18种化学农药与绿僵菌相容性研究

本文检测了18种常用低毒化学农药对生防真菌绿僵菌Metarhizium anisopliae孢子萌发、菌丝生长及产孢的影响,分析它们与绿僵菌的相容性。总体看,杀虫剂、植物生长调节剂和除草剂与绿僵菌的相容性好于杀菌剂。其中,氰戊菊酯与绿僵菌相容性最好,即使在10倍的推荐浓度下,对孢子萌发无影响,对菌丝生长速度和产孢量的抑制率只有25.13%和38.63%。高效氯氟氰菊酯和乐果与绿僵菌也有较好的相容性,在推荐的田间使用浓度下,孢子萌发抑制率为30%左右,对菌丝生长和产孢量基本没有抑制。溴氰菊酯、啶虫脒、吡虫啉、甲霜灵、氟乐灵、阿维菌素、敌百虫、毒死蜱和波尔多液与绿僵菌有一定的相容性。矮壮素、哒螨灵、多菌灵、甲基硫菌灵、代森锰锌和三唑酮与绿僵菌相容性很差。     

球孢白僵菌与几种化学杀虫剂和除草剂的相容性

针对真菌杀虫剂杀虫较慢、致死率较低的缺点,在IPM中常将其与亚致死量的化学农药混用,为此需不断测定其与各种新上市农药的相容性。本研究测定了当前农药市场上销售的7种杀虫剂和3种除草剂对10株球孢白僵菌Beauveria bassiana孢子萌发率、生长速度和产孢量的影响。结果表明,所有供试杀虫剂和除草剂在常规使用浓度下对球孢白僵菌分生孢子萌发都有显著抑制作用,抑制作用随农药浓度的降低而减弱;8%氯氰菊酯（绿色威雷微胶囊剂CM）、30%草除灵（草除灵悬浮剂BN）和6.9%精噁唑禾草灵（精噁唑禾草灵水乳剂FE）在稀释10倍后对孢子萌发无显著抑制作用。所有杀虫剂和除草剂在常规浓度下对菌丝生长均有显著抑制作用,1%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐（威克达乳油EB）、40%毒死蜱（毒死蜱乳油CP）、4.5%氯氰菊酯（高效氯氰菊酯乳油BC）和8%氯氰菊酯稀释10倍后的抑制作用较小,8%氯氰菊酯甚至对RCEF0894菌丝生长有促进作用。所有杀虫剂和除草剂对产孢量均有极显著的抑制作用。综合比较,在与供试农药混用时,菌株RCEF0013和RCEF0383的产孢较好,而菌株RCEF0895、RCEF0896和RCEF0897菌丝生长较快。8%氯氰菊酯、30%草除灵和6.9%精噁唑禾草灵与球孢白僵菌的相容性相对较好,是菌药混用可能选择的对象。     

玫烟色棒束孢的生物学特性与其对小菜蛾致病力的相关性

测定了玫烟色棒束孢原始亲本菌株PFCF-O、退化亲本菌株PFCF-D和单孢分离子菌株PF-CF-D58、PFCF-D20、PFCF-D50的菌落生长速率、产孢量、孢子萌发率和胞外蛋白酶水平等生物学指标以及各菌株对小菜蛾2龄幼虫的校正死亡率。结果表明,菌株PFCF-O的生长速率呈先快后慢的趋势,产孢量为2.7×107个/mL,孢子萌发率为62.59%,胞外蛋白酶水平为1.16,对小菜蛾2龄幼虫校正死亡率达97.74%。而菌株PFCF-D、PFCF-D20、PFCF-D50和PFCF-D58间平均生长速率和孢子萌发率无显著差异,产孢量变化范围为1.05×107~2.34×107个/mL,胞外蛋白酶水平变化范围为1.02~1.07,各生物学指标及其对小菜蛾2龄幼虫的校正死亡率(19.86%~51.44%)都显著低于菌株PFCF-O。相关性分析结果显示,玫烟色棒束孢对小菜蛾的致病力与菌株生长初期的生长速率、产孢量、孢子萌发率和胞外蛋白酶水平呈极显著的正相关关系,与菌株生长后期的生长速率呈极显著负相关关系。     

球孢白僵菌与5种农药的相容性及其对韭菜迟眼蕈蚊的联合毒力

本文室内评价了5种防治韭菜迟眼蕈蚊常用化学农药(辛硫磷、噻虫嗪、噻虫胺、高效氯氟氰菊酯和高效氯氰菊酯)与高毒力球孢白僵菌YB8的相容性,并测定了菌药联合使用对韭菜迟眼蕈蚊的毒力效果。结果表明不同浓度的5种农药对菌株YB8生长均有一定的影响。其中噻虫嗪和噻虫胺在供试浓度下对孢子萌发无显著影响,5 d时能促进菌株YB8菌落生长,且随着浓度降低促进作用加强(抑制率为-2.26%~-15.69%),10 d时对菌株YB8生长略有抑制作用(抑制率为0.29%~8.33%);高效氯氟氰菊酯(16.7 mg/L)和高效氯氰菊酯高浓度(30 mg/L)均对孢子萌发有抑制作用(孢子萌发率分别为86.87%、86.82%),而低浓度(1.67、3 mg/L)则促进孢子萌发(孢子萌发率分别为124.96%、104.10%);二者不同浓度对菌落生长均有一定的影响,其中高效氯氰菊酯在低浓度3 mg/L时,5和10 d的菌落生长抑制率分别为-32.64%和-13.11%;辛硫磷与菌株YB8相容性差,随着浓度增加,孢子萌发率明显降低,菌落生长明显受到抑制。5种农药与菌株YB8联合使用的生物测定结果表明,联合作用时农药的LC50值降低,菌株YB8对韭蛆的LT50缩短。因此,生产上推荐菌株YB8与噻虫嗪和噻虫胺联合使用,而避免与高浓度辛硫磷、高效氯氟氰菊酯和高效氯氰菊酯联合使用。     

七种化学杀虫剂与球孢白僵菌TST05菌株的相容性研究

本文测定了7种常用化学杀虫剂高效氯氰菊酯、高氯甲维盐、辛硫磷、高效氯氟氰菊酯、阿维菌素、阿维杀虫单、虫酰肼对球孢白僵菌TST05菌株菌丝生长及孢子萌发、生长及产孢的影响,以研究化学药剂与球孢白僵菌TST05菌株的相容性,为化学杀虫剂和白僵菌制剂混合应用提供依据.结果表明,在田间常用浓度下,7种杀虫剂对该菌株的菌丝生长抑制率为27.93％～38.74％.虫酰肼组的孢子萌发率为33.19％,几乎不形成菌落,产孢量仅为0.05×106个/mL;而其余6种杀虫剂组的孢子萌发率为50.34％～70.62％,能形成较致密的菌落,产孢量为(2.51～3.58)×106个/mL.杀虫剂对该菌株的抑制作用随着浓度的降低而减小,田间浓度再稀释5倍后,各处理组孢子萌发率升高到72.08％～84.92％;产孢量为(3.01～9.61)×106个/mL.在田间浓度下,虫酰肼与该菌株不相容;其余6种杀虫剂的相客性较好.并且相客性随着杀虫剂浓度的降低而提高.     

小菜蛾感染玫烟色棒束孢后的病征及组织病理变化

为了明确玫烟色棒束孢对小菜蛾的致病作用,分别以1×10⁵孢子/mL和1×10⁸孢子/mL浓度的玫烟色棒束孢菌株EBCL03011孢子悬浮液感染小菜蛾幼虫,观察了感病幼虫体表和体内器官组织的病变情况。结果显示,感病虫体颜色由局部浅褐色逐渐变为大面积深褐色,病虫出现缩短、强直等外部形态的变化。组织切片观察显示,接种后4 h,附着于体壁的分生孢子开始萌发入侵;16 h后,小菜蛾内表皮被分解,菌丝段进入血腔。与此同时,被幼虫取食进入消化道的分生孢子也增殖产生菌丝段,以菌丝段突破肠壁细胞,向附近的脂肪体入侵;随着玫烟色棒束孢继续在虫体内增殖,24 h后各组织器官遭到不同程度破坏;48 h后,感病幼虫死亡,虫尸体内的菌丝突破体表,在虫体外形成菌丝层。表明玫烟色棒束孢入侵小菜蛾有两条途径,第1条为体表途径,第2条为消化道途径。     

虫生真菌玫烟色棒束孢PF904表面活性剂的筛选

为筛选适用于玫烟色棒束孢Isaria fumosorosea PF904菌株的表面活性剂,采用OWRK法和表面张力法测定了甘蓝、苹果、茄子和黄瓜叶片的表面自由能以及添加4种表面活性剂后玫烟色棒束孢孢子悬浮液的表面张力和临界胶束浓度(CMC),并采用量角法和重量差值法测定了4种不同植物叶片上的接触角和最大稳定持留量,同时对筛选获得的表面活性剂进行了安全性评价。结果表明:PEG-12聚二甲基硅氧烷(OFX-0193)、ɑ-烯基磺酸钠(AOS)和二异丁基萘磺酸钠(Nekal)3种表面活性剂在125~500 mg/L下均可提高玫烟色棒束孢孢子悬浮液在4种供试植物叶片上的润湿性能;其中250 mg/L的Nekal在甘蓝和苹果叶片上的最大持留量(11.90和13.28 mg/cm^2)和接触角(29.5°和27.5°)均显著优于OFX-0193和AOS,润湿效果最好;在茄子叶片上,添加125 mg/L的OFX-0193时持留量最大(9.45 mg/cm^2);而添加普鲁兰多糖(Pullulan)达到临界胶束浓度时的溶液表面张力大于甘蓝、苹果和茄子叶片的表面自由能,润湿性能最差。孢子萌发抑制率的测定结果表明:添加Nekal和OFX-0193对玫烟色棒束孢PF904的孢子萌发无抑制作用,而AOS则对其表现为抑制作用。因此,在玫烟色棒束孢PF904中添加OFX-0193和Nekal 2种表面活性剂可用于防治苹果、甘蓝类害虫,添加OFX-0193还可用于防治茄类害虫。     

常用杀虫剂与球孢白僵菌的相容性及对温室白粉虱的协同防效

本试验测定6种常用杀虫剂对球孢白僵菌孢子萌发、菌丝生长和产孢量的影响,并选取相容性高的杀虫剂在10倍稀释浓度下与球孢白僵菌复配对温室白粉虱进行防治。结果表明,球孢白僵菌与10%吡虫啉WP的相容性最高,而与2.5%联苯菊酯EC和20%高氯·噻嗪酮EC相容性较差,在10倍稀释浓度下10%吡虫啉WP对孢子萌发和菌丝生长的抑制率分别为12%和3.38%,产孢量为1.94×106个/mL。对白粉虱协同防效试验中,3个处理间存在显著差异,复配药剂的防效最高能达到85.19%,在防治3d后一直维持在80%以上,高于单独使用球孢白僵菌制剂和10%吡虫啉WP的防效。因此,在温室白粉虱的防治过程中,可利用生防真菌制剂与低浓度的化学杀虫剂复配,从而达到增效作用。     

基于环介导等温扩增技术的玫烟色棒束孢可视化检测

玫烟色棒束孢Isaria fumosorosea是一种重要的虫生真菌，已成为微生物源农药的一个要资源。由于缺乏有效手段，无法对罹病害虫中玫烟色棒束孢进行大量、快速、准确的检测，严重制约了该生防菌株防治效果的科学评价。本研究通过环介导等温扩增（LAMP）技术的引物设计和体系优化，建立了玫烟色棒束孢菌株可视化的LAMP检测方法。该检测方法特异性强，准确率高，与其他常见生防菌株和病原菌无交叉反应；检测时间短，60 min可得到阳性结果；灵敏度高，是常规PCR方法的100倍。该方法的建立为田间条件下玫烟色棒束孢菌株的毒力测定与安全性评价提供了新技术。     

西双版纳自然保护区玫烟色棒束孢分布的时空动态及寄主多样性

为明确西双版纳自然保护区虫生玫烟色棒束孢的时空动态及寄主多样性，以期为玫烟色棒束孢的开发利用提供理论依据和材料。本研究于2017年7月—2018年9月，对西双版纳自然保护区石灰岩山季雨林、热带季雨林、季风常绿阔叶林、热带丛生竹林、暖热性针叶林5种生境中玫烟色棒束孢的发生季节、生境分布和寄主进行了调查研究，采用形态学和ITS序列对菌株进行种类鉴定。结果表明，在西双版纳自然保护区共采集玫烟色棒束孢674株。从时间动态来看，玫烟色棒束孢于当年10月至次年4月为发生流行期，12月或次年1月为发生高峰期。从空间分布来看，玫烟色棒束孢主要分布于热带丛生竹林和石灰岩山地雨林的低、高和中海拔地带，分别采集到150和133、118、104株，相对丰度分别为22.3%、19.7%、17.5%和15.4%；热带季雨林和季风性常绿阔叶林中相对较少，分别采集到77和73株，相对丰度分别为11.4%和10.8%；暖热性针叶林生境仅采集到19株，相对丰度为2.8%。从海拔分布来看，石灰岩山季雨林生境中，玫烟色棒束孢在高、中、低海拔生境中分布的差异不明显，低海拔生境中菌株数量略高于中海拔和高海拔生境。玫烟色棒束孢的寄主节肢动物有2纲12目，包括昆虫纲11目，蛛形纲1目，其中优势寄主为鳞翅目和膜翅目，其相对丰度分别为40.4%和36.4%。该研究为玫烟色棒束孢生物多样性研究提供了重要内容，也为害虫生防高毒力玫烟色棒束孢菌株筛选提供材料。     

Effects of selected pesticides and adjuvants on germination and vegetative growth of Phomopsis amaranthicola, a biocontrol agent for Amaranthus spp.

Phomopsis amaranthicola, a bioherbicide agent for Amaranthus spp., was tested in vitro for its compatibility with commercial formulations of 16 adjuvants, 24 herbicides, nine fungicides and four insecticides at 2X, 1X (highest labelled product dose rate), 0.75X, 0.5X and 0.25X concentrations. These chemicals were tested for their effects on spore germination. Selected herbicides and fungicides at 1X were also tested for their influence on colony growth and sporulation. All tested compounds were finally categorized in compatibility classes regarding germination, mycelial growth and sporulation such as low, medium and high compatibility. High compatibility in terms of germination and fungal colony growth was only observed with the herbicide bentazone. Many of the adjuvants tested were highly compatible in the germination studies. Most fungicides and insecticides had medium and low compatibility with P. amaranthicola. Effects of pesticides on spore germination did not fully correspond with their effects on colony growth. Thus, it is possible to integrate the use of P. amaranthicola with some herbicides, fungicides, insecticides and adjuvants but not others. A case‐by‐case selection of application methods, such as tank‐mix or sequential application, along with proper timing of applications of the fungus and the chemical agents will be necessary.     

农药对虫生真菌粉虱座壳孢孢子萌发和菌丝生长的影响

虫生真菌粉虱座壳孢Aschersonia aleyrodis是大有前途的粉虱和介壳虫杀虫剂。用6种大田常用农药在推荐浓度下，研究其在25℃下对座壳孢菌孢子萌发和菌丝生长的影响，发现甲氰菊酯和克螨特抑制其孢子萌发和菌丝生长，表明二者与本菌极不相容。吡虫啉、水胺硫磷和双甲脒能促进孢子萌发且后两者亦可加速菌丝生长，多菌灵对其孢子萌发起暂时促进作用然而抑制其菌丝生长。     

保护地常用农药对蜡蚧轮枝菌菌丝生长影响研究

6种杀虫剂和 6种杀菌剂对昆虫病原真菌蜡蚧轮枝菌菌丝生长影响的研究结果表明 ,杀虫剂对蜡蚧轮枝菌菌丝生长有程度不同的抑制作用。在田间常规使用浓度下 ,5种杀虫剂对菌丝生长的抑制率在 10 %以上 ,最高者为甲氰菊酯达 17.6%。田间常规使用浓度稀释 10倍下 ,杀虫剂万灵、快灭净和锐劲特对菌丝生长抑制率低于 5% ,锐劲特在3.3～33.3mg/L时 ,菌丝生长与对照无显著差异 ,表现出与蜡蚧轮枝菌有极好的相容性 ,是菌药混用较好的候选杀虫剂。杀菌剂对蜡蚧轮枝菌菌丝生长有强烈的抑制作用 ,浓度愈高 ,抑制程度愈强。因此 ,在利用蜡蚧轮枝菌防治保护地蔬菜害虫时 ,须与杀菌剂使用保持一定的间隔期     

海洋霉菌1-B6-10代谢产物对几种镰刀菌的抑制作用

测试了海洋霉菌菌株1-B6-10代谢产物对不同镰刀菌菌丝生长、孢子萌发和显微形态的影响.结果表明,该菌代谢产物粗提物对尖孢镰刀菌Fusarium oxysporum菌株F1113、F1125和番茄镰刀菌Fusarium batatasis菌株F2016等的菌丝生长具有明显的抑制作用.当纸片上滴加0.05 mL该粗提物时,其抑菌圈直径均在32 mm以上;在菌株F1125菌丝块上直接滴加0.05 mL该粗提物,其菌丝生长抑制率达到98.39%.该代谢产物也能显著抑制尖孢镰刀菌F113和F1125孢子的萌发,用粗提物处理后培养48h,其孢子萌发率仅为8%和9.6%.显微镜观察结果表明,在添加该代谢产物亚抑菌浓度的培养基中,尖孢镰刀菌F1113菌丝的形态发生改变,部分菌丝萎缩和断裂.     

保存时间对中华羊茅种子内生真菌活力的影响

以分别保存于2004-2006年的带Epichloë内生真菌(E＋)中华羊茅Festuca sinensis为研究对象,探讨了随着保存时间的延长,内生真菌活力的变化。结果表明,随着保存时间的延长,中华羊茅种子带菌率、幼苗带菌率以及种子的发芽率、发芽指数、根长、苗长均有降低的趋势,同一年种子带菌率均高于幼苗带菌率,2006年带菌率最高,种子为95.80%,幼苗为93.10%;以3个年份的(E＋)中华羊茅草粉浸提液对细交链孢Alternaria alternata、燕麦镰孢Fusarium avenaceum和绿色木霉Trichoderma viride的抑菌活性研究表明,3个年份的带菌草粉浸提液对3种菌的菌落生长和孢子萌发均有一定的抑制作用,但保存时间越长,其抑菌能力越弱,2006年的抑菌率为63.51%,2004年为25.49%,而2006年的抑制产孢能力为69.25%,2004年仅为26.34%。同时,从不同保存年份分离到的内生真菌在相同条件下再培养结果显示,保存时间越长的内生真菌生长越缓慢,产孢能力越弱,2006年的菌落直径为26.4 mm,而2004年仅为17.4 mm。说明随着保存时间的延长,内生真菌活力在逐渐下降,导致自身生长以及促进种子生长,抑制真菌的活性也开始减弱。