激素6-BA、多效唑对非洲菊茎尖、叶柄离体培养的影响

浓度2～5mg／L的激素6-BA与MS组合培养基，可有效促使非洲菊茎尖和叶柄直接分化出芽，分化所需时间相对小花托诱导分化提前35-50d，再生频率提高85％和45％；6-BA浓度在0．2mg／L与0．8mg／L交替使用时，有利于提高组培苗的增殖系数；0．1mg／L和0．2mg／L多效唑的应用可大幅度提高非洲菊组培苗增殖系数、生根率和试管苗的移栽后成活率。     

不同外植体和激素对非洲菊愈伤组织诱导及芽分化的影响

通过不同外植体对非洲菊愈伤组织诱导的试验、不同激素水平对花托愈伤组织形成及芽分化的试验。结果表明,以叶柄、叶片为外植体,愈伤组织诱导率低;以带芽短缩茎为外植体,污染率高;以花托作为外植体,愈伤组织诱导率高,且污染率较低。因此,花托是较理想的外植体材料。以花托为外植体在培养基MS＋6-BA 2.0 mg·L^-1＋KT 4.0 mg·L^-1＋NAA 0.5 mg·L^-1上能诱导出大量愈伤组织,并能进一步分化出健壮芽。     

非洲菊组织培养与快速繁殖试验研究

以非洲菊的花托、茎尖、花梗为外植体进行组织培养快速繁殖试验,结果表明:适合花托外植体愈伤组织不定芽诱导的培养基为"池上真一培养基"+6-BA 2 mg/L+NAA 0.5 mg/L,适合茎尖外植体愈伤组织不定芽诱导的培养基为MS+KT 10 mg/L+IAA 0.5 mg/L,适合花梗外植体愈伤组织不定芽诱导的培养基为MS+6-BA 10 mg/L+IAA 0.5 mg/L;适合非洲菊试管苗继代增殖的培养基为MS+KT 10 mg/L+IAA0.5 mg/L;适合非洲菊试管苗生根培养的培养基为1/2 MS+NAA 0.03 mg/L。     

非洲菊的组织培养和快速繁殖

以非洲菊幼花托为外植体，改良ＭＳ培养基为基本培养基，添加６－ＢＡ、ＩＡＡ等激素，诱导少量愈伤组织，然后分化出芽，形成完整植株，并移栽到田间。     

金娃娃萱草组织培养技术研究

对金娃娃萱草的茎尖、心叶和花蕾作为外植体材料进行组培快繁技术研究的结果表明 ,最佳外植体为花蕾 ;诱导花蕾产生愈伤组织分化和丛生芽生长的适宜培养基均为 MS 6 - BA1.0 m g/ L KT1.0 mg/ L IBA 0 .5mg/ L ,适宜试管苗生根的培养基为 1/ 2 MS NAA0 .1m g/ L ,生根率达 93.3% ;生根试管苗根系长至 1.5 cm以上时 ,移栽成活率高达 90 .0 %以上。     

非洲菊幼花托离体培养研究

本试验研究表明：取非洲菊幼花托为外植体，以1/2MSH 8mg/L BA 0.3mg/L NAA培养基，不定芽再生率最高；以幼花托为外植体，不定芽再生主要集中在接种后50-90d的时间段内，90d以后分化出的不定芽，芽体弱小，生长慢；同时，试验将最佳分化培养基应用于其他8个主栽非洲菊品种。     

非洲菊品种的收集、繁育及保存研究

收集、评价了38个非洲菊品种,并通过实验得到了建立非洲菊无性系的优化条件,结果表明：以花托作为外植体可大大降低污染率;同时用KT、6-BA搭配和高细胞分裂素浓度、低生长素浓度以及1／2MS培养基均有利于提高花托不定芽的分化率;为了有利于试管苗的生根并防止内源激素的增加而引起变异,增殖培养基中6-BA的浓度应控制在1-2mg／L,并结合“MET”和低温同时进行。     

胡杨的组织培养

本文报近了以胡杨的无菌幼叶作为外植体材料，诱导产生愈伤组织，进而分化形成无菌苗的方法，采用第一轮试管苗的幼叶作外植体比用茎切段作外植体繁殖率高，且由于芽长成的嫩技较小，可以大大节省容器，比茎切段更为经济实用．     

黄芩(Scutellaria baicalensis Georgi)的组织培养快速繁殖

【目的】建立黄芩(Scutellaria baicalensis Georgi)的组织培养快速繁殖体系。【方法】以黄芩的幼茎、幼叶及叶柄为外植体,在MS培养基上添加不同质量浓度的6-BA、2,4-D与NAA诱导愈伤组织及再生芽;在1/2 MS培养基上添加IAA、IBA或NAA激素,单独或者组合使用,诱导黄芩试管苗生根。【结果】幼叶和叶柄容易褐化死亡,而幼茎显示很好的脱分化和再分化效果;BA与NAA组合可以诱导幼茎外植体脱分化与再分化,而BA与2,4-D组合只能诱导愈伤组织发生。IAA诱导生根率最高,但是茎基部会形成愈伤组织,后期无法驯化成活;IBA及NAA均可以诱导根的发生,但是以IBA效果为佳。【结论】幼茎为最佳外植体,MS+BA0.5mg/L+NAA 0.5mg/L为最佳的愈伤组织诱导及再生芽的分化培养基。1/2MS+IBA 0.1mg/L为最佳的试管苗生根培养基,生根率为70.3%。     

非洲菊叶片愈伤组织诱导和不定芽分化的研究

以非洲菊3个品种叶片为材料,研究了不同基因型、叶片叶龄和叶片不同部位以及激素对非洲菊愈伤组织诱导和不定芽分化的影响。结果表明:诱导愈伤组织较为适宜的外植体为嫩叶,以MS+6-BA 1.0~5.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L为培养基,愈伤组织诱导率均98%;诱导分化不定芽较为适宜的外植体为叶柄,最适培养基为MS+TDZ 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L,但不定芽分化率较低,仅为4.2%。     

天等1号辣椒遗传转化再生体系的研究

对天等1号辣椒的子叶、带柄子叶、带柄真叶和F lam ingo-b ill外植体进行了遗传转化,比较不同激素及其水平对不同外植体芽分化的影响,以及外植体对卡那霉素的敏感性。结果表明,仅有以F lam ingo-b ill为外植体所形成的愈伤组织,能在培养基M S ZT 1.0m g/L IAA 0.2m g/L A gNO32.0m g/L上诱导芽的分化(63%的分化率),在培养基M S ZT 1.0m g/L IAA 0.2m g/L A gNO32.0m g/L GA32.0m g/L上使诱导芽伸长(15%的芽伸长率)。抗性筛选最适卡那霉素浓度为50m g/L。通过根癌农杆菌介导法转化,共获得33株抗性再生苗。PCR和PCR-Sou thern杂交检测结果表明,94%的抗性植株检测到报告基因nptII片段。     

高山蓍嫩茎无性系的建立

[目的]建立高山蓍嫩茎再生繁殖体系,满足高山蓍人工栽培对种苗的需求,保护其野生种质资源.[方法]以嫩茎为外植体,分别探讨不同培养基和激素组合对愈伤组织的诱导、分化、不定芽生根、试管苗继代增殖培养的影响.[结果]在添加不同激素组合的MS、1/2MS、8114和B5培养基中,高山蓍嫩茎愈伤组织诱导培养的理想培养基为1/2MS+6-BA 0.8 mg/L+NAA 0.5 mg/L+2,4-D 1.5 mg/L和1/2MS+6-BA 0.8 mg/L+NAA 0.5 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L;愈伤组织分化培养的理想培养基为1/3MS和1/3MS+IAA 0.2 mg/L;在添加NAA 0.6 mg/L或IAA 0.6 mg/L的1/2MS、1/4MS、N6、B5和LS培养基中,1/4MS+IAA 0.3 mg/L是不定芽生根培养和试管苗继代增殖的理想培养基,生根率为92%,平均每代繁殖系数为2.7;试管苗易移栽定植,成活率可达98.6%.[结论]建立了高山蓍嫩茎繁殖无性系,定植的试管苗生长旺盛,翌年开花结果,并保持了高山蓍的所有植物学性状.     

OT型百合品种黄天霸花器官组培快繁体系的建立

[目的]研究OT型百合品种黄天霸花器官的离体培养快速繁殖技术,为其种球产业化生产提供技术支持.[方法]以黄天霸花蕾和半开花的不同部位为外植体,以MS为基本培养基,探讨不同外植体的愈伤组织诱导效果、0～3.0 mg/L6-BA对外植体愈伤组织分化、1.0～3.0 mg/L 6-BA＋0～0.2 mg/L NAA组合对叶片不定芽诱导、30.0～80.0 mg/L蔗糖对鳞茎形成及生根的影响,调查不同基质对组培苗移栽种植的效果.[结果]花蕾和半开花不同部位愈伤组织诱导从易到难表现为：子房＞柱头＞花药＞花托＞花丝、花瓣,子房和柱头的愈伤组织诱导率均超过50.0％.在MS培养基中,随着6-BA用量的增加（0～3.0 mg/L）,外植体愈伤组织分化率先提高后稍有下降,适宜分化培养基为MS＋ 2.5 mg/L 6-BA.在不同6-BA和NAA组合中,以培养基MS＋3.0 mg/L 6-BA的无菌叶片不定芽诱导效果较优.添加60.0 g/L蔗糖的MS培养基利于不定芽结鳞茎生根;带鳞茎组培苗移栽于大田菜园土即可成活.[结论]成功建立的OT型百合品种黄天霸花器官离体快速繁殖体系可用于其种球工厂化生产,扩大规模化种植.     

安祖花组织培养和植株再生的研究

[目的]为安祖花幼苗的规模化生产提供依据。[方法]以叶片、叶柄以及组培苗气生根为外植体,进行安祖花愈伤组织的诱导,探索安祖花再生植株规模化生产的最佳途径。[结果]叶片、叶柄以及组培苗气生根均能成功地诱导产生愈伤组织,其中叶片诱导率最高(92%),组培苗气生根诱导率可达82%。诱导愈伤组织分化产生不定芽的最佳培养基为1/2MS+6-BA1.0 mg/L+KT0.1 mg/L。培养基1/2 MS+IBA0.5 mg/L和MS+IBA0.5 mg/L均可诱导不定芽产生根,无明显差异。将珍珠沙和花泥按1∶1(V∶V)混合后作为组培苗移栽的培养基质,经30 d培养,幼苗成活率达91%。[结论]以气生根为外植体,规模化再生植株只需55~60 d,生产成本也大大降低。     

绿萝组织培养与快繁技术

[目的]研究绿萝组培快繁技术要点,为绿萝再生体系建立和工厂化生产提供技术支持.[方法]以绿萝叶片和无节茎段为外植体,以MS为基本培养基,探讨不同浓度的激素组合(1.0~3.0 mg/L 6-BA、0.1~0.3 mg/L NAA、0.1~0.3mg/L IBA)对愈伤组织诱导及其分化、不定芽诱导、生根培养等的影响.[结果]两种外植体均能产生愈伤组织,但茎段产生愈伤组织较快,产生不定芽也快.叶片诱导愈伤组织的最适培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L,愈伤组织分化的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L.茎段诱导愈伤组织及其分化的最适培养基均为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.2 mg/L,最适生根培养基为1/2MS+NAA 0.2 mg/L.[结论]绿萝叶片和茎段可作为愈伤组织培养的较好外植体,茎段培养效果优于叶片.     

Effects of 2,4-Dichlorophenoxy Acetic Acid and Light on Growth of Gerbera(Gerbera jamesonii cv.Daxueju) Callus

This study was conducted to determine effects of 2,4-dichlorophenoxy acetic acid(2,4-D) and light on growth of gerbera(Gerbera jamesonii cv. Daxueju) callus. Callus was induced from both petiole and leaf explants of gerbera on Murashige and Skoog medium supplemented with 3% sucrose and various concentrations of 2,4-D and placed under light and dark. Callus induction percentage, callus size and callus fresh and dry weights were efficiently higher when using petiole as explant. MS medium supplemented with 1.5 mg/L 2,4-D showed the highest callus induction percentage of 96.70%. Callus induced under light had larger weight mass. It was indicated that 1.5 mg/L 2,4-D and light could promote growth of gerbera callus from petiole explant.     

培养基和植物激素对非洲菊叶片愈伤组织诱导的研究

为了完善非洲菊组培快繁体系和推动非洲菊种苗工厂化生产,本试验以非洲菊叶片为外植体,对影响非洲菊愈伤组织诱导的基本培养基、激素种类及其浓度等关键因素进行了研究。结果表明,基本培养基以MS诱导愈伤组织效果最好,诱导率可达78.3%;2,4-D比NAA和IBA能够较快地诱导叶片产生愈伤组织,其中以1.0mg/L2,4-D诱导率最高,可达100%,且形成愈伤组织多;6-BA诱导愈伤组织的效果优于KT和TDZ,2.0mg/L6-BA的诱导率为89.7%;叶片在6-BA2.5mg/L+2,4-D0.5mg/L+NAA0.4mg/L培养基上愈伤组织诱导率最高,诱导出的愈伤组织生长快,并可分化出不定芽。     

大活组织培养及再生体系建立的研究

以大活的嫩茎为外植体,进行了大活组织培养及再生体系建立的研究。试验结果表明:MS+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L是愈伤组织诱导和继代增殖的理想培养基;在光照条件下MS+ZT 0.6 mg/L+NAA 0.1 mg/L是愈伤组织分化的理想培养基;1/4MS+IAA 0.5 mg/L是不定芽生根和试管苗生根继代增殖的理想培养基。试管苗移栽成活率为92.1%,定植后成活率为96.8%。     

中华猕猴桃华优遗传转化系统建立研究

为了更好的利用遗传转化技术进行猕猴桃品种改良研究,以中华猕猴桃华优组培苗幼嫩叶片为材料, 研究了外植体分化不定芽再生途径所需的培养条件及转化效率提高方法。结果表明,在叶片不定芽诱导培养基中加 入浓度为0.75~1.0 mg/L 的TDZ 时,叶片愈伤发生率达85.7%~90.1%,不定芽发生率达41.8%~44.6%;在TDZ 1.0 mg/L 基础上,补充0.1~0.4 mg/L IAA 可使叶片愈伤发生率提高到96.7%~100%,不定芽发生率提高到67.4%~71.9 %; 在农杆菌侵染液与共培养基中同时加入75~100 滋mol/L 浓度的AS,可使GUS 瞬时表达率及卡那抗性芽发生率分别 提高至27.9%、14.5%;外植体被农杆菌侵染前,的预培养2~3 d有利于提高GUS 表达率与卡那抗性芽发生率。GUS 染色与PCR 扩增检测结果显示,Shiva A基因已转化至中华猕猴桃华优转基因植株。     

猕猴桃良种‘杨氏金红50号’离体再生技术

为实现‘杨氏金红50号’猕猴桃组织培养工厂化育苗,以其组培苗的叶片、叶柄为外植体直接诱导不定芽,研究不同植物生长调节剂对不定芽诱导、生根诱导的影响,筛选出高效离体再生方式。结果表明：直接诱导叶片产生不定芽的最佳培养基为MS+2 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,平均褐化率为7.5%,平均发芽率为92.5%;直接诱导叶柄产生不定芽的最佳培养基为MS+2 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA,平均发芽率为89.17%;生根培养的最佳培养基为1/2 MS+0.9 mg/L IBA,根扎在培养基内部,平均愈伤组织块直径为1.03 cm,平均生根率为100%,平均根长为3.19 cm,平均生根数量为12.58条,最适开盖炼苗时间为7 d。