怀黄菊微滴玻璃化超低温保存再生植株的生理和同工酶分析

为了验证前期建立的微滴玻璃化法超低温保存技术是怀黄菊(Chrysanthemum morifolium Ramat.‘Huaihuang’)种质资源保存的一种有效方法,对微滴玻璃化法超低温保存后怀黄菊再生植株叶片的膜脂过氧化相关指标及过氧化物酶(POD)和超氧化物歧化酶(SOD)同工酶进行了分析。结果表明:与常温保存植株相比,供试怀黄菊再生植株叶片的相对电导率、超氧阴离子(O2·—)和丙二醛(MDA)含量均显著降低,保护酶系统除了POD活性稍有增强外,SOD、过氧化氢酶(CAT)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)和谷胱甘肽还原酶(GR)活性均显著增强;保存后再生植株叶片中SOD和POD同工酶的条带数目没有改变,但有些谱带的亮度增强。研究结果不仅从生理水平验证了怀黄菊经微滴玻璃化超低温保存后的再生植株增强了抗膜脂过氧化的能力,而且从POD、SOD同工酶水平验证了其遗传稳定性的保持,从而说明微滴玻璃化法超低温保存技术是保存怀黄菊种质资源的理想方法。     

黄瓜和西瓜尖孢镰刀菌同工酶异质性分析

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳对同一寄主尖孢镰刀菌进行了同工酶分析。结果表明,黄瓜不同部位分离的尖孢镰刀菌过氧化物酶同工酶酶谱是相同的,均为 3条过氧化物酶(POD)同工酶酶带,迁移率分别为 0.04、0.20和 0.33;而酯酶 (EST)同工酶酶谱存在较大的差异。西瓜尖孢镰刀菌都具有 4条POD同工酶酶带,电泳迁移率分别为 0.048、0.190、0.286和0.381,而EST同工酶条带很少,且存在较大差异。     

刺儿菜性别连锁的同工酶标记分析

[目的]利用刺儿菜进行同工酶分析,确定适合作为遗传标记的同工酶类型。[方法]采用聚丙烯酰胺不连续垂直平板电泳(PAGE)技术,对刺儿菜雌雄株花和叶片中过氧化物酶(POD),苹果酸脱氢酶(MDH),苹果酸酶(ME)及酯酶同工酶(EST)的差异进行比较分析。[结果]POD、MDH及EST同工酶在刺儿菜雌雄株的花和叶中存在明显的性别差异。在花和叶片中,POD同工酶均发现了性别特异的酶带,MDH同工酶仅发现在花中具有1条雄性特异带,苹果酸酶同工酶(ME)没有明显的性别差异。除花中的酯酶酶谱外,两种同工酶在同一性别的不同个体间,酶谱无明显差异。[结论]同一种酶在刺儿菜叶片和花中的雌雄株酶谱有明显差异。     

碳离子辐照对甜高粱幼苗保护酶同工酶表达的影响

[目的]分析碳离子辐照对甜高粱幼苗叶片中保护酶同工酶的影响。[方法]以甜高粱品种KFJT-CK为对照,以经碳离子辐照选育的早熟突变株KFJT-1为试材,采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳法(PAGE)对幼苗叶片中的过氧化物酶(POD)、酯酶(EST)和超氧化物歧化酶(SOD)同工酶谱进行了分析。[结果]突变后代KFJT-1与对照KFJT-CK相比,POD同工酶酶谱基本相同,说明碳离子辐照并未使甜高粱POD同工酶的表达发生明显的变化;SOD同工酶酶谱的条带数相同,只是条带的颜色深浅有所差异,说明碳离子辐照仅使SOD同工酶的表达量有所差异;EST同工酶增加了1条新谱带,说明碳离子束辐照使甜高粱EST的表达发生了变异。[结论]碳离子辐照对甜高粱幼苗叶片中POD的影响很小,对SOD有较微弱的作用,而对EST的同工酶谱有很大的影响。     

8种大白菜过氧化物酶同工酶分析

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对8个大白菜品种的过氧化物酶（POD）同工酶进行分析。结果表明,8个品种的POD同工酶酶谱在酶带教、迁移率、酶量（酶带宽窄）及酶活性（酶带深浅）等方面均存在相似性,但也有一定的差异。依酶谱带特征初步将8个品种进行分类,并对其亲缘关系进行了分析。     

杭白芍过氧化物酶同工酶及芍药苷HPLC图谱分析

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离杭白芍的过氧化物酶(POD)同工酶,经活性染色后显示:杭白芍13个品系的POD同工酶谱带数为2～5条,相对迁移率分布在0.567～0.685之间,根据酶谱带数和相对迁移率可归为3个类型.高压液相色谱(HPLC)法测定结果表明:杭白芍以芍药苷为主,仅含少量的芍药内酯苷,并且未出现氧化芍药苷的吸收峰;不同炮制方法加工的杭白芍样品的芍药苷含量存在差异,但芍药苷HPLC图谱基本相同.     

杏树被中华微蛾为害后POD酶谱·酶活性的研究

[目的]为今后中华微蛾的防治提供一定的理论依据。[方法]采用愈创木酚法和聚丙烯酰胺凝胶电泳法。测定中华微蛾为害杏树前后新梢、果实、叶片、枝条中的过氧化物酶活性,比较同工酶酶谱。[结果]为害前后,杏树过氧化物酶同工酶谱在酶带数、迁移率、酶量及酶活性等方面均存在相似性,但有一定的差异。[结论]为害前后,杏树过氧化物酶酶谱发生一定的变化,酶活性降低。     

发状念珠藻POD和EST同工酶研究

[目的]通过分析野生的和液体培养的发状念珠藻的过氧化物酶（POD）和酯酶（EST）同工酶,了解其在遗传物质表达和生理代谢方面存在的差异。[方法]采用聚丙烯酰胺垂直电泳法对野生的和液体培养的发状念珠藻细胞的POD和EST同工酶进行分析与比较。[结果]POD同工酶谱分析表明,野生发状念珠藻细胞有4条带,其Rf值分别为0.400、0.709、0.764和0.929;液体培养的发状念珠藻细胞只有2条带,其Rf值分别为0.736和0.929。EST同工酶谱分析表明,野生发状念珠藻细胞有2条带,其Rf值为0.397和0.559;液体培养的发状念珠藻细胞有3条带,其Rf值分别为0.296、0.397和0.458。[结论]野生的与液体培养的发状念珠藻细胞在POD和EST电泳图谱上存在一定差异,以野生发状念珠藻的POD同工酶酶谱带数多,酶活性强。     

超重力处理对绿豆EST、POD和SOD同工酶的影响

采用垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,研究了绿豆在不同超重力处理下的EST同工酶、POD同工酶和SOD同工酶的变化情况。结果表明,在不同超重力处理条件下,绿豆的EST同工酶酶带数和活性变化较明显,增加了2条补偿性酶带,缺失了1条活性酶带,而POD、SOD同工酶超重力处理与对照无明显变化。只是萌发过的种子与干种子相比EST同工酶1条弱带增强;POD同工酶活性增强;SOD同工酶活性减弱。通过以上同工酶分析,证明超重力处理引起绿豆同工酶结构和活性的改变。     

胡杨异形叶CYT和EST同工酶特征的初步研究

以胡杨不同发育阶段植株(五种树冠类型)的不同冠层异形叶为材料,调查同一单株上不同冠层同一节位叶片的叶形指数,测定其细胞色素氧化酶同工酶酶谱(CYT)和酯酶(EST)同工酶酶谱。探讨不同发育阶段胡杨植株叶形的变化和CYT、EST同工酶酶谱间的关系。结果表明:(1)不同发育阶段的胡杨植株都表现出叶形指数随冠层的升高而减小;(2)同一株不同冠层叶片的CYT同工酶酶谱带型基本一致,但各冠层叶片间酶谱带的表达量上存在细小差异。不同发育阶段植株CYT同工酶在质(酶带数目和迁移率)和量(酶的活性)的表达上各不相同,表现为随发育进程的推进,一些条带的表达或不表达;(3)EST同工酶的质(酶带数目和迁移率)和量(酶的活性)的表达在同一株不同冠层及不同发育阶段的胡杨叶片中均有差异。     

罗汉果农青2号移栽生物学特性及适应性研究

[目的]探讨罗汉果农青2号在引种地的生物学特性和适应性。[方法]将罗汉果农青2号组培苗在湘西地区进行种植,观察其生物学特性,探讨其适应性。[结果]罗汉果农青2号全年生育期220 d左右,整个年生育过程大致可分为幼苗期、开花结果期和枯萎期;雌株于8月上旬开花,花期长达110 d左右,但有效授粉期仅30 d左右;果实于11月上旬成熟,产果数为194 791.5个/hm2,大中果率达73.4%,其中丰产园大中果率为85.0%以上;甜苷V和可溶性总糖含量与广西原产地果实相近。[结论]在适时定植、修剪、授粉等技术措施及合理的肥水管理条件下,在湖南湘西中低海拔地区种植＂农青2号＂罗汉果效益较好。     

罗汉果基质栽培试验初报

【目的】明确不同栽培基质对罗汉果幼苗生长及果实品质的影响。【方法】以蘑菇渣、大田土栽培罗汉果,比较不同栽培基质对罗汉果幼苗生长和果实品质的影响,并测定不同时期不同栽培基质及罗汉果植株的营养状况。【结果】蘑菇渣栽培的罗汉果平均株高、真叶数分别为97.25cm、33.75张,比土壤栽培分别多32.10cm、8.12张;种植前、开花及采收期蘑菇渣中速效N、速效P、速效K、有效Mg含量均高于大田土;开花期蘑菇渣栽培的罗汉果叶片全P、全K、全B含量均低于土壤栽培,而采收期蘑菇渣栽培的罗汉果叶片和茎的全N、全P、全K含量均低于土壤栽培;蘑菇渣栽培罗汉果果实中平均可溶性固形物、水溶性总糖、甜素含量分别比土壤栽培高2.90%、1.91%、1.60%,达显著差异水平。【结论】采用不同栽培基质对罗汉果幼苗生长及果实品质均有影响,生产上应合理选择栽培基质,建立标准化设施栽培技术体系,以提升罗汉果的品质和种植效益。     

中药罗汉果对小鼠急性毒性和致突变性研究

[目的]研究罗汉果水提取物在小鼠体内的急性毒性及致畸变性效应,为罗汉果临床用药安全提供理论依据。[方法]对小鼠进行罗汉果水提取物最大给药量急性毒性试验,观察小鼠给药后的体征及生理变化,进行血液检查以及剖检;采用小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验进行致畸变性检测。[结果]在最大给药量90 000 mg/kg剂量下,小鼠无明显中毒症状,生理指标、血液与空白对照组无显著差异,内脏器官解剖无病理变化;微核试验结果呈阴性。[结论]罗汉果水提取物无急性毒性以及致突变性。     

利用树脂脱色对罗汉果深加工柱流液中还原糖的测定研究

[目的]探索利用树脂脱色对罗汉果深加工柱流液中还原糖的测定方法。[方法]将罗汉果甜甙生产过程中的柱流液柱进行酸水解后,对稀释浓度为0.4%、深褐色和不透明的柱流溶液,用D941大孔弱碱性阴离子交换树脂脱色,之后采用直接滴定法测定罗汉果加工柱流液干燥固体中游离还原糖含量和总还原糖含量。[结果]罗汉果加工柱流浓缩液含固量为56.3%,树脂脱色后固体产物的得率为35.05%。用D941大孔弱碱性阴离子交换树脂进行脱色,脱色效果显著,可用于直接滴定,滴定终点明显,且经脱色后还原糖回收率可达98.48%。测得罗汉果柱加工流液干燥固体中游离还原糖含量为12.55%,总还原糖含量为23.50%。[结论]该研究为进一步开发利用罗汉果资源,提高其利用率和经济效益提供理论基础。     

包埋玻璃化法超低温保存沙生柽柳休眠茎尖的研究

[目的]采用包埋玻璃化法,对沙生柽柳休眠茎尖成功地进行冷冻保存。[方法]将沙生柽柳休眠茎尖包埋在含3%褐藻酸钙的胶球中,研究了预培养中蔗糖浓度、培养时间和不同玻璃化保护液处理的时间对沙生柽柳休眠茎尖存活率的影响。[结果]含沙生柽柳茎尖的胶球在0.8mol/L蔗糖溶液中培养24h可获得较高的存活率;胶球经玻璃化保护液[40%甘油＋45%（0.4mol/L）蔗糖＋10%聚乙二醇（分子量4000）＋5%二甲基亚砜]在25℃处理20min可以明显提高存活率,在优化条件下存活率可高达48.3%。[结论]蔗糖浓度和预培养时间是决定沙生柽柳茎尖存活率的关键因素。     

罗汉果籽油微胶囊的乳化配方及其性质分析

[目的]研究罗汉果籽油微胶囊的乳化配方及其性质,为制备出高品质的罗汉果籽油微胶囊及进一步开发利用罗汉果提供参考依据.[方法]以罗汉果籽油为原料制备微胶囊产品,在单因素试验的基础上,通过响应曲面法优化罗汉果籽油微胶囊化的乳化配方,并对罗汉果籽油微胶囊产品性质进行分析.[结果]微胶囊化罗汉果籽油的最佳乳化条件为:以阿拉伯胶为主壁材、β-环糊精为填充剂,乳化剂浓度1.06%,壁材比1∶9.8,芯壁比1∶2.71,固形物浓度16.69%.经高温喷雾干燥所得的罗汉果籽油微胶囊产品热稳定性较好,但易吸收水分.[结论]在最佳乳化条件下制得的罗汉果籽油乳状液稳定性可以达到99.4%,经高温喷雾干燥所得的微胶囊产品应保存在干燥的环境中.     

罗汉果鲜花粉培养条件研究

【目的】探索罗汉果鲜花粉的适宜培养条件。【方法】以不同浓度的蔗糖和硼酸复配液,在不同pH值和温度条件下,对罗汉果鲜花粉进行不同时间的组织培养,测定萌发率。【结果】罗汉果鲜花粉的适宜培养基为：蔗糖15％＋硼酸200mg／L,pH6．5。该培养基培养的鲜花粉在常温27～32℃下萌发率达77．6％,适合当天授粉使用;在冰壶或冰箱5～8℃下冷藏15d,萌发率仍有52．8％,适用于应对花期不遇和异地调粉。【结论】罗汉果花粉萌发率随培养时间的增加而下降,相对低温可使萌发率的下降显著减慢;硼酸可以促进罗汉果花粉的萌发与花粉管伸长,提高花粉的萌发率;罗汉果鲜花粉不宜在碱性环境中培养。     

大果紫檀试管苗玻璃化影响因子的研究

[目的]研究大果紫檀试管苗出现玻璃化的影响因素。[方法]以大果紫檀的无菌种子苗为材料,研究MS培养基附加不同激素组合及改良MS培养基中NH＋4离子、Ga2＋离子浓度对大果紫檀试管苗玻璃化的影响。[结果]当TDZ浓度大于0.03 mg/L时,大果紫檀玻璃化比率会大幅上升,而KT不会导致大果紫檀试管苗出现玻璃化;适当降低培养基中NH＋4离子浓度及提高Ga2＋离子浓度,也能降低试管苗玻璃化发生的比例。[结论]激素种类和浓度是影响大果紫檀试管苗玻璃化的主要因素,低浓度的TDZ既能高效诱导大果紫檀试管苗增殖,又能使试管苗的玻璃化比率处于较低的水平。     

罗汉果研究综述

综述了罗汉果的生境、地理分布、主栽品种、繁殖技术、化学成分、药理作用和资源开发利用方面的研究成果。指出目前罗汉果研究中存在的不足,并提出挖掘良种资源,扩大罗汉果栽培面积;加强罗汉果抗病植株的筛选和罗汉果病害研究,培育抗病虫品种;运用多倍体育种技术开发甜苷含量和整果利用率高的多倍体无籽罗汉果新品种等建议。     

罗汉果鲜花粉培养条件研究

【目的】探索罗汉果鲜花粉的适宜培养条件。【方法】以不同浓度的蔗糖和硼酸复配液,在不同pH值和温度条件下,对罗汉果鲜花粉进行不同时间的组织培养,测定萌发率。【结果】罗汉果鲜花粉的适宜培养基为：蔗糖15%＋硼酸200 mg/L,pH 6.5。该培养基培养的鲜花粉在常温27~32℃下萌发率达77.6%,适合当天授粉使用;在冰壶或冰箱5~8℃下冷藏15 d,萌发率仍有52.8%,适用于应对花期不遇和异地调粉。【结论】罗汉果花粉萌发率随培养时间的增加而下降,相对低温可使萌发率的下降显著减慢;硼酸可以促进罗汉果花粉的萌发与花粉管伸长,提高花粉的萌发率;罗汉果鲜花粉不宜在碱性环境中培养。