大肠杆菌对几种抗菌药物的药敏试验

为了解大肠杆菌对抗生素的耐药情况，采用Kirby-Bauer（纸片扩散法），对大肠杆菌8种血清型（01、02、07、08、018、078、0119、0141）的菌株进行了7种抗菌药（恩诺沙星、环丙沙星、庆大霉素、氟哌酸、头孢噻肟、普康、阿莫西林）的药物敏感性实验，结果显示，正常情况下菌群已对目前生产上常用的抗生素恩诺沙星、环丙沙星、庆大霉素、阿莫西林产生了较强的耐药性。其中对阿莫西林产生了普遍的耐药性，达到了100％的耐药水平，另外对临床上常用的氟哌酸、普康的使用前景也不容乐观，只有应用较少或尚未使用的头孢噻呋对8种血清型大肠杆菌有较高的敏感性。     

中国兽医药品监察所完成猪链球菌2型药敏试验

2005年7月，四川资阳、内江等几十个乡镇爆发猪链球菌病，发生大范围的散养猪点状发病和死亡。由于饲养卫生条件落后，农民缺少卫生防疫概念，病原菌通过伤口等途径感染人，造成204人发病、38人死亡的严重局面。中国兽医药品监察所接受农业部下达的任务，对猪链球菌进行了药敏试验。采用纸片扩散法和最小抑菌浓度测定法，选择10个类别共32种抗菌药物，对从四川不同地区病、死猪体内分离得到并经鉴定为猪链球菌2型的7个菌株进行了药敏试验。7个菌株对药物的敏感谱基本相同：对青霉素、氨苄西林、阿莫西林、奥格门丁（阿莫西林一克拉维酸）、头孢氨苄、头孢拉定、头孢他定、头孢呋辛、头孢曲松、头孢噻呋、红霉素、卡那霉素、大观霉素、氯霉素、氟苯尼考、环丙沙星、氧氟沙星、二氟沙星、沙拉沙星、达氟沙星、恩诺沙星、复方新诺明、磺胺六甲氧嘧啶、万古霉素、亚胺培南等25种药物均敏感；对阿米卡星、新霉素、庆大霉素等3种药物中度敏感；对四环素、土霉素、多西环素、链霉素等4种药物低度敏感。     

四川某猪场猪链球菌2型菌株的分离鉴定与耐药性分析

本研究采集某发病猪场的环境及病猪样品,通过细菌分离纯化、PCR鉴定为猪链球菌2型致病菌株,随后用纸片扩散法测定该菌株的耐药性,结果显示对青霉素类、头孢类（头孢噻呋）、喹诺酮类、糖肽类、氨基糖苷类、多肽类最为敏感,对头孢类（头孢西丁）、氯霉素类较为敏感,对磺胺类、碳青霉烯类（亚胺培南）、四环素类、大环内酯类耐药。选取敏感的10种药物进行最小抑菌浓度（MIC）值测定,结果显示：阿莫西林的MIC为8μg/mL,苯唑西林、头孢噻呋、氧氟沙星、万古霉素和庆大霉素的MIC为4μg/mL,恩诺沙星和恩拉霉素的MIC为1μg/mL。     

河南省安阳市猪链球菌2型分布及其药物敏感性

为了解河南省安阳市猪链球菌2型（SS2）的分布范围、生化特性及其药物敏感性,收集了来自该地区9个县（市、区）的56份疑似感染病料,分离后用PCR鉴定出38株猪链球菌菌株,其中21株（55.3%）为SS2,分离自安阳县、汤阴县、滑县、文峰区、北关区、殷都区、龙安区7个县区采集的病料样品。生化试验发现,分离菌株与SS2菌株的生化特点相符合;药物敏感性分析发现,全部SS2菌株对氨苄西林和头孢曲松敏感,20株对头孢呋辛敏感,19株对阿莫西林和头孢噻肟敏感;全部SS2菌株对卡那霉素、阿米卡星和磺胺异恶唑耐药,20株对庆大霉素和四环素耐药,19株对阿米卡星耐药。结果表明,SS2在河南省安阳市分布范围较广,是该地区猪链球菌的优势流行亚型,且流行菌株存在多重耐药性。本研究为有效防控该地区猪链球菌病提供了参考。     

2013－2019年贵州省副猪嗜血杆菌分离株耐药性及其演变

试验旨在揭示贵州省副猪嗜血杆菌（Haemophilus parasuis，Hps）的耐药性及其变化趋势，指导Glasser's病临床防控用药，减缓Hps耐药菌株出现。通过K-B纸片琼脂法，检测2013－2019年分离自贵州省9个地区517株Hps对15种常用抗菌药的耐药性，分析不同分离时期和分离地区的菌株的耐药性差异。结果显示，针对15种抗生素分别有14.36%~70.58%的分离菌株表现耐药，其中耐头孢噻呋菌株的比例最低，耐复方新诺明菌株的比例最高；与2013年相比，2019年分离的Hps菌株对13种抗生素的耐药率分别升高了4.52%~324.68%，其中耐头孢噻呋菌株比例上升速度最快，达324.68%，耐链霉素菌株比例上升最慢，仅4.52%，耐土霉素和四环素菌株的比例分别下降2.21%和8.63%，出现负增长。相对于凯里、毕节和兴义地区，安顺、遵义、贵阳地区流行的菌株对头孢噻呋、替米考星、多西环素等在全省范围内耐药菌株比例较低的药物耐药率相对较高，而对复方新诺明、阿莫西林、链霉素等在全省范围内耐药菌株比例较高的药物耐药率相对较低。这一结果说明，贵州省Hps菌株对15种常用药物的耐药性较为严重，且总体呈现上升趋势，不同地区分离株对部分抗菌药的耐药率呈现明显的地区差异性。     

头孢噻呋等抗菌药物对4种标准菌株的药效学研究

通过用头孢噻呋等抗菌药物对兽医 临床常见的4种标准菌株的体外抗菌活性的 研究,表明头孢噻呋等对4种标准菌株的抗 菌活性较强;头孢噻呋等对4种标准菌株的 杀菌速率均较大;与氨苄西林相比,头孢噻呋 的各个浓度(8,5,2MIC)对金黄色葡萄球菌、 猪链球菌的杀菌速率较小,即它们在3h内使 活菌减少的值差异显著(P<0.05),但头孢 噻呋的各个浓度(8,5,2MIC)对鸡大肠杆菌、 鸡白痢沙门氏菌的杀菌速率均大于氨苄西林 的各个浓度;头孢噻呋与头孢曲松的各个浓 度相比较,对4种标准菌株的杀菌速率差异 均不显著(P>0.05);头孢噻呋等3种β 内 酰胺类抗生素对4种菌株的杀菌速率均不随 浓度(8,5,2MIC)的增加而增大(P> 0.05),即它们均为非浓度依赖性的杀菌药 物。     

奶牛子宫内膜炎大肠杆菌耐药性及其与整合子关系的研究

为阐明奶牛子宫内膜炎大肠杆菌的耐药性及其与细菌携带整合子之间的关系,采用微量稀释法测定药物对各菌株的最小抑菌浓度,以确定菌株的耐药性;运用PCR方法检测细菌携带Ⅰ类整合子的情况。结果：所有菌株对头孢噻呋、呋哺唑酮以及喹诺酮类药物的耐药率较低,均小于35％,而对磺胺类和抗菌增效剂的耐药率较高,均在97％以上;57株大肠杆菌中有21株携带Ⅰ类整合子,阳性率为36．8％,且Ⅰ类整合子阳性菌株均为多重耐药菌株（耐8种以上抗菌药物）;整合子阳性菌株对链霉素、阿莫西林、氨苄西林、头孢噻吩、四环素、土霉素的耐药率均显著高于整合子阴性菌株。结果表明奶牛子宫内膜炎致病性大肠杆菌的耐药性和多重耐药性与整合子携带有着密切关系。     

宠物源菌株的分离鉴定及耐药性分析

为了解河南郑州市常见宠物携带菌株组成以及耐药情况,本试验采集了郑州地区不同宠物医院患病及健康犬、猫共计76个样本的肛拭子、眼拭子、耳拭子。试验通过细菌分离培养、形态学观察、生化试验、16s rRNA基因测序完成细菌鉴定,确定分离菌株种类,采用微量肉汤稀释法测定分离菌株耐药表型。结果共分离得到大肠杆菌50株、肠球菌27株、奇异变形杆菌24株、葡萄球菌46株、绿脓杆菌4株。奇异变形杆菌耐药最为严重,对多西环素、替米考星两种药物耐药率高于90.0%;大肠杆菌对替米考星的耐药率高达94.0%,对阿莫西林耐药率为62.0%,对多西环素、多粘菌素E、庆大霉素、环丙沙星、恩诺沙星、头孢噻呋的耐药率在4.0%~24.0%之间。肠球菌对多西环素、庆大霉素、头孢噻呋三种药物的耐药率在29.6%~40.7%之间;对阿莫西林、恩诺沙星、环丙沙星三种药物的耐药率在7.4%~14.8%之间,对替米考星的耐药率为66.7%。葡萄球菌对替米考星的耐药率为39.1%,对阿莫西林、多西环素、庆大霉素、环丙沙星、恩诺沙星、头孢噻呋的耐药率均低于20.0%。上述试验结果表明:大肠杆菌和葡萄球菌在宠物菌群组成中占比较大;大肠杆菌和奇异变形杆菌的耐药情况较为严重。     

重庆市万州区某规模化猪场副猪嗜血杆菌的分离鉴定及药敏试验

为了解重庆市万州区某规模化猪场副猪嗜血杆菌病的感染情况,从而实施有效的防控,采集该猪场疑似副猪嗜血杆菌感染病猪肺脏、支气管、心包积液等病料进行病原菌的分离培养,分离得到一株革兰氏阴性细菌,对分离到的菌株进行形态学观察、培养特性和生化试验鉴定,并进行了药敏试验。结果表明:分离株为副猪嗜血杆菌;分离株对氟苯尼考、替米考星、头孢噻呋钠、头孢噻呋晶体、恩诺沙星、头孢喹肟敏感,对阿莫西林、环丙沙星、磺胺-6-甲氧嘧啶、庆大霉素耐药。     

山西猪场猪蓝耳病并发猪胸膜肺炎放线杆菌的病毒鉴定及细菌分离鉴定以及治疗方案

2020年2月份山西某大型规模猪场育肥猪突发呼吸困难,无过多症状表现,即突然死亡,发病率为2%,死亡率1.5%左右。实验室以病死猪为研究对象,综合死亡猪只脏器病变状况观察,无菌采集病死猪的肺脏、肝脏、脾脏病料,进行RT-PCR检测猪蓝耳病原;用含1%NAD和5%胎牛血清的TSA琼脂培养基进行细菌分离培养和纯化,经形态学鉴定、PCR鉴定、16Sr RNA基因序列进化树构建等方法,结果显示:该发病猪群为猪繁殖与呼吸障碍综合征并发猪胸膜肺炎放线杆菌感染。药敏试验结果显示:该猪胸膜肺炎放线杆菌对安普霉素、硫酸黏菌素、替米考星+氟苯尼考、替米考星+阿莫西林、氟苯尼考、头孢噻呋钠+硫酸黏菌素、头孢喹肟、头孢噻呋钠+新霉素、替米考星+头孢噻呋钠、多西环素+氟苯尼考、头孢噻呋钠+阿莫西林、阿莫西林+克拉维酸钾、头孢噻呋钠+恩诺沙星、新霉素、头孢噻呋钠、安普霉素+头孢噻呋钠敏感。对恩诺沙星耐药。本实验室根据临床及检测结果制定治疗方案,为该猪场的猪繁殖与呼吸障碍综合征并发猪胸膜肺炎的临床诊断及用药提供了理论依据。     

及其对实验性感染鸡大肠杆菌病的疗效

采用肉汤微量稀释法测定头孢噻呋对大肠杆菌、沙门菌、溶血性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌、链球菌等病原菌的最小抑菌浓度,采用棋盘稀释法测定头孢噻呋与氧氟沙星、甲氧苄啶（TMP）的联合抑菌浓度指数。结果表明,头孢噻呋、氧氟沙星对5种病原菌都具有很强的抗菌活性;头孢噻呋与氧氟沙星联合使用时,对大肠杆菌、沙门菌、链球菌可产生协同作用,对溶血性巴氏杆菌和金黄色葡萄球菌表现为无关作用;头孢噻呋与TMP联合用药时,对上述5种病原菌均具有协同作用。对实验性感染鸡大肠杆菌病的药效学试验结果表明,头孢噻呋高（100mg／L）、中（50mg／L）剂量对感染鸡的有效率明显高于对照药物庆大霉素（P〈0．05）,极显著高于感染对照组（P〈0．01）;头孢噻呋高剂量组（100mg／L）感染鸡的增重率与健康对照组相比差异不显著（P〉0．05）。建议临床应用头孢噻呋治疗鸡大肠杆菌病时,可采用饮水给药,剂量为100mg／L。     

猪链球菌Ⅱ型四川分离株对抗菌药的敏感性分析

对四川省不同地区链球菌病病死猪体内分离的7株链球菌Ⅱ型进行抗菌药敏感性试验,用链球菌兰氏D群C55914作为对照,比对菌为肺炎链球菌质控菌株ATCC49619.在32种抗菌药中,选择29种药物进行纸片法药敏试验.试验结果表明:7株链球菌耐药谱非常相似,对青霉素、氨苄西林、阿莫西林、奥格门丁、卡那霉素、红霉素、壮观霉素、氯霉素、氟苯尼考、头孢氨苄、头孢拉定、头孢他定、头孢呋辛、头孢曲松、环丙沙星、氧氟沙星、二氟沙星、沙拉沙星、达氟沙星、恩诺沙星、复方新诺明、万古霉素、亚安培南均敏感;对阿米卡星、新霉素、庆大霉素3株敏感,4株中敏;对四环素和多西环素2株中敏,5株耐药;对链霉素1株中敏,6株耐药.用21种药物进行最小抑菌浓度(MIC)测定,结果7株均对青霉素、氨苄西林、卡那霉素、红霉素、头孢他定、头孢呋辛、头孢曲松、头孢噻呋、环丙沙星、达氟沙星、氧氟沙星、二氟沙星、沙拉沙星、恩诺沙星、磺胺六甲氧嘧啶敏感,1株对新霉素和阿米卡星中敏,2株耐药;所有菌株对四环素、土霉素、多西环素、链霉素均耐药.两种方法总体结果一致.     

头孢噻呋钠对人工感染雏鸡大肠杆菌病的疗效试验

采用国产头孢噻呋钠对人工感染大肠杆菌O78的雏鸡进行疗效试验。其结果显示:应用头孢噻呋钠和阿莫西林钠可有效控制雏鸡大肠杆菌病,降低雏鸡大肠杆菌病的发病率和死亡率。以0.1 mg/只和0.2 mg/只剂量皮下注射头孢噻呋钠,对雏鸡大肠杆菌病有较好疗效。     

β-内酰胺类药物对副猪嗜血杆菌流行病学临界值的建立及耐药性的测定

副猪嗜血杆菌病是副猪嗜血杆菌主要针对保育仔猪的一种全身多发性的传染病,对猪场的危害极大。β-内酰胺类抗生素是临床上使用比较多的一类抗生素,具有杀菌活性强、毒性低、适应症广及临床疗效好等优点,常用于治疗副猪嗜血杆菌病,因此有必要了解副猪嗜血杆菌对β-内酰胺类抗生素的耐药情况,从而更科学地指导临床用药和新药开发。本研究参考CLSI-VET和VETCAST中流行病学临界值的建立方法,汇总不同地区来源的菌株对14种β-内酰胺类药物的药敏结果,建立β-内酰胺类药物的流行病学临界值。结果显示,头孢克洛、头孢吡肟、头孢噻肟、头孢喹肟、头孢噻呋、头孢氨苄、阿莫西林-克拉维酸、阿莫西林、克拉维酸、氨苄西林、青霉素、苯唑西林、亚胺培南和美罗培南的流行病学折点值分别为16、0.5、0.125、0.031 25、0.5、32、0.25、1、0.5、1、2、8、0.25、0.062 5 μg·mL^-1,可以得出副猪嗜血杆菌对氨苄西林、阿莫西林以及头孢吡肟的耐药率较高,对亚胺培南和阿莫西林-克拉维酸的敏感性较高。在CLSI （Clinical and Laboratory Standards Institute）和EUCAST （The European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing）缺乏敏感性评判标准的情况下,本研究可以直观地识别非野生型菌株的出现,有利于耐药性监测工作的开展,对副猪嗜血杆菌的治疗和防控具有一定的参考价值。     

断奶仔猪副猪嗜血杆菌分离鉴定与药敏试验

黑龙江省铁力市某原种猪场,有216头断奶仔猪,对其中患病仔猪进行临床及剖检的观察疑似副猪嗜血杆菌感染对该病例进行详细分离,通过细菌分离形态培养、生化试验、PCR鉴定和药敏试验等,确定该分离菌株为副猪嗜血杆菌。测定该临床上常用抗菌药物对分离菌株的敏感性,结果显示,对头孢噻呋、氟苯尼考、阿莫西林、头孢噻肟敏感,对头孢噻吩、氨苄青霉素、新霉素、头孢三嗪等8种药物耐药性,说明分离菌株抗药性比较严重。所以,提示临床防治该病时,应根据药敏试验结果进行防治。     

鸡源大肠杆菌对17种抗菌药的耐药性测定

对陕西省关中主要养鸡地区分离的20株致病性大肠杆菌进行17种抗菌药的药敏实验。结果表明，除氟哌酸（NOR）、头孢哌酮（CFP）和头孢三嗪（CRO）未产生耐药性外，分离菌株对其余14种抗菌药均有程度不同的耐药。红霉素（ERY）、苯唑青霉素（OXA）和头孢呋新（CFX）普遍产生耐药性。20株菌中有14种耐药谱型，多数为6重以上联合耐药。     

头孢噻呋的合成改进

对硫代呋喃甲酸进行精制,用乙酸乙酯作溶剂,与7-ACA反应得到头孢呋酸[收率95.6%,含量≥98.0%（HPLC归一化法）],在三乙胺作用下直接与AE-活性酯缩合得到头孢噻呋[收率74.2%,含量≥95.0%（HPLC外标法）],产品可直接制备冻干粉。     

鸭致病性大肠杆菌分离鉴定及药敏试验

2006年10月—2008年5月,从国内5个省的9个规模型鸭场的发病鸭或死亡鸭分离、鉴定大肠杆菌67株,采用肉汤稀释法测定其对头孢3代、4代,碳青霉烯类、单环β-内酰胺环类和氟喹诺酮类药物的敏感性。结果表明,试验菌株对以上药物的耐药率分别为头孢曲松钠（56.7%）、头孢噻呋（71.6%）、头孢吡肟（31.3%）、头孢噻肟（49.3%）、左氧氟沙星（50.7%）、环丙沙星（71.6%）、加替沙星（62.7%）、亚胺培南（0%）、氨曲南（56.7%）,鸭致病性大肠杆菌的耐药性比较严重,且同类药物的交叉耐药不容忽视。     

保定市鸡源致病性大肠杆菌的流行病学及药敏试验

从保定市不同鸡场疑似大肠杆菌病的病鸡中,分离到致病性大肠杆菌54株,对此54株大肠杆菌进行血清型鉴定,除了6株未能定型外,其余分离株的O血清型共有8个,分别为O1、O2、O5、O18、O78、O26、O76和O88,其中O78、O26、O1为主要血清型,分别占鉴定菌株的39.6%、27.1%和16.7%。用20种临床常用的抗菌药物对分离菌株进行药物敏感性试验,结果表明,分离菌株呈现出不同程度的耐药性,其中氨苄青霉素和四环素的耐药率最高,其次为阿莫西林。大多数为多重联合耐药;而阿米卡星、头孢噻呋和头孢噻吩的敏感率较高,其中以头孢噻呋(94.5%)最敏感。     

断奶仔猪腹泻病原菌的分离鉴定及药敏试验

为鉴定承德地区断奶仔猪腹泻病原菌并分析其耐药性,从承德地区不同养猪场采集腹泻断奶仔猪的肝脏、肛拭子、粪便等样品120份,试验采用细菌学鉴定法、K-B药敏纸片法进行细菌分离鉴定与药敏试验。结果显示,从采集的120份样品中分离得到了大肠杆菌42株、沙门菌23珠、志贺菌12株,42株大肠杆菌分离株对阿莫西林、氟苯尼考、新霉素等7种药物耐药率在59.5%以上,对头孢噻呋、头孢曲松、恩诺沙星等4种药物耐药率为14.3%～31.0%;23株沙门菌分离株对阿莫西林、氟苯尼考、新霉素等8种药物的耐药率在47.8%以上,对头孢噻呋、头孢曲松、恩诺沙星3种药物的耐药率为13.1%～34.8%;12株志贺菌分离株对阿莫西林、氟苯尼考、新霉素等7种药物的耐药率在50.0%以上,对头孢噻呋、头孢曲松、恩诺沙星等4种药物耐药率为16.7%～33.3%。研究为该地区断奶仔猪细菌性腹泻的防控提供理论基础。