尔氏菌致病性生物测定方法的研究

采用不同浓度的强致病力青枯雷尔氏菌FJAT-91处理番茄盆栽苗,建立青枯雷尔氏菌致病性生物测定方法.结合菌落形态和特异性引物鉴定结果说明所分离得到的菌株均为强致病力青枯雷尔氏菌.当番茄植株培养至第5d时,4个不同接种浓度处理的番茄植株苗均出现发病症状.采用104 cfu·mL-1处理的番茄植株在第4d发病,但到第8d,...     

非寄主植物可培养内生细菌防治桉树青枯病研究

为筛选对桉树青枯病有防治效果的内生细菌,采用抑菌圈法,测定从青枯菌的非寄主植物中分离的内生细菌对青枯菌的拮抗作用,并分别在水培和土壤系统中测定其防治作用以及内生特性。结果表明:从蒜、葱、洋葱和葡萄内分离的14种可培养内生细菌中,只有菌株SH、SB、PT、C1和C2对青枯病菌具有拮抗作用;SH对C1具有拮抗作用,C2对SH有拮抗作用;在水培系统中,菌株SH对桉树青枯病的防治效果最好;在土壤系统中菌株PT、SH具有防治作用;菌株SH具有内生性,将桉苗浸于SH菌液中24 h,内生菌能侵入到桉苗茎部。     

发病史、品种和轮作组合预防烤烟青枯病试验

选择不同烟地进行发病史、品种和轮作年数组合试验,初步量化3种因素,以求能更有效地预防烤烟青枯病。结果显示:把烟地发病史划分为0、5%、10%和≥30%4档是基本合理的;可以用K326、RG11和K346作为目前贵州省烤烟推广品种中对青枯病不同抗性的代表品种。在当前以K326及抗性类似品种为主栽品种的前提下,当烟地发病史为5%时就必须轮作;若连作,其倒数第2炕采收前1~2 d的平均病株率达22.1%(6.3%~39.6%),即可能很快进入明显甚至重病史档。黄泥土的重病史烟地轮作2~3年后种K326的病指分别为42.1~53.1和37.6,轮作3年和15年以上,种植与K326抗性相近的G28,病指分别是为13.2~16.1和30.3,显示轮作玉米多年后种植K326之类品种,被青枯病明显或严重危害的风险仍然高。提出了根据烟地发病史选择品种和轮作年数组合的试验结果预防青枯病明显危害的对策建议。     

植物青枯细菌胞外蛋白在致病中作用的研究

 用含有转座子Tn5的铜绿假单胞杆菌PAO1826(pMO75::Tn5,Kmr)诱变我国马铃薯青枯菌小种3号菌株PO41,获得胞外多糖正常产生的接合子6000多个,经SDS-PAGE电泳筛选出胞外蛋白减少1～9种的菌株21株。经测试其中20株为原养型菌株,1株为营养缺陷型菌株。这21株突变株在烟草叶片上呈现典型的过敏性反应。用茎部毛细管滴注法在马铃薯植株上进行致病力测试的结果表明,胞外蛋白发生减少的21株突变株中有20株致病力均不同程度下降,通过分析突变株胞外蛋白缺失种类与致病力强弱的关系,初步确定59.5ku、55ku和47ku的胞外蛋白在青枯菌致病过程中起着十分重要的作用。     

抗姜瘟病菌芽孢杆菌的诱变改良

为改良拮抗姜瘟病菌的芽孢杆菌,从未发病土壤分离得到1株对茄科雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum)等8种病原菌具有较强拮抗能力的蜡状芽孢杆菌菌株L1.为进一步改进该菌的拮抗活性,采用紫外线(UV)、甲基磺酸乙酯(EMS)、吖啶橙等诱变因素对L1菌株进行诱变改良.结果表明:改良后菌株的拮抗性能显著提高,其中菌株EMS-2和UL-1的拮抗蛋白浓度分别比L1菌株提高30.38%和29.18%,其差异均达极显著水平;L1对UV照射十分敏感,尤其在前60 s,而90 s的照射处理正突变率最高,达24.8%;吖啶橙处理L1后,没有筛选到发生正突变的菌株;L1在EMS处理80 min后,致死率达到90%左右,因此,为大量获取正突变菌株,应采用较低剂量的EMS(0.16 mol?mL-1)、长时间处理程序(60 min为宜).     

利用甘薯青枯病菌及其粗毒素测定甘薯品种抗瘟性的相关性研究

用甘薯青枯菌液及其粗毒素在温室内测定甘薯幼苗的抗病性，结果表明青枯菌菌株侵染甘薯幼苗的病情指数与其粗毒素的致萎度之间呈正相关，相关系数为0.9458(n=88)，达极显著水平；用5个不同致病力（强、中、弱）甘薯青枯菌株及其粗毒素分别接种抗、中、感甘薯品种华北48、广薯15、惠红早，结果表明甘薯品种对不同致病力青枯病菌菌株及其粗毒素的抗性呈极显著正相关，相关系数在0.9992-1.0000之间；以不同致病力甘薯青枯菌混合菌株及其粗毒素接种抗、中、感甘薯品种97-10、广薯15、惠红早，结果表明不同抗性甘薯品种病情指数与致萎度之间也存在极明显正相关，相关系数为0.9257-0.9651。说明在室内用粗毒素检测甘薯幼苗的致萎度，能够反映甘薯对甘薯瘟病的抗病或感病水平。     

植物青枯菌遗传多样性及致病基因组学研究进展

植物细菌性青枯病是由茄科雷尔氏菌（Ralstonia solanacearum Yabuuchi et al.）引起的一种世界性重大病害。作为复合种,青枯菌在与寄主长期协同进化过程中,表现出广泛的生态和寄主适应性。Fengan和Prior提出青枯菌演化型分类框架,用以描述青枯菌种以下的遗传多样性。青枯菌种内表型特征差异的本质是其基因组较其它植物病原细菌更为复杂和更具可塑性。笔者对近期青枯菌遗传多样性和致病基因组学方面的研究进展进行了归纳和讨论。