13种常用农药和玫烟色棒束孢SCAU-IFCF01的相容性研究

为了研究常用农药和生防真菌玫烟色棒束孢Isaria fumosorosea之间的相容性,本文测定了13种常用农药对玫烟色棒束孢孢子萌发、菌丝生长及产孢量的影响。试验结果表明,杀虫剂与玫烟色棒束孢的相容性优于杀菌剂。其中,高效氯氰菊酯与玫烟色棒束孢相容性最好,在常规浓度下,对玫烟色棒束孢孢子萌发和菌丝生长的抑制率分别只有2.42%和1.62%,对产孢基本无抑制作用,苏云金芽胞杆菌和氯氰菊酯与玫烟色棒束孢也有较好的相容性,二者在常规使用浓度下对孢子萌发、菌丝生长、产孢量的抑制率分别为6.05%、2.83%、22.41%和16.3%、7.81%、16.67%。高效氯氟氰菊酯、氟啶脲、丙溴磷与玫烟色棒束孢有一定的相容性。丙环唑、百菌清、戊唑醇、木霉菌、阿维菌素、甲维盐与玫烟色棒束孢的相容性则相对较差。     

西双版纳自然保护区玫烟色棒束孢分布的时空动态及寄主多样性

为明确西双版纳自然保护区虫生玫烟色棒束孢的时空动态及寄主多样性，以期为玫烟色棒束孢的开发利用提供理论依据和材料。本研究于2017年7月—2018年9月，对西双版纳自然保护区石灰岩山季雨林、热带季雨林、季风常绿阔叶林、热带丛生竹林、暖热性针叶林5种生境中玫烟色棒束孢的发生季节、生境分布和寄主进行了调查研究，采用形态学和ITS序列对菌株进行种类鉴定。结果表明，在西双版纳自然保护区共采集玫烟色棒束孢674株。从时间动态来看，玫烟色棒束孢于当年10月至次年4月为发生流行期，12月或次年1月为发生高峰期。从空间分布来看，玫烟色棒束孢主要分布于热带丛生竹林和石灰岩山地雨林的低、高和中海拔地带，分别采集到150和133、118、104株，相对丰度分别为22.3%、19.7%、17.5%和15.4%；热带季雨林和季风性常绿阔叶林中相对较少，分别采集到77和73株，相对丰度分别为11.4%和10.8%；暖热性针叶林生境仅采集到19株，相对丰度为2.8%。从海拔分布来看，石灰岩山季雨林生境中，玫烟色棒束孢在高、中、低海拔生境中分布的差异不明显，低海拔生境中菌株数量略高于中海拔和高海拔生境。玫烟色棒束孢的寄主节肢动物有2纲12目，包括昆虫纲11目，蛛形纲1目，其中优势寄主为鳞翅目和膜翅目，其相对丰度分别为40.4%和36.4%。该研究为玫烟色棒束孢生物多样性研究提供了重要内容，也为害虫生防高毒力玫烟色棒束孢菌株筛选提供材料。     

小菜蛾感染玫烟色棒束孢后的病征及组织病理变化

为了明确玫烟色棒束孢对小菜蛾的致病作用,分别以1×10⁵孢子/mL和1×10⁸孢子/mL浓度的玫烟色棒束孢菌株EBCL03011孢子悬浮液感染小菜蛾幼虫,观察了感病幼虫体表和体内器官组织的病变情况。结果显示,感病虫体颜色由局部浅褐色逐渐变为大面积深褐色,病虫出现缩短、强直等外部形态的变化。组织切片观察显示,接种后4 h,附着于体壁的分生孢子开始萌发入侵;16 h后,小菜蛾内表皮被分解,菌丝段进入血腔。与此同时,被幼虫取食进入消化道的分生孢子也增殖产生菌丝段,以菌丝段突破肠壁细胞,向附近的脂肪体入侵;随着玫烟色棒束孢继续在虫体内增殖,24 h后各组织器官遭到不同程度破坏;48 h后,感病幼虫死亡,虫尸体内的菌丝突破体表,在虫体外形成菌丝层。表明玫烟色棒束孢入侵小菜蛾有两条途径,第1条为体表途径,第2条为消化道途径。     

紫蓬山国家森林公园虫生真菌物种多样性与分布特点

本文系统研究了紫蓬山虫生真菌资源概况。共采集分离获得436株虫生真菌,鉴定为6属13种,其中优势种为环链棒束孢、蝉棒束孢、球孢白僵菌和玫烟色棒束孢,4种优势种占所有菌株的89.23%。对其虫生真菌季节变化和分布特点进行研究发现,虫生真菌数量丰富但物种多样性指数较低;夏季和晚春虫生真菌最为丰富,随着气温及降雨量的下降,菌株数量逐渐下降;不同季节环链棒束孢、蝉棒束孢和球孢白僵菌的数量波动大,但玫烟色棒束孢波动较小。环链棒束孢、蝉棒束孢和玫烟色棒束孢主要分布于阔叶林中,对单一生境的依赖性较强;而球孢白僵菌主要分布于针叶林中。本研究明确了紫蓬山虫生真菌的物种多样性和分布特点,为进一步开发生物农药奠定基础。     

基于环介导等温扩增技术的玫烟色棒束孢可视化检测

玫烟色棒束孢Isaria fumosorosea是一种重要的虫生真菌，已成为微生物源农药的一个要资源。由于缺乏有效手段，无法对罹病害虫中玫烟色棒束孢进行大量、快速、准确的检测，严重制约了该生防菌株防治效果的科学评价。本研究通过环介导等温扩增（LAMP）技术的引物设计和体系优化，建立了玫烟色棒束孢菌株可视化的LAMP检测方法。该检测方法特异性强，准确率高，与其他常见生防菌株和病原菌无交叉反应；检测时间短，60 min可得到阳性结果；灵敏度高，是常规PCR方法的100倍。该方法的建立为田间条件下玫烟色棒束孢菌株的毒力测定与安全性评价提供了新技术。     

炔草酯微乳剂药液在菵草叶片上的润湿和持留特性分析

为科学使用除草剂防治菵草,采用Zisman图法测定了菵草叶片的临界表面张力及不同浓度炔草酯微乳剂药液的表面张力,利用表面张力法测定了炔草酯微乳剂中表面活性剂的临界胶束浓度及在菵草叶片上的接触角和最大稳定持留量。结果表明,菵草叶片的临界表面张力为31.3 m N/m。炔草酯浓度为676.1 mg/L时,药液表面张力为28.0 m N/m,此时药液中表面活性剂浓度即为临界胶束浓度;浓度为1 000.0、2 000.0 mg/L时,表面活性剂浓度大于临界胶束浓度,其表面张力分别为27.7、27.8 m N/m,接触角均小于60°,润湿性好,最大稳定持留量分别为3.65±0.09、3.83±0.02 mg/cm2,均显著高于其余浓度;其余浓度下表面活性剂浓度均小于临界胶束浓度,药液表面张力大于菵草叶片的临界表面张力(500.0 mg/L除外),接触角介于75.9~125.9°之间,润湿性中等或差,最大稳定持留量相对较低,但均显著高于对照的0.47±0.10 mg/cm2。表明只有药液表面张力小于菵草叶片的临界表面张力,且药液中表面活性剂浓度达到临界胶束浓度时才能使药液在菵草叶片上具有较好的润湿性和较高的最大稳定持留量。     

玫烟色棒束孢耐热菌株的筛选及对麦长管蚜的致病力测定

采用48℃恒温水浴热胁迫法对玫烟色棒束孢7个菌株进行了耐热性测定。结果表明,热胁迫45 min后,不同菌株的残存活孢率差异显著,其中IF-502、IF-904和IF-9606菌株耐热性较强,残存活孢率均达50%以上;IF-7606菌株耐热性最差,残存活孢率仅为28.70%;IF-14、IF-511和IF-609菌株耐热性居中,残存活孢率34.72%～36.00%。对耐热性强的IF-502、IF-904和IF-9606三个菌株对麦长管蚜若蚜的致病力测定表明, IF-904菌株在1×10~7孢子/mL时对麦长管蚜的致病力最高,校正死亡率达88.20%,致死中时最短,为2.67 d。     

玫烟色棒束孢的生物学特性与其对小菜蛾致病力的相关性

测定了玫烟色棒束孢原始亲本菌株PFCF-O、退化亲本菌株PFCF-D和单孢分离子菌株PF-CF-D58、PFCF-D20、PFCF-D50的菌落生长速率、产孢量、孢子萌发率和胞外蛋白酶水平等生物学指标以及各菌株对小菜蛾2龄幼虫的校正死亡率。结果表明,菌株PFCF-O的生长速率呈先快后慢的趋势,产孢量为2.7×107个/mL,孢子萌发率为62.59%,胞外蛋白酶水平为1.16,对小菜蛾2龄幼虫校正死亡率达97.74%。而菌株PFCF-D、PFCF-D20、PFCF-D50和PFCF-D58间平均生长速率和孢子萌发率无显著差异,产孢量变化范围为1.05×107~2.34×107个/mL,胞外蛋白酶水平变化范围为1.02~1.07,各生物学指标及其对小菜蛾2龄幼虫的校正死亡率(19.86%~51.44%)都显著低于菌株PFCF-O。相关性分析结果显示,玫烟色棒束孢对小菜蛾的致病力与菌株生长初期的生长速率、产孢量、孢子萌发率和胞外蛋白酶水平呈极显著的正相关关系,与菌株生长后期的生长速率呈极显著负相关关系。     

一些药液难在水稻、小麦和甘蓝表面润湿展布的原因分析

试验表明,水稻、小麦和甘蓝叶片的临界表面张力分别为36.7、36.9和36.4mN/m。在测定了30个杀虫剂商品后发现,大多数药剂推荐浓度药液的表面张力值大于水稻、小麦和甘蓝的临界表面张力值,药液中的表面活性剂浓度未达到临界胶束浓度。这是导致大多数药剂难以在这些植物表面润湿展布的原因所在。     

玫烟色棒束孢几丁质诱导蛋白的培养条件研究

玫烟色棒束孢是重要的昆虫病原真菌之一。本文在测定菌丝总蛋白及SDS-PAGE检测的基础上,比较了不同时间和温度下玫烟色棒束孢Isaria fumosorosea经几丁质诱导前后所产生的蛋白差异。结果表明,PD(potato dextrose)和BM(basic medium)培养液中不含几丁质的对照组(contrast,CK)和加入几丁质诱导的处理组(treatment,T)中菌丝总蛋白含量都随培养时间的延长而增加,且对照组与处理组间菌丝蛋白总浓度差异显著。第5 d在BM培养液中对照组与处理组菌丝总蛋白浓度差异最显著。在不同温度条件下,PD和BM培养液中的菌丝蛋白总浓度在25℃时最高、在31℃时浓度最低,对照组与处理组间蛋白总浓度差异显著;从SDS-PAGE上可以看出,在第5 d、21℃时对照组与处理组间的蛋白条带差异最显著。结合以上信息,玫烟色棒束孢几丁质诱导蛋白的最佳培养条件为BM培养液、在25℃条件下培养5 d。     

结合药液表面张力与苹果树冠层参数预测喷雾药液用量的方法及应用

为了保证果树精准施药，减少药剂流失，通过4种常用表面活性剂调节药液的表面张力，借助界面张力仪、微重力天平和植物冠层扫描仪等测定手段建立了药液表面张力与苹果叶片最大稳定持液量 (R_m) 之间的关系，并结合果树常用冠层参数，提出了一种预估果树施药液量的方法。结果表明:生长前期苹果叶片近轴面的R_m值明显高于生长后期；在同一生长期，苹果叶片远轴面的R_m值均高于近轴面，且R_m值随叶倾角的增大而减小；生长前期苹果叶片远轴面的R_m值受药液表面张力的影响大于近轴面，但随着叶倾角的增大，叶片近、远轴面的R_m受药液表面张力的影响减小。当药液中表面活性剂的浓度未达到其临界胶束浓度 (cmc) 时，药液的表面张力与苹果叶片的R_m值成正相关关系，由此可建立一元线性回归方程，结合果树平均叶片倾角、叶面积指数和冠层地面投影面积等植物冠层参数，可以估算果树的最大施药液用量。采用4种常用的农药制剂验证了所建方法的实用性。该研究结果可以为苹果园喷雾施药时预估药液用量、减少药剂流失提供理论依据。     

不同助剂对嘧菌酯防治3种植物病害的增效作用

为研究不同助剂对嘧菌酯防治植物病害的增效效果,通过表面张力、临界胶束浓度(cmc)、药液叶片持留量的测定以及室内盆栽活性试验,测定了Silwet408、NF-100、倍达通、迈道和速捷5种助剂对玉米、小麦、大豆叶片的润湿持留能力和对嘧菌酯防治病害的增效作用。结果表明:供试的5种助剂均可显著降低药液的表面张力,增加药液在叶片上的最大稳定持留量(Rm),其中Silwet408的Rm值达7.32 mg/cm^2,倍达通的Rm值达11.16 mg/cm^2。5种助剂可显著增加嘧菌酯对小麦白粉病、大豆锈病和玉米锈病的防治效果,其中:对于玉米锈病,迈道的增效效果(EC500.016 mg/L)最好,其次为倍达通(EC500.029 mg/L);对于小麦白粉病,NF-100(EC500.009 mg/L)和Silwet408(EC500.009 mg/L)的增效效果最好;对于大豆锈病,迈道(EC500.006 mg/L)和Silwet408(EC500.007 mg/L)的增效效果最好。综合来看,Silwet408和迈道对嘧菌酯防治3种植物病害是较好的增效助剂。     

几种新型润湿分散剂在悬浮剂加工中的应用评价

为快速表征新型表面活性剂在农药剂型加工中的主要功能,本研究通过测定几类国产高分子表面活性剂的临界胶束浓度及该浓度下的表面张力和润湿时间等性能,初步判断其适合作润湿剂还是分散剂;运用流点法确定了各助剂在多菌灵悬浮剂中的用量及配比;利用不同助剂类型及不同用量加工了多种50%多菌灵悬浮剂,并测定了其性能。结果表明:将润湿剂和分散剂按不同比例混合后,通过测定其流点来确定悬浮剂中助剂用量的方法是可行的;从对各制剂的性能测试结果可以看出,不管是用流点用量还是5倍流点用量,所选助剂多数可成功加工出合格试样。将性能较好的制剂按照农药登记推荐使用浓度稀释1 000倍后,测定其表面张力及在小麦叶片上的接触角和持液量,推断其田间使用情况。结果显示:药液因表面张力过大未能润湿小麦叶片,国产助剂与国外助剂差别不显著,甚至部分国产助剂的性能还优于国外助剂的;制备悬浮剂时将磺酸盐类与聚羧酸盐类分散剂配合使用效果较好。     

玫烟色棒束孢的遗传变异性及其芽孢子生产

本文评述了近年来在杀虫真菌玫烟色棒束孢Isaria fumosorosea Wize研究中的一个热点问题:遗传变异性与菌株的毒力、产品质量监控以及田间应用效果等方面的密切关系.同时介绍了一种有实用性的现场或家庭作坊式生产芽孢子的方法和相关制剂载体的研究.     

Effects of nonionic surfactants on cuticular sorption and penetration of 2, 4-dichlorophenoxy acetic acid

Surfactants increase the uptake of some foliar-applied chemicals to a greater extent than would be expected from their effects on surface tension and spray coverage. This study of the uptake of 2, 4-D [(2, 4-dichlorophenoxy)acetic acid] evaluated the effect of surfactants on penetration through and sorption by isolated cuticles of apple leaves. [¹⁴C]2, 4-D was placed in glass chambers affixed to enzymatically isolated adaxial apple leaf cuticles after the cuticle segments had been treated with various surfactants. The same surfactant pretreatments were included in sorption studies in which cuticle segments were immersed in [¹⁴C]2, 4-D for 96 h. Quantities of 2, 4-D passing through or sorbed by the cuticle were determined. Similar experiments were conducted with unaltered cuticles and cuticles dewaxed with chloroform. The hydrophile-lipophile balance (HLB) of polyethylene-glycol-based surfactants was inversely related to the sorption of those surfactants by the cuticles and penetration of 2, 4-D. Sorption of 2, 4-D by apple leaf cuticles was unaffected by surfactant pretreatment. Dewaxed cuticle membranes showed a similar response to 2, 4-D penetration and sorption following the surfactant pretreatment.     

嘧霉胺悬浮剂的润湿性能及其靶标表面性质研究

采用光学视频接触角测量仪对加入不同润湿分散剂(7227-A、SOPROPHOR FD和SC-4)的40%嘧霉胺悬浮剂的表面张力及其分量进行了测定,同时研究了作用靶标黄瓜和番茄叶片的表面自由能,以及药液在其上的润湿展布性能。结果显示:不同配方的嘧霉胺悬浮剂其表面张力在39~51 mN/m之间,且均以色散分量为主,其中加入SC-4的药剂表面张力最低(39~48 mN/m);黄瓜和番茄叶片的表面自由能均较小,在22 mJ/m2左右,不利于药液润湿,且以极性分量占主导;各配方药液的水稀释液在番茄叶面上的接触角在51~86°之间,在黄瓜叶面上的接触角在30~62°之间,药液在黄瓜叶面上更易附着,其中加入7227-A的药剂在黄瓜叶片上润湿性能最好,加入SOPROPHOR FD的药剂在番茄叶片上润湿性能最好;田间防治效果与药液的润湿性能呈正相关。表明嘧霉胺悬浮剂对靶标的润湿性能不仅与药液的表面张力有关,也与其分量有关,同时受到靶标表面性质的影响,通过研究药液对靶标润湿性能可分析评价其药效。     

喷雾助剂对氟啶虫胺腈在富士苹果叶片表面润湿和持留的影响

为明确喷雾助剂在苹果园化学防治中的作用，采用表面张力、接触角和最大稳定持留量等分析了GY-T12、NF-100和迈润等3种喷雾助剂在达到临界胶束浓度 (CMC) 时对22%氟啶虫胺腈悬浮剂药液的表面张力及其在苹果叶片表面润湿性能和持留量的影响。结果显示:当添加的3种喷雾助剂达到其CMC时，氟啶虫胺腈药液表面张力降低至27.64~35.64 mN/m；根据水滴在苹果叶片表面的接触角小于或大于90°判定苹果叶片近轴面为亲水性表面、远轴面为疏水性表面，添加助剂使药液在近轴面和远轴面30 s的静态接触角分别降低23.2°~41.3°和68.0°~93.5°，同时使亲水性近轴面黏附功降低5.36~12.56 mJ/m2，而黏附张力增大9.27~11.26 mN/m，在疏水性远轴面黏附功与黏附张力分别增大27.45~36.66 mJ/m2和47.55~53.28 mN/m，对改善远轴面的黏附润湿性更显著；药液表面张力和最大稳定持留量存在抛物线状函数关系，当表面张力为40.89 mN/m时，持留量达最大值12.53 mg/cm2；3种助剂中，NF-100和GY- T12可显著增加药液持留量，且GY-T12对靶标害虫苹果黄蚜有显著增效作用。本研究结果表明，在苹果园应用时应依据预期目标选择适当的喷雾助剂，并通过调节药液表面张力使其处于适宜范围以增加药液持留量、提高对靶标害虫的毒力。