几种常见猪病抗体水平检测分析

检测猪蓝耳病抗体血清1552份、猪瘟抗体血清2180份、猪圆环病毒抗体血清454份、H1N1猪流感抗体血清462份、猪肺炎支原体抗体血清488份、猪放线杆菌胸膜肺炎抗体血清116份.结果表明,规模猪场猪蓝耳病抗体阳性率较高,母猪达92%,肉猪达82%,小规模自繁自育场为30%,发病隐患较大;猪瘟抗体检测,规模猪场母猪抗体阳性率达95%,其余均在60%以下(国家规定抗体合格率≥70%),发病隐患较大;圆环病毒抗体检测,无论规模场或自繁自育场,阳性率均在60%以上.另外,猪流感、肺炎等症小规模猪场感染较为严重;胸膜肺炎则规模猪场感染较为严重.     

不同种类呼吸道样品活体检测猪肺炎支原体抗原和抗体的比较分析

猪支原体肺炎是由猪肺炎支原体(Mhp)引起的猪的一种慢性呼吸道疾病，Mhp基础感染率的监测对于及时实施控制措施和评估防控与净化效果至关重要。为了解在活体检测过程中的不同采集时间、样品类型和检测方法对猪肺炎支原体感染诊断结果的影响，本研究通过ELISA和实时定量PCR方法检测了来源于某大型养殖场的断奶仔猪、保育猪、屠宰猪、后备猪和种猪群活体采集的鼻拭子、喉拭子和咽拭子样品中的Mhp黏膜sIgA抗体和Mhp抗原。结果：鼻拭子、喉拭子和咽拭子样品总体的黏膜抗体阳性率分别为63.23%、62.55%和47.27%,抗原阳性率分别为74.75%、65.91%和63.64%。从不同的生产阶段看，保育猪和屠宰猪群中Mhp黏膜sIgA抗体阳性率较高，而断奶仔猪群中Mhp黏膜sIgA抗体阳性率最低。Mhp抗原的检出率随着猪群生产日龄的增加而增加，屠宰猪群和后备猪群鼻拭子和喉拭子中Mhp抗原阳性率达到峰值，种猪群中的抗原检测率出现了下降。对于鼻拭子样品中抗原与抗体的检测，从断奶仔猪至屠宰猪阶段，Mhp黏膜sIgA抗体的检出率更高，而后备猪群的抗原检出率更高。研究表明，在临床生产实际中，对于Mhp感染的活体...     

新疆伊宁市周边猪支原体肺炎的流行病学调查

猪支原体肺炎又称猪气喘病,是危害养猪业最重要的疾病之一。本研究通过采集新疆伊宁市周边地区规模化猪场、养殖合作社及生猪散养户饲养的疑似支原体肺炎猪只的鼻拭子或病料(肺脏),利用荧光定量PCR方法对猪支原体肺炎感染情况进行调查,并结合对周边规模化养殖场、养殖合作社和散养户进行的支原体肺炎流行病学调查进行分析,结果显示伊宁市周边规模化养殖场、养殖合作社及周边散养户的猪只均有猪支原体肺炎感染,其中鼻拭子采样阳性率为38.8%;肺脏病料阳性率为57.8%,结果也反映了散养户发生支原体肺炎感染的情况较为严重。同时通过支原体肺炎的流行病学调查结果综合分析该病的发生及发展规律对预防控制新疆地区猪支原体肺炎提供理论依据。     

四川省部分猪场PCV-2感染的血清学调查

为了研究四川省规模化猪场猪圆环病毒2型(PCV-2)的感染现状和不同生长阶段猪群的感染情况,研究采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对采自四川省5个地区6个猪场的种公猪、母猪、后备母猪、保育猪及哺乳仔猪共184份血清进行了PCV-2的抗体检测,同时运用PCR方法对种公猪及经产母猪的20份扁桃体进行了PCV-2的抗原检测。结果表明:PCV-2抗体总阳性率为69.57%(128/184),种公猪阳性率为75.00%(18/24),经产母猪阳性率为97.87%(46/47),后备母猪阳性率为91.11%(41/45),保育猪阳性率为43.75%(21/48),哺乳仔猪阳性率为10.00%(2/20);PCR检测结果为种公猪阳性率为70.00%,经产母猪阳性率为90.00%。说明四川地区普遍存在圆环病毒的感染并且比较严重。     

广东东莞地区猪肺炎支原体感染的血清学调查

为了解广东东莞地区猪养殖场猪肺炎支原体感染情况,在5个镇（街）、20个猪养殖场共采集了390份血清,应用ELISA方法进行猪肺炎支原体抗体检测。结果为猪肺炎支原体抗体阳性率为86.92%,20个猪养殖场都存在不同程度的猪肺炎支原体感染,其中母猪的抗体阳性率为70.41%,仔猪为84.45%,中猪为97.50%,大猪为92.63%。结果表明,广东东莞地区养殖场猪受肺炎支原体感染情况比较普遍,需采取综合防控措施。     

安徽地区猪传染性胸膜肺炎流行病学调查

为了解安徽地区猪传染性胸膜肺炎(PCP)的流行情况,本研究采用ApxIV-ELISA试剂盒对1 288份猪血清样品中胸膜肺炎放线杆菌(APP)感染抗体进行检测,并采用PCR方法对573份母猪鼻腔棉拭子样品和92份屠宰生猪肺脏样品的APP核酸检测。结果显示,APP感染抗体总阳性率为26.40%,母猪/后备母猪/公猪APP感染抗体阳性率(45.47%)高于哺乳仔猪(28.02%)、保育猪(6.16%)、育肥猪(7.20%);夏季(41.42%)高于春季(29.75%)、秋季(26.35%)、冬季(19.26%);淮北地区(30.73%)和江淮地区(28.57%)高于皖南地区(13.77%);中型猪场(47.16%)高于大型猪场(19.28%)和小型猪场及散养户(23.15%);屠宰生猪肺脏样品APP核酸阳性率(11.96%)高于母猪鼻腔棉拭子(1.92%)。ELISA试剂盒与PCR同步检测的符合率为49.77%。表明PCP在安徽地区普遍存在,为引起猪呼吸道疾病综合征的主要原因之一。本研究结果为PCP的有效防控提供了现地调查依据。     

猪肺炎支原体和猪鼻支原体双重荧光定量PCR检测方法的建立

建立同时检测猪肺炎支原体和猪鼻支原体的双重荧光定量PCR方法。根据猪肺炎支原体P97序列和猪鼻支原体P37序列的特异性引物,分别标记FAM和Texas Red荧光报告基团的2条TaqMan探针,建立和优化双重实时荧光定量PCR反应条件和体系,同时检测其敏感性、特异性和重复性。建立的双重荧光定量PCR对猪肺炎支原体和猪鼻支原体的最低检测值均为10copies·μL-1;与猪源致病菌、病毒和其他常见细菌均无交叉反应;各浓度标准品的Ct值变异系数小于5%,重复性好。检测72份临床样本,其中猪肺炎支原体的肺阳性率为80%,鼻拭子阳性率22%,支气管肺泡灌洗液阳性率58.33%;猪鼻支原体的肺阳性率为40%,鼻拭子阳性率66%,支气管肺泡灌洗液阳性率41.67%。建立的双重荧光定量PCR方法比普通PCR更加敏感,实用性强,可用于临床样品的检测。该方法能同时快速和定量地检测猪肺炎支原体和猪鼻支原体,在短时间内获得样品的多个信息,快速地解决了多次检测所需的时间以及经济消耗,为猪肺炎支原体和猪鼻支原体的监测和防控提供了新型、可靠的检测技术。     

一例猪场多病原混合感染的诊断与分析

为了对一例规模化猪场发病病例所患疾病进行诊断,同时了解该猪场的抗体水平及病原感染情况,试验对该猪场的血清样品、鼻拭子、粪便样品及组织样品进行血清学和病原学检测。结果表明:发病猪组织样品中蓝耳病病毒阳性率为71. 4%、猪圆环病毒2型阳性率为85. 7%、肺炎支原体阳性率为85. 7%、伪狂犬病病毒阳性率为14. 3%、副猪嗜血杆菌阳性率为71. 4%。鼻拭子中猪肺炎支原体阳性率为16. 3%。血清样品中猪瘟病毒抗体、蓝耳病病毒抗体阳性率达到80%以上,抗体水平较高;伪狂犬病病毒g E抗体阳性率达到34. 8%;肺炎支原体疫苗只免疫了仔猪,全群抗体阳性率为59. 3%;猪圆环病毒2型疫苗全场未免疫,而抗体阳性率却高达77. 1%。粪便样品中A群轮状病毒阳性率为66. 7%;球虫阳性率为100%。说明蓝耳病病毒、猪圆环病毒2型、肺炎支原体、伪狂犬病病毒、副猪嗜血杆菌、轮状病毒和球虫是该场的主要病原,应加强防控,提高猪群的免疫水平,降低猪群的感染风险。     

猪肺炎支原体和猪鼻支原体在屠宰猪呼吸道与血液中的分布

用PCR方法对从湖南省长沙市515头屠宰猪收集的1 204份样品(120份猪鼻拭子、254份猪支气管拭子、515份猪支气管肺泡灌洗液和235份猪肺、80份血液)进行了猪肺炎支原体和猪鼻支原体检测,并对部分PCR产物进行序列分析。结果发现,猪肺炎支原体在猪支气管灌洗液中检出率最高(23.3%,120/515),猪鼻拭子和血液中检出率最低(0);猪鼻支原体在猪鼻拭子中检出率最高(24.3%,125/515),在猪支气管拭子中检出率最低(2.5%,3/120)。序列分析表明:试验的PCR产物与国内已出版的相关序列有97%~100%的同源性。试验探明了猪肺炎支原体和猪鼻支原体在猪呼吸道与血液中的分布情况,为这两种支原体的分离鉴定提供了依据。     

苏姜猪肺炎支原体流行病学调查报告

为研究苏姜猪新品种对猪气喘病的抵抗力,笔者采集不同猪场各个生长阶段苏姜猪的鼻拭子,采用PCR检测肺炎支原体病原携带的差异性。试验结果显示,不同猪场间猪群肺炎支原体病原携带的阳性率存在差异;猪群生长发育的不同时期,肺炎支原体病原携带的阳性率也存在差异(育肥期最高);苏姜猪携带肺炎支原体比其亲本姜曲海猪携带病原的阳性率低。结果说明了猪场猪群肺炎支原体病原阳性率差异与饲养环境相关,苏姜猪比其亲本姜曲海猪对猪支原体肺炎耐受力更强。     

应用PCR方法调查东北三省部分地区猪附红细胞体病流行情况

为了解东北三省猪附红细胞体感染情况,应用血液压滴标本镜检法和PCR检测方法对东北三省部分地区600头份猪血液样本进行了检测。结果:血液压滴标本镜检法检测阳性率为87.3%(524/600),PCR检测方法检测阳性率为91.5%(549/600)。其中种母猪阳性率为87.2%(34/39),育肥猪阳性率为90.8%(347/382),断奶仔猪阳性率为92.9%(78/84),哺乳仔猪阳性率为94.7%(90/95);黑龙江省阳性率为93.5%(187/200),辽宁省阳性率为89.5%(179/200),吉林省阳性率为91.5%(183/200)。结果表明,东北三省猪附红细胞体感染情况严重。     

猪场母猪与仔猪猪圆环病毒2型感染情况调查

为了解目前母猪和仔猪猪圆环病毒2型(PCV2)感染情况,本试验对来自于15个猪场的85份母猪血清和29个猪场的55份仔猪可疑病料(脾脏、淋巴结、肾脏等),分别采用间接ELISA和PCR法进行PCV2抗体和病毒核酸检测。结果显示,在15个猪场中,1个猪场母猪抗体呈阴性,其他14个猪场母猪抗体均呈阳性,猪场PCV2阳性检出场为93.3%(14/15),85份母猪血清抗体总阳性率为75.3%(64/85)。29个猪场的仔猪,PCV2核酸检测阳性猪场为19个,猪场阳性率为65.5%(19/29),55份仔猪可疑病料病毒核酸检测总阳性率61.8%(34/55)。可见,母猪和仔猪感染PCV2相当普遍。对母猪群PCV2抗体阳性率及其仔猪群病毒核酸阳性率进行比较发现,母猪群PCV2抗体阳性率越高其仔猪群病毒核酸阳性率却越低。     

香猪肺炎支原体抗体水平的固相ELISA方法检测及防治建议

猪肺炎支原体是导致猪呼吸道疾病的重要病原,由此引发的气喘病常给猪场造成巨大的经济损失。了解香猪肺炎支原体感染情况对制定相应科学的防治措施,提高香猪经济效益大有帮助。用固相ELISA方法对香猪肺炎支原体抗体进行检测,采集血清样本97份,经检测阳性45份,阳性率为46．39％。试验结果表明：香猪的阳性率49．06％,杂交猪为43．18％;哺乳仔猪阳性率为0,保育猪为11．11％,育肥猪为59．09％,生产母猪为88．89％。生产母猪和育肥猪已成为香猪场肺炎支原体感染的主要传染源。     

致犊牛肺炎和关节炎牛支原体新疆株的分离与鉴定

自2010年7月以来,新疆北疆部分地区某些奶牛场犊牛陆续出现严重的肺炎和关节炎,为确定其病原,无菌采集8个牛场病死犊牛的肺脏和关节液,患病犊牛的血清和部分鼻拭子,病料接种筛选培养基,通过菌落形态观察、特异性PCR鉴定、生长抑制试验和血清学检测,确定牛支原体15株,其中7株牛支原体克隆测序,与PG45 OPP F基因同源性为97.32%~100.00%。牛支原体ELISA试剂盒检测92份血清显示,阳性率82.61%。结果表明,该地区奶牛场发病犊牛以牛支原体感染为主。     

不同品种猪群肺炎支原体流行病学调查

为了调查地方猪种与引进猪种肺炎支原体的流行情况,本试验以姜曲海猪、苏姜猪、长白猪为调查对象,通过不同猪群发病情况、血清学、鼻拭子病原检测和屠宰肺部病变情况了解不同品种间肺炎支原体流行病学情况。结果表明:姜曲海猪、苏姜猪、长白猪的猪群发病率分别为17.43%、3.27%、2.41%,死亡率分别为7.71%、0.92%、0.60%,姜曲海猪发病率和死亡率明显高于苏姜猪和长白猪;姜曲海猪群血清阳性率达36.84%,比苏姜猪群高约22百分点,比长白猪群高约24百分点;姜曲海猪群肺部病变指数评分极显著高于长白猪群和苏姜猪群(P0.01);而从猪群鼻拭子肺炎支原体病原检测结果看,3个品种猪群之间携带病原情况并不存在显著差异(P0.05)。说明不同品种猪群间存在流行病学差异,中国地方猪种的易感性明显高于引进猪种。     

规模化猪场猪伪狂犬病野毒感染的调查

为了解北疆部分规模化猪场伪狂犬病野毒感染情况,本试验于2016年6月-2017年7月共采集北疆5个不同规模的规模化猪场567份血清,采用gE-ELISA和全病毒ELISA方法进行伪狂犬野毒及免疫抗体的检测。结果表明,北疆地区猪伪狂犬病全病毒抗体总阳性率为99.32%(290/292),gE抗体总阳性率为52.74%(154/292);其中B、D、E三场全病毒抗体阳性率都达到了100%,C场阳性率最低,为98.15%(53/54),D场gE抗体阳性率最高为83.33%(20/24),B场gE抗体阳性率最低为35%(14/40);不同猪群调查结果显示,怀孕母猪gE抗体猪阳性率最高为68.18%(30/44),公猪较高为59.38%(19/32),保育猪阳性率最低为35.14%(26/74);A场在2016年6月-2017年7月3次检测中,gE抗体阳性率总体呈下降趋势,其中生产母猪和怀孕母猪下降明显,其他猪群阳性率波动较大。检测结果揭示,北疆地区伪狂犬野毒感染净化工作的压力依然很大,需要进行严格的检疫、免疫以及净化。     

石河子部分规模猪场副猪嗜血杆菌病的血清学调查

为了解副猪嗜血杆菌(HPS)在石河子规模猪场的流行情况,试验采用ELISA方法进行了副猪嗜血杆菌抗体的检测,并对抗体阳性血清进行了其他呼吸道病混合感染血清学调查。结果表明:330份血清样品HPS抗体阳性率为60.30%(199/330),12个猪场感染阳性率为91.67%(11/12);199份阳性血清中,24.62%(49/199)感染了H1N1亚型猪流感病毒(SIV),49.25%(98/199)感染了猪肺炎支原体(Mhp),84.42%(168/199)感染了猪圆环病毒2型(PCV-2),35.18%(70/199)感染了猪胸膜肺炎放线杆菌(APP),49.75%(99/199)感染了猪链球菌2型(SS2)。说明垦区大部分规模猪场存在HPS感染情况,且混合感染情况比较严重。     

2010—2011年猪场中猪源新型甲型流感病毒流行情况调查

为深入了解猪源新型甲型流感病毒的流行情况,本研究对山东省9个地市40个猪场进行了猪源新型甲型流感病毒的感染情况调查。在养猪场采集有流感症状猪的血液样品(263份)和鼻咽拭子(235份),分别用HI试验来检测血清抗体滴度和荧光定量PCR技术检测鼻咽拭子中的流感病毒的含量。结果表明,血清阳性率为23.07%～63.33%,总阳性率为41.6%;荧光定量PCR检测鼻咽拭子阳性率为10.0%～64.28%,总阳性率为30.63%。这为了解山东省猪源新型甲型流感病毒的发生和分布,并采取相应的公共卫生措施提供了依据。     

集约化养猪场嗜流产衣原体病流行状况的初步调查

本试验对北京郊区5个规模化猪场断奶仔猪、育成猪、育肥猪和怀孕母猪采集血清共507份,同时采集密切接触饲养人员、仔猪、育肥猪的喉头拭子、母猪阴道拭子及公猪的精液共183份。分别使用间接血凝诊断试剂盒、法国ELISA试剂盒检测抗体;利用直接荧光染色法检测抗原,包括166份猪喉头拭子、阴道拭子和精液以及17份饲养人员喉头拭子。结果发现间接血凝诊断试剂盒、ELISA试剂盒抗体阳性率分别为4.14%和2.17%;抗原平均阳性率为14.8%,其中精液阳性率达到37.5%,母猪阴道拭子阳性率为27.5%,饲养人员阳性率为23.5%。本试验证实北京郊区猪嗜流产衣原体在种公猪、母猪群和饲养员呈高流行趋势。同时研究结果显示,5个被调查的规模化猪场嗜流产衣原体抗体阳性率显著低于有报道的其他省市,这与间接血凝诊断试剂盒检测结果高于ELISA试剂有关。针对发现的问题,必须采取有效措施控制种公猪精液污染衣原体现象,阻断向母猪和饲养人员传播,以降低人兽共患病发生的风险。     

山东省蓬莱部分地区猪肺炎支原体流行情况调查与分析

该研究旨在初步了解山东蓬莱地区猪肺炎支原体流行情况,为该病的进一步防制奠定基础。应用ELISA方法对采集于该地区4个镇、12个猪场共324血清样品进行猪肺炎支原体抗体检测。结果显示,该地区猪肺炎支原体抗体检测阳性样品183份,阳性率为56.48%;不同地区猪群抗体阳性率存在一定差异,范围在45.78%~62.5%;其中哺乳仔猪抗体阳性率为27.08%,保育猪为45.0%,育肥猪为63.41%,繁殖母猪为86.48%。结果表明猪肺炎支原体在该地区分布广泛,且流行情况较为严重,需要采取积极的措施进行有效防制。