碱性蛋白酶水解鸡血清蛋白制备ACE抑制肽的研究

采用碱性蛋白酶水解鸡血清蛋白制备ACE抑制肽。以ACE抑制率和水解度为评价指标,研究温度、p H值、底物质量分数、酶与底物浓度比、时间对水解效果的影响。通过单因素试验对碱性蛋白酶水解鸡血清蛋白制备ACE抑制肽的工艺条件进行优化。结果表明,最优水解条件为温度50℃,p H值8.0,底物质量分数6%,酶与底物浓度比6 000 U/g,时间4 h,此时ACE抑制率和水解度分别为63.07%±0.69%和17.22%±0.31%。     

酶解鹰嘴豆蛋白制备ACE抑制肽的研究

ACE抑制肽对血压调节起重要作用,对抑制ACE活性发挥着重要作用。为开发降血压多肽,以鹰嘴豆分离蛋白为原料,在碱性蛋白酶作用下水解,选择温度、pH值、酶与底物浓度比和水解时间4个因素,以ACE抑制率为评价指标,在单因素试验基础上,采用Box-Behnken响应面分析法优化酶解鹰嘴豆分离蛋白制备ACE抑制肽的条件。结果表明,最优水解条件为:温度50℃,pH值8.0,酶底比4%,水解时间4.0 h,在此条件下,ACE抑制率可以达到58.84%,验证试验ACE抑制率为(59.01±0.58)%,与理论值相符合。     

沙海蛰ACE抑制肽制备酶解条件研究

对用碱性蛋白酶酶解新鲜沙海蜇制备ACE抑制肽的酶解条件进行研究。先后以水解度(DH)和ACE抑制率为指标,经单因素试验和正交试验得到最佳的酶解条件为酶解温度50℃,加酶量5%,酶解起始pH值9.5。采用改进的高效液相色谱法测定ACE抑制率,发现新鲜沙海蜇在以上条件下酶解7 h时所得多肽的ACE抑制率最大。所得ACE抑制肽脱盐冻干后,测定质量浓度0.5 mg/mL时ACE抑制率为54.53%。最后,通过排阻色谱法测得其平均分子量约为500 Da。     

碱性蛋白酶水解蚕蛹蛋白质工艺的研究

经5种蛋白酶比较试验的筛选,采用碱性蛋白酶进行水解蚕蛹蛋白的研究。在单因素试验的基础上,以水解度为考察指标,通过正交试验优化水解工艺条件,研究温度、底物浓度、时间、加酶量和pH值对蚕蛹蛋白质水解效果的影响。结果表明,碱性蛋白酶水解蚕蛹蛋白质的最优工艺条件为:处理温度55℃,底物浓度3%,时间6 h,加酶量3%,pH 9.5,蚕蛹蛋白的水解度可达22.91%左右。     

鹰嘴豆分离蛋白的酶解工艺研究

通过单因素实验和正交实验,得出碱性蛋白酶水解鹰嘴豆分离蛋白的最佳反应条件是：pH8.5、反应温度55℃、底物浓度[S] 2%、酶与底物浓度之比[E]/[S]2%,在此条件下,蛋白水解率可以达到27.86%;碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶在各自最佳反应条件下（碱性蛋白酶pH8.5、反应温度55℃、[S]2%、[E]/[S]2%,木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶均为pH7.2、反应温度55℃、[S]2%、[E]/[S]2%）依次水解鹰嘴豆分离蛋白,反应结束时,蛋白水解度可达到34.64%。     

牡蛎蛋白酶解液对α-葡萄糖苷酶的抑制作用研究

以太平洋牡蛎为原料,研究了牡蛎蛋白酶解液对α-葡萄糖苷酶的抑制作用,以期为新型α-葡萄糖苷酶抑制剂的开发提供基础性研究数据。试验结果表明,胃蛋白酶、胰蛋白酶、菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶及Alcalase酶6种蛋白酶解液中,菠萝蛋白酶与Alcalase酶酶解液对α-葡萄糖苷酶的抑制率最高,分别为37.53%和35.59%,与其他处理差异达显著水平(p<0.05)。采用正交试验对这2种酶的酶解条件进行优化,结果显示,菠萝蛋白酶在50℃,pH值6.0,料水比1∶4,加酶量2 400 U/g,酶解时间2 h时对α-葡萄糖苷酶的抑制率最高;Alcalase酶在温度50℃,pH值8.5,料水比1∶4,加酶量1 800 U/g,酶解时间2 h的条件下对α-葡萄糖苷酶的抑制率最高。     

酶对猪血蛋白水解度影响的研究

对4种蛋白酶水解能力的比较得出,水解能力最强的是碱性蛋白酶。通过单因素试验和正交试验,考察了各因素对猪血水解的综合影响。在碱性蛋白酶的最适温度和最适pH值下,对水解度影响最大的因素是底物质量分数,其次是酶质量浓度,最后是水解时间。利用直观分析可以得到水解猪血蛋白质的最佳工艺条件为:底物质量分数为4%,酶质量浓度为8000U/g,水解时间为8h,水解度大小为34.05%。     

碱性蛋白酶Alcalase水解杏仁蛋白制备ACE抑制肽

采用Alcalase蛋白酶水解杏仁蛋白,以水解度(DH)及水解产物对血管紧张素转化酶(ACE)的抑制率为指标进行酶解工艺优化。结果表明,较大活性的ACE抑制肽的最佳水解条件为:pH值7.0,温度50℃,酶底比4%,底物质量分数为2%。该条件下经60min水解,其水解度为12.23%,得到ACE抑制肽的IC50值为0.85mg/mL。     

杂色蛤酶解制备ACE抑制肽的工艺优化

杂色蛤酶解产物对ACE活性的抑制作用采用马尿酸法测定。以ACE抑制率和水解度为指标,通过单酶筛选,得出对杂色蛤肉酶解效果最佳的酶是木瓜蛋白酶。通过单因素试验和正交试验,确定木瓜蛋白酶酶解杂色蛤肉制备ACE抑制肽的最优工艺为料液比1∶10,加酶量1.5%,酶解温度45℃,p H值6.0,酶解时间1.5 h。酶解产物(10 mg/m L)对ACE的抑制率为86.7%,水解度为27.75%。酶解液经超滤,小于6 k Da部分(2 mg/m L)抑制率最高为52.3%,IC50为1.738 mg/m L。     

酶法水解牦牛血制备蛋白多肽粉的技术研究

摘 要：[目的][方法]利用中性蛋白酶将牦牛血红蛋白水解,探讨各因素对中性蛋白酶水解牦牛血红蛋白的影响以及水解度的关系,并对酶解液进行了活性炭脱色效果的研究。通过单因素和正交试验（L16(45)）,[结果]确定了中性蛋白酶水解血红蛋白的适宜条件为 pH 7.0,温度 45℃,酶底物浓度比 4000 U/g 蛋白质液,底物浓度 5%,酶解时间 7 h。通过正交试验,确定酶解液的最佳脱色工艺条件为活性炭用量 4%,脱色温度 75℃,pH 5.0,脱色时间 60 min。     

苜蓿叶蛋白ACE抑制肽的制备

以苜蓿叶为原料,采用直接加热法提取苜蓿叶蛋白,分别用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶、风味蛋白酶等6种酶进行酶解,获得酶解产物。通过对酶解温度、酶解pH值、底物质量分数来分析酶解液的ACE抑制率。研究发现,木瓜蛋白酶酶解苜蓿叶蛋白的ACE抑制能力最高,酶解温度在55℃时抑制率为83.26%±0.61%,酶解pH值为7.5时ACE抑制率为64.87%±0.49%,底物质量分数为4%时ACE抑制率为81.18%±0.04%。因此,确定木瓜蛋白酶为制备苜蓿ACE抑制肽的最佳用酶。     

鱿鱼内脏制备功能性短肽的初步研究

为了选取水解鱿鱼内脏效果较优的蛋白酶,并对鱿鱼内脏的水解液进行分析,测定水解液的分子量分布范围,并对洗脱液的DPPH自由基清除能力进行分析。试验选取碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶、动物蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶对鱿鱼内脏进行水解,通过测定水解液的总氮含量、氨基态氮含量,比较各水解液的水解度、氮收率以及水解得率。经大孔树脂对胰蛋白酶水解液进行水、20%、60%、80%甲醇-水梯度洗脱,经液相质谱(LC-MS)进行分析。结果发现水解液短肽分子量范围在100~2400,其中以60%梯度洗脱的水解液分子量分布范围较为集中,且以分子量在200左右的化合物为主,对各洗脱梯度水解液的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除能力分析可知60%梯度洗脱水解液DPPH清除能力为40.21%。胰蛋白酶为水解鱿鱼内脏较优的蛋白酶,且60%甲醇-水为最优洗脱浓度。     

鲅鱼加工副产物水解液中ACE抑制肽分离纯化研究

以鲅鱼加工副产物为原料,经脱脂后进行碱性蛋白酶酶解,分离纯化具有ACE抑制活性的小肽。水解液经超滤、离子交换层析、凝胶过滤层析和反相高效液相色谱等逐级纯化,得到较纯的ACE抑制肽。结果表明,分子量小于3 kDa的超滤组分IV具有最高的ACE抑制活性,达45.6%;超滤高活性组分进一步经DEAE-Sepharodse FF阴离子交换层析分离,得到3个组分,其中组分A2活性最高,ACE的抑制率达50.3%;A2组分继而经Sephacryl S-100HR凝胶过滤层析分离,得到2个组分,其中B2组分ACE抑制率达83.4%;最后,B2组分经反相高效液相色谱进行分离,得到活性更高的C2组分,为下一步氨基酸序列测定提供了基础。     

双酶法水解罗非鱼下脚料制备降血糖肽的工艺研究

以水解度和α-葡萄糖苷酶抑制率为评价指标,确定双酶复合水解罗非鱼下脚料的方案,并通过单因素试验和正交试验进行优化,最后得到最适酶解工艺参数为先在碱性蛋白酶在温度50℃,加酶量10000 U/g,pH值9.5,底物质量分数6%条件下水解;再在胰蛋白酶在温度37℃,加酶量10000 U/g,pH值8条件下水解100 min。此工艺条件下罗非鱼下脚料水解度、水解产物的α-葡萄糖苷酶抑制率分别为48.26%和41.46%。     

Protamex(R)酶解玉米蛋白质制备生物活性玉米肽的研究

利用Protamex(R)蛋白酶控制玉米蛋白水解,制备有利于消化吸收,具有降血压和抗氧化等特定生理功能的玉米肽.适度变性的玉米蛋白易被Protamex(R)蛋白酶水解,热处理的时间和温度均影响玉米蛋白的变性程度,经温度85℃热处理60 min的玉米蛋白的水解度最大.相同的水解时间,在pH值为9.0,温度60℃时,该酶对变性玉米蛋白的水解度最大,在此条件下酶解60 min,消耗NaOH(5 mol/L)16.3 mL,玉米的水解度为32.5%,肽的得率为51.2%.SephadexG-25对玉米蛋白水解产物的分离结果表明,Protamex(R)蛋白酶水解玉米蛋白可生成分子量不同的5个组分.     

多肽的酶法制备

以羊脾脏为原料,用菠萝蛋白酶和胰蛋白酶双酶水解,选择最佳水解条件。结果表明,温度60℃,pH值7.0,加酶量5.0%,时间5.0h为最佳水解条件。     

双酶法水解米糠蛋白工艺优化的研究

以米糠为原料,经脱脂后,采用碱性蛋白酶和中性蛋白酶双酶法水解米糠蛋白。在单因素试验的基础上,通过正交试验研究温度、pH、米糠质量分数、两种酶的比例及水解时间比对米糠蛋白水解度的影响。结果表明,影响米糠蛋白水解度的因素主次顺序为:米糠质量分数温度时间比pH酶比;优化的双酶法水解米糠蛋白的工艺条件为:温度45℃,米糠质量分数3%,碱性蛋白酶处理时pH为9.5、中性蛋白酶处理时pH为6.5,时间比3︰1(即碱性蛋白酶4.5 h,中性蛋白酶1.5 h),加酶总量3%时的酶比(碱性蛋白酶︰中性蛋白酶)2︰1。在此工艺条件下,米糠蛋白的水解度达到56.28%。     

玉米抗氧化肽制备及其对血管紧张素转化酶的抑制作用

以玉米蛋白粉为原料,采用微波预处理协同碱性蛋白酶水解制备抗氧化肽,并研究其对血管紧张素转化酶(ACE)的抑制效果。通过单因素试验,确定出最佳的微波预处理条件为:微波功率400 W、微波时间2.0 min,通过中心组合设计及响应面分析确定了最佳水解条件为:碱性蛋白酶添加量9 000 U/g、酶解时间2.5 h、酶解温度45℃、酶解p H 8.9,在此条件下,玉米蛋白粉平均水解度为14.13%,同时得到的玉米抗氧化肽对ACE有一定的抑制作用,其半抑制浓度(IC50)为4.99 mg/m L。     

碱性蛋白酶水解玉米蛋白粉的研究

比较了4种不同的蛋白酶对玉米蛋白粉的水解情况,分析确定了碱性蛋白酶为最佳水解用酶;通过正交试验确定最佳水解工艺参数为:温度80℃,加酶量2.0%,作用时间50min,α-氨基酸质量浓度可达1927.53mg/L。     

低值水产品蛋白资源酶解产物的抗氧化性分析和评价

为分析评价水产品蛋白酶解产物活性特性及合适水解蛋白酶类的选择。采用不同的商品化蛋白酶和枯草蛋白酶BPN对市场上常见的经济鱼类白鲢和彩云雕蛋白进行酶解,测定各种酶在水解过程中的水解度,并对酶解产物的抗氧化活性进行了比较分析。结果表明：蛋白酶在水解反应的前20 min内水解度迅速增加,20~120 min之间逐渐达到平衡。复合蛋白酶和水解蛋白酶具有较强的水解能力,其中水解蛋白酶对彩云雕2 h的水解产物最高可达15.92%。白鲢鱼枯草蛋白酶水解液的抗氧化活性最好,其DPPH清除能力为87.11%。不同蛋白酶水解不同的水产品蛋白产生的酶解产物活性肽成分具有明显的差异。