食菌孢子滤纸保藏法

目前食用菌菌种的保藏材料都取用其菌丝体。保藏方法大致有三种:一为菌丝体的继代培养;二为菌丝体的液体石蜡保藏;三为菌丝体的液氮低温保藏。继代培养法使用方便,但传代次数多了,菌种易衰老退化;液体石蜡和液氮低温保藏法,保藏时间长,但不易寄运。用液体石蜡保藏的菌种也易遭霉菌污染;用液氮低温法保藏又需特殊的液氮冰箱。本试验则以食用菌的担孢子为保藏材料,以滤纸条为保藏基质,即让食用菌孢子保藏在滤纸条上,并密封于试管内。此法保藏时间长,制备简便,又易贮运。     

黑木耳菌种保藏方法的比较研究

比较研究了保护剂、预处理等因素对液氮冷冻保藏黑木耳菌种的影响,同时比较了液氮冷冻保藏、低温冰箱冷冻保藏、普通冰箱保藏和石蜡油覆盖保藏等4种方法对黑木耳菌种性状的影响。结果表明:以甘油为保护剂,按照1℃.min-1的降温速度降至-50℃后进行液氮冷冻保藏是较好的保藏方法。     

双孢蘑菇菌种液氮保种方法的研究

主要进行双孢蘑菇菌种液氮保藏中菌丝的培养基质、不同冷冻保护剂、不同降温速率及菌种解冻方式等因素对菌种活力的影响研究。结果表明生长3d-5d菌龄的PDA菌丝块,以10％甘油作为冷冻保护剂及聚丙烯吸管安瓿为容器,制备的菌种保藏管在液氮罐口缓慢降温至-40％左右时,迅速浸入液氮保藏,提取的液氮保藏菌种以快速解冻方式进行复苏,双孢蘑菇菌种经过4年的液氮保藏,存活率达100％,栽培出菇的农艺性状仍保持原有菌株特性,研究建立的双孢蘑菇液氮保藏方法已成为我所蘑菇菌种长期保藏的主要方法之一。     

食用菌菌株的长期保藏方法

食用菌保藏的方法有矿油保藏、液氮超低温保藏等，适合食用菌长期保藏的方法是液氮超低温保藏，将几年来采用冷冻真空干燥保藏、液氮超低温保藏和低温冰箱冷冻保藏的食用菌菌种进行了复苏实验，液氮超低温保藏和低温冰箱冷冻保藏两种保藏方法的存活率均为100％，低温冰箱冷冻保藏可以节省资金，实用于食用菌研究和小型食用菌栽培的菌种保藏。     

蘑菇菌种的干燥保藏

以往我们采用冷藏法保藏菌种,从种菇收集到的担孢子须立即分离,获得一级纯母种又须置于冰箱(4～10℃)保藏2～3个月,再经二次传代,制成三级生产菌种。这种方法具有防止菌种传代多而老化衰退,保持菌种纯壮的作用,但它仅能保藏菌丝体(不能很好地保藏有性担孢子),且菌丝体久置冰箱极易感染杂菌,以及置于冰箱的菌丝     

木耳种质资源最佳保藏方法

以干木耳子实体为试材,采用常温、4℃、-18℃及液氮等方法对子实体进行保藏,1年后进行组织分离、孢子收集、出耳试验以及酸性蛋白酶、漆酶活性试验,研究保藏方式对木耳子实体的影响。结果表明:耳片组织分离后获得菌丝与继代保藏菌丝无拮抗现象,子实体保藏在菌落形态、菌丝生长速度、分解木屑料能力和酶活性方面均优于继代保藏效果;菌落浓度、漆酶和酸性蛋白酶活性与保藏方式相关性显著,可以作为保藏方式的评价指标,漆酶与菌丝分解木屑速度、催芽率和产量相关性显著,漆酶活性越高,菌丝分解木屑速度越快、催芽率越高、产量越高;无保护剂液氮保藏孢子萌发率最高。木耳子实体保藏简单,并能够更好地保持品种性状,其中无保护剂液氮保藏为最佳保藏方式。     

白胶塞封口保藏食用菌母种试验

食用菌菌种保藏的目的,是保持菌种原有的各种优良性状.目前食用菌菌种的保藏方法很多,一般常采用低温保藏法、液体石蜡保藏法等,这些方法各有特点.低温保藏法可作为菌种的暂时保藏,此种方法因菌种在冰箱或冷库中保藏2个月后,培养基便失水干缩,故需经常转管传代,菌种在频繁转管过程中易发生变异、污染和混淆,且工作量大,造成人力、物力的浪费.液体石蜡保藏法虽然保存期长,但转接时因石蜡油包住孢子或菌丝而影响孢子萌发和菌丝生长等.为寻找一种节约人力、物力、费用低的食用菌菌种保藏方法.笔者自1990年起进行了用白胶塞代替棉塞封口保藏食用菌母种的试验,并与其他方法进行比较,得到了令人满意的试验结果.     

活化处理双孢蘑菇液氮菌种对产量的影响

分别采用液氮和4℃冰箱保藏双孢蘑菇(Agaricus bisporus)菌种,并对液氮菌种进行活化处理,通过栽培试验比较各处理对双孢蘑菇产量的影响.结果表明,液氮法保藏双孢蘑菇菌种的产量较理想;液氮菌种经活化处理后的产量明显提高.     

不同菌种保藏方法对香菇产量的影响

分别采用液氮和4℃冰箱保藏香菇(Lentinula edodes)菌种,并通过栽培试验比较了二种保藏方法对香菇产量的影响。     

食用菌菌种冷冻保藏用保护剂的筛选

通过单因素比较试验和正交试验设计,确定适合食用菌菌种的最佳冷冻保护剂配方,通过对16种冷冻保护剂单因素保护效果的比较,以及对选定的4种保护剂的正交试验结果,可以确定食用菌菌种最佳冷冻保护剂配方为8%蔗糖,1%甘油,0.03%谷氨酸钠,10%脱脂乳。     

液态氮保藏草菇菌种简易操作法

近年来,国外采用液态氮超低温法保藏某些冷冻真空干燥法不易保藏成活的菌种而获得了满意的结果。其具体做法是:将已封口的菌种安瓿管置入慢速冻结器内,在控制速度为每分钟下降1℃的条件下,使样品冻结到-35℃,然后立即放入液氮容器中保藏。我处应用液态氮保藏草菇菌种时,由于缺少慢速冻结器,而采用一步速投法同样获得较理想的结果,克服了草菇常温保藏多次转管的缺点。     

平菇菌种的制作技术

菌种是以保藏、试验、栽培和其它用途为目的,具繁衍能力,遗传特性相对稳定的孢子、组织或菌丝体极其营养性或非营养性得栽体。平菇属木腐菌,适应性强,凡是适合木生食用菌的培养基,也都适合平菇菌丝的生长。     

不同保藏方法对金针菇“上研1号”栽培特性的影响

针对金针菇(Flammulina velutipes)菌种在保藏中难以保持遗传性能相对稳定的问题,以金针菇新品种"上研1号"为供试菌株,采用继代培养法(C)、液体石蜡法(P)、液氮法(N)和蒸馏水法(W)保藏两年后,观测活化菌丝的生长、液体菌种性能及工厂化栽培性状,比较不同保藏方法对金针菇栽培特性的影响。研究结果表明:液氮法保藏处理和继代培养保藏处理中,活化菌丝生长速度快,菌落浓白、均一;液体菌种成球度、菌球大小和密度等方面均表现优异,液体菌种终止pH在5.9～6.0之间;菌丝分支能力强,锁状联合明显且数量较多。在工厂化栽培中,液氮法保藏处理子实体整齐度好、产量高(每瓶372.67 g);液氮法和继代培养法保藏处理的A级商品菇比例相近,商品性状优良。液氮法与继代培养法保藏处理在两年内均可维持金针菇新品种的栽培特性,但液氮保藏法操作更为便捷,是保藏金针菇品种的稳定、可靠、省力的方法。     

低温保藏草菇种的研究

草菇是一种喜温性真菌。菌丝体在2～4℃冰箱内存放,一般经1～2天就会失去生活力。长期来,草菇菌种一般都是用琼脂斜面于15℃左右下保藏,由于试管内培养基容易脱水干缩,引起菌种衰老和死亡,所以每隔1～2月就得重新转管培养,随着转管次数的增多,会引起遗传性状的变化,影响菌种固有特性的保持。用液氮超低温保藏草菇菌种,虽然可以克服上述弊端,但所需设备投资大,成本高,     

白菜小孢子超低温保存及复苏后胚状体诱导

随着白菜游离小孢子培养技术的不断优化，通过诱导小孢子胚状体获得大量DH系在白菜育种等科研领域得到了广泛应用。但小孢子供体植株受生长季节、生长期等影响，无法长期持续获取高生活力白菜小孢子，成为目前阻碍白菜细胞工程相关研究顺利推进的重要问题之一。本试验利用超低温技术对10份白菜材料小孢子开展冻存复苏研究，结果表明：利用改良B5液体培养基作为冷冻保护剂，白菜小孢子生活力明显高于传统冷冻保护剂二甲基亚砜处理的白菜小孢子；小孢子-80 ℃(冰箱)和-196 ℃(液氮)冻存180 d后生活力仍保持在85%以上，且两个温度处理间差异不显著，实际应用中可选择-80 ℃冰箱冻存替代传统-196 ℃液氮冻存；利用0.5 mL冻存管保存的白菜小孢子最适复苏条件为37 ℃恒温水浴40 s，在-80 ℃冰箱冻存90 d后复苏的小孢子平均生活力达87.9%。复苏冻存30、60、90 d后易出胚材料的白菜小孢子诱导获得了胚状体及再生植株；复苏冻存180 d的白菜小孢子在高温热激诱导条件下仍可感应胁迫，表现为体积膨大，且具胚胎发生能力的小孢子能够进行细胞分裂。本试验为国内首次开展的白菜小孢子超低温冻存研究，建立了白菜...     

观察菌丝的简易方法

农业微生物菌种保藏工作者每天都要接触大量的菌种,经常观察菌种的生长情况。但观察食用菌形态不象细菌和放线菌那样,要观察那个部位的菌丝就挑那个部位来制片,而往往是要观察的部位挑不出来,特别是保藏时间较长的斜面菌种,菌丝体象棉花一样,更难挑出来制片。     

食用菌菌种保藏技术研究进展

由于食用菌菌种在生产和研究中的重要性,菌种保藏受到越来越多的重视,目前主要的保藏方法有继代培养保藏法、矿油保藏法、蒸馏水保藏法、液氮保藏法和冷冻干燥保藏法等,本文对这些保藏方法原理和研究进展进行综述.     

食用菌菌种保藏方法的研究进展

食用菌菌种是食用菌产业发展的重要基石,菌种质量直接影响着食用菌子实体的产量和品质,因此菌种保藏历来都受到食用菌生产及科研人员的重视。目前食用菌菌种保藏方法,常用的有控制温度的继代培养低温保藏法和超低温(液氮)保藏法,现已将分子生物学技术运用于菌种保藏研究,对菌种保藏方法和进展进行了综述。     

草菇菌种液态氮冷冻保藏研究

用液态氮冷冻技术保藏草菇菌种,目前在国外已有应用,但在国内研究不多。草菇对低温的忍耐度较差,菌丝在5℃下即易死亡。我们将草菇菌种经-195.8℃冷冻120天解冻复苏,仍然保持菌种     

羊肚菌菌种的分离与纯化和形态鉴定

为了获得优良的羊肚菌(Morchella sp.)菌种,对野生的羊肚菌子实体进行孢子分离和组织分离的研究。结果表明,孢子分离法优于组织分离法。对分离后的菌种进行纯化,由孢子分离得到的母种菌丝体生长茂密且旺盛。孢子分离法得到的羊肚菌菌种经过液体培养的菌丝球形态和菌丝的显微观察结果均与标准的羊肚菌菌丝球形态一致,说明由孢子分离得到的菌种纯度可靠。孢子分离法分离得到的菌种为今后羊肚菌液体培养活性物质的研究和栽培试验奠定了坚实的基础。