红叶石楠愈伤组织抗褐化研究以及悬浮细胞系的建立

以红叶石楠无菌苗叶片为试材,诱导愈伤组织并建立悬浮细胞系。结果表明:红叶石楠愈伤组织初代诱导最佳培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,诱导率可达97%。继代培养以MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L为宜。针对红叶石楠愈伤组织继代培养过程中易褐化的问题,通过正交试验探讨了不同吸附剂、抗氧化剂及其它因素对褐化的影响。采用MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+Vc 1.0 mg/L+Ch 100 mg/L附加1%蔗糖的继代培养基,可以明显降低红叶石楠愈伤组织的褐化现象。将胚性愈伤组织接种到1/2 MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L附加2%蔗糖,pH 5.5液体培养基中悬浮震荡培养获得了分散性好、色泽鲜艳的悬浮细胞。     

银杏的药用价值及组织培养研究

从银杏的果实、叶、种皮、种仁及木材等方面论述了其药用价值,并概述了银杏茎段培养、配子体培养、胚培养、愈伤组织诱导以及银杏组织培养中抑制褐化问题等方面的进展。愈伤组织培养的基本培养基为SH基本培养基中加2,4-D2mg/L,6-BA1mg/L和NAA0.5mg/L以及苹果汁10%以及在1.0kV/cm强度的高压静电和Cu2 条件下有利于愈伤组织生长。改良MS培养基和多效唑可以促进腋芽萌动和分化;MS BA2mg/L NAA0.5mg/L的培养基、蜂王浆和椰子乳汁对诱导银杏胚状体有很大促进作用。0.1%植酸(肌醇六磷酸酯)、5.0mg/L抗坏血酸或2000mg/L聚乙烯吡咯烷酮PVP有明显抑制褐变的作用。     

印楝的组织培养和快速繁殖

以印楝带芽茎段为外植体,进行快速繁殖技术研究,愈伤组织诱导率为100%,其繁殖系数30 d可达5～7倍,生根率30 d可达100%.诱导培养基以MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.01 mg/L+3%蔗糖最佳,继代增殖以MS+BA 0.5mg/L+NAA 0.1 mg/L+3%蔗糖为宜,生根培养以1/2MS+NAA 0.1 mg/L+1.5%蔗糖效果最好.     

大岩桐组织培养与快繁技术研究

大岩桐(Sinningiaspeciosa)幼嫩叶片可诱导形成愈伤组织及再生小植株。最适宜的愈伤组织诱导培养基为MS+6!BA1.5mg/L+NAA0.2mg/L;分化继代培养基为MS+6!BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L;生根培养基为1/2MS+IBA0.2mg/L。     

叶用芥菜细胞悬浮培养的研究

以叶用芥菜的子叶为外植体,对愈伤组织诱导和细胞悬浮培养的技术体系进行了研究.结果表明,愈伤组织诱导的最适培养基为MS+0.3 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L 2,4-D,愈伤组织最佳增殖培养基为MS+3.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L 2,4-D.悬浮培养过程中细胞生长曲线呈S型,培养2～10 d达对数生长期.将小细胞团接种于Ms+1.0 mg/L NAA+3.0 mg/L 6-BA分化培养基上,继代两次后,分化出芽,分化芽在培养基MS+0.1 mg/L NAA上诱导生根,形成小植株.     

四川竹根姜胚性愈伤组织诱导和植株再生

选用四川竹根姜的茎尖组织,诱导产生了胚性愈伤组织,建立了高频再生体系。筛选出了适于胚性愈伤诱导及扩增最佳培养基MSN+1.0 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L KT+3.0%蔗糖+0.7%琼脂;胚性愈伤组织分化培养基MS+0.2 mg/L 2,4-D+5.0 mg/L BA+3.0%蔗糖+0.7%琼脂;根状茎形成培养基MS+3.0 mg/LBA+0.1 mg/L NAA+6.0%蔗糖+0.7%琼脂。在3.0%~6.0%的范围内蔗糖浓度越高越促进根状茎形成。     

福鼎大白茶愈伤组织的诱导条件优化

[目的]优化福鼎大白茶愈伤组织的诱导条件。[方法]以茶叶品种福鼎大白茶的幼嫩茎段为外植体,以MS为基本培养基,添加不同浓度的2,4-D、KT、NAA和蔗糖,研究不同激素组合、蔗糖浓度对其愈伤组织诱导的影响。在继代培养过程中,研究了不同抗褐变剂对愈伤组织生长情况的影响及抗褐变的效果。[结果]不同激素对福鼎大白茶愈伤组织的诱导影响依次为2,4-D>KT>NAA。适宜福鼎大白茶愈伤组织生长的培养基为MS+2,4-D1.0 mg/L+NAA1.0 mg/L+KT0.5 mg/L+蔗糖30 g/L,pH值为5.8。在培养基中添加0.5%的活性炭和0.1%的聚乙烯吡咯烷酮可有效减轻愈伤组织的褐变。[结论]不同的激素组合、蔗糖浓度及抗褐变剂对福鼎大白茶愈伤组织的诱导均有较大影响。     

矮生沿阶草茎尖离体培养及其植株再生

以矮生沿阶草幼嫩茎尖为外植体,进行愈伤组织、丛生芽诱导以及壮苗、生根培养基筛选对比研究,建立矮生沿阶草组培快繁体系。结果表明,采用MS+0.1 mg/L BA+0.1 mg/L KT+1.0 mg/L NAA或MS+0.2 mg/L BA+0.05 mg/L KT+1.0 mg/L NAA,愈伤组织诱导率96%以上,愈伤组织致密、淡黄色;将诱导的愈伤组织接种于MS+2.5 mg/L BA+0.5 mg/L KT+0.2 mg/L NAA或MS+3.0 mg/L BA+0.05 mg/L KT+0.1 mg/L NAA或MS+2.0 mg/L BA+0.1 mg/L KT+0.1 mg/L NAA培养基中,可分化出较多的丛生芽;丛生芽接种于MS+2.5 mg/L BA+0.1~0.2 mg/L NAA培养基中进行壮苗培养,幼苗生长健壮、色泽良好;适宜矮生沿阶草组培苗生根的培养基为1/4 MS+0.2 mg/L NAA,外观表现良好。     

银合欢组织培养研究初报

以银合欢(Leucaena leucocephla(Lamarck)de Wit)无菌实生苗子叶和胚轴切段为外植体,以MS为基本培养基,研究不同BA和NAA浓度组合对银合欢组织培养效果的影响。结果表明:愈伤组织诱导培养中,以子叶的培养反应性最好,其愈伤组织诱导率在各种组合中都达到100%,其中以附加0.1 mg/L NAA和2.5-7.0 mg/L BA效果最好;胚轴在添加0.1 mg/L NAA及3.0-4.5 mg/L BA的MS培养基上培养时愈伤组织诱导率较高。子叶愈伤组织在MS+3.0 mg/L BA+0.2 mg/L NAA的培养基中培养时芽分化率只有6.7%;胚轴愈伤组织则未能实现芽的分化。     

艾纳香的组织培养

以贵州药用植物艾纳香的叶片为材料,MS培养基为基本培养基,探讨影响艾纳香组织培养的因素,为艾纳香的组织培养快速繁殖提供重要的参考依据。结果表明:外植体灭菌组合以0.1%氯化汞8 min+75%乙醇5 s最佳;诱导愈伤组织培养基以MS+6-BA3.0 mg/L+NAA0.1 mg/L最佳,诱导率为88.17%;愈伤组织继代培养基以MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L最佳;愈伤组织分化为芽的培养基以MS+6-BA 3.0mg/L+NAA 0.1mg/L最佳,以试管苗(由野外艾纳香培育出的完整幼苗)叶片为外植体诱导愈伤组织,其分化率为93%;芽继代培养基以MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L最佳,平均苗高4.3 cm;IBA有利于艾纳香的无根绿苗生根,以MS+IBA 1.4 mg/L培养基培养,生根率为100%。     

生姜茎尖脱毒培养研究

以生姜茎尖为外植体进行培养,筛选诱导愈伤组织和芽分化的最佳培养基。结果表明,消毒时间对茎尖成活率影响很大,以0.1%HgCl2消毒10 min最为有效。不同的激素配比对生姜试管苗再生诱导有明显影响,诱导茎尖愈伤组织生长及分化的最适培养基为1/2MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.1 mg/L,丛生芽继代培养增殖效果较好的培养基为1/2MS+BA2.5mg/L+NAA0.1 mg/L+KT1.0 mg/L。     

香花槐的组织培养与快速繁殖

试验分别对香花槐的腋芽诱导,继代增值培养及无菌苗生根培养和愈伤组织分化做了初步研究,研究结果表明：最佳诱导培养基为MS＋BA1.0mg/L＋NAA0.1mg/L;最佳增值培养基为MS＋BA0.8mg/L＋NAA0.3mg/L;当最佳生根培养基为MS＋IBA0.05mg/L;在愈伤组织分化的过程中,培养基MS＋BA0.5mg/L＋NAA0.05mg/L分化效果相对较好。     

兴安升麻试管苗培养研究

以兴安升麻嫩茎为材料,进行了愈伤组织诱导和分化培养、不定芽生根和茎段生根继代繁殖培养,以及试管苗移栽和定植试验。结果表明,1/2 MS+BA 0.5 mg/L+2,4-D 2.5 mg/L+蔗糖35 g/L是愈伤组织诱导培养和继代扩增培养的适宜培养基;1/2 MS+蔗糖40 g/L+ZT 0.4 mg/L+NAA 0.1 mg/L是愈伤组织分化培养的适宜培养基;采用下部切口在10 mg/L IAA溶液中处理5 min,再接种到1/2 MS培养基上进行生根培养的方法是不定芽生根培养和生根继代繁殖培养的理想方法;试管苗移栽成活率为95.1%,定植成活率为98.4%,定植的试管苗保持了兴安升麻的全部植物学性状。     

雪菊的组织培养研究

以雪菊带芽茎段、茎尖、叶片为外植体以MS为培养基添加不同浓度6BA和NAA进行组织培养实验,结果表明适合带芽茎段愈伤组织诱导的培养基为MS＋6BA1.0mg/L＋XAA0.3mg/L;适合茎尖愈伤组织诱导的培养基为MS＋6BA1.0mg/L＋XAA0.1mg/L;适合叶片愈伤组织诱导的培养基为MS＋6BA3.0mg/L＋NAA0.3mg/L,适合雪菊愈伤组织增殖和不定芽诱导的培养基为MS＋6BA2.0mg/L＋NAA0.3mg/L;适合雪菊试管苗生根的培养基为1/2MS＋6BA0.3mg/L＋XAA0.03mg/L,蔗糖减半,以雪菊无菌苗的带芽茎段、茎尖和叶片为外植体成功地诱导出了愈伤组织,其中带芽茎段愈伤组织诱导率最高时间最短效果最好茎尖次之叶片最差.     

藏红花愈伤组织的诱导及植株再生

以藏红花(Crocus sativus L.)当年新生小球茎为材料,在MS+0.5 mg/L BA+1.0 mg/L NAA+7%CM(椰乳)培养基上进行初代培养,再转入MS+5 mg/L BA+5 mg/L NAA中进行愈伤组织的诱导,黑暗条件下继代1-2次,51 d就可以获得高诱导串的愈伤组织,愈伤诱导率可达65%.将愈伤组织转入分化培养基MS+5 mg/L BA+5 mg/L NAA中分化丛生芽,丛生芽诱导率高达95%,将丛生芽分成单个植株,最终形成完整再生植株.     

蝴蝶兰愈伤组织诱导和体细胞胚胎发生的研究

研究了蝴蝶兰愈伤组织的诱导和通过体细胞胚胎发生的植株再生。原球茎在含有蔗糖的VW培养基上形成愈伤组织。结果表明,最有效的诱导愈伤组织的培养基为VW+0.1 mg/L BA+0.1 mg/L 2,4-D+60 g/L蔗糖或者VW+0.3 mg/L BA+0.1 mg/L NAA+40 g/L蔗糖。愈伤组织在被转到不含植物激素的VW培养基上易形成原球茎。组织学观察证实了体细胞胚胎结构的形成,暗示了试验中诱导的愈伤组织即为体细胞胚。     

银杏幼胚培养的多因子正交试验研究

以MS为基本培养基,选用银杏幼胚为试验材料,采用L9(34)正交设计分析比较2,4-D(A因素)、6-BA(B因素)、酸水解酪蛋白(CH,C因素)3个因素及其组合对银杏幼胚愈伤组织诱导率、褐化率及生长量的影响。结果表明:2,4-D 1.0mg/L+6-BA 1.0mg/L+CH 500mg/L组合银杏的幼胚愈伤诱导率最高,为100%,同时该组合处理愈伤组织生长量也最大,增长倍数达8.11倍;而2,4-D 0.5mg/L+6-BA 0.5mg/L组合褐化率最高,为60.3%。经直观分析、方差分析和主因素效应的多重比较后认为,3个因素中,2,4-D对银杏幼胚愈伤诱导率及褐化率的影响最大,极差分别为74.196和63.702;CH对银杏幼胚愈伤生长量影响最大,极差为2.148。银杏愈伤组织诱导及生长的培养基最优组合为MS+2,4-D 1.0mg/L+6-BA 0.5mg/L+CH 500mg/L。     

宝铎草组织培养及快速繁殖的研究

为保护宝铎草的野生资源,我们以胚轴作为材料,进行了愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、不定芽的分化继代、试管苗的生根、试管苗的移栽和移植的研究,建立宝铎草的快速繁殖技术。结果证明：N6＋BA0.4 mg/L＋2,4-D1.5 mg/L＋NAA0.2 mg/L是宝铎草胚轴愈伤组织诱导培养的理想培养基;MS＋BA1.0 mg/L＋NAA0.1 mg/L是宝铎草愈伤组织分化培养的理想培养基;MS＋BA1.0 mg/L＋NAA0.1 mg/L＋GA30.5 mg/L是宝铎草不定芽分化继代培养的理想培养基;MS＋NAA0.1 mg/L＋IAA1.0 mg/L是宝铎草生根培养的理想培养基;移植到山坡上的试管苗保持了野生宝铎草的生物性状,且生长旺盛。     

防风嫩茎无性系建立的研究

为保护野生资源,实现人工栽培,以防风的嫩茎为材料,进行了愈伤组织的诱导和分化、试管苗生根、移栽和定植的研究,成功的建立起防风的无性系。结果证明:MS+BA 0.2 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L+NAA 0.5mg/L是愈伤组织诱导培养和增殖继代培养的理想培养基;MS+AgNO30.5 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1mg/L是愈伤组织分化培养的理想培养基;1/3MS+NAA 0.1 mg/L+IAA 0.3 mg/L是不定芽生根培养和试管苗生根继代增值的理想培养基;试管苗易移栽、定植成活;定植的试管苗保持了防风所有植物学性状。     

黄芩组织培养与快速繁殖条件的研究

用黄芩茎段作为外植体进行愈伤组织诱导及分化培养,确定黄芩愈伤组织诱导和分化培养的最佳培养基分别为MS+6BA 1.0 mg/L+NAA0.5 mg/L和MS+6BA 0.5mg/L+NAA0.5 mg/L,最佳的生根培养基为1/2MS+NAA0.4 mg/L。