β-葡聚糖对啤酒易滤性影响的研究

通过对啤酒中β-葡聚糖的定性定量分析和啤酒易滤性的测定,发现溶解状态的β-葡聚糖对啤酒的过滤没有明显的影响,而β-葡聚糖凝胶对啤酒过滤有严重影响.啤酒中β-葡聚糖凝胶的分子量在300 000以上,当含量达到20 mg/1时,就会使啤酒膜过滤困难.啤酒的易滤性与β-葡聚糖含量之间里r=-0.222的不显著负相关,而与β-葡聚糖凝胶的含量之间呈r=-0.841~(***)的极显著负相关.     

褐牙鲆精子生理特性及超低温冷冻保存

对褐牙鲆精子部分生理特性进行了研究,结果表明,褐牙鲆精浆pH值为(7.90±0.26),精子密度为(1.03×1010)/mL,精浆渗透压为(308.50±7.85) m Osm/kg,K+在精浆中的浓度为 (27±3) mmol/L,Na+在精浆中的浓度为(71±5) mmol/L.对不同盐度和pH与褐牙鲆精子活力和寿命的关系进行了研究,结果表明,在盐度为35,pH为8.0时,精子的活力最高,分别达到(93.33±5.67)%和(89±3.33)%,与其生活环境相适应;褐牙鲆精子寿命为(23±2) min,与已报道其它海水鱼精子寿命相近.分别采用室温(25 ℃)和低温(4 ℃)保存精子,发现精子在室温条件下,可存活4 d,在低温条件下可以存活7 d,证明低温可有效延长精子存活时间.另外,分别采用4种不同稀释液(S1、S2、S3、S4)与4种不同抗冻剂(DMSO、EG、Gly、PG)配制成冷冻保存液对褐牙鲆精子进行超低温冷冻保存研究.结果表明,以S3液作为稀释液,16%的DMSO作为抗冻剂,利用快速降温法对精子进行超低温冷冻保存,38 ℃水浴快速解冻,解冻后的精子获得最高的活力为(84±3.67)%,此方法可用于褐牙鲆精子的长期保存.     

印度水牛瘤胃内容物细胞外核酸酶的提取及其特性

水牛瘤胃液内细胞外核酸酶是从滤过的瘤胃液中被提取的,其过程包括 Seitz过滤和丙酮分馏和交联葡聚糖凝胶 G_(-100)凝胶过滤。此酶出现两个锋,表示即有脱氧核糖核酸酶又有核糖核酸酶活性。相对锋Ⅰ和锋Ⅱ分子量分别近似为30,000和12,000。这两个锋酶的特性是相同的,两种酶活性最适温度为50℃。脱氧核糖核酸酶活性保持在60℃以内,核糖核酸酶活性保持在50℃以内。脱氧核糖核酸酶活性表现两个最适 PH 值,一为 PH5.5,一为 PH7.0。核糖核酸酶活性则表现了一个最适 PH 范围即 PH 值为6.0～8.0。酶 PH 稳定性与两种酶活性的最适 PH 是一致的。脱氧核糖核酸酶活性可被 Mg(?)和 Mn(?)激活,而被 Fe~(++)、Zn~(++)、Hg~(++)和 Ag~+拟制;核糖核酸酶活性也可被 Mg~(++)和 Mn~(++)激活,而被 Cu~(++),Fe~(++),Zn~(++),Hg~(++)和 Ag~(++)拟制,还原粒物质可激活这两种酶活性。     

一株绿色木霉产外切β-葡聚糖苷酶条件及其纯化与性质的研究

从树林中腐烂木块上采集并筛选出一株分泌外切β-葡聚糖苷酶(exo-1,4-β-D-glucanase or cellobiohydrolase,CBH)的绿色木霉菌株．在100mL的锥形瓶中装入40mL培养基的产酶状况最好,其通气量最佳,培养液初始pH为8时绿色木霉产生的CBH活力最高．随绿色木霉生长时间的延长,CBH的活力与培养基中的葡萄糖含量呈交替的一高一低的波浪状变化．通过硫酸铵分部分离、葡聚糖G-100凝胶过滤、DEAE-纤维素52阴离子交换柱层析等方法使绿色木霉所产的CBH达到了电泳纯,纯化倍数为16．3．CBH的反应最适温度为60℃,最适pH为6．0,Km(底物为羧甲基纤维素钠)为17．34mg／ml．     

大枣露的制作

一、工艺流程原料→加水煮沸→过滤→调整→灌装→杀菌→冷却→成品。二、操作要点1.选择原料。可用制作枣泥或枣酱、无核糖枣的下脚料枣皮、枣核作原料。2.煮沸过滤。如用枣核和枣皮作原料,加水8～10倍,在铜锅或铝锅中煮沸20～30分钟,过滤。3.调整。测定滤液含糖量,根据测得数据,加冰糖或白砂糖调整含糖量至7%～8%。4.真空抽滤。滤液投入真空泵抽     

精子与慢病毒孵育制备转基因猪的分子检测及遗传分析

【目的】在前期精子与慢病毒孵育法制备的转基因猪基础上,进一步探讨外源基因在转基因猪上的遗传状况.【方法】通过转基因猪与野生猪交配扩繁后,运用PCR和Southern-blot法对转基因G_1和G_2代进行外源基因的检测与遗传分析.【结果和结论】采用PCR法检测,G_1代PCR阳性率为25.42%(15/59);G_2代PCR阳性率为46.67%(7/15).在12头阳性转基因猪的13种组织中,外源基因在多种组织中均有存在;对阳性转基因猪的胃、垂体、下丘脑组织的RT-PCR检测结果显示,外源基因在66.67%(24/36)的组织样品中均有表达.表明在精子与慢病毒共孵育法制备的转基因猪中,外源基因能整合到猪的基因组,并遗传给后代.     

免疫抑制素和卵泡抑素阻止夏季热应激导致的猪精液品质下降的研究

[目的]通过免疫抑制素和卵泡抑素促进精子发生,在夏季热应激状态下保持公猪精液品质.[方法]在夏季热应激状态下对精液品质出现下降的成年种公猪单独免疫抑制素、或联合免疫抑制素α亚基和卵泡抑素重组蛋白(n=6)3次,每次间隔21 d;然后在9周试验期间定期采血测定血液抗体效价、FSH和睾酮浓度,每周采精观察精子活力和精子密度作为精液品质指标.[结果]抑制素单独免疫、抑制素和卵泡抑素联合免疫都使猪血液中抗抑制素的抗体效价显著高于对照组值(P<0.01),联合免疫也使猪血液中抗卵泡抑素的抗体效价显著高于对照组值(P<0.01).单独免疫或联合免疫都显著升高了血液FSH浓度;联合免疫还升高了血液睾酮水平.在试验期间对照组中猪的精子活力持续下降,而两免疫组的精子活力都上升,其中联合免疫猪的精子活力显著高于对照组猪.试验开始时对照组猪精子密度显著高于两免疫组,但在试验期间持续下降;而免疫组中猪精子密度在试验期间未下降,特辑是在联合免疫组于试验后期还显著高于对照组猪.[结论]免疫抑制素和卵泡抑素可以促进公猪FSH和睾酮分泌,克服夏季热应激的不良影响,促进猪精子发生,并提高精液精子活力和密度,有望用于热应激状态下保持种用公猪的繁殖性能.     

基于3种BLUP方法的长白公猪精液性状遗传参数估计

【目的】探究3种BLUP方法在长白公猪精液性状及其稳定性遗传参数估计中的差异。【方法】收集了来自2 294头长白公猪的227 361条精液数据,使用R语言ASReml软件包,分别用基于系谱的最佳线性无偏预测(PBLUP)、基因组最佳线性无偏预测(GBLUP)和一步法(SSGBLUP)3种BLUP方法对精液性状及其稳定性进行遗传参数估计。【结果】使用PBLUP、GBLUP和SSGBLUP估计遗传力分别为：精液体积(VOL)0.21、0.08和0.20,精子密度(DEN)0.17、0.06和0.12,精子活力(MOT)0.25、0.06和0.26,精子畸形率(ABN)0.38、0.09和0.47,总精子数(TSN)0.11、0.03和0.09,有效精子数(FSN)0.15、0.03和0.12,精液体积稳定性(C.V._VOL)0.11、0.05和0.08,精子密度稳定性(C.V._DEN)0.03、0.02和0.03,精子活力稳定性(C.V._MOT)0.28、0.02和0.12,精子畸形率稳定性(C.V._ABN     

SpermCryo无卵黄冷冻液对食蟹猴精子冷冻保存的影响

为了建立运用商品化人类精子无卵黄冷冻液SpermCryoTM All-round冷冻保存食蟹猴精子的方法,比较了快速(-435℃/min)、中速(-183℃/min)和慢速(-69℃/min)的降温速率以及不同冷冻平衡时间(10和30 min)对食蟹猴精子冷冻保存的效果.结果表明,在液氮上方冷冻平衡10 min对食蟹猴精子的复苏活力显著高于30 min.用快速和中速冷冻速率保存的精子的复苏活力较高,冻存精子的复苏活力明显高于慢速冷冻速率保存的精子.该研究建立和优化的SpermCryo无卵黄冷冻液冷冻保存食蟹猴精子的方法,可简单快速完成精子的冷冻保存,并获得较高的冷冻复苏存活率.该研究结果对深入研究灵长类动物精子冷冻损伤的机制和在辅助生殖中的应用具有重要意义.     

时间和密度对公猪精子活力和运动参数的影响

研究时间和密度对公猪精子活力和运动参数的影响,采用计算机辅助精子分析(CASA)系统在采精后0、10、20、30、60 min时检测精子运动参数,比较精子活力[用前向运动(PR)的精子百分率表示]、精子活动率[用前向运动和非前向运动(NP)的精子百分率表示]、精子运动速度等参数在不同时间节点不同密度下的变化情况。结果显示,精子活力和精子活动率整体上均表现为随时间延长而降低的趋势,在20 min时均极显著低于0 min时的检测水平,60 min时两者的检测水平降幅分别达29. 91%、16. 48%。在1. 0亿个/mL及以下(D1)、1. 0亿～1. 5亿个/mL(D2)、 1. 5亿～2. 0亿个/mL(D3)、2. 0亿个/mL以上(D4)密度级别下,60 min时精子活力和精子活动率检测结果降幅不一,D1降幅最大,D4最小;曲线速率(VCL)、直线速率(VSL)和平均轨道速率(VAP)等精子运动速度指标均呈现随时间而下降现象;线性(LIN)、直向(STR)和摆动(WOB)变化较平缓,上下波动幅度较小,交打频率(BCF)中,0 min时检测水平最高,为(6. 059±0. 197) Hz,之后呈现明显下降趋势,至60 min时下降1. 201 Hz,降幅为19. 82%,差异极显著(P 0. 01),0 min时与20和30 min时比较,差异显著(P 0. 01)。结果表明,密度大的精液缓冲能力强,精子活力和运动参数降幅小,密度小的精液缓冲能力弱,精子活力和运动参数降幅大;精液品质检查和精液稀释等工作最好在采精后10 min内完成。     

胭脂鱼精子低温保存及其在人工授精中的应用

[目的]研究胭脂鱼精子的低温保存方法,为胭脂鱼的人工繁殖和人工授精提供基础依据。[方法]试验配制了A、B、C、D4种精子保存液,以0．7％的NaCl溶液作为对照,以精子被激活后的活率为指标,对4种精子保存液保存成熟的胭脂鱼精子的效果进行评价。[结果]在低温（0～4℃）条件下,4种精子保存液之间及其与对照溶液之间的差异比较明显。其中保存效果最好的是B液,能在120h内使精子的活率保持为80％;D液次之,能在84h内使精子的活率保持为80％。胭脂鱼在淡水中快速运动时间为（24．0±3．5）s,寿命为（128．0±9．5）s。2007～2008年精子保存B液在胭脂鱼的人工授精中进行应用,受精率为53％～85％。[结论]用精子保存液低温保存胭脂鱼精子的方法是切实可行的。     

甘薯品种金山471凝集素的提取及其性质研究

甘薯凝集素 (sweetpotato lectin,简称 SPL )由甘薯品种金山 4 71的叶片组织经 (NH4 ) 2 SO4 分级沉淀 ,甲壳素亲和柱及 Sephadex G- 75分离得到的 .经 PAGE或 SDS- PAGE均呈现一蛋白区带 ,用 SDS- PAGE测得亚基相对分子质量为 4 1× 10 3左右 .SPL能凝集人各种血型及部分动物红细胞 ,其中对鸽红细胞凝集活性最高 ,能凝集小鼠 S180 肉瘤细胞 .其凝集活性可被阿拉伯糖或 N-乙酰葡萄糖胺等抑制 ,在 90℃加热 2 0 min才完全失活 .SPL中性糖含量为 8.4 2 % .氨基酸组成分析表明分子中富含酸性氨基酸 .     

鸡血清IgG纯化方法研究

[目的]为了获得高纯度鸡免疫球蛋白(Ig),并保持其生物学活性。[方法]比较几种纯化鸡血清免疫球蛋白(IgG)的方法。用饱和硫酸铵(NH4)2SO4沉淀法或乙醇沉淀法提取鸡血清IgG,经透析除盐,将初提物过sephadexG-200柱进一步分离IgG,经免疫电泳和SDS-PAGE电泳进行纯度鉴定。[结果]结果表明:在该试验条件下,(NH4)2SO4盐析和乙醇沉淀法获得的鸡IgG经sephadexG200柱分离获得高纯度的鸡IgG。[结论]该研究为找到较好的纯化鸡血清IgG方法提供了试验依据。     

水牛梭形住肉孢子虫包囊抗原的纯化技术

应用萄聚糖凝胶柱层析对水牛梭形住肉孢子虫包囊包溶性抗原进行了纯化。结果表明：纯化水牛梭形住肉孢子虫包囊抗原的最适条件为：选用萄聚糖凝胶Ｇ—１００柱层析系统；洗脱液为０３ＭＰＢＳ（ｐＨ７２），床体积为１０ｃｍ×１６５ｃｍ，上样体积为５００ＨＬ；流速为１２ｍＬ／ｈ。纯化抗原可使琼脂凝胶双扩散试验的阳性检出率提高３０％。     

牡蛎抗氧化活性肽的酶解工艺研究

以木瓜蛋白酶和中性蛋白酶为工具酶,利用正交试验法确定了木瓜蛋白酶和中性蛋白酶酶解制备牡蛎抗氧化活性肽的最佳酶解工艺。结果表明：当时间为150min、酶用量为6％、温度为45℃、pH为7．0时,木瓜蛋白酶酶解液的抗氧化活性最强;当时间为110min、酶用量为3％、温度为65℃、pH为6．0时,中性蛋白酶酶解液的抗氧化活性最强。用SephadexG-15葡聚糖凝胶柱层析分析的结果表明,木瓜蛋白酶酶解液中最佳抗氧化活性组分的相对分子质量为1191和826左右,中性蛋白酶酶解液最佳抗氧化活性组分的相对分子质量为1074和735左右,其抗氧化活性峰值与蛋白肽在280nm下的吸收峰值分别相吻合。     

一种微生态制剂中抑菌物质的分离与鉴定

植物乳杆菌发酵产生的抑菌物质经乙醇浸提、SephadexG-15层析、氨基酸组成分析、反相液相色谱分离及鉴定，发现该植物乳杆菌产生的抑菌物质为一类分子量较小（小于1000Da)，且比较接近，极性不同的多肽。     

菜籽中4—羟基—3—甲基吲哚硫代葡萄糖苷的离子交换色谱法分离

本文报道用ＤＥＡＥ Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ａ－２５作固定相，硫酸钾溶液作流动相的离子交换色谱法，从菜籽中分离４－羟基－３－甲基吲哚硫代葡萄糖苷的方法。     

一种微生态制剂中抑菌物质的分离与鉴定

植物乳杆菌发酵产生的抑菌物质经乙醇浸提、SephadexG-15层析、氨基酸组成分析、反相液相色谱分离及鉴定，发现该植物乳杆菌产生的抑菌物质为一类分子量较小（小于1000Da)，且比较接近，极性不同的多肽。     

抑制素α片段(1-26)辣根过氧化物酶标记物的制备与鉴定

用EDC法将抑制素α片段(1-26)与辣根过氧化物酶偶联,然后过sephadex G-50进行纯化,其鉴定结果表明,随着酶标记物浓度增加,实验所得的D280值也增加,说明该标记物酶活性较好.应用ELISA法检测的抑制素-HRP活性鉴定曲线可知,酶标抑制素α片段(1-26)纯化物可与抗抑制素抗体竞争结合.在检测的2个蛋白质峰中,峰1洗脱液中含抑制素α片段(1-26)-HRP;峰2洗脱液中不含抑制素α片段(1-26)-HRP.由试验结果表明,酶标记物的酶活性与免疫活性较好,可用于建立测定抑制素水平的ELISA法.     

青霉植酸酶生产条件及纯化的研究

青霉培养液的原始pH值为5.5时，植酸酶大量地产生，酶活性高，在青霉的生长过程中，维持培养液pH的不降低会抑制青霉的生长，植酸钙可促进植酸酶活性的提高，粗酶液经硫酸铵分级沉淀，再经SephadexG-100凝胶过滤，洗脱液有2个具有酶活力的蛋白峰，植酸酶被纯化了3.3倍，比活力达71.3U/mg。