福清山羊和戴云山羊发情周期内生殖激素分泌规律研究

为了研究福清山羊和戴云山羊发情周期内生殖激素的分泌变化规律,采用Elisa方法检测了2个品种经产母羊整个发情周期内外周血中4种生殖激素(雌二醇、孕酮、促卵泡激素、促黄体激素)的浓度。结果表明,2个品种发情周期内血浆FSH、LH均呈现周期性波动式分泌,福清山羊在发情周期中出现了4次波峰而戴云山羊为5次。2个品种血浆E_2的分泌水平呈现明显的高、低2个分泌时期,2个分泌时期血浆E_2浓度差异达到极显著水平(P0.01),戴云山羊高分泌期的E_2浓度显著高于福清山羊(P0.05)。2个品种血浆P浓度在发情期、发情前后2~3d较低,到发情周期的第6d开始分泌量迅速增加,在发情周期第8~9d达到整个发情周期的最大峰值,极显著高于发情期血浆P浓度(P0.01),随后在较高浓度范围内呈波动分泌至发情周期第16d,之后迅速下降至发情期的低分泌水平。     

新疆哈萨克绵羊在乏情期和发情期生殖激素的变化规律

旨在通过检测乏情期和发情期的发情绵羊外周血液中4种重要生殖激素孕酮(P4)、雌激素(E2)、促卵泡素(LH)和促黄体素(FSH)浓度,解析绵羊乏情期和发情期哈萨克绵羊发情时生殖激素的变化规律,以期阐明哈萨克绵羊发情时生殖激素变化规律,为调控绵羊的季节性发情提高激素方面的理论。采用ELISA方法测定4种生殖激素浓度,结果表明:哈萨克绵羊P4和E2在发情周期内呈现波动式变化,LH和FSH在发情周期内呈现脉冲式变化,且乏情期和发情期4种激素浓度变化显著(P0.05)。     

甘加藏羊发情周期不同阶段血浆生殖激素分泌规律

为研究甘加藏羊发情周期血浆中生殖激素的分泌变化规律,选取24只处于发情周期内的甘加藏羊,采集甘加藏羊发情周期不同阶段的血液,采用酶联免疫分析法(ELISA)检测甘加藏羊发情周期血浆中促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)、孕酮(P)和雌激素(E)的分泌变化。结果显示,FSH含量在发情期最高,为3.406 m IU/m L,发情后期降低至2.492 m IU/m L,间情期又开始升高,至发情前期达2.727 m IU/m L,发情期含量极显著高于发情后期、间情期和发情前期;LH含量在间情期最高,为4.377 m IU/m L,发情后期显著低于间情期和发情前期;P含量在发情前期最高,为18.039 ng/m L,发情期降至16.196 ng/m L,发情后期缓慢升高,间情期达17.127 ng/m L,发情前期极显著高于发情期与发情后期;E含量在发情前期最低,为29.625 pg/m L,发情期升高(36.035 pg/m L),发情后期达到最高,为38.573 pg/m L,间情期又降低(35.531 pg/m L),发情后期极显著高于发情期、间情期以及发情前期,发情期与间情期极显著高于发情前期。     

Ghrelin对雌性大鼠促性腺激素分泌及其mRNA表达的影响

【目的】探明Ghrelin在中枢水平上对雌性大鼠促性腺激素分泌及其mRNA表达的影响。【方法】用1 nmol Ghrelin对不同发情周期(发情前期、发情期、发情后期、间情期)雌性大鼠及用不同剂量(0.3,1和3 nmol)Gh-relin对发情后期雌性大鼠分别进行侧脑室注射,15 min后断头采血,离心血清,同时采集脑垂体,采用酶免法测定血清促黄体素(LH)、促卵泡素(FSH)的质量浓度,用实时荧光定量PCR法检测LH mRNA、FSH mRNA在垂体中的表达。【结果】①在发情前期和间情期,Ghrelin可显著抑制雌性大鼠LH的分泌和LH mRNA的表达(P0.05);Ghre-lin对整个发情周期中FSH的分泌不产生影响,仅在发情期抑制FSH mRNA的表达(P0.05)。②在发情后期,0.3和1 nmol的Ghrelin对大鼠促性腺激素分泌和mRNA表达均无影响,但3 nmol的Ghrelin可显著抑制LH、FSH的分泌和LH mRNA的表达(P0.05)。【结论】Ghrelin在中枢水平上对FSH、LH的释放及FSH mRNA和LH mR-NA的表达均有抑制作用,但存在一定的剂量差异,并受发情周期的调节。     

中国美利奴羊(新疆军垦型)同期发情处理前后外周血生殖激素的变化

研究同期发情处理中国美利奴羊(新疆军垦型)的外周血生殖激素含量变化与发情时间的关系,探讨中国美利奴羊(新疆军垦型)最佳人工输精时间。分别采集经孕酮海绵栓+PMSG肌注法处理母羊在埋栓前1 d、埋栓后7 d、埋栓后13 d(撤栓0 h)和撤栓/PMSG肌注48 h的外周血,应用ELISA方法检测外周血中雌二醇(E_2)、促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)、孕酮(P)的质量浓度,分析试验母羊在同期发情处理前后外周血中生殖激素含量变化,统计分析生殖激素质量浓度的相关性和4个时间点的差异显著性。研究结果,对孕酮海绵栓+PMSG肌注法处理前后试验母羊外周血生殖激素的ELISA检测,与埋栓前1 d、埋栓后7 d、埋栓后13 d(撤栓0 h)相比,撤栓/PMSG肌注48 h试验羊外周血中E_2、FSH、LH含量显著升高(P0.05),P含量显著下降(P0.05),且不同个体间不同激素含量的波动范围明显减小,达到相对一致水平,与该时间点的中国美利奴羊(新疆军垦型)集中发情现象相吻合。结果表明,孕酮阴道海绵栓+PMSG处理后的48 h是中国美利奴羊(新疆军垦型)集中发情的高峰时间,也是最佳输精时间。     

甘加型藏绵羊发情周期下丘脑GnRH分泌的动态变化规律

【目的】研究甘加型藏绵羊发情周期下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)分泌的动态变化及其对藏羊生殖活动的调控.【方法】选取发情周期不同阶段的甘加型藏绵羊48只,采集藏羊发情期、发情后期、间情期、发情前期的血浆.应用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定各个时期血浆中GnRH的含量,比较研究其动态变化规律.【结果】甘加藏绵羊发情周期不同阶段血浆中GnRH分泌呈现一定的规律:在发情期和发情后期呈脉冲式分泌,间情期和发情前期既有脉冲式又有波动式分泌.分泌特点为发情前期血浆中GnRH(57.409pg/mL)开始升高,至达到最大值(73.389pg/mL),发情后期(62.058pg/mL)和间情期(55.687pg/mL)分泌量降低,其中发情期分泌量最多,且与其他3个时期差异显著(P0.05).在整个发情周期中GnRH先后出现4个明显分泌峰,第1个峰出现在发情期4h,第2个峰出现在发情后期60h,第1个峰略高于第2个;第3个峰出现在间情期第9天早上,第4个峰出现在发情前期第14天早上,第3个峰较第4个低.【结论】了解甘加型藏绵羊发情周期下丘脑GnRH分泌的动态变化规律,以及GnRH在甘加型藏绵羊发情周期中的调控作用.     

二花脸母猪性早熟特性的生殖激素研究

本研究的目的是测定二花脸母猪最初三次发情周期外周血浆中促黄体素(LH),17β-雌二醇和孕酮含量的变化,并对相应的受胎率作比较观测,试图了解生殖激素在母猪生殖机能发展中的作用,以期探明二花脸母猪性早熟特性的生殖激素基础.材料与方法在丹阳县种畜场选择第一次至第三次发情的二花脸母猪各3头,平均日龄和体重分别为61,91,114天和12.5,16.6,20.6公斤.以试情公猪鉴定母猪发情,一俟呈现静立反应时定为发情日(周期0天).受试母猪的发情周期为18～20天.从母猪外生殖器出现明显红肿开始至发情第二天,每日定时用蘸有     

GPR30在小鼠发情周期卵巢中的分布和表达

为了获得G蛋白偶联受体30(GPR30)在小鼠发情周期卵巢中的分布和表达规律,分别运用免疫组织化学SP法和RT-PCR法,对小鼠发情前期、发情期、发情后期和间情期卵巢中GPR30分布及GPR30 mRNA的表达进行研究.结果显示:GPR30免疫反应阳性产物分布于小鼠卵巢各级卵泡的颗粒细胞、卵泡膜细胞、卵母细胞以及黄体细胞和间质细胞的细胞膜和胞浆中,以次级卵泡和成熟卵泡的颗粒细胞中分布最多、着色最深;GPR30的相对表达量在小鼠发情周期卵巢中以间情期最低且极显著低于其他3个时期(P＜0.01),发情期最高但与发情前期和发情后期无显著差异(P＞ 0.05).发情周期卵巢中GPR30 mRNA的表达变化规律与GPR30的表达基本一致,其中发情期最高且极显著高于其他时期(P＜0.01),间情期最低且极显著低于其他时期(P＜0.01). GPR30在小鼠卵巢中的分布和表达量变化与卵泡发育过程以及发情周期雌激素变化规律基本一致,提示其介导了雌激素对发情周期卵泡发育和卵母细胞成熟的调节.     

理囊散对卵泡囊肿和排卵延迟奶牛血清生殖激素的影响

研究理囊散对卵泡囊肿和排卵延迟奶牛血清中雌二醇(E2)、促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)、孕酮(P4)4种生殖激素的影响,初步探讨理囊散治疗奶牛卵泡囊肿和排卵延迟疾病的作用机理.用理囊散治疗奶牛卵泡囊肿和排卵延迟,统计发情率;用酶联免疫吸附法(ELISA)检测奶牛血清中的E2 、FSH、LH、P44种生殖激素,并与正常奶牛对比.结果显示,理囊散治疗卵泡囊肿发情有效率为83.33％,治疗排卵延迟发情有效率为90.91％.理囊散处理前,卵泡囊肿E2水平显著高于正常组(P＜0.05),P4水平显著低于正常组(P＜0.05),FSH和LH水平无显著差异;排卵延迟组的E2、FSH、LH水平与正常组间无显著差异,P4水平低于正常组,差异极显著(P＜0.01).理囊散处理后,卵泡囊肿组药后4d,E2 、FSH、LH急剧显著上升并达到高峰,相比治疗前差异极显著(P＜0.01),P4出现显著下降趋势,于药后4d达到低谷值;排卵延迟组的E2 、FSH、LH于药后7d明显上升,药后20d的水平与药前差异极显著(P＜0.01);P4明显上升,药后7d达到高峰值且与药前的差异极显著(P＜0.01),而后显著下降到处理前水平.结果表明,理囊散对卵泡囊肿和排卵延迟奶牛的E2 、FSH、LH、P44种生殖激素具有显著调节和诱导发情的作用.     

KiSS-1/GPR54系统在不同发情周期母羊下丘脑中的表达规律

【目的】研究发情周期各阶段KiSS-1/GPR54系统在母羊下丘脑中的表达规律。【方法】将12只雌性小尾寒羊随机分为4组,每组3只,分别于发情前期、发情期、发情后期和间情期,颈动脉放血致死后采集其下丘脑,采用实时荧光定量PCR技术研究母羊发情周期不同阶段下丘脑中KiSS-1和GPR54基因的表达规律。【结果】母羊发情周期各阶段下丘脑上均有KiSS-1和GPR54基因表达;发情期母羊下丘脑KiSS-1基因的表达量极显著高于发情后期、间情期和发情前期(P<0.01),而发情后期、间情期和发情前期之间差异不显著;发情周期的不同阶段,GPR54基因在母羊下丘脑中的表达量无显著差异(P>0.05)。【结论】发情期母羊下丘脑KiSS-1基因的表达量极显著高于发情周期其他阶段(P<0.01),GPR54基因在母羊发情周期各阶段的表达量无显著差异。     

G15对发情周期小鼠卵巢表皮生长因子受体表达的影响

【目的】研究G蛋白偶联雌激素受体(G-protein-coupled estrogen receptor,GPER)对发情周期小鼠卵巢表皮生长因子受体(Epidermal growth factor receptor,EGFR)表达的影响。【方法】间情期小鼠腹腔注射GPER抑制剂G15,按注射剂量0.3,1.5和7.5nmol/只设3个注射组,另设腹腔注射等体积生理盐水的对照组;药物注射后,依次取发情前期、发情期、发情后期和间情期小鼠的卵巢,用免疫组织化学SP法和RT-PCR法分别检测各组小鼠发情周期不同阶段卵巢EGFR及其mRNA的表达。【结果】EGFR免疫组化阳性产物主要分布于卵巢的各级卵泡中,阳性染色随卵泡发育而逐渐增强,其中颗粒细胞越靠近卵母细胞染色越强,发情周期卵巢EGFR相对表达量表现为发情期发情前期间情期发情后期。小鼠注射G15后,各情期卵巢中EGFR的表达呈G15剂量依赖性减弱,除发情后期外,均极显著下降(P0.01);1.5和7.5nmol/只G15注射组各情期EGFR的相对表达量无显著差异(P0.05),但均极显著低于0.3nmol/只G15注射组(P0.01)。EGFR mRNA的变化规律与EGFR相对表达量的变化趋势完全一致。【结论】G15可在一定程度上通过GPER下调发情周期小鼠卵巢中EGFR的表达,从而影响发情周期卵巢的功能。     

热应激对不同品种鸡繁殖性能、血液生殖激素及相关基因mRNA表达量的影响

为探讨热应激对我国地方鸡种与国外培育蛋鸡品种繁殖性能、血液生殖激素及相关基因mRNA表达量的影响,试验选择体况相近的112日龄济宁百日鸡和海兰褐鸡各96只,随机分为适温组((25±0.26)℃)和高温组((38±0.26)℃)2个处理,在人工环境气候舱中饲养,每个处理各设8个重复,每个重复6只,试验持续28 d.测定112、119、126和140日龄时的卵巢重量、卵泡总数和血液生殖激素浓度及生殖轴相关基因mRNA相对表达量.结果表明:1)适温条件下海兰褐鸡的卵巢、总卵泡发育好于济宁百日鸡,而热应激第7天济宁百日鸡和海兰褐鸡只出现明显的卵巢发育受阻、总卵泡数量增生缓慢(P＜0.05).2)在整个热应激期高温组卵泡刺激素(FSH)和促黄体生成素(LH)含量显著下降(P＜0.05),热应激7d后雌二醇(E2)含量显著减少(P＜0.05)、孕酮(P4)含量先升高后显著下降(P＜0.05);促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)含量显著高于适温组(P＜0.05),济宁百日鸡高温组各血液生殖激素水平的变异系数高于海兰褐,且差异不显著(P＞0.05).3)适温组的济宁百日鸡促性腺激素释放激素(GnRH)、催乳素(prolactin,PRL)、卵泡刺激素-β(FSH-β)、促卵泡素受体(LHR)、雌激素受体(ESR)、催乳素受体(PRLR)、卵泡刺激素受体(FSHR)的mRNA表达量均高于海兰褐鸡,但无显著差异(P＞0.05);而高温组济宁百日鸡mRNA表达量除PRL以外,均显著高于海兰褐鸡(P＜0.05).结果提示,地方品种在热应激环境条件下卵巢、总卵泡发育和各血液生殖轴相关激素的分泌调控机能强于外来品种;并且生殖轴相关激素mRNA表达量的变化具有品种效应.     

中草药饲料添加剂诱导哈萨克羊发情规律研究

为了了解中草药饲料添加剂诱导哈萨克羊发情的生殖激素变化规律,采用酶联免疫法(ELISA)测定外周血液中E2、P4、MLT、FSH和LH等5种重要生殖激素的浓度。结果表明:血液中E2和P4呈现波动式变化,FSH和LH呈现规律性脉冲式变化。结果提示E2和FSH与绵羊的非繁殖季节发情有关,高浓度的P4和LH对开启或维持绵羊的发情有重要作用,为通过中草药饲料添加剂调控绵羊发情提供激素方面的理论依据。     

二花脸猪繁殖生理特性的研究 Ⅵ.母猪发情周期外周血浆促黄体素、孕酮和17β-雌二醇含量的变化

自Yallow和Berson(1960)创建胰岛素的放射免疫分析法(Radioimmunoassay—RIA)后,七十年代国外相继建立了猪生殖激素的放射免疫测定系统,并检测母猪发情周期血液中生殖激素含量的变化.但是,迄今国内对母猪发情周期生殖激素含量的测定,尚未见有报道.本试验的目的主要是用放射免疫分析法测定二花脸母猪发情周期外周血浆促黄体素(LH)、孕酮和17β-雌二醇的含量,了解其正常变化规律,为进一步对二花脸母猪性早熟和多产特性生殖激素研究奠定基础.     

广西沼泽型母水牛发情淡季生殖激素的变化规律研究

[目的]研究发情淡季母水牛生殖激素的变化规律及各激素之间的相互关系。[方法]采用酶联免疫分析方法(ELISA)测定了发情淡季广西沼泽母水牛血样中促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)、抑制素(INH)、雌二醇(E2)和孕酮(P4)的浓度变化,并结合B超技术检测了母水牛卵泡在发情周期中的变化。[结果]广西沼泽型母水牛血样中E2和P4浓度呈波动式变化。其中,E2分别在排卵后第13天d下降到基础水平。FSH在排卵后的第10天出现峰值;LH在排卵前2天出现峰值;INH在排卵后第4天出现峰值。各种激素之间存在相关性。FSH、LH和INH三者两两之间存在极显著相关性,INH与E2、P4存在显著相关性,E2与P4存在极显著相关性。[结论]该研究可为指导适时配种、提高广西本地沼泽型母水牛的繁殖力提供理论参考。     

小鼠子宫内膜雌激素受体表达规律的研究

为探讨雌激素对子宫内膜容受性的影响,实现主动干预子宫内膜容受性、提高体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的成功率,本研究利用免疫组化法检测了雌激素受体在小鼠发情周期子宫内膜中的表达规律.结果显示,自然发情受孕组、自然发情假孕组(对照组)和超数排卵组小鼠在见栓后第2天,子宫内膜上雌激素受体(ER)表达量3组之间差异不显著(P＞0.05);之后的第4、6、8天,超数排卵组雌激素受体表达量显著高于其他2组(P＜0.05);自然发情受孕组小鼠子宫内膜中ER的表达在第4、6天时显著高于自然发情假孕组(P＜0.05),在第8天时,自然发情受孕组小鼠子宫内膜中的ER阳性率与自然发情假孕组差异不显著(P＞0.05).与自然发情受孕组相比,自然发情假孕组和超数排卵组小鼠子宫内膜容受性下降,窗口期开放延迟,而自然发情假孕组和超数排卵组差异不明显(P＞0.05).以上结果表明,雌激素通过ER对小鼠胚胎着床及窗口期子宫内膜容受性变化具有调节作用.     

Lrh-1基因在湖羊HPG轴中表达量变化研究

[目的]揭示湖羊发情周期不同阶段下丘脑-垂体-性腺(HPG)轴组织中Lrh-1基因的表达变化规律。[方法]建立了湖羊Lrh-1基因的实时荧光定量(qRT-PCR)检测体系,测定其在发情前期、发情期、发情后期和间情期湖羊的下丘脑、垂体和卵巢间质组织中的表达量,分析Lrh-1基因在湖羊HPG轴的表达随发情周期变化的规律。[结果]建立的湖羊组织Lrh-1 mRNA检测体系扩增效率为92.44%,扩增效果良好。在湖羊的下丘脑、垂体和卵巢间质组织中均检测到Lrh-1基因mRNA的表达。其中,在发情后期下丘脑和卵巢间质组织中Lrh-1 mRNA相对表达量显著高于其他阶段的表达量(P0.05),垂体组织中Lrh-1 mRNA相对表达量在发情周期不同阶段间差异不显著(P0.05)。[结论]Lrh-1基因参与发情周期湖羊下丘脑、垂体和卵巢功能的行使,并且该基因的表达量变化可能与湖羊发情周期有关。     

激素的不同剂量对小鼠超数排卵的影响

[目的]通过对小鼠超数排卵激素剂量和对其后代进行控制的研究,逐渐将这些技术运用到其它动物上,以加快其品种的改良,提高优良品种及个体的利用率.[方法]以昆明系小白鼠为实验动物,取性成熟个体,先进行发情鉴定,确定其发情周期及不同的阶段,然后按发情阶段分组,分别用5和10 IU剂量的孕马血清促性腺激素和人绒毛膜促性腺激素进行超排处理并与公鼠合笼,在见栓后的第3.5 d冲胚,对所得胚胎进行鉴定.[结果]对157只小鼠进行了发情鉴定.对40只小鼠在其发情周期的不同阶段进行了超排处理,发现10 IU剂量时,胚胎的质量和数量都优于5 IU.[结论]在小鼠发情周期中的间情后期和发情初期这两个阶段用5和10 IU的剂量进行超排,都能得到良好的效果,以发情初期的10 IU剂量效果最好.     

海门山羊超排及血浆孕酮和17β-雌二醇浓度

对28只性周期正常山羊分别注射1500iu PMSG(Ⅰ组)、300iu FSH(Ⅱ组)和等量生理盐水(Ⅲ组),比较两种促性腺激素的超排效果;用放射免疫方法测定血浆孕酮(P_4)和17β-雌二醇(E_2-17β)浓度。试验发现:(1)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组的排卵率依次为12.00+1.71、21.22+2.25和2.75±0.31,超排效果FSH优于PMSG。(2)PMSG和FSH处理后,P_4和E_2-17β浓度都上升,但PMSG组只有在48h后两浓度达显著水平,FSH处理只经24h就显著升高。注射PGF_(2α)后两组的P_4浓度急剧下降(ρ<0.01)。发情时P_4浓度最低,E_2-17β为最大。(3)处理当日及此后的孕酮浓度与排卵率之间无显著相关(ρ>0.05)。而发情时的E2-17β浓度与排卵率之间呈强相关(r=0.72,ρ<0.001)。     

不同同期排卵-定时输精程序对马鹿繁殖效果的影响

本研究旨在探讨不同同期排卵-定时输精程序对马鹿繁殖效果的影响。选用40只健康、年龄相近的经产天山马鹿母鹿,随机分为5组,每组8只,对照组在马鹿发情周期内放入孕酮阴道栓(CIDR),在埋栓第12天取出CIDR,同时肌注孕马血清促性腺激素(PMSG),撤栓48 h后肌注促排3号(A_3),再过12 h后人工输精,同时肌注促排3号(A_3)。试验组在马鹿发情周期内肌注促性腺激素释放激素(GnRH)和维生素AD注射液,在肌注第7天再肌注前列腺素(PG),试验1组在48 h后第2次肌注GnRH和维生素AD注射液,16～24 h后人工输精;试验2组在48 h后第2次肌注GnRH和维生素AD注射液,同时人工输精;试验3组在72 h后第2次肌注GnRH和维生素AD注射液,同时人工输精;试验4组在56 h后第2次肌注GnRH和维生素AD注射液,16 h后人工输精。在处理前和人工授精时采集血样,测定血清中孕酮(P_4)、雌激素(E_2)、促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)的含量。结果表明,对照组、试验1组、试验2组和试验4组同期发情率(分别为100%、87.5%、87.5%、100%)极显著高于试验3组(37.5%)(P0.01),但对照组和试验3组母鹿不返情率(分别为75.0%、75.0%)极显著高于试验1组、试验2组、试验4组(分别为12.5%、37.5%、25.0%)(P0.01);各组处理后(输精时)的母鹿血清中E_2、LH、P_4和FSH含量整体极显著高于处理前(P0.01),但各组之间无显著差异(P0.05);试验组方法处理母鹿成本显著低于对照组。采用试验组方法处理母马鹿可保证较高的不返情率,且操作简单、成本低、有效避免母鹿反复麻醉损伤等优点,优于对照组方法。