对虾皮下及造血组织坏死杆状病毒单克隆抗体的ELISA快速检测

对虾病毒性暴发病对我国对虾养殖业的危害十分严重,其病原为皮下及造血组织坏死杆状病毒(ｈｙｐｏｄｅｒｍａｌａｎｄｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃｎｅｃｒｏｓｉｓｂａｃｕｌｏｖｉｒｕｓＨＨＮＢＶ)[1]或称为对虾白斑综合症病毒(ｗｈｉｔｅｓｐｏｔｓｙｎｄｒｏｍｅｂａ?..     

斑节对虾白斑综合症病毒部分基因组文库及核酸探针检测法

通过分离纯化白斑综合症病毒（ＷＳＳＶ）粒子,抽提病毒ＤＮＡ。用限制性内切酶ＥｃｏＲⅠ或ＳａｌⅠ酶切后,克隆入质粒ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔⅡＫＳ中,从而建立了ＷＳＳＶ部分基因组文库。估计ＷＳＳＶ基因组ＤＮＡ在１６５ｋｂ以上。将ＷＳＳＶ ＥｃｏＲⅠ克隆片段标记制备为探针。进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交、打点杂交和原位杂交,其结果证明了克隆片段对ＷＳＳＶ特异,并为检测ＷＳＳＶ提供了方法。通过对部分基因组文库序列     

南美白对虾的养殖技术之二台湾模式养殖南美白对虾高产技术

为了探索南美白对虾在北方健康养殖和预防白斑杆状病毒ＷＳＢＶ，提高对虾养殖的经济效益，２００１年山东省青岛市城阳区水产技术推广站与青岛绿缘达深圳公司合作，引进台湾技术，进行活性生物酶制剂在对虾健康养殖和预防白斑杆状病毒ＷＳＢＶ及桃拉病毒ＴＳＶ方面的生产试验，取得了很好的经济效益和社会推广效益。一、试验方法１试验池条件：选址在城阳区桃缘河园林式高效养殖基地，该场地盐碱地质，地下１４ｍ～１７ｍ至沙层含丰富低盐度海水，水温１５℃～１６℃，盐度１６‰，水质稳定，水源良好。试验池共２个，分别为１号池和２号…     

聚合酶链反应（PCR）检测养殖对虾的白斑病病毒（WSSV）感染

对虾ＷＳＳＶ病是亚洲对虾养殖业中的一个棘手问题。本研究采用Ｋｉｍｕｒａ引物,用ＰＣＲ技术对不同生长期的中国对虾（Ｐｅｎａｅｕｓ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）进行了ＷＳＳＶ的检测,同时也检测了对虾发病时养殖池中多见的野生厚蟹（Ｈｅｌｉｃｐ ｓｐ．）和柔尾棘虾虎鱼（Ａｃａｎｔｈｏｇｏｂｉｕｓ ｈａｓｔａ）。检测结果表明：分别在检测的５尾亲虾中的１尾,６尾仔虾中的１尾,５尾稚虾中的３尾及所检测的５尾病虾和２只厚     

不同家系的万氏对虾对对虾杆状病毒抗病力的差异

不同家系的万氏对虾对对虾杆状病毒抗病力的差异郑国兴（东海水产研究所，上海２０００９０）关键词对虾杆状病毒，万氏对虾，抗毒力，家系ＤＩＦＦＥＲＥＮＣＥＩＮＲＥＳＩＳＴＡＮＣＥＴＯＥＸＰＥＲＩＭＥＮＴＡＬＩＮＦＥＣＴＩＯＮＳＷＩＴＨＢＡＣＵＬＯＶＩＲＵＳ...     

对虾皮下及造血组织坏死杆状病毒的精细结构、核酸、多肽及血清学研究

对纯化的对虾皮下及造血组织坏死杆状病毒（ＨＨＮＢＶ）进行了超微结构、紫外吸收、核酸类型及多肽ＳＤＳ－ＰＡＧＥ的研究。同时用单克隆抗体对ＨＨＮＢＶ的两分离株和ＭＢＶ进行了血清学比较研究。用ＴＭＶ作为内标定物测得病毒粒子大小为１５０ｎｍ×４５０ｎｍ，其衣壳为两个帽状物端夹１３圈螺旋对称的园柱体结构。病毒在２６０ｎｍ处吸光系数为０．１１７ｍｇ／ｍＬ／ＯＤ２６０。病毒核酸为双链ＤＮＡ，分子量大于３５×１０６ｄ。病毒囊膜有１２种主要多肽。病毒衣壳有两种主要多肽。从寿光（ＨＨＮＢＶ—９３７）和青岛（ＨＨＮＢＶ—９３８）分离到的病毒种在ＳＤＳ—ＰＡＧＥ和抗ＨＨＮＢＶ—９３７单抗ＥＬＩＳＡ反应上没有显著差异。ＨＨＮＢＶ与斑节对虾杆状病毒（ＭＢＶ）在抗原决定簇上存在差别。     

对虾白斑综合症病毒暴发流行与传播途径、气候和水体理化因子的关系及其控制措施

白斑综合症病毒（whitespotsyndromevirus,WSSV）,又称白斑杆状病毒（whitespotbaculovirus）、皮下与造血组织坏死杆状病毒（hepodermalandhematopoieticnecrusisbaculovirus）、日本对虾棒状病毒（Rodshapevirusofpenaeusjaponicus）、白斑综合症杆状病毒（whitespotsyndromebaculovirus）、系统性外胚层和中胚层杆状病毒（systemicectodermalandmesodermalbaculovires）等。WSSV为全球养殖对虾危害性最大的病毒,每年因WSSV全球养殖对虾产量减少一半,损失几百亿元人民币。近年,随着对WSSV认识的逐渐深入,对虾养殖技术有所提…     

对虾皮下及造血组织坏死杆状病毒单克隆抗体的研制

用经密度梯度离心纯化的对虾皮下及造血组织坏死杆状病毒（ＨＨＮＢＶ—９３７）注射Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，取其免疫后的脾细胞与ｓｐ２／０骨髓瘤细胞进行融合。经筛选与克隆，获得７株抗ＨＨＮＢＶ的单克隆杂交瘤细胞株。其中Ｆ９株的染色体数为８７，ＥＬＩＳＡ测定培养上清中单抗滴度为１∶８，腹水为１∶１０００。患有杆状病毒的皮下及造血组织坏死症的对虾组织切片的单抗酶联免疫染色，表明Ｆ９株单抗只与ＨＨＮＢＶ病灶发生特异性结合，与对虾组织结构不发生特异性反应。将其用于现场样品的检测研究表明，该抗体适于用来进行对虾暴发性流行病的病原检测。     

用于PCR检测对虾皮下及造血组织坏死杆状病毒(HHNBV)的一种快速提取DNA方法

使用采样液ＳＥＭＰ－Ｔｒｉｓ保存人工感染ＨＨＮＢＶ（ＷＳＳＶ的一个分离株）的中国对虾组织,然后分别用酚抽提法、玻璃乳（Ｇｌａｓｓ Ｍｉｌｋ）回收法、硝酸纤维素膜结合法和煮沸－乙醇沉淀法提取ＤＮＡ。应用ＨＨＮＢＶ引物对提取的ＤＮＡ进行ＰＣＲ扩增,使用琼脂糖凝胶电泳对扩增产物进行鉴定和检测。通过比较表明,煮沸－乙醇沉淀法是一种最快速、简便的从采样液ＳＥＭＰ－Ｔｒｉｓ保存的病虾组织中制备ＰＣＲ模板的方法     

对虾白斑综合症的研究综述

对虾白斑综合症是由对虾白斑综合症病毒（white spot syndrome virus WSSV)引发的暴发性流行病，典型症状是病虾甲壳内侧出现0.5-2mm大小不等的白色斑点，此病病程短，死亡率高。白斑综合症病毒（WSSV）的形态结构与杆状病毒相似，杆状病毒分子分布于患病组织细胞核内，WSSV不仅水平传播，还存在垂直传播的可能性，到目前为上，诊断技术己较为进步，但尚无有效手段控制该病的发生。今后的研究重点在防治上。     

Estimation of variation of virulence of Renibacterium salmoninarum by survival analysis of experimental infection of salmonid fish

The variation of virulence of Renibacterium salmoninarum , the causative agent of bacterial kidney disease (BKD) in salmonid fish, was studied by infecting rainbow trout, Oncorhynchus mykiss (Walbaum), with two isolates (strains 325 and 932) from diseased Atlantic salmon, Salmo salar L., and one isolate (strain 4366) from an apparently healthy Atlantic salmon. Coho salmon, Oncorhynchus kisutch (Walbaum), were injected with the strain 932 to estimate difference in fish species resistance. Fish were removed by random sampling for other study purposes, a study design possible with analysis of lifetime distributions incorporating both sampling-, death- and survival-times. At the end of the experiment, the rainbow trout infected with strains 325, 932 and 4366 had a survival probability of 33%, 51% and 72%, respectively. The coho salmon infected with strain 932 had a 26% survival probability. The strain differences were significant according to the log-rank test, and the risk ratio between the strains ranged from 1·8 to 5·4. The strain from the apparently healthy fish was least virulent. The survival of the fish species was different over time. Rainbow trout were more likely to die early in the time course, but high numbers of coho died later, resulting in an overall risk of mortality of 1·4 in favour of rainbow trout. Differences in virulence may reflect changed selective pressure on R. salmoninarum when introduced from feral stocks into the environment of fish farms.     

水硬度对七彩神仙鱼幼鱼发育的影响

采用不同硬度的水对七彩神仙鱼幼鱼进行饲养。6周龄幼鱼在硬度为7.94°dH±0.30°dH时饲养84d后,比在硬度为14.71°dH±0.23°dH水中的幼鱼个体大,生长速度快。表明较高硬度的水有利于七彩神仙鱼幼鱼的生长发育。     

牙鲆刺激隐核虫病的防治

2005年七、八月份,乐亭、滦南一带多家工厂化牙鲆养殖场发生刺激隐核虫病,此种病虫害发病急、传染快、死亡率高。发生过该病的养殖场牙鲆死亡率一般都在50％～80％之间,这种病害给牙鲆养殖业带来很大损失。     

Characterization of protease inhibitors of seminal plasma of cyprinids

Anti-proteinase activity was demonstrated in the seminal plasma of cyprinid fish species (bream, chub, ide, dace, asp, goldfish, roach, common carp) using electrophoretic techniques combined with a detection method based on inhibition of bovine trypsin. We found species-specific protease inhibitors in the seminal plasma of cyprinids. At least three bands of protease inhibitors with different migration rates could be identified by native PAGE. Higher variability was characterized for bands with slower migration rates. Visualization of inhibitors after SDS-PAGE under non-reducing conditions allowed estimation of their molecular weights. Apparent molecular weights were within the range of 51–59 and 47–54 kDa for the bands with slower and moderate migration rates, respectively. The molecular weight of fast migration bands for roach and common carp were estimated to 23 and 30 kDa, respectively. Inhibitors of common carp seminal plasma differed in their affinity toward serine proteases. Three inhibitors in common carp seminal plasma could be visualized using cod and bovine trypsin, but only two inhibitors (of high molecular weight) were recognized with chymotrypsin. There were differences in anti-proteinase activity and seminal plasma protein concentration in relation to the origin of common carp seminal plasma (breeding lines) and time of milt collection (spawning vs. post-spawning season).     

七种甲壳类水产品脂肪酸组成的分析研究

水产动物食品中富含ω—3型多稀酸,其中尤其是C_(20:5)(EPA)和C_(22:6)(DHA)对人体有特殊保健功能。本文对七种常见的甲壳类水产品进行脂肪酸组成分析,它们是中国对虾、日本沼虾、安氏白虾、克氏原螫虾、葛氏长臂虾、中华绒螯蟹和三寺疣梭子蟹。测定主要采用黄志斌、李淡秋(1990)的“快速制备脂肪酸甲酯用于气相色谱分析”一文所提供的方法。结果显示,被测样品中不饱和脂肪酸含量高于饱和脂肪酸,而不饱和脂肪酸中多烯酸含量高达60%,且以长碳链(C_(20)、C_(22))ω—3型为特征,表明甲壳类水产品体脂中EPA和DHA含量甚高,超过淡水鱼的一倍,但略逊于海水鱼。值得注意的是,甲壳类水产品中EPA的含量高于DHA的含量,这与鱼类中的情况正好相反。     

三种群银鲫形态特征的比较研究

滁州鲫体色较浅,背部青灰色,腹部银白色。各鳍条颜色灰白,略带黄色。体厚,背高,体型侧扁,头短小。脊椎骨4+26～28,侧线鳞28～30。背鳍不分枝鳍条4根。雄性个体胸鳍末端可达腹鳍基部,雌鱼不达腹鳍基部。上述形态特征均有别于方正银鲫及彭泽鲫。     

斑节对虾虾苗活力检测方法

该研究通过肉眼观察、镜检,进行干露、饥饿、盐度突降、福尔马林等抗性试验,并采用病毒检测等方法,以期建立评估斑节对虾（Penaeus monodon）虾苗活力和质量标准。结果表明,斑节对虾健康虾苗具有趋光性、集群性,体表光洁,肌肉透亮,肠胃食物充盈等特性。测试虾苗干露时间以15min为宜,健康虾苗干露后能立即恢复活力,而病弱虾苗多出现死亡、昏迷现象;虾苗的成活率随饥饿时间的延长而降低,随福尔马林浓度升高和时间延长而降低,随盐度突降幅度增加而降低。健康虾苗能忍受100～200μL·L^-1福尔马林溶液30min,成活率近100％;在盐度20～30下虾苗的成活情况较好,而其在淡水中仅能存活1h。对虾苗进行病毒检测,可以避免养殖中因虾苗携带病毒而可能导致的病毒性疾病的暴发。     

金鳟、虹鳟苗种长途运输实例

鳟鱼发眼卵和旨种运输是养鳟生产的重要环节。发眼卵多在冬季和早春运输,苗种多在晚春和夏季运输。苗种运输大多以鱼篓充氧进行短距离汽车运输,长途运输冷水性鱼苗种的实例很少。本文总结了金鳟和虹鳟苗种长途运输方法,以期与养鳟业界共同交流提高。一、包装材料和方法内包装材料是苗种运输专用塑料袋,规格54×104cm,外包装是泡沫塑料箱,规格63.5×45.5×30．5cm,纸箱规格64×46×32．5cm。塑料袋采取双层式,内装苗种和水共12.5kg,其中苗种0.5-1．3kg,100－2000尾。起运前苗种停食1－2天。运鱼用水水温调至6℃,鱼、水入袋后袋内…     

母猪胎衣不下的病因与防治要点

猪的胎盘属于弥散型胎盘,这种胎盘的结构特点和饲养管理的不当,常常导致母猪胎衣不下发生,给生猪的生产繁殖带来极大损失。本文针对母猪胎衣不下发生病因、综合防治进行详细阐述,旨在对预防和治疗胎衣不下能有所帮助。     

浅谈船舶干舷的作用

近几年．在唐山沿海发生的渔船海难、海损事故经统计表明呈增多趋势。这与出海作业渔民的安全意识不强有很大关系．渔民为了挣取更多的效益,在海上,超抗风浪等级作业且人为地增加船的不规范载荷．造成船的储备浮力损失,酿成恶果。笔者认为．在渔船设计建造中,留取的干舷对渔船作业的安全性起相当重要的作用,必不可少。 一、储备浮力的重要性 所谓储备浮力就是自船舶设计水线至水密甲板的水密部分体积,其大小与干舷相关．于舷大则储备浮力大,干舷的重要性就在于能够使船在海中保持正常的浮性和安全。再者,在设计建造渔船时,为了改善…