西方蜜蜂正反交苹果酸脱氢酶II基因的遗传差异

西方蜜蜂(Apis mellifera)中,苹果酸脱氢酶(malate dehydrogenase,MDH)II由a、b、c三个等位基因编码,具有aa、bb、cc、ab、bc、ac六种基因型.在酶谱上,纯合子为一条带,杂合子三条带.     

家蚕Bm30Kc6蛋白对过氧化氢诱导的家蚕细胞凋亡的抑制作用

30K蛋白是一类家蚕(Bombyx mori)血淋巴中具有最强抗细胞凋亡活性的蛋白,家蚕Bm30Kc6蛋白作为30K蛋白家族的成员之一,也具有较强的抗细胞凋亡作用,但其抗细胞凋亡的作用机制还不十分清楚。本研究将本实验室成功构建的重组病毒Bacmid-Bm30Kc6接种家蚕BmN细胞大量表达后,利用Ni-NTA蛋白亲和层析柱纯化重组蛋白Bm30Kc6。SDS-PAGE和Westernblot检测结果显示纯化蛋白的纯度较高。然后利用不同浓度(0.1、1、5和10mmol/L)的H2O2处理家蚕BmN细胞,诱导细胞发生凋亡,结果表明,在培养基中加入终浓度为5mmol/LH2O2孵育4h后即可成功诱导BmN细胞凋亡。在上述建立的H2O2诱导的家蚕BmN细胞凋亡体外损伤模型的基础上,分析了Bm30Kc6蛋白的抗细胞凋亡的活性及作用机制。首先利用CelldeathDetection ELISA试剂盒检测了细胞内的DNA片段化程度,检测结果表明,Bm30Kc6蛋白(终浓度5μg/mL)可明显降低H2O2诱导的家蚕BmN细胞内的DNA片段化程度。然后利用Cellproliferation ELISA试剂盒检测了细胞的增殖情况,结果表明,Bm30Kc6蛋白可以显著增强家蚕BmN细胞的活力。进一步利用8-isoprostane EIA试剂盒检测细胞内氧化应激标志物8-isoprostane的浓度变化,结果显示,家蚕Bm30Kc6蛋白可以显著降低胞内8-isoprostane的浓度。此外,Western blot分析结果显示,Bm30Kc6蛋白可显著抑制家蚕BmN细胞中细胞色素c从线粒体中释放进入细胞质。Bm30Kc6蛋白一方面可以通过降低BmN细胞内的氧化应激水平从而起到抑制细胞凋亡的作用;另一方面,Bm30Kc6蛋白也可以通过阻断H2O2诱导激活的线粒体通路来抑制细胞发生凋亡。本研究将为进一步深入研究家蚕Bm30Kc6蛋白的抗凋亡机制提供基础资料。     

涝渍逆境下大麦叶片保护酶活性和膜脂过氧化作用的变化

涝渍逆境下大麦叶片保护酶活性和膜脂过氧化作用的变化①童富淡１胡家恕１邵爱萍１沈秋泉２（１浙江农业大学生物化学研究所，杭州３１００２９；２浙江省农业科学院原子能研究所，杭州３１００２１ＰｒｏｔｅｃｔｉｖｅＥｎｚｙｍｅＡｃｔｉｖｉｔｉｅｓａｎｄＭｅｍｂｒ...     

不同育秧方式对早稻叶片SOD活性,电解质渗透率和发根力的…

以早粳１号、渐辐９号和威－４８水稻品种为材料，研究旱地和水田育秧秧苗的超氧物歧化酶（ＳＯＤ）活性、电解质渗透率和发根力。结果表明：旱育秧叶片ＳＯＤ活力分别比水育秧增高１８．１９％、８．５６％和７．２５％，旱地和水田育秧影响编码ＳＯＤ基因的表达量，前者高于后者；旱育秧电解质外渗率低于水育秧，发根力强于水育秧，旱育秧耐寒性较强。     

东方蜜蜂与西方蜜蜂酯酶同工酶的比较研究

酯酶（esterase）是一组多态性很高的同工酶，常用于昆虫种属鉴定和遗传变异研究。本试验采用薄层聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳（IEF-PAGE）技术，分析了浙农大Ⅰ号意蜂（A.m. lingustica）、东北黑蜂（A.m.ssp）和卡尼鄂拉蜂（A.m.carnica）等西方蜜蜂与中华蜜蜂（A.cerana cermama）酯酶同工酶及蜜蜂不同发育阶段酯酶同工酶的变化，以便为酯酶同工酶在蜜蜂遗传变异、种属鉴定及品种选育研究中的应用，提供基础资料。 　　1　材料与方法 　　1.1　材　料　浙农大Ⅰ号意蜂和中华蜜蜂来自浙江大学实验蜂场，东北黑蜂和卡尼鄂拉蜂来自吉林省蜜蜂研究所种蜂场。 　　1.2　方　法　每种蜂各取外勤蜂、内勤蜂和幼蜂20只，剪取头部，以1∶2（W/V）加入提取液, 在1.5 mL Eppendrof 管中，用玻棒研磨（冰浴中），离心（4 ℃，12 000 r/min,10 min）,取上清用于电泳。参照Nunamaher等的方法，用IEF-PAGE技术在LKB多相电泳系统中检测酯酶同工酶，酶活性染色液为0.1 mol/L pH6.5的磷酸缓冲液，含33.33%α-乙酸萘酯，33.33%β-乙酸萘酯，66.67%坚牢兰RR。……     

三角鲂IGF-I基因的分子克隆及其序列分析

 采用RT-PCR技术首次从钱塘江三角鲂肝脏组织克隆了IGF-Ⅰ基因(GenBank No.AY247412)，序列分析表明钱塘江三角鲂IGF-ⅠcDNA序列由486个核苷酸组成，编码包括B、C、A、D和E 5个区域的161个氨基酸，为Ea-2亚型。同源性分析发现，钱塘江三角鲂IGF-ⅠcDNA与团头鲂、草鱼和鲤鱼的同源性分别为99.8%、88.8%和85.8%，钱塘江三角鲂IGF-Ⅰ前蛋白氨基酸序列与团头鲂、草鱼和鲤鱼的同源性分别为99.4%、88.8%和85.4%。在鲤科鱼类中，亲缘性越近鱼种，IGF-Ⅰ及其基因的同源性越高。试验结果为三角鲂种质研究和开发高效生物饲料添加剂提供基础资料。     

瘦蛋白及其在养猪业上的研究进展

瘦蛋白 (Leptin)是脂肪细胞分泌的一种调节体脂沉积的重要因子 ,由 1 67个氨基酸残基组成 ,其中N端 2 1个氨基酸残基为信号肽 ,成熟瘦蛋白为 1 46个氨基酸残基组成的无糖化的多肽 ,相对分子量为 1 6kDa ,其中mRNA长 4 5kb。Leptin为单链 ,链内的两个半胱氨酸构成一个二硫键 ,这种结构也常见于其他分泌型多肽。就氨基酸序列分析 ,Leptin是一种球型分子 ,无明显的结构域或跨膜区 ,以单体形式存在 ,是由肥胖基因 (Obesegene ,简称ob基因 )编码的 ,其表达具有组织特异性 (Dennis等 ,1 997) ,表达部位主要在脂肪组织。Leptin作用于下丘脑的…     

对氨基苯胂酸及其与抗菌素联用对肥育猪胴体品质和肉质的影响

１４４头长加杂交猪按体重，性别和遗传基础分成４组（每组３个重复，每个重复１２头）分别饲喂不含对氨基酸胂酸（ＰＡＰＡＡ）（Ｉ组）和添加７０ｍｇ．ｋｇ＾－１ＰＡＰＡＡ（ＩＩ组），７０ｍｇ．ｋｇ＾－１ＰＡＰＡＡ＋７０ｍｇ．ｋｇ＾－１ＯＴＣ（土霉素，Ⅲ组），７０ｍｇ．ｋｇ＾－１ＰＡＰＰＡ＋７０ｍｇ．ｋｇ＾－１ＣＴＣ（金霉素，Ⅳ组）的相同玉米－豆粕型馈粮，结果表明：Ⅱ组和Ⅲ组胴体脂肪率分别降低４．９１％和４     

青素Ⅰ系,白壳Ⅰ系和绍鸭（RE）系产蛋初期及高峰期某些血液指标变…

测定了产蛋初期和高峰期的青壳Ｉ系，白壳Ｉ系和绍鸭的血清总蛋白，清蛋白，球蛋白和总脂含量，血清总蛋白在产蛋高峰时期上升，品种（系）间变化不大；清蛋白在不同品种和产蛋时期变化不明显；球蛋产蛋高峰期显著上升，白壳Ｉ系有较高的水平，血清总脂的变化情况与球蛋白相似。