复方中药制剂对小鼠腹泻的治疗作用研究

为研究复方中药制剂对小鼠腹泻的治疗作用,采用番泻叶、蓖麻油和硫酸镁建立小鼠腹泻模型,观察药物组小鼠的一般状态及行为学改变,测定腹泻次数,并以炭末推进率为指标,计算单位长度肠推进率及胃残留率,评价复方中药制剂的抗腹泻作用。结果表明:复方制剂均可极显著降低番泻叶、蓖麻油和硫酸镁所致小鼠腹泻模型的腹泻次数(P 0.01),极显著降低番泻叶所致小鼠肠推进率(P 0.01),极显著增加小鼠胃残留率(P 0.01)。研究表明,研制的复方中药制剂可有效缓解番泻叶、蓖麻油和硫酸镁所致小鼠的腹泻。     

银翘散对感染甲1型流感病毒金刚烷胺耐药株小鼠的抗病毒研究

以经过耐药表型和基因型鉴定的甲1型流感病毒金刚烷胺耐药株感染BALB/c小鼠,观察其生存状态并测定肺指数,以苏木素—伊红染色(HE染色)法观察肺组织病理改变;将鼠肺悬液以空斑试验定量检测感染性病毒滴度。研究结果表明,银翘散可以减轻甲1型流感耐药株感染小鼠引起的全身症状,降低肺指数;减少鼠肺病变范围及肺泡渗出物;降低鼠肺病毒滴度。说明银翘散有体内抑制甲1型流感病毒金刚烷胺耐药株复制的作用。     

甘草主要成分抗H9N2亚型流感病毒作用研究

利用H9N2亚型流感病毒鼠肺适应株感染小鼠,以肺指数抑制率、肺组织病毒滴度、死亡保护率和生命延长率为评价指标,研究了甘草酸单铵盐、甘草次酸、甘草黄酮等甘草中3种主要成分和甘草粗提物对感染H9N2亚型流感病毒小鼠的防治效果.结果表明,甘草粗提物及甘草酸单铵盐口服均能显著抑制H9N2亚型流感病毒鼠肺适应株引起的小鼠肺炎实变(P<0.01),甘草粗提物20 mg/kg组能明显延长流感病毒感染小鼠的生存时间.     

繁殖障碍型H3亚型猪流感病毒的分离与鉴定

于广东惠州市某猪场采集流产死胎的肺组织、胎衣及鼻棉拭子,病料处理后经SPF鸡胚绒毛尿囊腔接种获得1株有血凝(HA)活性的病毒,通过AGP试验初步确定为猪流感流感病毒;但此病毒的血凝现象不能被抗H1亚型猪流感单因子血清、抗H5亚型猪流感单因子血清、抗H7亚型猪流感单因子血清、抗H9亚型猪流感单因子血清抑制,而能被抗H3亚型猪流感单因子血清抑制;通过H3亚型猪流感病毒RT-PCR分子生物学诊断,最终确定该病毒为H3亚型猪流感病毒.动物回归试验结果显示,攻毒小鼠出现精神萎靡、厌食、嗜睡、被毛松乱、呼吸较急促,攻毒后7 d采集小鼠血清进行检测,HI效价为3log2～4log2;剖检发现病毒性肺炎,且能从病料中再次分离到H3亚型猪流感病毒.     

H9N2亚型猪流感病毒的分离、鉴定及其对小鼠的致病性研究

[目的]确定分离的H9N2亚型猪流感病毒对小鼠的致病性。[方法]利用此株猪流感病毒对SPF级6～8周龄、雌性BALB/c小鼠进行滴鼻感染,观察小鼠临床症状,感染后第2、6和14天分别剖杀小鼠,摘取各主要脏器后对其进行病理学检查。[结果]感染小鼠出现精神不振、体重下降、引起以弥漫性肺泡损伤为主的临床症状和病理变化。[结论]该研究成功进行了H9N2猪流感病毒对BALB/c小鼠的感染,可以作为感染模型进行H9N2猪流感病毒的发病机制、疫苗评价、药物筛选等研究。     

复方中药提取物对REV诱发的免疫抑制鸡的免疫增强作用

 【目的】探讨复方中药提取物对REV诱发的免疫抑制鸡的免疫增强作用,建立测试某些中药制剂免疫增强作用的实验模型。【方法】分别在临床健康鸡和在1日龄感染网状内皮增生病病毒（REV）诱发了免疫抑制状态的鸡测试了中药制剂对鸡的免疫增强作用。【结果】随饮水饲喂黄芪、党参、淫羊藿和甘草复方中药浸出物,在健康鸡对鸡新城疫病毒（NDV）和H5亚型禽流感病毒（H5-AIV）灭活疫苗免疫后的血凝抑制（HI）抗体滴度没有明显影响。但是在REV诱发了免疫抑制的鸡,该中药浸出物可显著提高对NDV和H5-AIV的HI抗体滴度（P＜0.01）,虽然仍显著低于未经REV感染的对照鸡。【结论】REV诱发的免疫抑制状态下的鸡,可作为测试某些中药制剂免疫增强作用的一种实验模型。     

中药复方超微粉制剂对人工诱发鸡大肠杆菌病的药效研究

在成功筛选出体外抗鸡大肠杆菌(O78)效果较好的中药复方基础上,以人工感染鸡大肠杆菌病为病理模型,对该复方超微粉与普通粉制剂进行药效比较试验及进一步探讨中西药复方超微粉制剂防治效果分析。研究结果表明:(1)中药复方超微粉高、中剂量组的死亡率均极显著低于感染对照组(P0.01),超微粉低剂量组、普通粉对照组的死亡率略低于感染对照组(P0.05);中药复方超微粉高死亡率显著低于普通粉对照组(P0.05),治愈率、有效率显著高于普通粉对照组;(2)中西复方超微粉高(H)、中(M)、低剂量(L)组及中西复方口服液对照组的死亡率均极显著低于感染对照组,H、M组的死亡率极显著低于盐酸环丙沙星对照组(W),治愈率、有效率均极显著高于W组。总体而言,H、M组的防治效果优于W组、中药复方超微粉对照组。     

中药复方制剂的抗炎药理学研究

根据中兽医基本理论,研制出治疗奶牛子宫内膜炎的纯中药制剂,在临床试用前探讨该药的抗炎效果.方法:以小白鼠为动物模型,设计了4组不同类型的试验:小鼠耳廓肿胀试验;小鼠腹腔毛细血管通透性增加试验;小鼠足跖肿胀及前列腺素E2渗出试验;小鼠棉签肉芽肿试验.结果:高、低两种浓度的中药复方制剂均能极显著地降低小鼠耳廓肿胀率和蛋清所致炎足中的前列腺素E2的渗出量( P<0.01),高浓度的中药复方制剂还能极显著地降低腹腔毛细血管的通透性和棉球肉芽组织增生重(P<0.01),同时低浓度的中药复方制剂对小鼠腹腔毛细血管的通透性和棉球肉芽组织增生重也有显著的降低作用(P<0.05).结论:该中药复方制剂能有效对抗不同类型的急性和慢性炎症,抗炎效果显著,为临床应用提供了理论依据.     

抗流感病毒特异性转移因子对试验小鼠的抗流感效果

[目的]探讨免疫增强剂抗流感特异性转移因子(STF)对试验性小鼠发热的预防效果。[方法]用蛋白胨致热法建立发热病理模型;以毛色及活泼度评价小鼠体征的变化;以体温(直肠温度)、免疫学指标(胸腺指数及脾指数)、血清学指标为依据。[结果]与对照组相比较,预防组体温稳定(P<0.01),毛色光泽,活泼度高,胸、脾指数明显高于对照组(P<0.01),血清检测中测出有抗流感抗体的产生。[结论]抗流感特异性转移因子对试验性发热小鼠有预防作用。     

流感病毒快速诊断试剂中HA抗原热稳定性的研究

[目的]筛选流感病毒HA抗原保护剂。[方法]将H3N2和H1N1亚型流感病毒分别加入A～F组中,在37℃下进行加速试验,并通过血凝试验测定HA滴度。[结果]在28 d A组(添加PBS缓冲液)中H3N2和H1N1亚型流感病毒的HA抗原血凝滴度分别为20和32。F组(添加BSA、岩藻糖、Proclin 300、Triton 100)HA抗原的热稳定性最好,在28 d H3N2和H1N1亚型流感病毒HA抗原血凝滴度分别为48和96。[结论]F组成分对流感病毒HA抗原的保护作用最好,可作为保护剂候选配方。     

贯叶连翘提取物对流感病毒感染小鼠肺中IFN-γ·TNF-α的影响

[目的]研究贯叶连翘提取物(HPE)对流感病毒感染小鼠肺组织中肿瘤坏死因子(TNF-α)、γ-干扰素(IFN-γ)等细胞因子的影响。[方法]以流感病毒滴鼻感染小鼠,分别灌胃给药(贯叶连翘提取物高剂量组100 mg/kg、低剂量组50 mg/kg和病毒唑组10 mg/kg),0.2ml/次,2次/d,5 d后摘眼球放血处死动物,摘出全肺,低温条件下制成肺匀浆,离心后取上清采用双抗体夹心ELISA法观察小鼠治疗前后肺组织中IFN-γ、TNF-α的变化。[结果]与模型对照组相比,贯叶连翘提取物流感病毒感染小鼠肺组织中TNF-α显著降低(P<0.05),IFN-γ极显著升高(P<0.01)。[结论]贯叶连翘提取物对机体抗感染免疫有一定调节作用。     

中药复方抗鸡新城疫病毒作用研究

[目的]探讨中药复方抗鸡新城疫病毒（NDV）的作用机理,为临床合理使用抗病毒性药物提供科学的理论依据。[方法]以白花蛇舌草、金银花、黄芪和甘草组成中药复方,制备成中药复方流浸膏并配制成不同浓度梯度的药液;测定中药复方对鸡成纤维细胞（CEF）最大无毒浓度,并测定NDV在CEF上半数感染力（TCID50）;设中药复方不同浓度组,正常细胞和NDV感染细胞对照组,采用3种不同的作用方式作用于各组以检测中药复方抗NDV活性,采用四甲基偶氮唑蓝微量酶反应比色法（MTT法）测定OD值,以治疗指数为评价指标。[结果]中药复方对CEF的最大无毒浓度为2-6g/ml,NDV对CEF的TCID50为10-7.3;第①种作用方式中药复方的最小有效浓度是2-10g/ml,第②种作用方式为2-8g/ml,第③种作用方式为2-7g/ml。[结论]第①种作用方式对病毒的灭杀作用最强,第②种作用方式次之,第③种对病毒的灭杀作用最弱。表明中药复方不仅具有细胞外直接杀灭病毒作用,而且还具有抑制病毒吸附、穿入、复制和成熟的某一环节,为研究中药抗病毒的作用机理及临床应用提供了可靠的试验依据。     

畜禽免疫增强剂中复合多糖的提取及免疫活性研究

[目的]为中药有效成分的进一步研究提供理论依据。[方法]通过正交试验对中药方剂中复合多糖的提取工艺进行筛选。以环磷酰胺作为免疫抑制剂建立小鼠免疫抑制模型,进行免疫脏器指数的检测、碳粒廓清试验、血清溶血素形成和外周血T淋巴细胞数检测,探讨中药复合多糖对免疫功能低下小鼠的影响。[结果]中药方剂中复合多糖的最优提取条件为:温度60℃,料液比1∶40,超声处理30 min。中药复合多糖能明显提高正常小鼠脾脏指数、胸腺指数及免疫抑制小鼠脾脏指数;增强正常小鼠和免疫抑制小鼠单核巨噬细胞系统的吞噬功能;促进溶血素的形成并提高外周血中T淋巴细胞数。[结论]该中药复合多糖对免疫抑制小鼠有免疫兴奋作用。     

香椿蛋白质对小鼠抗氧化能力及非特异免疫的影响

[目的]研究香椿蛋白质对小鼠抗氧化能力及非特异免疫的影响。[方法]用硫酸铵沉淀法、透析、冷冻干燥的方法提取香椿蛋白粗品,然后分别以高、中、低剂量的香椿蛋白腹腔注射小鼠9 d,取一半数量小鼠的血清,用试剂盒测定血清的SOD和GSH-Px,并解剖出肝脏、脾脏和胸腺,测定丙二醛MDA含量及胸腺和脾脏指数;另一半小鼠于第10天腹腔注射淀粉肉汤,然后取腹腔液观察巨噬细胞的吞噬率。[结果]香椿粗品蛋白的含量为84.5%,得率为5.3%。香椿蛋白可明显提高小鼠血清SOD的活性(P<0.05,高剂量P<0.01);高剂量香椿蛋白可明显增加GSH-Px的含量(P<0.05)、脾脏指数(P<0.05,高剂量P<0.01)和巨噬细胞的吞噬率(P<0.05)。[结论]香椿蛋白具有一定的体内抗氧化能力,对小鼠非特异性免疫也有一定的促进作用。     

甘露寡糖对免疫低下小鼠免疫功能的影响

[目的]探讨甘露寡糖对免疫低下小鼠免疫功能的影响,为甘露寡糖相关产品的开发应用提供实验依据。[方法]通过环磷酰胺制造免疫功能低下小鼠模型,给予甘露寡糖11 d后观察小鼠体重、脾脏指数、胸腺指数、巨噬细胞吞噬功能、血清溶血素滴度和迟发型变态反应强度变化。[结果]甘露寡糖组体重、脾脏指数、胸腺指数、巨噬细胞吞噬率、吞噬指数、抗体积数和左右后足重量差均较模型组提高（P〈0.01）。[结论]适当剂量甘露寡糖可提高免疫低下小鼠免疫功能。     

叶下珠抗新城疫病毒活性成分的筛选

[目的]筛选中草药叶下珠中的抗病毒活性成分,为开发治疗禽类病毒性疾病的新药提供条件。[方法]分别用75％乙醇（E）和纯净水（PF）煎煮叶下珠全草,再分别以石油醚（PE）、乙酸乙酯（EA）、正丁醇（BU）萃取其活性成分。将萃取物分别接种鸡胚成纤维细胞（CEF）,观察其对NDV病变的抑制作用;分别接种鸡胚,观察其对NDV血凝效价的影响;分别接种鸡,统计鸡群的死亡率,评价其免疫保护效果。[结果]E-PE、E-BU组萃取物均能明显抑制NDV在CEF细胞上的病变和显著抑制NDV在鸡胚内的增殖（P〈0.05）,以E-BU较好;E-PE、E-BU组的鸡只存活率均极显著高于利巴韦林对照组和生理盐水对照组（P〈0.01）,以E-PE组保护率较高。[结论]叶下珠水提取物效果较差;醇提取物E-PE组和E-BU组能有效抑制NDV病毒病变及其在鸡胚内增殖,对NDV的免疫保护效果较好。