雪莲果叶片愈伤组织的诱导

[目的]研究雪莲果叶片愈伤组织诱导的最佳灭菌方法和最佳培养基。[方法]以雪莲果叶片为外植体,用浓度0.1%升汞浸泡不同时间,筛选最佳灭菌方法;以MS为基本培养基,比较不同浓度生长调节物质对愈伤组织诱导的影响。[结果]用浓度0.1%升汞溶液灭菌8 min,外植体污染率为54.55%,死亡率为3.64%;最佳诱导培养基为MS+6-BA 1.0~1.5 mg/L+NAA 0.5~1.0 mg/L。[结论]最佳灭菌方法为浓度0.1%升汞对叶片灭菌8 min;诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+6-BA 1.0~1.5 mg/L+NAA 0.5~1.0 mg/L。     

大花蕙兰原球茎诱导培养影响因素及褐化防治的研究

[目的]研究大花蕙兰茎尖外植体原球茎诱导及增殖培养、褐化污染的影响因素。[方法]以大花蕙兰茎尖作为外植体,研究无菌系建立、诱导培养的灭菌方法与褐化防治、原球茎诱导培养初始培养基的筛选、原球茎增殖培养的影响因素。[结果]结果表明:解决茎尖内生菌污染及褐化严重的问题,两段式灭菌(75%酒精30 s+0.1%升汞10 min+剥去幼叶+0.05%升汞5 min)优于单一式的灭菌;原球茎诱导培养基为1/2MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA;原球茎增殖培养基为1/2MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+2.0 g/L活性炭+10%马铃薯。[结论]该研究可为大花蕙兰的茎尖快速繁殖及工厂化生产提供技术依据。     

金莲花初代培养探索

为了探讨不同因素对金莲花初代培养的影响,最终筛选金莲花初代培养的最适外植体、灭菌处理及诱导或分化培养基,为金莲花离体快繁和规模化、工厂化育苗提供理论依据。以金莲花叶片、叶柄、根颈和根为外植体,以乙醇和Hg Cl2为灭菌剂,以MS为基本培养基,通过不同浓度的6-BA和NAA配比,进行金莲花初代组织培养研究。结果显示,叶柄是金莲花再生初代培养的最佳外植体,其通过愈伤组织诱导途径建立再生体系,最佳的灭菌组合是75%乙醇灭菌10 s+0.1%HgCl_2灭菌4min,最适培养基为MS+6-BA 8.0 mg/L+NAA 2.0 mg/L;其次是根颈,以不定芽分化途径为主,最佳灭菌组合为75%乙醇灭菌20 s+0.1%HgCl_2灭菌6 min,最适培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L。     

玉竹初代培养最适条件的筛选

以玉竹[Polygonatum odoratum(Mill.)Druce]的叶片、茎段以及根茎作为外殖体,采用不同灭菌方式进行灭菌,在不同基本培养基上进行培养,添加不同种类生长调节剂,分析其最适的初代培养条件。结果表明,最适灭菌方法为75%乙醇处理10 s配合0.1%升汞处理7 min,其污染率为13.3%。根茎作为外殖体有较高的诱导率,达到90.0%;在培养中,最适宜初代培养的基本培养基为MS,其诱导率为86.7%;最适宜根茎分化的生长调节剂为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,其次为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IAA,其分化率分别为80%和62%。     

拂子茅组培再生体系的建立

为建立拂子茅植株再生体系,以茎尖为外植体,对拂子茅花叶灭菌方式以及愈伤组织诱导和植株再生培养条件进行分析与筛选。结果表明:用75%乙醇灭菌30 s,再用0.1%升汞灭菌12 min,灭菌效果最佳,去污染率达到90%;在MS+6-BA 0.2 mg/L+2,4-D 4 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L的培养基上进行愈伤组织诱导,诱导率达33.4%;用MS+6-BA 2mg/L+NAA 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L培养基诱导不定芽再生,诱导率最高、可达76.9%;用MS基本培养基诱导不定芽生根,生根率达到100%。     

软枣猕猴桃叶片愈伤组织诱导技术研究

为了解决软枣猕猴桃[Actinidia arguta(Sieb.&Zucc)Planch. ex Miq.]初代培养中外植体诱导率低且快繁效果差的难题,以软枣猕猴桃展叶为外植体,采用不同消毒试剂及消毒处理时间,筛选出最佳的灭菌程序;将不同培养基与不同浓度的KT、2,4-D组合,筛选出最佳的初代培养培养基配方。结果表明,选用展叶为外植体,75%CH3CH2OH处理30 s后10%NaClO处理20 min,0.1%HgCl2处理10 min后去离子水冲洗3～4次,接至MS+0.4 mg/L 2,4-D+1 mg/L KT+3%白糖+0.55%琼脂,pH 5.8的培养基上,置于光照2 500 lx、8 h/d,26℃下培养8 d后有少部分愈伤组织出现,60 d后平均单芽愈伤组织可达0.8 g以上,平均单个愈伤组织长度在0.7～1.4 cm,属中块愈伤组织。     

龙选蕉组培快繁技术

[目的]探讨不同灭菌剂对外植体的灭菌效果及不同激素浓度和组合对不定芽诱导和增殖的影响,建立龙选蕉的高频再生体系.[方法]以龙选蕉吸芽为外植体,以升汞和0.2%次氯酸钠对外植体灭菌;采用0~6.0 mg/L 6-BA、0.1~0.2 mg/L NAA激素组合对不定芽进行诱导或增殖培养.[结果]相对于升汞,次氯酸钠对龙选蕉外植体灭菌的效果更理想,灭菌率达到90.47%,且外植体生长良好,无中毒现象.在不定芽诱导培养基中,随着6-BA浓度的升高,不定芽萌发率呈先增加后降低趋势,其中以添加6-BA3.0mg/L的诱导效果最理想,萌发率为66.67%;随着6-BA和NAA浓度的提高,不定芽的增殖系数也随之增加,其中以4.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA为最佳组合,不定芽增殖效果最理想,增殖系数为4.05,芽苗粗壮,叶片颜色正常.[结论]次氯酸钠对龙选蕉吸芽的消毒效果优于升汞,操作简便,易于获得无菌外植体并利于不定芽生长;不定芽诱导最佳培养基为MS+3.0 mg/L 6-BA;不定芽增殖最佳培养基为MS+ 4.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA.     

中华猕猴桃茎段组培快繁系列技术研究

以中华弥猴桃带腋芽茎段为外植体,研究不同处理方法对外植体灭菌效果的影响,不同激素组合培养基对外植体初代培养和组培苗生根的影响。试验结果表明,最佳灭菌处理:先用75%酒精灭菌30 s,再用0.1%升汞进行表面灭菌8 min,外植体成活率88%;最佳初代培养基:MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L,出芽率92%;最佳生根培养基:1/2 MS+IBA 0.15mg/L+NAA 0.3 mg/L,生根率85.6%。     

红腺忍冬组织培养快繁技术

【目的】研究广西山银花当家品种红腺忍冬的组织培养,为红腺忍冬种苗工厂化生产提供技术支持。【方法】以红腺忍冬腋芽为外植体,用0.1%升汞溶液灭菌处理;以MS为基本培养基,探讨不同浓度6-BA、NAA和MET组合对芽诱导、增殖培养和根诱导的影响。【结果】较适宜外植体灭菌的处理为0.1%升汞溶液（加吐温-80）处理7 min,外植体污染率为16.0%。春季取材的灭菌效果及腋芽萌发效果最好,冬季最差。较适宜的芽初代诱导培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L,继代培养较适宜的培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,生根培养较适宜的培养基为MS+NAA 0.1 mg/L+MET 3.0 mg/L。【结论】通过红腺忍冬腋芽培养,得到可用于生产的组培苗,该技术可应用于红腺忍冬种苗工厂化生产。     

百香果茎段培养技术探究

以紫果百香果幼嫩茎段作为试验材料,MS培养基作为基础培养基,进行外植体的诱导和培养,探究外植体适宜的灭菌方法,初代、继代及生根培养过程中适宜的激素种类及浓度。结果表明,75%的酒精灭菌30s+0.1%的升汞灭菌12min灭菌效果最好;初代培养以2.5mg/L的6-BA在芽的诱导中效果最好;继代培养以1.0mg/L的6-BA+0.3mg/L的IBA适宜芽的增殖且利于壮苗;生根培养以1/2 MS培养基为基础培养基,加入0.1mg/L的NAA+0.1mg/L的IBA形成的苗健壮,生根率高达100%。     

山苍子外植体初始诱导的研究

[目的]研究山苍子外植体的诱导方法。[方法]以不同类型、不同采集时间的山苍子茎段为外植体材料进行组织培养研究。[结果]以0.1%氯化汞对外植体处理10 min效果较好,此时外植体污染率为40.0%,死亡率为15.0%;以顶芽以下2～5个芽的茎段进行初始诱导效果较好;1月份为最佳取材时间,此时诱导率高达81.1%,污染率仅为11.7%;初始诱导中,以改良MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA培养基为最适培养基配方。[结论]1月采集的半木质化茎段用0.1%氯化汞消毒10 min后,以改良MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA培养基可较好诱导山苍子幼苗。     

木薯外植体表面灭菌与增殖培养的研究

[目的]筛选出适合木薯组织培养的灭菌体系,为加快木薯组织快繁提供科学依据。[方法]以木薯品种GR891的腋芽为外植体,研究经甲基托布津杀菌剂处理和无处理外植体分别采用不同组合、不同处理时间对其表面灭菌的效果,同时研究6-BA和6-BA与NAA组合对丛芽诱导培养效果的影响。[结果]经甲基托布津杀菌剂处理后用体积分数75%乙醇消毒10 s＋质量分数0.1%升汞处理8 min效果最好,外植体存活率为61.3%;以MS＋6-BA 1.5 mg/L＋糖30 g/L＋琼脂6.5 g/L培养基诱导培养芽效果最好,有的丛芽能达到7～9株,丛芽生长速度快,健壮。[结论]建立了木薯GR891组织培养外植体灭菌与增殖培养体系。     

尖萼耧斗菜外植体消毒及愈伤组织诱导的研究

[目的]研究尖萼耧斗菜外植体消毒及愈伤组织的诱导。[方法]采用不同消毒剂种类和浓度,对尖萼耧斗菜种子进行消毒处理,研究其污染率和污染速率,寻找建立无菌苗培养系的最佳方法;以尖萼耧斗菜种子获得的无菌苗的根、茎、叶片为外植体,通过在MS基本培养基中附加不同激素配比,筛选最佳外植体和最佳培养基配方。[结果]外植体材料最适宜的灭菌处理方法为：先将外植体在75%酒精中浸30 s,用无菌水冲洗5遍,再将其用0.2%升汞液浸泡2 min,再用无菌水冲洗5遍。该消毒方法使污染率最低、发芽率最高,且获得的无菌苗长势最好;诱导尖萼耧斗菜胚性愈伤组织的最佳外植体为幼根;诱导胚性愈伤组织的最佳培养基为MS＋0.6 mg/L2,4-D＋0.5 mg/L6-BA。[结论]为尖萼耧斗菜的大规模生产提供了技术支持,并为其药用和观赏价值的最大发挥作出了贡献。     

尖萼耧斗菜外植体消毒及愈伤组织诱导的研究（摘要）

[目的]研究尖萼耧斗菜外植体消毒及愈伤组织的诱导。[方法]采用不同消毒剂种类和浓度,对尖萼耧斗菜种子进行消毒处理,研究其污染率和污染速率,寻找建立无菌苗培养系最适宜的方法;以尖萼耧斗菜种子获得的无菌苗的根、茎、叶片为外植体,通过在MS基本培养基中附加不同激素配比,筛选最佳外植体和最佳培养基配方。[结果]外植体材料最适宜的灭菌处理方法为：先将外植体在75%酒精中浸30s,用无菌水冲洗5遍,再将其用0.2%升汞液浸泡2min,再用无菌水冲洗5遍。该消毒方法使污染率最低、发芽率最高,并且获得的无菌苗长势最好;诱导尖萼耧斗菜胚性愈伤组织的最佳外植体为幼根;诱导胚性愈伤组织的最佳培养基为MS0.6mg/L2,4-D＋0.5mg/L6-BA。[结论]该研究为尖萼耧斗菜的大规模生产提供了技术支持,并为其药用和观赏价值的最大发挥作出了贡献。     

湖州雪藕的茎尖离体培养技术研究

[目的]为莲藕种藕的快速繁殖提供参考。[方法]以湖州主栽莲藕品种"迟来早"的地下茎尖为外植体,考察不同消毒时间和消毒方式(0.1%HgCl2、1.0%NaClO+0.1%HgCl2)对外植体的消毒效果,并研究取材时间和培养基中6-BA、NAA浓度对外植体分化的影响。[结果]HgCl2和NaClO联合对外植体消毒效果最好;最佳诱芽培养基为MS+1.0 mg/L6-BA+0.2 mg/L NAA;莲藕地下茎处于冬季休眠期时取材最佳,外植体分化率最高;将再生芽接种到培养基MS+1.0 mg/L6-BA上进行增殖,然后挑选生长良好的芽苗接种到生根培养基MS+0.1 mg/L6-BA+1.0 mg/LIBA+0.2%AC上可正常生根。[结论]该研究确定了莲藕品种"迟来早"地下茎尖的最佳离体培养条件。     

垂枝樱花外植体灭菌及不定芽的诱导研究

[目的]探讨垂枝樱花外植体灭菌及不定芽诱导的相关技术.[方法]以垂枝樱花当年生带腋芽茎段为外植体,对其组织培养繁殖技术中外植体选择、灭菌方法与程序、不定芽的诱导等环节进行了初步研究.[结果]适宜外植体采集时间为晴天中午,采集部位为当年生枝条的中上部,适宜的表面灭菌程序为：洗衣粉中浸泡15 min,流水冲洗lh,70％乙醇浸泡30 s,0.1％ HgCl2浸泡10 min,最后无菌水冲洗5遍,成活率达68.3％.适宜垂枝樱花不定芽诱导的培养基为1/2MS ＋6-BA 0.5 mg/L＋ NAA 0.10 mg/L,分化率达68.3％.[结论]为垂枝樱花的组织培养提供相关技术支持.     

兰州百合鳞茎再生繁殖体系的建立

[目的]建立兰州百合鳞茎快繁体系,并测定丛芽与鳞茎的淀粉含量,为系统研究兰州百合鳞茎离体再生过程中淀粉的代谢奠定基础.[方法]以兰州百合鳞片为外植体,探讨不同消毒剂组合、激素与蔗糖用量对鳞茎诱导培养过程的影响.[结果]随着75％乙醇（10～30 s）与0.1％升汞消毒时间（7～10min）的延长,外植体鳞片污染数不断下降,但诱导芽数表现为先上升后下降的趋势,以75％乙醇消毒30 s＋0.1％升汞消毒10 min组合的消毒效果最好,外植体污染率和芽诱导率分别为12.33％和91.00％.使用1000倍多菌灵处理10 min后,再使用75％乙醇30 s ＋0.1％升汞7～13 min组合进行消毒,可明显降低鳞片污染率3.00％～5.00％（绝对值）.在MS＋0.03 mg/L NAA＋30.0 g/L蔗糖＋5.0 g/L琼脂培养基中添加6-BA 0.5～1.0 mg/L,可显著提高平均芽诱导数;在MS＋5.0 g/L琼脂培养基中添加30.0～60.0 g/L蔗糖,对外植体芽诱导无明显影响;培养基MS＋1.0 mg/L 6-BA＋0.03 mg/L NAA＋30.0 g/L蔗糖＋5.0 g/L琼脂是外植体芽诱导的最适培养基.MS＋0.50 mg/L 6-BA＋0.03 mg/L NAA＋30.0 g/L蔗糖＋5.0 g/L琼脂为适宜增殖培养基,芽增殖系数达最高,为3.67.在MS培养基中添加60.0～90.0 g/L蔗糖可明显促进鳞茎的形成,以添加90.0 g/L蔗糖处理的鳞茎重量最高（99.30mg）.小鳞茎的淀粉质量分数比丛芽增加62.34％.[结论]以鳞片为外植体建立的兰州百合鳞茎再生繁殖体系具有可行性;在丛芽至小鳞茎形成阶段淀粉含量明显升高,小鳞茎的形成与淀粉含量升高密切相关.     

辣根茎尖的组织培养

[目的]研究辣根茎尖组织培养,为其优良品种的快速繁殖提供新途径。[方法]分别就不同消毒时间对茎尖接种污染率的影响、不同激素配比的培养基对茎尖出愈率、分化率的影响、不同激素浓度对不定芽生根的影响进行了探讨分析。[结果]酒精消毒时间为35 s时外植体污染率和褐化率均较低;MS+0.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA培养基对茎尖形成愈伤组织的诱导率较高,为82.3%;MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA培养基诱导茎尖分化率较高,达80%;MS+0.2 mg/L Kt培养基适合辣根不定芽的继代繁殖;MS+0.1 mg/L NAA为辣根不定芽生根培养基。[结论]该研究结果为辣根茎尖的组织培养提供了试验基础,为其优良品种的快速繁殖奠定了基础。     

红掌工厂化育苗关键技术研究

[目的]研究红掌工厂化育苗的关键技术。[方法]以红掌盆花和切花品种的叶片、叶柄、花苞片和花苞柱头为外植体,进行组培快速繁殖技术研究,探讨外植体的选择和消毒条件以及不同培养基对红掌愈伤组织的诱导、增殖和生根影响。[结果]叶柄为最佳外植体,愈伤诱导率最高,达78.3%;外植体采用0.1%HgCl2消毒8min的效果最好;粉冠军和MIDORI的最佳愈伤组织诱导培养基为1/2MS＋6-BA1.50mg/L＋KT1.00mg/L＋2,4-D0.10mg/L;最佳愈伤组织继代培养基为MS＋6-BA0.50mg/L＋KT0.50mg/L＋NAA0.10mg/L,添加10%的椰子汁或香蕉浆有利于增殖和丛芽生长,增殖率最高达2.83倍;最佳生根培养基为1/2MS＋NAA0.10mg/L＋IAA0.10mg/L,生根率达100%。[结论]该结果为红掌工厂化育苗体系的建立奠定了基础,对确保红掌产业的发展具有重要意义。     

大花蕙兰再生体系建立的研究

[目的]研究并建立大花蕙兰再生体系。[方法]用75%酒精和0.1%升汞进行表面灭菌,以MS为基本培养基,采用L9(33)正交试验设计进行类原球茎增殖的优选,以继代培养40 d后的增殖系数及幼苗分化率为考察指标。[结果]在大花蕙兰离体再生过程中,侧芽是最容易启动的外植体;MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+AC 0.1 g/L是类原球茎诱导的最佳培养基;1/2 MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L是类原球茎增殖和幼苗分化的最适宜培养基;芽分化后,待长至2~3 cm时,小心切下接入1/2 MS+NAA 1.0 mg/L+GA31.0 mg/L+香蕉泥150 g/L培养基中生根壮苗效果最好。[结论]为规模化生产提供依据。