姜曲海猪ATP2B1基因克隆、生物信息学及组织表达分析

克隆姜曲海猪质膜钙转运ATP酶1(ATPase Plasma Membrane Ca²⁺Transporting 1,ATP2B1)基因CDS区序列，对其进行生物信息学分析，并探究ATP2B1基因在不同日龄姜曲海猪子宫组织的表达水平，以期为研究ATP2B1基因在姜曲海猪繁殖性能方面的作用提供参考依据，采用RT-PCR技术扩增姜曲海猪子宫ATP2B1基因CDS区序列，利用生物信息学软件对其进行分析，利用实时荧光定量PCR检测ATP2B1基因在1月龄和8月龄姜曲海猪子宫组织中的表达量。结果显示，姜曲海猪ATP2B1基因CDS区全长3 663 bp,编码1 220个氨基酸，与野猪同源性最高、亲缘关系最近。姜曲海猪ATP2B1蛋白分子质量约为134 737.94 u,原子总数为19 102个，理论等电点(pI)为5.63,带正电荷、负电荷的氨基酸数分别为141、161个。该蛋白最可能位于细胞膜上，为跨膜、非分泌型疏水蛋白质，有159个磷酸化位点和5个N-糖基化位点，无规则卷曲在预测的二级结构中占比最大。实时荧光定量PCR结果显示，ATP2B1基因在8月龄姜曲海猪子宫组织中...     

鸡Mx基因全长cDNA序列的克隆及分析

以Poly(I)-Poly(C)诱导鸡成纤维细胞Mx基因的表达,提取总RNA,RT-PCR扩增出全长Mx cDNA,扩增产物克隆入pMD19-T Simple载体中进行序列测定。结果表明:与GenBank公布的鸡Mx cDNA序列相比,其同源性达99.9%,为进一步研究鸡Mx基因的抗病毒活性和作用机理奠定了基础。     

氧、光照时间、pH等理化因子影响光合细菌生长的研究

用正交试验设计研究氧、光照时间、pH值等理化因子对荚膜红假单胞光合细菌生长状况。研究结论，荚膜红假单胞菌适宜生长在光照充足的有氧条件下，初始培养基的pH值最好中性偏酸，以使其在整个生长过程中呈良好的态势。     

家鸡Mx基因多态性及其诱变修饰的研究

研究采用错PCR-RFLP的方法对家鸡14个品种的Mx基因变异性分布进行了探索;并利用PCR突变技术将Mx基因全长cDNA第2032位碱基由G突变为A(即631位氨基酸的改变),并将突变的Mx基因插入真核表达载体pcDNA3.0,转染COS-I细胞,进行RT-PCR与间接免疫荧光(IFA)鉴定,研究结果显示,14个品种Mx基因的2032位点存在2个等位基因(A、G),3种基因型(AA、AG、GG),其中鹿苑鸡、狼山鸡、斗鸡未发现AA型个体,茶花鸡未发现GG个体;并成功对Mx基因进行PCR诱变修饰和构建了能够表达鸡Mx基因的重组真核表达载体,为其体内外表达及生物学活性的进一步研究奠定了基础.     

信息化教学在高职《猪生产》课程中的探索和实践

《猪生产》是畜牧兽医、动物科学等专业的重要专业课,内容多任务重,实践教学难度大。针对传统教学的特点和不足之处,充分运用现代教育技术手段,构建的信息化教学资源库网络资源具有直观性、新颖性、不受时空限制性等特点的学习环境。对高职《猪生产》课程进行信息化教学设计,有效地提高了高职《猪生产》课程教学效率。     

阿奇霉素不同途径给药治疗仔猪支原体肺炎的效果比较

探讨阿奇霉素不同途径给药对姜曲海仔猪支原体肺炎治疗效果的影响。将90只病猪随机均分为5组,即感染对照组、阿奇霉素混饲组、肌肉注射组、雾化给药组和静脉注射组,并设有健康对照组,试验前后自由饮食。结果表明,各治疗组的治愈率高于感染对照组(P<0.05),且以雾化给药方式的治疗效果最好,而肌肉注射组和静脉注射的不良反应率最高,与其他组差异显著(P<0.05);各治疗组平均日增重显著高于感染对照组(P<0.05),其中雾化给药最高,相对增重率达93%。试验证明,阿奇霉素雾化给药对姜曲海仔猪支原体肺炎治疗效果显著,高于其他给药方式。     

猪初情期前后瘦素长型受体Ob-Rb mRNA在垂体内表达变化的研究

[目的]观察猪初情期前后瘦素长型受体Ob-RbmRNA在垂体内的表达变化,探讨其与猪初情期发育的关系。[方法]随机选取苏姜猪120日龄、初情期、180日龄各3头,屠宰,采集垂体组织,提取垂体组织总RNA,设计引物,利用实时荧光定量RT-PCR方法检测垂体内Ob-RbmRNA表达变化。[结果]在三个时期猪的垂体内都能检测到Ob-RbmRNA的表达,初情期表达量最低,与120日龄比较差异显著（P〈0.05）,与180日龄比较差异不显著（P〉0.05）。[结论]低表达量的Ob-RbmRNA有利于初情期的发生。     

猪初情期瘦蛋白b型受体在下丘脑-垂体-卵巢轴内的分布定位

为检测猪初情期瘦蛋白b型受体(Ob-Rb)在下丘脑、垂体和卵巢的分布和定位,使用免疫组织化学方法检测苏姜母猪初情期下丘脑-垂体-卵巢轴中Ob-Rb的表达分布及定位.结果表明,Ob-Rb阳性颗粒广泛分布于下丘脑,尤其是弓状核;垂体中Ob-Rb阳性颗粒主要集中于垂体前叶细胞;卵巢中Ob-Rb阳性颗粒出现在各级卵泡的颗粒细胞,而卵母细胞没有阳性颗粒.结论是Ob-Rb分布于下丘脑-垂体-卵巢轴内,在下丘脑-垂体-卵巢轴对雌性生殖的调节中具有关键的调控作用.     

猪皮肤组织块冷冻保存方法的研究

以二甲基亚砜、甘油和乙二醇为冷冻保护剂,以3种浓度(10%、20%、30%)在2种降温条件下探讨适合猪耳皮肤组织冷冻保存的最适条件和方法以及复苏后对皮肤组织生长能力的影响.结果表明: 快速冷冻条件下各处理均无组织块生长.慢速冷冻条件下复苏后组织块的存活率均为100%, 各冷冻保护液3种浓度的平均生长率分别为14.29%、56.52%和8.70%, 差异显著.20%甘油保护液下采用慢速冷冻方法复苏后组织块的生长率达82.35%, 极显著高于其他组和对照组.新鲜和冻存后的细胞培养均采用组织块培养法, EDTA-牛血浆贴覆, 97.78%的新鲜样本组织块能较好生长,且扩展能力强.     

不同生长性能苏姜猪保育仔猪器官的发育差异

为预防苏姜猪弱仔的发生和救治提供参考,选取同日龄体重相近健康情况良好的保育仔猪100头,在相同饲养条件下饲养42d后,从中选取体重最轻的4头弱仔猪、体重最重的4头健壮仔猪,研究2种生长性能苏姜猪保育仔猪不同器官的发育差异。结果表明:弱仔猪的平均体重极显著轻于健壮仔猪,主要免疫器官胸腺、脾脏重量显著低于健壮仔猪;弱仔猪胸腺指数和胸腺脑比显著小于健壮仔猪;弱仔猪胸腺切片观察边缘区较薄,淋巴细胞较稀疏,凋亡小体较多;弱仔猪肺部切片观察有轻微病变,胃肠粘膜厚度极显著变小,小肠杯状细胞增多,胃肠道免疫功能受损;弱仔猪小肠绒毛长度极显著低于健壮仔猪,隐窝深度极显著高于健壮仔猪,消化吸收功能变弱。弱仔猪免疫系统和消化系统显著弱于健壮仔猪,其他器官发育受到的影响相对较小。