烟草磷营养分子机制研究进展

磷是烟草完成生命活动所必需的营养元素,在烟草的生长发育和品质形成过程中起关键作用。烟草对于磷素营养的吸收及转运主要是通过不同家族的磷转运蛋白来进行的。综述了近年来关于烟草磷营养高效状况和烟草中磷素转运蛋白基因的克隆、表达、调控的研究,并展望了今后的研究方向。     

怀玉山三叶青烟草病毒增殖蛋白3基因克隆和功能分析

通过怀玉山三叶青试管苗转录组数据库筛选到怀玉山三叶青烟草病毒增殖蛋白3基因的核心片段,利用RT-PCR技术克隆该病毒增殖蛋白3基因,并进行序列分析、亚细胞定位、器官表达分析和功能分析.结果表明:怀玉山三叶青烟草病毒增殖蛋白3基因cDNA总长度为873 bp,G+C含量为44.22％;怀玉山三叶青烟草病毒增殖蛋白3由29...     

小菊'类锌指蛋白'基因植物表达载体构建及对烟草的转化

为了建立耐盐碱小菊(Chrysanthemum morifolium)中克隆到的'类锌指蛋白基因'CmSTZF(DQ864730)的烟草遗传转化体系,并研究其抗逆特性。本研究借助Gateway技术构建了小菊'类锌指蛋白'基因CmSTZF的过量表达载体pH7WG2D-CmSTZF,并以烟草NC89(N.plumbaginifolia'NC89')的叶片为试材,通过农杆菌介导的转化,成功地建立了烟草遗传转化体系,经PCR-Southern鉴定获得CmSTZF的转基因烟草株系。     

苎麻生长素结合蛋白BnABP1与GFP融合在烟草中的表达

运用已克隆的苎麻生长素结合蛋白BnABP1基因cDNA及植物表达载体pCAMBIA1300 GFP,构建了35S启动子控制的苎麻BnABP1基因编码区段与绿色荧光蛋白(GFP)基因融合表达重组体(pCAMBIA1300 GFP BnABP1)。通过根癌农杆菌介导法将其转化烟草WS38,经抗性筛选和PCR检测获得了转基因烟草。对转基因烟草细胞进行荧光显微镜观察,发现在细胞质膜和内膜系统上都有较强烈的荧光信号,进一步证明苎麻生长素结合蛋白ABP1已结合在细胞的膜系统上。     

不同浓度Fe2+对蛋白激发子AMEP聚合状态以及活性的影响

AMEP是来自于枯草芽孢杆菌的一种新型蛋白激发子，可诱导植物叶片发生过敏反应并激发植物的防卫反应，提高植物的抗病性，是生物农药的理想候选。为了研究AMEP蛋白的聚合体状态与金属离子之间的关系，以及蛋白多聚体对其活性的影响，比较了不同浓度Fe²⁺对AMEP蛋白激发子的聚合程度和活性的影响，设置0.03、0.3、3 g·L^-1Fe²⁺3种浓度梯度的Fe²⁺与AMEP蛋白混合溶液处理烟草叶片，并通过过敏反应、酶活、灰霉抗病试验对烟草叶片的生理指标进行检测。低浓度Fe²⁺能够增加AMEP聚合程度提高蛋白活性，从而增强烟草的过敏反应和早期防御反应和某些防御酶的激发，从而增加对灰霉病的抗性；而高浓度Fe²⁺则会降低蛋白活性。综上，低浓度的Fe²⁺与AMEP蛋白结合形成了更多适宜其发挥蛋白性能的多聚体，能更好地保存酶解位点以便其发挥其性能，从而提高AMEP蛋白的活性。     

转基因烟草蛋白表达系统的研究进展

随着分子生物学和基因工程理论等技术的迅速发展,转基因烟草可以表达越来越多的外源蛋白。就转基因烟草作为蛋白表达系统的基本方法、研究状况及发展前景进行概述。     

金针菇中一种抗病毒蛋白的纯化及其抗烟草花叶病毒特性

通过DEAE-SepharoseFF离子交换层析、Superdex75凝胶层析和高效液相色谱,从金针菇中获得抗烟草花叶病毒蛋白Zb,经SDS-PAGE确定该蛋白相对分子质量为30ku.采用半叶法在心叶烟上检测抗烟草花叶病毒活性,发现该蛋白抑制中质量浓度为4.4μg·mL-1.     

6％寡糖?链蛋白可湿性粉剂对烟草病毒病的防治效果

[目的]明确6%寡糖·链蛋白可湿性粉剂对泸州烟区烟草病毒病的防治效果。[方法]在四川省泸州市叙永县麻城乡采用田间试验研究6%寡糖·链蛋白可湿性粉剂1 000倍稀释液对烟草病毒病的防治效果。[结果]通过苗期喷施1次,大田期喷施2次6%寡糖·链蛋白可湿性粉剂1 000倍稀释液,对烟草病毒病的防治效果达65.44%。[结论]6%寡糖·链蛋白可湿性粉剂可用于防治泸州烟区烟草病毒病。     

烟草分子农业——烟草行业发展的新增长点

明确了烟草分子农业的含义,详细介绍了烟草分子农业生产的产品,例如抗体、疫苗等,并对比了烟草生产重组蛋白表达系统的优缺点,提出了发展分子农业的优势及烟草分子农业开发的现状,指出烟草分子农业可以成为烟草行业发展的一个新增长点。发展烟草分子农业可以改变烟草生产仅限于制造卷烟的单一模式,从而使烟草行业发展具有更大的活力。     

超敏蛋白BaPE1对烟草马铃薯Y病毒的诱导抗性

为了探究超敏蛋白对烟草马铃薯Y病毒病的诱导抗性影响,采用半叶枯斑法和田间效果试验研究超敏蛋白BaPE1提取物对枯斑三生烟和普通烟的诱导抗性和促生作用。结果表明,超敏蛋白BaPE1能诱导烟株对烟草马铃薯Y病毒产生抗性,并对烟草有一定的促生作用。接种前48h喷施500μg/mL超敏蛋白BaPE1预防效果达70.46%,接种后24h、48h喷施500μg/mL超敏蛋白BaPE1治疗效果达61.30%和60.59%,均显著高于对照组;喷施500μg/mL超敏蛋白后烟草在株高、茎围、最大叶面积等方面表现出较好的生长势,并高于其他处理。因此,超敏蛋白BaPE1不仅可以提高烟草抗性而且还能促进烟株生长、提高烟叶经济效益。     

响应面分析法优化处理烟叶模块用酶配方的研究

为降解烟叶模块中的淀粉和蛋白质,以酶处理后烟叶模块的感官评吸得分为评价指标,采用响应面分析法优化了酶处理烟叶模块的最佳酶用量。结果表明:最佳酶用量为淀粉酶16U/g、糖化酶130U/g、风味蛋白酶68LAPU/g。此条件下处理后的烟叶模块感官评吸得分为59.50,与预测值59.27相近,说明响应面回归模型可靠。处理后的烟叶模块淀粉和蛋白质有所降解,降解率分别为24.47%和13.13%,感官抽吸品质明显改善。     

生物制剂激活蛋白在烤烟生产上的应用研究

为探索防治烟草花叶病和提高烟叶产质量新方法,以激活蛋白为材料,开展生物制剂在烤烟生产上的应用研究。结果表明:在烤烟不同生育期喷施激活蛋白能有效促进烟株生长,抑制烟叶花叶病发生,提高烟叶经济性状和改善烟叶品质。其中以苗床期、移栽期和团棵期3个时期都喷施激活蛋白的处理效果最优。     

转H5禽流感病毒M2e基因烟草的研究

将禽流感病毒M2e与鸡IgG Fc的融合基因转入烟草植株,利用烟草生产禽流感抗原蛋白,探索利用植物作为生物反应器生产禽流感疫苗的可行性。将M2e-Fc融合基因克隆到植物表达载体pBI121中,与CaMV35s启动子相连,以烟草子叶作为外植体,利用农杆菌介导法将外源基因转入烟草中。对抗性植株进行了PCR、RT-PCR分析。结果表明,M2e基因已经导入到烟草中,在转录水平得到了表达。为进一步利用转基因植物生产禽流感疫苗进行了前期的探索工作。     

人骨形成蛋白3全长基因转化烟草的初步研究

将含有人骨形成蛋白3(hBMP-3)全长基因的质粒pCAMBIA1300-hBMP-3通过电激法转化到根癌农杆菌LBA4404中,以烟草无菌苗叶盘为外植体,通过农杆菌介导法进行遗传转化,获得了抗潮霉素(Hy-gromycin,Hyg)的再生植株,通过潮霉素抗性鉴定及PCR检测,初步确定人骨形成蛋白-3(hBMP-3)全长基因已整合到烟草的基因组中。     

编烟密度对怀化雪茄烟叶品质的影响

以‘古巴7号’雪茄烟中部叶为材料，测定3种编烟密度(30、35和40片/m)下雪茄烟叶的物理特性、化学成分和中性致香物质含量。结果表明：随着编烟密度的增加，雪茄烟叶单叶质量、叶片厚度和叶质重逐渐降低，含梗率、拉力和平衡含水率烟碱含量则逐渐增加；当编烟密度为35片/m时，蛋白质含量最低，总糖和还原糖含量最高；当编烟密度从30片/m增加至35片/m时，烟叶新植二烯含量逐渐升高，当编烟密度从35片/m提高至40片/m时，其含量降低45.74%，导致烟叶的中性致香物质总量也降低；类西柏烷类降解产物也呈现相同的变化趋势。综上，编烟密度为35片/m时，雪茄烟叶的物理特性较好，化学成分较协调，中性致香物质含量较高，有利于雪茄烟叶品质的形成。     

不同基因型烤烟苗期氮代谢对相关酶活性的影响

采用沙培方法,选用不同基因型烤烟‘K326'、‘中烟90'和‘净叶黄',研究氮形态对不同烤烟幼苗叶部、根部的酶活性及可溶性蛋白含量的影响.研究发现,在NO3 -N或NH4+ -N不同处理水平下,‘净叶黄'叶部硝酸还原酶(NR)的活性较高,‘中烟90'根部NR的活性较高,在NH4+ -N的处理水平下NR的活性高于NO3- -N处理水平;‘K326'叶部和根部的谷氨酰胺合成酶(GS)的活力较高,根部的GS活力远大于叶部,并且在NH4+ -N的处理水平下叶部的GS活性低于NO3- -N处理水平,根部NH4+ -N处理水平下GS活性高于的NO3- -N处理水平;可溶性蛋白的含量具体表现为‘净叶黄'叶部较高,‘中烟90'根部较高.结果表明不同基因型烤烟间根部、叶部NR和GS活性以及可溶性蛋白含量与氮素形态有关,并且与氮素水平不呈正相关.     

微生物和酶学技术在烟草发酵中的应用及展望

综述了微生物和酶学技术在烟草发酵中的应用及其研究进展,重点阐述了陈化烟叶表面微生物区系与优势菌种的筛选、分离和鉴定;外源有益微生物协调与改善陈化烟叶化学组分,提高烟叶香气量,缩短烟叶陈化周期;以及添加外源生物活性酶降解烟叶中淀粉、蛋白质、纤维素等大分子物质等方面的研究现状,分析了目前该领域研究中存在的问题,认为将现代分子生物学技术与传统的方法相结合来深入研究烟叶发酵机理及其增香技术仍是今后研究的关键。     

云烟及其地质环境中的稀土元素

本文研究了云南东部烤烟及其地质环境中的１５个稀土元素，结果表明，烟叶中稀土含量很低（∑ＲＥＥ＝１０ｍｇ／ｋｇ左右），烤烟对稀土的吸收率亦很低（平均吸收率０．０２３），但烟叶中稀土含量与生化组分含量之间存在稳定而显著的相关性．据此认为，稀土元素虽非烤烟生理必需元素，但对烤烟内在品质有重要影响．通过叶面喷施稀土微肥，能有效调控烟叶化学成分，改善其内在品质。     

生长素结合蛋白与纤维素合成酶在同一细胞中的标记与定位

生长素通过其结合蛋白(ABP1)促进细胞纤维素合成并使细胞伸长生长。为探明ABP1与纤维素合成酶(CesA1)这2种蛋白质之间的相互关系,分别对这2种蛋白质进行了荧光标记,构建了绿色荧光蛋白(GFP)对ABP1融合标记以及青色荧光蛋白(CFP)对CesA1融合标记的2种载体。采用烟草叶片侵注法,将2种重组体转入烟草叶片同一细胞进行瞬时表达。扫描激光共聚焦显微成像观察到转基因瞬时表达的烟草铺列细胞的细胞膜上有强烈两色荧光信号,表明这2种蛋白集中在细胞膜上分布,其分布区域存在明显的重叠。在细胞的内膜系统中绿色荧光信号相对较强,青色荧光信号较弱,表明内膜系统中也分布着一定量的ABP1,而纤维素合成酶在内膜系统中不会集中分布。在叶片铺列细胞间嵌合交错区可以观察到青色荧光的高亮点,表明此处存在纤维素合成酶的高密度分布,也说明在此部位有更多的纤维素合成。