牛IVF性控切割胚胎和整胚的冷冻保存研究

本研究分3个实验对比了采用不同处理的常规冷冻和玻璃化冷冻保存358枚体外受精(IVF)性控切割囊胚和326枚整胚的保存效果。结果表明：(1)用于冷冻整胚的常规方法对冷冻性控切割胚胎同样有效；(2)利用含10％EG 10％FBS的DPBS冷冻牛IVF控切割胚胎或整胚的效果明显优于用含10％甘油 0.4%BSA或1．4mol／LEG 0．1％PVOH的DMPBS；(3)采用微玻管玻璃化冷冻保存牛IVF性控切割胚胎的效果显著优于常规冷冻法。     

去透明带体细胞核移植的牛囊胚质量检测

对来自6批次147枚采用去透明带-双半卵融合法(简称去透明带法)克隆的牛体细胞囊胚进行质量分级,然后除了20枚优质胚胎用来移植外,其余的127枚克隆囊胚均采用低渗分离细胞核法进行细胞计数。结果表明:127枚采用去透明带法克隆的7 d囊胚细胞数平均为129.8个,其中优质大囊胚细胞数平均为218.9±45.0个(117~281),中等大小的优质囊胚细胞数为134.9±43.7个(85~233),不同体积大小的囊胚细胞数差异极显著(P<0.01)。结果表明,从优质囊胚比例以及其细胞数来衡量,采用去透明带克隆方法可以获得质量较高的牛囊胚。     

水牛卵泡液中雌二醇和睾酮水平变化的初步研究

试验采用ELISA法对离体水牛卵巢不同大小卵泡液中的雌二醇(E2)和睾酮(T3)水平进行了定量分析.结果表明:较大卵泡(直径≥6 mm)液中雌二醇的平均浓度是中小卵泡(直径为2～5 mm)液中的8.5倍;而中小卵泡液中睾酮的平均浓度则是较大卵泡液中的3.3倍;较大卵泡液中雌二醇与睾酮比值显著高于中小卵泡.试验结果说明高浓度的雌激素对卵泡的发育有促进作用,而高浓度的雄激素则发挥抑制作用.     

水牛卵母细胞孤雌激活方法的优化

为了研究离子霉素(Ion)在不同环境下对水牛孤雌激活效果的影响及水牛卵母细胞在6-二甲基氨基嘌呤(6-DMAP)液中以聚集激活或分离激活方式对激活效果的影响。试验对比了水牛卵母细胞在25℃室温环境和38.5℃CO2培养箱环境下的Ion激活效果,还比较了水牛卵母细胞在6-DMAP液中进行聚集激活和分离激活的孤雌激活效果。结果表明:试验组8-细胞胚胎率(54.11%)和囊胚率(31.51%)均高于对照组的8-细胞胚胎率(51.68%)和囊胚率(27.52%),但无统计学差异;在6-DMAP液中分离激活组(1组)的囊胚率明显优于聚集激活组(2组)的囊胚率。     

青年娟姗母牛在发情周期中卵泡波变化规律的研究

家畜繁殖是畜牧业生产的首要环节,而母畜生殖系统的健康是发挥其繁殖力的基础。卵巢作为生殖系统的重要器官,其生理调节功能尤为重要。在20世纪70年代后期,B型超声波影像诊断技术用于大畜直肠检查和母畜的繁育,这是动物繁殖诊断技术的新革命。为了解青年娟姗母牛在发情周期中卵巢形态和卵泡发育的动态变化,进行卵泡的计数,以有效地控制卵巢功能,调整和控制青年娟姗母牛的繁殖生理过程,充分发挥优良青年娟姗母牛的繁殖潜力和遗传性能,研究利用超声影像技术对青年娟姗母牛卵泡波进行观察,现报道如下。1材料和方法1.1试验动物春季舍饲的健康、…     

我区首批试管牛犊在广西农学院陆续降生

广西首批试管牛犊于1990年4月6日至5月6日在广西农学院牧试站陆续降生,共4头,一公三母。这是本院卢克焕教授及其助手们采取国内外相结合的方式通力合作,刻苦攻关所取得的又一重大成果。广西农学院家畜繁殖研究室自1988年承担了国家及广西“黄牛胚胎工程”科研课题以来,全体研究人员在完全体外化培养胚胎的技术方面进行了深入细致的研究。从屠宰后的良种母牛的卵巢中采集卵母细胞进行体     

电脉冲对体内体外成熟的兔卵母细胞核移植的影响

本研究探讨了不同电激次数对体内成熟的兔卵母细胞核移植胚卵裂的影响,以及用体外成熟的兔卵母细胞作核移植受体卵的可能性。将16～32细胞期胚胎的单个卵裂球显微注入体内成熟去核卵母细胞卯周隙内,419枚移核卵中有371枚存活(89%),用160 V,40 μs 两次电脉冲(间隔18)电激诱导融合,融合率91%(299/327)。融合胚在含细胞松驰素 B 的 PBS 内培养1 h 后分为两组:(1)直接转移到 TCM-199+10%FCS 内培养;(2)用160.V,40μs 电脉冲电激一次后培养。18 h 后(1)组卵裂率仅为18%(20/110)比(2)组76%(86/112)明显低(P<0.01),表明融合后的胚胎再增加一次电激对激     

给配种后5天的乳用牛注射HCG可提高怀孕率

在发情周期中 (配种前或配种后 ) ,血浆孕酮含量低的乳用牛怀孕率亦较低。人绒毛膜促性腺激素 (ＨＣＧ)是一种具有高度类似促黄体生成激素 (ＬＨ)活性的激素 ,它可以与卵巢上小黄体细胞中的ＬＨ受体结合 ,激发孕酮的产生。在乳用牛发情周期的第 5天注射一定量的ＨＣＧ ,会诱使第一卵泡发育波的优势卵泡排卵并形成一个功能性副黄体。从而提高黄体中期血浆孕酮的浓度 ,并改变卵泡波的模式。美国佛罗里达州立大学的Ｓａｎｔｏｓ等人将40 6头处于泌乳期 5 0— 1 5 0天的荷斯坦乳用牛 ,按照泌乳天数及胎次 (初产和经产 )这 2个因素 ,将乳用牛平衡…     

牛体外受精技术的研究——单层细胞预培养时间对牛早期胚胎体外培养效果的影响

将2469枚经体外成熟、体外受精后获得的牛早期胚胎(2～8细胞阶段)随机放入7组不同日龄(分别预培养0～9天)的牛卵泡颗粒细胞单层细胞滴中进行“复合”培养,然后观察这些胚胎在体外培养条件下继续发育至囊胚和孵化囊胚阶段能力的差异。结果随单层细胞预培养时间的延长(0～4天内),牛早期胚胎的囊胚发育率、发育速度及囊胚胎孵化率均呈逐渐升高的趋势;尔后,培养效果又稍有下降。经统计学检验,各组间囊胚发育率(31.7～39.2%)和囊胚孵化率(61.1～72.6%)及7日龄囊胚发育比率(41.8～58.5%)均无显著差异(P>0.05)。这表明,利用不同预培养时间(0～6天)的颗粒细胞单层与牛早期胚胎“复合”培养,都同样具有促进胚胎在体外条件下发育到囊胚和孵化囊胚阶段的能力,但以使用预培养2～4天单层细胞进行“复合”培养效果较佳。     

牛胚胎移植技术的应用前景展望

1 胚胎移植的意义 胚胎移植(ET)技术对畜牧业的发展具有十分重大的意义. (1)通过胚胎移植可以充分发挥优良种畜的繁殖潜力,提高经济效益.