胡椒组织培养中污染问题的研究

研究了胡椒组织培养中外植体的污染问题。采用常规消毒、枝条喷施杀菌剂 常规消毒、培养基中加入不同杀菌剂和抗生素组合 常规消毒、杀菌剂和抗生素混和液振荡处理 常规消毒、枝条喷施杀菌剂 培养基中加入杀菌剂和抗生素 振荡处理 常规消毒对污染进行控制，对外植体消毒中的污染问题未有明显改善，表明这种污染主要是内源性污染。     

消毒剂和激素对江西野生金线莲外植体的诱导研究

[目的]研究消毒剂和激素对江西野生金线莲外植体消毒效果的影响。[方法]以江西龙南九莲山自然保护区的野生金线莲带腋芽的茎段为材料,研究浓度0．1％升汞、浓度2％次氯酸钠、浓度10％次氯酸钙和饱和漂白粉溶液等不同消毒剂在不同处理时间对外植体的消毒效果,以及不同浓度的6-BA和NAA组合对外植体诱导率的影响。[结果]以酒精消毒30s后再用浓度0．1％升汞处理16min的消毒效果最好,其污染率只有10％,存活率高达82％;最适合江西野生金线莲外植体诱导的培养基为MS＋2．0mg／L6-BA＋0．1mS／LNAA,诱导率高达98％。[结论]消毒剂和激素对江西野生金线莲外植体的诱导均有一定程度的影响。     

巴西橡胶树树根组织培养外植体消毒研究

[目的]寻找一条降低橡胶树树根组织培养中外植体污染的有效途径。[方法]对巴西橡胶树树根进行组织培养,取林段断根处理30d后的新根为外植体,采用1g／L多茵灵、0．1％HgCl2和不同浓度益培隆对其进行了消毒试验。[结果]在常规消毒前先采用1g／L多茵灵对外植体处理2．5h,再用75％乙醇消毒308及0．1％HgCl：消毒6min,然后接种到添加0．1％益培隆的固体愈伤诱导培养基上,培养30d后外植体污染率下降至44．59％,存活率达25．60％。[结论]为降低橡胶树树根组织培养中外植体污染提供了理论依据。     

降低软枣猕猴桃初代培养污染率的研究

[目的]筛选降低软枣猕猴桃外植体初代培养污染率和提升外植体诱导率的处理方法。[方法]采用半木质化的软枣猕猴桃新梢作为外植体,根据外植体灭菌时间和氨苄青霉素培养基浓度差异组合,分析降低软枣猕猴桃外植体初代培养污染率和提升外植体诱导率的因素,筛选出最适宜的处理方法。[结果]增加外植体75%乙醇灭菌时间至10 s可降低软枣猕猴桃初代培养污染率,培养基中氨苄青霉素浓度为100~150 mg/L时,软枣猕猴桃初代培养污染率随培养基中氨苄青霉素浓度的增加而降低。增加外植体灭菌时间和培养基中氨苄青霉素浓度均能增加软枣猕猴桃外植体诱导率。[结论]污染率低且诱导率高的处理方法为1/2MS+100 mg/L氨苄青霉素、1/2MS+150 mg/L氨苄青霉素、外植体75%乙醇灭菌10 s+0.1%升汞灭菌8 min和外植体75%乙醇灭菌10 s+0.1%升汞灭菌10 min。     

巴西橡胶树树根组织培养外植体消毒研究

[目的]寻找一条降低橡胶树树根组织培养中外植体污染的有效途径。[方法]对巴西橡胶树树根进行组织培养,取林段断根处理30d后的新根为外植体,采用1g/L多菌灵、0.1%HgCl2和不同浓度益培隆对其进行了消毒试验。[结果]在常规消毒前先采用1g/L多菌灵对外植体处理2.5h,再用75%乙醇消毒30s及0.1%HgCl2消毒6min,然后接种到添加0.1%益培隆的固体愈伤诱导培养基上,培养30d后外植体污染率下降至44.59%,存活率达25.60%。[结论]该研究为降低橡胶树树根组织培养中外植体污染提供了理论依据。     

巴西橡胶树离体茎段培养研究

[目的]诱导橡胶树茎段腋芽分化增殖,为橡胶树栽培提供大量优良的新型无性系种植材料。[方法]以橡胶树优良单株带芽茎段作外植体,以MS为基本培养基,研究不同激素配比的培养基对橡胶树腋芽分化增殖的影响。[结果]以多茵灵2．0g／L＋青霉素400．0mg／L预处理＋O．1％HgCl2表面消毒,污染率降至29％;以MS＋6一BA2．0mg／L为启动培养基,腋芽萌动率达85％。以MS＋6-BA3．0mg／L＋NAA0．1mg／L为生长增殖培养基,萌动腋芽生长发育正常。[结论]多菌灵和抗生素预处理,可以明显降低外植体污染率和死亡率。6-BA对腋芽的萌动和生长起重要作用,而添加2,4一D则抑制腋芽萌发及生长。     

苦马豆外植体初代培养杂菌污染率控制的探讨

[目的]以苦马豆种子和发芽幼苗的不同部位作为外植体进行无菌处理和培养,探究杂菌污染率控制的方法。[方法]以MS为基本培养基,通过不同消毒试剂种类和浓度配比、时间,探讨其对外植体初代培养污染率的影响。[结果]野生苦马豆种子去皮后采用0.1%升汞消毒效果较好,消毒时间以6 min为佳;苦马豆幼苗胚轴最佳消毒时间为6 min;外植体表面灭菌后使用50 mg/L的青霉素溶液处理30 min效果最为理想。[结论]筛选获得适宜的外植体消毒方法,对细菌和真菌的抑制作用提供一条有效的途径,为提高苦马豆组培体系工厂化育苗的效率奠定基础。     

贺州大肉姜的组培快繁技术研究

[目的]研究大肉姜组培快繁技术,为贺州大肉姜规模化生产提供技术支持。[方法]以贺州大肉姜的芽作为外植体,研究不同消毒液和激素组合对外植体污染率、芽分化和生根的影响。[结果]外植体用0.1%HgCl2消毒12min效果最好,诱导芽分化的最佳培养基为MS＋2.0mg/L6-BA＋0.1mg/LNAA,最佳生根培养基为1/2MS＋1.0mg/LNAA,生根率可达100%。[结论]该组培快繁技术可用于贺州大肉姜的规模化生产。     

绶草高频再生体系建立的研究

[目的]建立绶草高频再生体系.[方法]以野生绶草的花序轴为外植体,对外植体进行消毒和预培养后,以MS为基本培养基,添加不同浓度的6-BA筛选最适诱导培养基;以MS为基本培养基,添加不同浓度6-BA和IAA筛选最适增殖培养基;以1/2 MS为基本培养基,添加不同浓度NAA筛选最适生根培养基.[结果]最适诱导培养基为MS＋ 6-BA2.0,最适增殖培养基为MS＋ 6-BA15＋IAA0.4,最适生根培养基为1/2MS＋ NAA1.5.[结论]该研究对绶草优良品种的改良和次级代谢产物研究有重要意义.     

应用正交试验优选茎瘤芥子叶组培诱导培养基

[目的]建立茎瘤芥体细胞培养再生植株体系,为芸薹属植物茎瘤芥及芥菜的遗传转化体系及生物技术育种奠定基础。[方法]以茎瘤芥6 d苗龄子叶为材料,应用正交试验法研究不同浓度生长激素6-BA、NAA、2,4-D对外植体分化和愈伤组织成苗率的影响。[结果]最适合茎瘤芥外植体分化成苗的培养基为MS加6-BA 3.0 mg/L＋NAA 0.10 mg/L＋2,4-D 0 mg/L＋3 g/L琼脂粉;1/2MS＋0.10mg/LNAA利于组培苗生根。[结论]优选培养基的再生频率具有较大提高。     

月见草种子的无菌萌发条件

[目的]为月见草的组织培养提供无菌外植体。[方法]以月见草种子为材料,经过不同的表面除菌方法处理后,接种于不同的培养基上,培养10 d后统计种苗的污染率、发芽率。[结果]经70℃热处理48 h后,用70%乙醇（40 s）＋0.1%HgCl2（10 min）＋吐温80进行表面除菌效果最好,污染率最低;在VW＋1.0 mg/L6-BA＋0.5 mg/LNAA＋0.05%AC培养基中培养,月见草种子的萌发率最高,达到93%,萌发后幼苗的生长状况最优。[结论]该试验建立了优质、高效的月见草种子无菌萌发体系,为月见草资源的持续利用奠定了基础。     

三角梅外植体消毒和愈伤组织诱导研究

[目的]探索三角梅的最佳消毒时间和最佳愈伤组织诱导培养基。[方法]采用不同消毒时间对三角梅的7种外植体进行灭菌,并用不同激素与浓度组合的培养基诱导愈伤。[结果]三角梅的最佳外植体为半木质化茎段;最佳消毒方法为先用浓度75%酒精溶液灭菌30 s,无菌水冲洗5次,再用浓度0.1%升汞溶液消毒9 min,最后用无菌水冲洗7~8次;最佳诱导培养基为MS＋2.0 mg/L 6-BA＋1.0 mg/L NAA。[结论]获得了三角梅外植体的最佳消毒方式和最佳愈伤组织诱导培养基,为三角梅组织培养体系的建立奠定了基础。     

沈氏栎组培快繁技术的初步研究

[目的]对沈氏栎组培快繁技术进行初步研究,以期为该物种的快速繁殖和优良性状的保持奠定基础。[方法]以引自北美的沈氏栎(Quercus shumardi'Shumard Oak')为试验材料,从外植体接种试验、试管苗的增殖与生根等技术环节进行了探索,研究沈氏栎瓶内培养技术体系。[结果]用作外植体的理想材料为带腋芽茎段;最佳灭菌方式是用75%的酒精消毒1 min后再用0.1%升汞消毒6 min;试管苗增殖(诱导丛生芽)的最佳培养基为MS+6-BA 0.80 mg/L+NAA 0.45 mg/L;诱导生根的最佳培养基组合为1/2 MS+NAA 0.40mg/L;瓶苗培养的理想温度为26～28℃。[结论]该研究初步建立了沈氏栎瓶内培养技术体系,同时为该物种的快速繁殖和优良性状的保持奠定基础。     

柑橘品种茎段离体培养条件的优化及微芽嫁接试验

[目的]优化柑橘品种茎段离体培养条件并开展微芽嫁接(试管内茎尖嫁接)试验,为培育无毒柑橘组培种苗提供参考依据.[方法]对温州蜜柑和纽荷尔脐橙成年态枝条进行不同浓度HgCl2和NaClO消毒,筛选适宜组培利用的柑橘外植体消毒方式、采集季节及激素配比;开展嫁接砧木种子消毒和微芽嫁接试验,分析两个柑橘品种微芽嫁接的萌发状况.[结果]温州蜜柑外植体的最适消毒方法为70%酒精+1.0‰HgCl2消毒6 min处理两次;纽荷尔脐橙外植体的最佳消毒方法为70%酒精+15.0%NaClO处理两次;采集成年态柑橘茎段进行离体培养的最佳时期为夏季;在MS固体培养基中添加1.0 mg/L 6-苄氨基嘌呤(6-BA)和0.1 mg/L萘乙酸(NAA)均有利于两个柑橘品种外植体腋芽萌发.砧木种子最适消毒方法为剥去内外种皮+70%酒精+1.5%NaClO溶液处理;两个柑橘品种微芽嫁接的萌发率较低,分别为10.00%和6.67%,但嫁接成功后柑橘苗长势良好.[结论]于夏季剪取温州蜜柑和纽荷尔脐橙成年态枝条带芽茎段,分别经70%酒精+1.0‰HgCl2消毒6 min处理两次、70%酒精+15.0%NaClO处理两次,在添加1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA的MS固体培养基中接种,可获得最佳的培养效果.利用微芽嫁接技术嫁接的柑橘苗长势良好,可在提高其嫁接萌发率基础上推广应用.     

龙吐珠组培快繁技术初探

[目的]探究龙吐珠最佳组织培养方案。[方法]以马鞭草科龙吐珠叶片、茎段、腋芽为外植体,进行组培快繁技术研究。[结果]最适宜外植体为茎段;最适宜消毒处理是消毒剂为0．1％升汞溶液,消毒时间为6min。产生侧芽的最佳培养基为1／2MS＋6-BA1．00mg／L＋NAA0．05ms／L＋IBA0．50mg／L,最适愈伤组织诱导及继代培养基为1／2MS＋6-BA2．00mg／L＋NAA0．10mg／L,平均诱导率为86．2％;最适分化培养基是1／2MS＋6-BA1．00mg／L＋NAA0．10mg／L＋KT 0．20mg／L,平均分化率为76．7％;不定芽的最适生根培养基是1／2MS＋N从0．01mg／L,其生根率为100％。[结论]该方案可为龙吐珠规模化生产提供技术支持。     

白首乌的离体再生与快速繁殖

[目的]加快白首乌种苗生产速度及实现其生产的现代化。[方法]以带侧芽白首乌茎段为外植体,采用MS为基本培养基,附加不同植物生产调节剂进行试验。[结果]结果表明,适宜于白首乌的初代培养基为:1/2 MS+6-BA 0.50 mg/L+NAA 0.05 mg/L;增殖培养基:MS+6-BA 0.20 mg/L+NAA 0.10 mg/L;生根培养基:1/2 MS+IBA 0.20 mg/L。移栽成活率达100%。[结论]采用白首乌的茎段作为外植体,利用组织培养的方法能实现种苗的快速工厂化。     

瑞昌山药组培快繁研究

[目的]探讨瑞昌山药组培快繁的技术环节。[方法]以瑞昌山药茎段为外植体,通过组织培养试验研究了不同激素及其浓度对愈伤组织形成、丛生芽诱导和生根的影响。[结果]70％乙醇和0．1％HgCl2结合对外植体的的消毒效果最佳。培养基Ms＋6-BA2．0mg／L＋NAA0．2mg／L中的腋芽生长最好,培养基MS＋6一BA1．0mg／L＋NAA0．2mg／L、MS＋6一BA1．0mg／L-I-NAA0．5mg／L、MS＋6一BA2．0mg／L＋NAA0．2mg／L和MS＋6一BA2．0mg／L-I-NAA0．5mg／L中腋芽的诱导率分别为52％、43％、84％和48％。在继代培养中,采用原诱导培养基诱导丛生芽的效果较差,降低6一BA的浓度有利于丛生芽的诱导。培养基1／2MS＋IBA1．5mg／L＋NAA0．3mg／L4-活性炭0．2mg／L中幼苗的生根效果较好。[结论]该研究为组织培养技术在种苗繁育中的应用奠定了基础。