大孔树脂柱富集虫草素工艺研究

通过对大孔吸附树脂型号、静态吸附、动态吸附等分离条件进行详细的探索,建立大孔吸附树脂富集纯化蛹虫草小麦培养基中虫草素的方法。探索从蛹虫草小麦培养基中分离提纯虫草素柱层析分离纯化工艺。大孔树脂柱层析参数为AB-8型,柱洗脱参数为水洗去杂,2BV30%乙醇洗脱。结果表明,采用大孔树脂柱层析能有效地富集蛹虫草小麦培养基中虫草素。     

不出草的蛹虫草固体培养基中虫草素含量分析

确定不出草的蛹虫草(Cordyceps militaris)固体培养基中虫草素含量,可为合理利用不出草的蛹虫草固体培养基提供理论依据。以虫草素含量为检测指标,利用优化后的虫草素超声提取条件以及高效液相色谱定量分析条件,分别对5个不同批次不出草蛹虫草固体培养基中的虫草含量进行了测定。结果表明:5个批次的不出草蛹虫草固体培养基中均含有一定数量的虫草素,虫草素含量为347.2~735.5μg/g,平均548.5μg/g。不出草的蛹虫草固体培养基中虫草素含量较高,具有开发利用价值。本研究结果为今后从不出草的废弃固体培养基中提取虫草素提供了依据,有利于减少虫草资源的浪费。     

蛹虫草废弃培养基二次应用于蛹虫草栽培的探索

以不添加废弃培养基的普通栽培的蛹虫草为对照,研究蛹虫草废弃培养基二次应用于蛹虫草栽培对于蛹虫草子实体鲜质量、虫草素及腺苷含量的影响。结果表明:与对照组相比,废弃培养基添加量为10%、20%、30%时,蛹虫草子实体鲜质量高于对照组,但无显著差异;废弃培养基添加量大于30%时,蛹虫草子实体鲜质量则低于对照组,差异显著;虫草素含量则随废弃培养基添加量的增加而逐渐提高,腺苷含量与对照组相比也有所升高,当废弃培养基添加量为100%时达到最高;虫草素含量比对照组提高2.10倍,腺苷含量比对照组提高1.75倍。     

蛹虫草小麦培养基中虫草素提取工艺研究

通过对比提取溶剂、料液比、温度、pH值及时间对提取蛹虫草小麦培养基中虫草素的影响,以确定虫草素提取最佳工艺参数.结果表明:最佳提取参数为水提取、pH值5,料液比1:50、温度70℃、时间3h.该方法从蛹虫草小麦培养基中提取虫草素,提取率可达94.87％.     

不同培养基对蛹虫草子实体中虫草素和腺苷含量的影响

采用不同种类培养基栽培蛹虫草,以虫草素和腺苷含量为指标,筛选出培养蛹虫草的最优培养基。结果表明,最佳栽培培养基配方为3号培养基(大米40 g+纯柞蚕蛹),以3号培养基栽培获得的蛹虫草子实体中虫草素和腺苷含量均为最高,分别达到15 986.3 mg/kg和2176.5 mg/kg,与其它实验组结果的差异达到极显著水平。     

8种物质对蛹虫草液体发酵中虫草素及多糖含量的影响

【目的】研究不同前体物及营养物对蛹虫草液体发酵中虫草素和虫草多糖含量的影响,筛选提高虫草素及虫草多糖的最适添加物及其添加质量浓度。【方法】将不同质量浓度的腺苷、核糖、次黄嘌呤、谷氨酰胺、甘氨酸、核黄素、苯丙氨酸及甲硫氨酸8种物质添加到蛹虫草液体发酵培养基中,提取菌丝体中的虫草素与多糖,分别用HPLC法、硫酸-苯酚法对其含量进行检测。【结果】在8种添加物中,腺苷、核糖、谷氨酰胺、甘氨酸均能明显提高虫草素及虫草多糖的含量,其最适添加量分别为4.0,2.0～3.0,0.5～1.0,0.5mg/mL;苯丙氨酸、甲硫氨酸、次黄嘌呤对蛹虫草液体发酵中虫草素和多糖含量的促进作用不明显;核黄素对虫草素与多糖合成有抑制作用。【结论】蛹虫草发酵过程中添加腺苷合成途径中的前体物能明显提高其中的虫草素与虫草多糖含量。     

人工栽培蛹虫草虫草素含量HPLC检测方法研究

应用高效液相色谱法检测蛹虫草子实体及其固体培养基中的虫草素含量,优化了样品前处理条件,色谱柱为MP-C18 (4.6 mm ×150 mm,5 μm),流动相为V(甲醇):V(水)=15:85,流速1 ml/min,柱温25 ℃,样品回收率范围为95.1%～104.2%;同时对比使用3种不同的培养基(大米、小麦、蚕蛹粉)栽培的蛹虫草子实体中虫草素的含量,结果表明生长在大米培养基上的蛹虫草子实体中虫草素含量最高.     

以虫草素和腺苷含量为指标优化蛹虫草人工栽培

为提高人工栽培蛹虫草中主要活性成分的含量,以虫草素和腺苷含量为检测指标进行蛹虫草优化栽培研究,在采用Cm-1菌株、以20%豆粕为氮源、水料比为1.4的条件下,可获得子实体产量为每瓶42.2 g、子实体中虫草素含量为4.46 mg.g-1的栽培效果,虫草素含量超过了以蚕蛹为寄主的蛹虫草(2.83 mg.g-1),表明植物蛋白完全可以用作栽培蛹虫草的氮源,同时证实采收子实体后的培养基中仍含有大量虫草素,可作为提取虫草素的原料。     

辐射诱变高产虫草素蛹虫草菌株的研究

[目的]筛选高产虫草素蛹虫草菌株。[方法]采用放射性元素60Co-γ射线辐射诱变方法对蛹虫草菌株进行处理。[结果]筛选出yccGy1016诱变菌株为目标菌株,其生物转化率达12.5%,菌丝中虫草素含量达481.6 mg/kg,子实体虫草素含量达9 600 mg/kg,明显高于对照菌株。[结论]经10代加富PDA斜面继代培养及罐头瓶小麦培养基栽培试验,yccGy1016诱变菌株具有产量性状稳定、产生虫草素能力强的特点。     

人工蛹虫草固体培养基虫草素的分离纯化研究

以人工蛹虫草固体培养基为原料,首先热水浸提虫草素,然后设计单因素试验和正交试验,通过离子交换层析进行分离。结果表明:洗脱流速、料水比为主要影响因子。最优条件为:料水比1∶16,洗脱流速为30滴/min,离子柱pH 3.5,此时虫草素的得率为0.014 2%。     

不同配方下固体培养蛹虫草活性成分含量比较

以蚕蛹、黄豆、玉米糁、蛋白胨为原料固体栽培蛹虫草,研究不同配方培养基对蛹虫草虫草素、腺苷、多糖、虫草酸含量的影响。结果表明,配方5下蛹虫草虫草素含量最高,配方1下腺苷含量最高,配方4下多糖、虫草酸含量最高,在纯蛹培养基中添加适量黄豆、玉米糁、蛋白胨有利于蛹虫草活性物质的提高。     

蛹虫草大米培养残基中虫草素提取方法的优化研究

[目的]优化蛹虫草大米培养残基中虫草素的提取方法。[方法]以蛹虫草大米培养残基为原料,根据虫草素的理化性质,采用不同提取溶剂、温度、时间和pH值,进行单因素试验设计,利用HPLC技术检测虫草素。[结果]结果表明,蛹虫草大米培养残基中虫草素含量为2．011—2．185g／kg。不同水浴时间和温度条件的提取值为1．316～1．968g／kg。培养基残基中虫草素含量与子实体的比较系数为99．1％～110．9％。不同pH值提取液提取虫草素分别提高2．15％-15．89％。残基中虫草素优化的水溶剂提取工艺条件为：时间60min、温度60℃、pH值2．0;高浓度虫草素在水溶液中可能会发生降解。[结论]该研究为蛹虫草固体培养基的深加工和再利用以及开发新的虫草素资源提供理论依据和技术指导。     

不同种类氨基酸对蛹虫草发酵液中虫草素含量的影响

[目的]研究液体培养基中添加氨基酸对蛹虫草发酵液中虫草素含量的影响,并确定8种氨基酸最佳添加浓度。[方法]考察24种氨基酸(添加浓度为1 g/L)对虫草素含量的影响,采用DPS V18.10软件进行差异显著性分析,并对促进虫草素合成作用显著的8种氨基酸添加浓度进行研究。[结果]L-赖氨酸、L-半胱氨酸、L-精氨酸、L-天门冬酰胺、L-甘氨酸、L-丙氨酸、L-丝氨酸、L-苏氨酸、L-组氨酸、肌氨酸对蛹虫草发酵液中虫草素含量具有不同程度的提高作用;4 g/L的L-甘氨酸对虫草素的合成促进作用最强,发酵液中虫草素含量为1 022.25 mg/L。[结论]该研究为蛹虫草液体发酵生产虫草素提供参考依据。     

蛹虫草面条的研制及加工工艺优化

为实现蛹虫草的综合利用,制作出营养丰富的蛹虫草面条,对蛹虫草面条的加工工艺进行了优化.以虫草素及虫草多糖含量为指标,考察了蛹虫草、食盐、水的添加量对蛹虫草面条的品质和感观的影响.结果表明,100 g面粉中,蛹虫草的添加量为5%,水的添加量为30%~34%,食盐的添加量为1%时,蛹虫草面条的品质、感官及营养价值取得平衡,且虫草素和虫草多糖的含量丰富.     

蓝光诱导蛹虫草虫草素含量和分生孢子数的变化

[目的]研究蓝光对蛹虫草菌丝体中虫草素含量和分生孢子量的影响。[方法]以蛹虫草为材料,在不同的蓝光照射时间取样,以检测菌丝体中虫草素的含量,并计数蛹虫草分生孢子的产生量。[结果]蛹虫草受蓝光照射后,其虫草素的产生受到了一定的抑制,同时虫草素含量的变化也有一定的波动性;在相同的时间点,受蓝光照射的蛹虫草分生孢子数量比黑暗时的分生孢子数量要多,同时在一定时间范围内分生孢子数均呈上升趋势。[结论]该研究为系统性的研究蓝光对蛹虫草的影响奠定了基础。     

蛹虫草中虫草素的提取与纯化工艺研究进展

介绍了蛹虫草中虫草素的提取分离和纯化工艺,对虫草素提取富集的主要研究进展进行了综述。指出目前对虫草素分离采用的主要方法是离子交换树脂法和硅胶柱层析法,对虫草素的主要检测方法是高效液相色谱法、色质联用法和毛细管电泳法。并对膜分离技术在虫草素提取分离上的应用进行了展望。     

蛹虫草大米培养基中活性多糖的提取及免疫调节功能研究

为探讨从蛹虫草大米培养基中提取其活性多糖的可行性、验证蛹虫草大米培养基活性多糖对小鼠免疫调节功能的调节作用。采用正交实验法优化蛹虫草大米培养基活性多糖提取工艺,用血凝法检测血清溶血素的水平,用M TT法测定了脾淋巴细胞的转化。结果表明,蛹虫草大米培养基活性多糖的最佳提取条件是乙醇浓度95%、提取4次、提取温度90℃,其提取率为0.74%;蛹虫草大米培养基活性多糖能显著提高小鼠的血清溶血素含量,促进小鼠的脾淋巴细胞转化能力。     

微波-超声波协同作用蛹虫草虫草素提取条件的优化

为满足市场对虫草素的需求,提高虫草素提取率,选用蛹虫草为原料,在微波-超声波仪协同作用条件下进行该试验。通过单因素试验和正交试验考察料液比、溶剂比、提取时间和微波功率对蛹虫草虫草素提取率的影响。结果表明:蛹虫草虫草素提取的最佳提取条件为料液比1∶5,甲苯与无水乙醇配比10∶1,提取时间50min,微波功率为60 W,该条件下蛹虫草中虫草素的提取率为0.27%。     

蛹虫草活性成分分析

本研究对实验室分离的虫草菌种进行了鉴定,确定其为蛹虫草,经测定其主要活性成分为虫草多糖11．870g／100g、虫草素0．33g／100g、虫草酸9．9g／100g,含量均高于天然冬虫夏草。     

提高蛹虫草培养物中虫草素含量的研究

为提高蛹虫草的虫草素含量，从寄主培养、液体培养、固体培养和代料栽培等方面进行研究，使蛹虫草培养物的虫草素含量获得显著提高，寄主培养的蚕虫草虫草素含量超过12mg／g，菌核超过30mg/g；液体培养的培养液超过0．2mg／ml，菌丝体超过3mg／g；固体培养物超过10mg/g，代料栽培子实体超过3mg/g，采后培养基的虫草素含量比子实体还要高。