模拟干旱胁迫对发状念珠藻抗氧化酶系统和渗透调节物质的影响

[目的]探讨模拟干旱胁迫对发状念珠藻抗氧化酶系统和渗透调节物质的影响.[方法]以发状念珠藻细胞为实验材料,用2;、4;、6;、8;、10;浓度的PEG-6000模拟干旱胁迫,测定发状念珠藻氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)活性及胞外多糖(EPS)和脯氨酸(Pro)含量的变化.[结果]与对照处理相比,随着干旱胁迫程度的增加,发状念珠藻细胞的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)活性均呈现先上升后下降的趋势,细胞胞外多糖(EPS)和脯氨酸(Pro)含量呈增加趋势,但在高浓度的胁迫下,脯氨酸的含量呈现下降趋势.[结论]发状念珠藻在中度干旱胁迫下能够激活自身的抗氧化酶类以提高藻细胞的抗氧化能力,从而能消除或减轻活性氧毒害,而在重度干旱胁迫下,酶活降低,标志活性氧清除机制受到破坏,抗氧化能力降低.在干旱胁迫下,作为渗透调节物质的胞外多糖和脯氨酸表现出缓解干旱胁迫的效果,累积的脯氨酸和胞外多糖能够维持细胞内渗透平衡,保证细胞内正常的物质代谢,从而提高发状念珠藻对干旱胁迫的适应性.     

罗汉果茎尖超低温保存后再生植株的遗传稳定性研究

[目的]检测罗汉果茎尖玻璃化法超低温保存后再生植株的遗传稳定性。[方法]对罗汉果玻璃化法超低温保存前后的植株进行过氧化物酶（POD）和酯酶（EST）同工酶酶谱分析、染色体计数和随机扩增多态性DNA（RAPD）分子标记。[结果]超低温保存前后,POD同工酶图谱上均显示9条酶带,且迁移率一致;EST同工酶图谱上均显示8条酶带,迁移率也一致;POD和EST同工酶谱、染色体数目和RAPD谱带均未发现差异。[结论]玻璃化法超低温保存罗汉果种质资源安全、稳定。     

金银花的过氧化物酶和淀粉酶同工酶遗传多样性研究

[目的]探讨不同产区金银花的亲缘关系。[方法]采用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳技术,利用过氧化物(POD)同工酶和淀粉酶(AS)同工酶对10个地区11个金银花样品的遗传多样性进行分析。[结果]金银花过氧化物酶同工酶谱带形成2个电泳区域,共有3个酶位点,Rf值分别为0.324、0.671和0.863。其淀粉酶同工酶谱也形成2个电泳区域,共有4个酶位点,Rf值分别为0.125、0.306、0.67和0.792。不同产区金银花的过氧化物酶和淀粉酶具有较丰富的多态性,说明金银花不同居群在遗传本质上是有区别的。聚类分析表明10个产区的11个金银花样品可聚为3个类群。[结论]不同产区金银花的亲缘关系与其遗传本质和地理位置有关。     

碳离子辐照对甜高粱幼苗保护酶同工酶表达的影响

[目的]分析碳离子辐照对甜高粱幼苗叶片中保护酶同工酶的影响。[方法]以甜高粱品种KFJT-CK为对照,以经碳离子辐照选育的早熟突变株KFJT-1为试材,采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳法(PAGE)对幼苗叶片中的过氧化物酶(POD)、酯酶(EST)和超氧化物歧化酶(SOD)同工酶谱进行了分析。[结果]突变后代KFJT-1与对照KFJT-CK相比,POD同工酶酶谱基本相同,说明碳离子辐照并未使甜高粱POD同工酶的表达发生明显的变化;SOD同工酶酶谱的条带数相同,只是条带的颜色深浅有所差异,说明碳离子辐照仅使SOD同工酶的表达量有所差异;EST同工酶增加了1条新谱带,说明碳离子束辐照使甜高粱EST的表达发生了变异。[结论]碳离子辐照对甜高粱幼苗叶片中POD的影响很小,对SOD有较微弱的作用,而对EST的同工酶谱有很大的影响。     

甘蓝一代杂种秦甘60及其双亲的同工酶电泳分析

应用同工酶电泳技术,分析了甘蓝一代杂种秦甘60及其亲本叶片中的过氧化物酶(POD)和酯酶同工酶(EST)图谱。结果表明,甘蓝秦甘60(F1)及其亲本在苗期的POD酶谱和EST酶谱表现相一致,都表现为单一亲本型,具有母本的完整酶带。对秦甘60(F1)杂交率的鉴定在其反交种中是可以利用POD酶Rf0.227、0.273酶带或EST酶Rf0.778酶带将其与父本自交种区分开,但在正交种中与母本自交种不易区别。     

黄瓜和西瓜尖孢镰刀菌同工酶异质性分析

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳对同一寄主尖孢镰刀菌进行了同工酶分析。结果表明,黄瓜不同部位分离的尖孢镰刀菌过氧化物酶同工酶酶谱是相同的,均为 3条过氧化物酶(POD)同工酶酶带,迁移率分别为 0.04、0.20和 0.33;而酯酶 (EST)同工酶酶谱存在较大的差异。西瓜尖孢镰刀菌都具有 4条POD同工酶酶带,电泳迁移率分别为 0.048、0.190、0.286和0.381,而EST同工酶条带很少,且存在较大差异。     

蕨类植物同工酶的遗传多样性分析

[目的]分析26种蕨类植物同工酶的遗传多样性。[方法]分析26种蕨类植物的POD同工酶、SOD同工酶、CAT同工酶和EST同工酶的酶谱,并对其中有条带的17种材料进行聚类分析。[结果]在26种蕨类植物中,有17种在同工酶谱带上表现出丰富的遗传多样性,但其聚类分析结果与形态学分类结果不完全吻合。[结论]同工酶谱为研究蕨类植物的遗传多样性提供了好的研究方法,但不支持形态学分类。     

花脸香蘑酯酶同工酶分析

[目的]对花脸香蘑酯酶同工酶进行分析,以期为花脸香蘑酶谱分析奠定基础。[方法]采用聚丙酰胺凝胶电泳方法,对7种不同提取液提取的酯酶进行分析,探讨不同提取液对酯酶同工酶提取效果的影响,找出最优提取液,并分析不同培养方法和组织对同工酶的影响。[结果]7种不同提取液提取的酯酶酶带保持一致,但提取效果各异,用pH 8.0、0.1 mol/L Tris-HCl缓冲液提取时效果较好。液体菌丝体、试管种、驯化花脸香蘑菌盖酶带均有5条;野生花脸香蘑菌盖和菌柄只有3条酯酶同工酶谱带;野生花脸香蘑菌盖与驯化花脸香蘑菌盖的酯酶谱带条数不同。因此在选用酯酶同工酶作为遗传指标,用作花脸香蘑液体菌种鉴定时,必须注意保持培养基、培养条件以及取材部位的一致性。[结论]该研究结果为花脸香蘑酶谱分析奠定了基础。     

刺儿菜性别连锁的同工酶标记分析

[目的]利用刺儿菜进行同工酶分析,确定适合作为遗传标记的同工酶类型。[方法]采用聚丙烯酰胺不连续垂直平板电泳(PAGE)技术,对刺儿菜雌雄株花和叶片中过氧化物酶(POD),苹果酸脱氢酶(MDH),苹果酸酶(ME)及酯酶同工酶(EST)的差异进行比较分析。[结果]POD、MDH及EST同工酶在刺儿菜雌雄株的花和叶中存在明显的性别差异。在花和叶片中,POD同工酶均发现了性别特异的酶带,MDH同工酶仅发现在花中具有1条雄性特异带,苹果酸酶同工酶(ME)没有明显的性别差异。除花中的酯酶酶谱外,两种同工酶在同一性别的不同个体间,酶谱无明显差异。[结论]同一种酶在刺儿菜叶片和花中的雌雄株酶谱有明显差异。     

同工酶分析在三种杨树对光肩星天牛抗性上的应用

该文从杨树 -光肩星天牛的协同进化关系出发 ,应用同工酶分析法对毛白杨、I 69杨和小美旱杨进行了生态抗虫性的研究 .根据聚丙烯酰胺凝胶电泳方法对对照树的酶谱分析表明 ,3种杨树的过氧化物酶 (POD)、多酚氧化酶 (PPO)和酯酶 (EST)各有其特有的酶谱 ,毛白杨POD具有特异性条带 ;根据比色方法对酶活性分析得毛白杨POD含量最高 ,活性最强 ,通过方差分析和多重比较得 ,毛白杨与其它两种杨树之间的POD酶差异极显著 .随后又对危害树进行了分析 ,测得毛白杨POD增长率最大 (为 17% ) .由此作者认为POD ,PPO ,EST和蛋白质 (PRO)都与抗虫性有一定的关系 ,其中POD与抗虫性的关系最大 ,可能由抗虫基因所控制 .     

低叶绿素b水稻突变体的抗氧化酶系统研究

[目的]研究低叶绿素b水稻突变体抗氧化酶系统在缓解光氧化伤害中的作用。[方法]以低叶绿素b水稻突变体和野生型为材料,对其叶绿体中过氧化氢(H2O2)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)的活性和同工酶谱进行了比较。[结果]与野生型相比,突变体叶片细胞及叶绿体中抗氧化酶SOD、POD和CAT的同工酶种类相对较多,酶活性相对较高;强光条件下,突变体叶绿体H2O2的含量低于野生型叶绿体。[结论]较强的内源活性氧清除系统减轻了强光下过剩光能对光合膜的光氧化伤害,是该突变体PSII具有较高稳定性的重要原因。     

四川盆地麦冬及其近缘植物的同工酶分析

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,作过氧化物(POD)同工酶、酯酶(EST)同工酶分析,并使用SPSS 17.0软件对谱带作相关及聚类分析,以探讨四川盆地不同产地25份麦冬及其近缘植物野生资源间的遗传多样性,为麦冬分类、鉴定和种质资源保护提供生化依据。结果显示,不同产地麦冬及其近缘植物样品的POD同工酶有10种酶谱类型,每种类型具有6~11条酶带;EST同工酶有15种酶谱类型,每种类型有4~8条酶带;同工酶系统聚类分析结果将25个样品被分为4类,并与染色体核型具有同一性。四川盆地麦冬种质资源,具有丰富的遗传多样性,POD、EST同工酶分析可以作为麦冬及其近缘植物种质资源鉴定的重要参考依据,并可将其加以区分,结合形态学、细胞学等经典理论研究,可判断其遗传差异及亲缘关系。     

三种不同栽培类型白芷同工酶分析

[目的]对3种不同栽培类型的白芷进行同工酶分析。[方法]通过垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对选育的3种不同类型(表型)的白芷进行过氧化物酶(POD)和酯酶(EST)同工酶分析,并根据分析结果探讨其亲缘关系。[结果]过氧化物酶共得到15条谱带,其中7条是3个类型白芷的共有特征谱带;酯酶同工酶中得到12条谱带,其中6条是共有的特征谱带;聚类分析表明,3种不同类型的白芷间差异较大。[结论]该研究为白芷优良品种的选育提供了可靠且快速的生理生化选择指标。     

睡莲不同器官和不同生长阶段的过氧化物酶和酯酶同工酶比较

利用聚丙烯酰胺垂直板电泳技术对3个睡莲Nymphaea品种‘彼得’‘Peter Slocum’,‘玛珊姑娘’‘Masaniello’和‘得克萨斯’‘Texas Dawn’不同器官（未展开的幼叶、展开的幼叶、老叶、花瓣、花蕾、叶柄）和未展开的幼叶在营养生长阶段和生殖生长阶段的过氧化物酶（POD）和酯酶（EST）同工酶进行了研究。结果表明：①3个品种共有12种过氧化物酶酶带,6种酯酶酶带。②睡莲的过氧化物酶和酯酶具有组织特异性,其中未展开嫩叶和展开嫩叶的酶带最多,叶柄和花蕾次之,花瓣和老叶最少。未展开幼叶为较适合用于睡莲同工酶分析。③与生殖生长阶段相比,3个睡莲品种未展开幼叶在营养生长阶段的酯酶表达量更大,条带更多;而过氧化物酶同工酶表达量则是生殖生长阶段的表达量大,但3个品种的酶条带变化不一致,其中‘彼得’和‘玛珊姑娘’在生殖生长阶段的过氧化物酶同工酶阶段条带多‘得克萨斯’则相反。图4表3参15     

水稻同核异质体幼穗分化过程中同工酶的变化分析

[目的]探索水稻幼穗分化过程中同工酶的变化与胞质雄性不育的关系。[方法]以冈型胞质雄性不育系G46A及其保持系G46B为材料,分别取处于第一苞分化期、一次枝梗原基分化期、二次枝梗原基分化期、颖花原基分化期、雌雄蕊分化期、花粉母细胞形成期、减数分裂期、单核期、双核期、三核期的叶片及处于花粉母细胞形成期、减数分裂期、单核期、双核期、三核期的幼穗进行酯酶同工酶(EST)、细胞色素氧化酶同工酶(COD)、过氧化物酶同工酶(POD)电泳分析。[结果]在叶片中,不育系与保持系相比,COD、POD酶谱除在染色深度上存在差异外,在谱带数目及分布未见差异;EST酶带的分布及数目从花粉母细胞形成期开始出现差异,并持续到三核期,且不育系酶带数目及活性要低于保持系。在幼穗中,不育系与保持系相比,EST酶谱带分布在花粉母细胞形成期出现差异,单核期更加明显,COD、POD酶谱带分布、强度、数目差异均从单核期呈现;不育系中3种同工酶带数目均低于保持系,且随着发育时期的深入表现的更明显。这与细胞学观察G46A单核期孢子体败育的结果相吻合。[结论]可以将细胞色素氧化酶同工酶及过氧化物酶同工酶特征酶带的缺失作为胞质雄性不育系败育的生理生化指标。     

宝巾(Bougainvillea spp.)种质资源同工酶的遗传多样性分析

[目的]分析深圳本地12种宝巾种质资源的遗传多样性。[方法]利用聚丙烯酰胺凝胶电泳法研究宝巾种质资源过氧化物同工酶(POD)和酯酶同工酶(EST)的遗传多样性,并对统计结果进行聚类分析。[结果]各宝巾种质资源间有丰富的遗传多样性,在相似系数为0.63水平上可以聚为2大类。[结论]同工酶的特征谱带应用于品种鉴定是可行的,在一定程度上明确了各宝巾品种的亲缘关系。     

发菜多糖清除自由基活性的研究

[目的]为发菜多糖的药物和食品开发提供科学依据。[方法]采用分光光度法研究发菜多糖对自由基的清除作用。[结果]发菜胞外多糖和荚膜多糖对DPPH自由基均具有一定的清除能力,当多糖加入量为312μg时,胞外多糖对DPPH自由基的清除率(12.8%)高于荚膜多糖(11.2%)。发菜胞外多糖对羟自由基的清除效果较明显,在试验浓度范围内荚膜多糖对羟自由基的最大清除率为37.7%。发菜胞外多糖和荚膜多糖对超氧自由基的清除效果均较明显,当多糖浓度为125μg/ml时,胞外多糖对超氧自由基的清除率(42.6%)略高于荚膜多糖(41.5%)。[结论]发菜胞外多糖与荚膜多糖对DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基都有清除能力,且在一定浓度范围内,其清除效果与多糖浓度呈正相关。胞外多糖的作用效果强于荚膜多糖。