贵州省黔南州2020年屠宰企业非洲猪瘟检测能力比对分析

非洲猪瘟疫情自发生以来,农业农村部提出生猪定点屠宰企业必须具备非洲猪瘟检测能力,通过指导、培训,贵州省黔南州16家屠宰企业均自建了非洲猪瘟检测实验室,为屠宰环节非洲猪瘟防控起到至关重要的作用。为掌握了解屠宰企业非洲猪瘟病毒检测能力,在全州开展了屠宰企业检测能力比对试验,比对结果表明:部分生猪屠宰场检测能力有待提升,定期开展比对试验,能有效检验屠宰企业的检测情况,对全州非洲猪瘟疫情防控具有重要的意义。     

2019年辽宁省生猪屠宰企业非洲猪瘟病毒检测能力比对

为客观评价生猪屠宰企业非洲猪瘟病毒检测能力水平,辽宁省首次组织全省生猪屠宰企业实验室进行非洲猪瘟病毒检测能力比对试验。334家生猪屠宰企业实验室领取了比对样品,326家在规定时限内上报了检测结果,结果合格率为77.30%（252/326）、样品检测合格率为91.66%（1 494/1 630）;A类和B类屠宰企业实验室比对结果合格率分别为88.89%（64/72）和74.02%（188/254）;74家比对结果不合格的实验室中：5份样品中分别有1~4个样品检测结果错误的实验室个数分别为30、29、12、3,占比分别为9.2%、8.9%、3.7%、0.9%;结果表明：辽宁省生猪屠宰企业非洲猪瘟检测能力整体水平亟待提升,但A类生猪屠宰企业检测能力明显高于B类企业。比对结果为政府部门优化管理措施提供了信息支持,提示应加强对生猪屠宰企业的监管水平,注重专业人员检测能力培训,强化政策及资金扶持力度,进一步推进生猪屠宰企业非洲猪瘟检测能力提升。本次比对试验对辽宁省乃至全国有效防控非洲猪瘟疫情具有积极意义。     

湖南省非洲猪瘟检测实验室能力建设现状调查

为了解湖南省非洲猪瘟检测实验室能力水平,采用问卷调查、能力比对、现场调查等方式,对实验室类型、数量、仪器设备、人员配置、检测能力比对、运行情况、生物安全措施等开展全面调查。问卷及现场调查显示:湖南省具备非洲猪瘟检测能力实验室179个,其中系统内兽医实验室仅37个,检测力量薄弱,难以满足当前非洲猪瘟防控需要;屠宰企业实验室120个,但实验室条件简陋、人员配置不合理,检测结果难以有效保障;实验室仪器设备与检测试剂来源多样,缺少统一判定标准,结果准确率低;实验室质量管理体系及生物安全管理体系不完善,监管不规范。能力比对显示:参与完成能力比对的实验室150个,检测结果全部符合的实验室78个,实验室检测质量堪忧;屠宰企业实验室存在大量假阴性结果,疫病传播风险大。这提示湖南省虽拥有一批非洲猪瘟检测实验室,但整体检测水平不高,检测能力和实验室生物安全水平亟待加强。     

山东省生猪屠宰企业非洲猪瘟病毒核酸检测能力比对

为客观评价生猪屠宰企业非洲猪瘟检测能力,山东省动物疫病预防与控制中心组织全省319家生猪屠宰企业开展非洲猪瘟病毒核酸检测能力比对。结果显示:有314家屠宰企业反馈结果,其中有225家检测结果完全合格,合格率为71.66%,样品正确率为88.47%(1389/1570);A类和B类屠宰企业合格率分别为79.14%和60.63%。结果表明,山东省生猪屠宰企业非洲猪瘟病毒检测能力有待进一步提升。结果提示,畜牧兽医主管部门应强化屠宰企业监管,加强对屠宰企业技术人员的培训和实验室管理的指导。     

甘肃省天水市生猪屠宰企业非洲猪瘟检测能力提升措施

着力加强和提升生猪屠宰企业非洲猪瘟检测实验室建设是有效防范非洲猪瘟传播的重要手段。为进一步提升屠宰企业非洲猪瘟自检能力,对甘肃省天水市生猪屠宰企业非洲猪瘟自检体系建设和运行情况进行了实地调研,并针对不足之处提出系列提升指导措施。调研发现:2019年以来,通过优化实验室配置、增加检测人员数量、加强检测人员培训和强化生物安全防护措施等,天水市屠宰企业非洲猪瘟检测能力明显提升。本文为我国其他地区生猪屠宰企业提升非洲猪瘟自检能力提供了参考。     

平凉市生猪屠宰企业实验室非洲猪瘟检测能力比对结果分析

为了进一步评估生猪屠宰企业非洲猪瘟检测在生猪屠宰“两项制度”落实中发挥的积极作用,提升生猪屠宰企业非洲猪瘟自检能力,落实非洲猪瘟常态化防控措施。2020年平凉市10家生猪屠宰企业先后3次参加了省、市动物疫控机构组织的非洲猪瘟病毒核酸荧光PCR检测能力比对工作。结果显示:3次能力比对结果准确率分别为78%、84%和96.6%,并有逐次提高的趋势,有3家生猪屠宰企业3次非洲猪瘟病毒核酸检测比对结果均符合标准,占屠宰企业总数的30%,有7家生猪屠宰企业在3次比对中结果还不稳定,企业之间比对结果存在差异,对10家生猪屠宰企业3次非洲猪瘟病毒核酸检测能力比对结果影响因素综合分析结果表明,生猪屠宰企业实验室标准化程度越高、检测人员文化程度越高、屠宰企业管理越严格,非洲猪瘟检测能力比对结果越稳定,准确率越高。     

长沙市非洲猪瘟病毒核酸检测实验室现状调查

为全面了解非洲猪瘟检测实验室能力水平,长沙市动植物疫病预防控制中心通过问卷调查、能力比对和实地调研的方式,2019—2021年连续对基层非洲猪瘟检测实验室组织开展摸底调查。结果显示：长沙市具备非洲猪瘟检测能力的实验室共30家。其中：动物疫控机构实验室6家,承担主要监测任务;企业及第三方实验室24家,提供屠宰、监测、调运等方面检测数据,起到辅助作用。但县级以下基层实验室存在区域规划不合理、人员配置不足、生物安全管理体系不完善等问题。综上,实验室检测工作在非洲猪瘟防控上起到关键作用,但基层检测能力与生物安全管理水平仍有较大提升空间。     

四川省宜宾市屠宰企业非洲猪瘟病毒核酸检测能力比对

屠宰企业的非洲猪瘟自检对切断病毒传播链条、打好非洲猪瘟攻坚战有着重要作用。为摸清四川省宜宾市屠宰企业的非洲猪瘟检测水平,对全市10个区县83家屠宰企业组织开展了非洲猪瘟检测能力比对工作。结果显示:屠宰企业检测人员偏少、岗位工作时间短、文化程度不高;不同区县、不同类别、不同组合的检测结果存在差异,有的差异较大。总的检测敏感性为49.72%,特异性为87.41%,准确率为66.56%。结果表明:屠宰企业的检测能力较为一般,监测风险预警效果不甚理想,有待加强。建议从保障人员队伍和加强操作培训两方面入手,提高屠宰企业非洲猪瘟检测能力。     

2022年湖南省兽医实验室检测能力比对及非洲猪瘟检测能力验证

实验室检测能力比对与能力验证是评估实验室检测质量的重要手段。2022年4月,按照农业农村部关于检测能力比对的工作部署和要求,湖南省组织全省14个市级77个县级兽医系统实验室开展了检测能力比对,267个实验室开展了非洲猪瘟能力验证。市级开展禽流感病毒H5/H7亚型核酸鉴别检测、非洲猪瘟病毒核酸检测、O型口蹄疫病毒抗体检测3个项目,县级开展非洲猪瘟病毒核酸、O型口蹄疫病毒抗体以及布鲁氏菌抗体检测3个项目,非洲猪瘟检测实验室开展非洲猪瘟病毒核酸检测项目,每个项目各5份盲样。结果显示:12个市级和59个县级系统实验室所有比对项目检测结果全部准确,实验室整体准确率为78.02%,1 355份样品中1 317份样品检测结果准确,样品整体准确率为97.20%;267个参加非洲猪瘟能力验证的实验室中,224个实验室核酸检测结果准确,实验室整体准确率为83.90%,1 335份样品中1 265份样品结果准确,样品整体准确率为94.76%,其中屠宰企业样品准确率最低(93.30%)。结果表明:湖南省兽医实验室检测能力整体良好,但部分县级兽医系统实验室及屠宰企业实验室检测能力有待加强。各地应继续加强实验室检...     

2019—2021年浙江省兽医实验室非洲猪瘟检测能力比对

为了解兽医实验室非洲猪瘟病毒检测能力,2019—2021年,浙江省按年度分别组织了地（市）、县（市、区）级系统兽医实验室和116家生猪屠宰企业参加了非洲猪瘟检测能力系列比对工作。结果显示：兽医系统实验室2019—2021年样品正确率分别为100%、98.78%、98.90%,实验室正确率分别为100%、94.55%、96.00%。2019年屠宰企业检测室样品检测正确率为83.45%。系统内实验室整体正确率较高,但部分县区级实验室检测水平还有待提高。屠宰企业检测室检测能力亟待提升,存在生物安全设施不完善,生物安全意识不强等问题。这提示浙江省兽医实验室还需提升管理规范化水平,提高人员检测能力。     

非洲猪瘟病毒核酸定性检测方法比对

为提升兽医实验室非洲猪瘟病毒核酸检测能力和质量控制水平,积累检测经验,以更好地开展非洲猪瘟检测,2020年7月,参加了北京市农业农村局组织的“非洲猪瘟实验室检测能力比对”项目。本次比对同时选用《非洲猪瘟检疫技术规范》(SNT 1559—2010标准)中的普通PCR方法、荧光定量PCR方法以及商品化试剂盒,对5份验证样品开展非洲猪瘟病毒核酸检测和结果比对。比对发现,3种检测方法结果一致,样品检测结果与预期一致,结果满意。此次比对确认了实验室现有检测方法能够满足非洲猪瘟病毒核酸的日常检测需求,同时提升了实验室人员的检测能力,积累了检测经验,可为非洲猪瘟防控提供有力的技术支撑。     

Motivation and Characterization of Finnish Meat Inspection Veterinarians

A questionnaire survey on the factors affecting the motivation and work attitudes of Finnish veterinary meat inspectors was conducted. Traditional meat inspection on the slaughtering line and in the emergency department took up most of the weekly work time (15.8% and 15.8%, respectively). Emergency slaughtering (29%) and general hygiene control (29%) were considered the most important tasks of veterinary meat inspectors. Assurance of meat safety (68%) was cited as the most important single reason for meat inspection. Veterinary meat inspectors were of the opinion that they do not play an important role in the training of slaughterhouse personnel, although they considered training to be a very important means for promoting hygienic work methods among workers. Three orientations of the respondents toward meat inspection and slaughterhouse operations were revealed from the survey: hygiene, education, and emergency slaughter work orientation. Meat inspection veterinarians may feel isolated from the other personnel responsible for maintaining quality and hygiene. The orientation and possible isolated position of veterinary meat inspectors should be given more attention in both the basic undergraduate and postgraduate training of veterinary meat inspectors.     

非洲猪瘟病毒环介导恒温扩增快速检测技术的建立及应用

本研究基于非洲猪瘟病毒（African swine fever virus, ASFV）vp72基因设计引物,建立了能够快速检测非洲猪瘟病毒的环介导恒温扩增技术（loop-mediated isothermal amplification, LAMP）。将LAMP与OIE参考的PCR检测方法进行比较,并且应用LAMP对非洲猪瘟参考实验室提供的非洲猪瘟病毒17个毒株的基因组以及国内收集的50份猪的基因组、30份蜱的基因组进行检测。结果显示,本研究设计的引物具有良好的特异性和敏感性,所建立的LAMP能够成功扩增非洲猪瘟病毒17个毒株的基因组,而野外收集的猪和蜱的基因组检测均为阴性。因此,本研究所建立的方法能够用于非洲猪瘟的快速诊断以及防控。     

恒温隔绝式荧光PCR检测非洲猪瘟病毒核酸方法的建立

恒温隔绝式荧光PCR(iiPCR)是一种简便、快速及可使用于现场检测的荧光PCR方法.本研究采用农业农村部推荐的检测非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)核酸的荧光定量PCR方法的引物和探针,通过对引物、探针、Taq酶等反应体系的优化,建立了基于恒温隔绝式荧光PCR的ASFV检测方...     

非洲猪瘟病毒p30基因的原核表达及间接ELISA抗体检测方法的建立

为建立检测血清中非洲猪瘟病毒（African swine fever virus,ASFV）抗体的间接ELISA方法,本试验将ASFV p30基因进行原核表达,采用SDS-PAGE和Western blotting方法对重组蛋白进行表达鉴定和免疫原性分析,随后以纯化的重组蛋白为包被抗原,经条件优化、特异性试验、敏感性试验和重复性试验,建立一种血清中ASFV抗体的检测方法。结果显示,ASFV p30基因成功克隆到原核表达载体pET-32a （+）中,获得pET-32a-p30重组质粒;转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞进行诱导表达,得到P30重组蛋白,重组蛋白大小约为42 ku,主要以包涵体形式存在;Western blotting结果显示,纯化后的蛋白具有良好的免疫原性;以纯化的P30重组蛋白为包被抗原,建立了检测ASFV抗体的间接ELISA方法,通过方阵试验对间接ELISA方法进行优化,最终确定了抗原最佳包被浓度为1.2 μg/mL,待检血清最佳稀释倍数为1：100,最佳封闭液为1% BSA,酶标抗体最佳稀释度为1：4 000,以此建立的ASFV间接ELISA方法临界值为0.322。本方法仅与ASFV阳性血清发生特异性反应,与猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、口蹄疫病毒、伪狂犬病病毒、猪圆环病毒2型及猪流行性腹泻病毒阳性血清均无交叉反应,具有较强的特异性。该方法检测ASFV阳性血清灵敏度可达到1：1 600;批内重复性和批间重复性变异系数均<10%。本试验建立的间接ELISA方法具有良好的特异性、灵敏度和重复性,可初步应用于ASFV抗体的检测。     

非洲猪瘟病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

本研究为了建立一套检测非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)的实时荧光定量PCR检测方法,根据GenBank公布的23株编码ASFV结构蛋白p72的基因序列,设计引物和探针,优化退火温度、Mg^2＋浓度和引物、探针浓度,生成标准曲线,进行重复性、敏感性、特异性试验,并检测样品。结果显示,优化的退火温度为60 ℃,Mg^2＋终浓度为4 mmol/L,引物、探针终浓度分别为0.8、0.3 μmol/L。重复性试验变异系数均小于1.3%,敏感性试验最低能够检测到10拷贝/μL的质粒,以其他5种猪病病毒和ASFV质粒为模板进行特异性试验,只有ASFV质粒出现扩增曲线。结果表明,建立的实时荧光定量PCR方法是快速、灵敏、特异的检测ASFV的方法。     

重庆市2011—2019年区县兽医实验室检测能力比对结果分析

根据农业农村部部署,为全面提升基层兽医系统实验室检测能力,重庆市于2011年起每年开展覆盖全市所有区县的兽医实验室检测能力比对工作。根据动物疫病流行情况,结合各年度省级兽医系统实验室比对项目,2011—2019年全市共开展了涉及PCR/RT-PCR(含普通、荧光定量)、ELISA(含iELISA、cELISA、LpBELISA)、血凝抑制试验(HI)和试管凝集试验(SAT)等多个项目的比对工作。结果显示,比对样品结果正确率由92.94%稳步上升至98.99%,区县兽医实验室整体检测水平有了很大提升;所有区县均具备PCR、ELISA、HI和SAT检测能力,但区县间检测水平存在一定差异,个别区县HI、SAT等项目检测能力还有待进一步提高。建议加大基层兽医实验室投入,加强实验室管理,强化技能培训,提升检测人员能力和素质,提高检测结果准确性,为建立科学完善的动物疫病防控体系提供技术支持。     

美国畜禽屠宰检疫制度介绍

国务院调整畜禽屠宰管理职能后,畜禽屠宰行业由农业部负责管理,生猪屠宰检疫管理制度亟待进一步完善。本文介绍了美国畜禽屠宰检疫的法律依据、管理体制、检疫人员、检疫的内容和程序,以及检疫出证等内容,希望可以为我国屠宰检疫制度建设提供参考。     

Determining the sensitivity of abattoir surveillance for ovine Johne's disease

OBJECTIVE: The objective of this study was to determine the sensitivity of abattoir surveillance of intestinal tract lesions for detecting ovine Johne's disease (OJD) under normal meatwork conditions. DESIGN: The design of this study was a diagnostic test validation. The three OJD inspectors were the diagnostic test and follow-up histopathological examination was used for test validation. PROCEDURE: Approximately 1200 sheep were procured from known high prevalence OJD infected farms. The sheep viscera were tagged (numbered) and then examined as they were processed on the abattoir line by three experienced meat inspectors. Their observations were independently recorded on a cassette tape. Specified sections of viscera were prepared and subjected to histopathological examination and these results were compared with the inspector diagnoses. RESULTS: The sensitivity of abattoir inspection for OJD varied between inspectors from 53 percent to 87 percent. The specificity varied from 97 to 100 percent. It appeared that the level of sensitivity for detecting disease was higher in lines of sheep where the disease was more prevalent. It also appeared that formal training was an important aspect in ensuring a high level CONCLUSION: Abattoir surveillance is a very economical and rapid method of assessing the OJD status of sheep. On the basis of these results it is reasonable to suggest that abattoir surveillance has a sensitivity of approximately 70 percent. This technique is useful as an ancillary to other testing regimes for negative assurance programs where a sheep identification system is used.