大花三色堇花粉生活力测定及贮藏方法

为解决大花三色堇杂交育种过程中的时空障碍,提高育种效率,以纯黄大花三色堇品种EYO花粉为试材,采用离体萌发法、碘 碘化钾染色法、醋酸洋红染色法和TTC（氯化三苯基四氮唑）染色法对新鲜花粉生活力进行测定,并研究不同贮藏条件对花粉萌发的影响。结果表明：培养基中添加蔗糖和硼酸对花粉的萌发有促进作用,且二者之间具有互作效应,当培养基中添加200 g/L蔗糖 +150 mg/L硼酸,萌发率较高,达35.04%。与离体萌发法相比较,碘 碘化钾染色法、醋酸洋红染色法测定的花粉活力值偏高,分别为50.80%、71.41%,TTC染色法不能使大花三色堇花粉着色。花粉在不同贮藏条件下,生活力变化存在显著差异,常温贮藏3 d后花粉活力降为零,而4 ℃、-80 ℃不干燥贮藏26 d后花粉仍有活力,萌发率分别为6.26%和10.31%。     

花粉活力与柱头可授性对兰花杂交结荚率的影响

以24个大花惠兰品种为母本,32个国兰品种为父本,通过人工正交杂交共产生45个组合,研究杂交结荚率与花粉活力和柱头可授性之间的关系。结果表明,国兰花朵开放0～20 d的花粉活力处于增长期,之后花粉活力随花朵开放时间的增加而降低。花朵开放相同天数的不同国兰品种间的花粉活力差异较大,活力范围为20%～95%。大花蕙兰花朵开放20～25 d时柱头都具可授性,不同品种间有差异。45个杂交组合中有22个组合获得发育成熟的果荚,结荚组合率为48.89%,落果组合率为51.11%。从授粉到果荚成熟需要175～200 d,成熟果实结荚率为80%～100%的有9个组合,其中6个组合花粉活力73%,柱头可授性很强,3个组合花粉活力50%,2个组合柱头可授性强和1个柱头可授性弱;结荚率为50%～80%的有3个组合,花粉活力67%,2个组合柱头可授性强和1个组合的柱头可授性弱;结荚率50%有10个组合,其中1个组合花粉活力50%,柱头可授性强,其他9个组合花粉活力≥50%,柱头可授性强;落果率即结荚率为0的杂交组合表现为授粉后子房膨大,生长过程中出现黄苞落果。表明花粉活力、柱头可授性的强弱对结荚率有一定的影响,一般表现为花粉活力与柱头可授性越强结荚率越高,反之亦然。花粉活力与柱头可授性可作为杂交授粉能否结荚的重要指标。     

新疆变色石竹繁殖生物学特性研究

[目的]观察变色石竹花期动态,分析花粉活力、柱头可授性的发生规律,为野生石竹种质资源利用及杂交育种提供理论依据.[方法]观测记录变色石竹花期.以变色石竹花粉为材料,采用L9(33)正交设计研究蔗糖、硼酸、氯化钙对变色石竹花粉离体萌发的影响.运用碘-碘化钾染色法、TTC染色法、花粉萌发法动态测定花粉活力,采用联苯胺过氧化氢法测定柱头可授性.[结果]变色石竹开花在5月中下旬,盛花期从6月延续到9月,花期持续时长为165 d左右;10 g/L蔗糖+0.1 g/L硼酸+0.05 g/L氯化钙为比较适合变色石竹花粉萌发培养基;花粉在开花第6h至第6d花粉都具有活力,开花第2d花粉活力最高;柱头从开花第3d逐渐具有可授性,到第8d可授性消失.[结论]变色石竹花部图案多变,花期较长具有一定的观赏价值.蔗糖、硼酸、氯化钙均对花粉萌发具有促进作用,TTC染色法测定花粉活力相对便捷准确,开花第4～6d内柱头可授性最强.     

木薯花粉活力测定及验证试验

以6个木薯品种为供试材料,分别采用碘-碘化钾(I2-KI)染色法、氯化三苯四氮唑(TTC)染色法、醋酸洋红染色法、离体萌芽法对其花粉活力进行测定,以自然授粉法和人工杂交法对其进行验证。结果显示:I2-KI染色法、醋酸洋红染色法、氯化三苯四氮唑(TTC)染色法、离体萌芽法测定花粉平均活力分别是96.8%、96.4%、1.8%、0～1.12%;人工杂交授粉率为0%～0.34%,自然授粉率则为38.2%～62.9%。验证试验表明:供试木薯花粉具有活力,CCT法和离体萌芽法,不能正确反映花粉活力状况,碘-碘化钾和醋酸洋红染色法能测出花粉活力,但能否则正确反映花粉活力,有待进一步验证。     

马铃薯花粉生活力测定及低温贮藏研究

快速测定马铃薯花粉活力可以使马铃薯人工杂交育种有效开展.以新采摘的马铃署花粉为材料,采用醋酸洋红染色法、碘-碘化钾染色法和氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法测定马铃薯花粉活力,初步研究不同马铃薯花粉在-20℃黑暗避光条件下储藏时间与活力的变化.结果表明,醋酸洋红染色法和碘-碘化钾染色法不适合马铃薯花粉活力的快速测定,而氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法能够快速测定马铃薯花粉活力,该方法省时省力,基本上能够反映花粉的活力大小.低温储藏试验结果表明,花粉在-20℃黑暗干燥条件下储藏3个月仍保持较高的活力.     

青蒿花粉活力及柱头可授性研究

以野生青蒿中形态差异较为明显的绿秆(品系Y03)和紫红秆(品系Y07)为材料,分别以碘-碘化钾染色法、TTC染色法、联苯胺-甲萘酚染色法和离体萌发法测定其花粉活力,并从中选取较适宜的检测方法研究其贮藏特性,采用联苯胺-过氧化氢法测定其柱头的可授性.结果表明,碘-碘化钾和TTC染色法不适宜青蒿的花粉活力检测,联苯胺-甲萘酚染色法可以用于快速测定青蒿花粉活力,但测定值偏高,离体萌发法能准确可靠地反应花粉活力;两个品系的新鲜花粉在室温条件下只能贮藏2d,4℃,-19℃条件下可以贮藏3d,干燥处理显著加快了花粉活力的丧失;联苯胺-过氧化氢法测得两个品系青蒿柱头可授期为8~10d,边缘雌花可授性比中央两性花的强,且其可授期比中央两性花长1~2d.     

不同品系油菜花粉生活力测定方法比较

[目的]采用5种方法对不同品系的油菜花粉生活力进行测定,以找出油菜花粉生活力的最佳测定方法。[方法]5种花粉生活力测定方法分别为蔗糖萌发测定法、醋酸洋红染色法、氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法、碘—碘化钾染色法和红墨水染色法。[结果]TTC染色法和红墨水染色法测定值偏高,碘-碘化钾染色法测定结果偏低;蔗糖萌发测定法和醋酸洋红染色法测定结果比较接近,是测定油菜花粉生活力的最佳方法。[结论]可将蔗糖萌发测定法和醋酸洋红染色法结合起来,先通过醋酸洋红染色法掌握花粉的基本存活情况,之后进一步用蔗糖萌发测定法测定其花粉的萌发能力,这有利于正确地反映花粉生活力。     

芝麻繁育特性研究Ⅴ：花粉活力与柱头可授性

比较分析直接观察法、醋酸洋红染色法、I₂-KI染色法、无机酸法、MTT染色法、TTC染色法和FDA荧光检测法在芝麻花粉活力上的检测效果，监测芝麻花粉活力的日变化情况，并采用联苯胺-过氧化氢法和不同时间直接授粉法对芝麻柱头可授性的日变化进行研究。结果表明：（1）直接观察法、TTC染色法和FDA荧光检测法不适合芝麻花粉活力的检测，而醋酸洋红染色法、I₂-KI 染色法、无机酸法和MTT染色法等4种方法可用于芝麻花粉活力检测，其中，醋酸洋红染色法操作简单、易于观察。（2）芝麻花粉活力的日变化表现为不断下降趋势，在7:30-9:30最高，11:30-17:30不断下降，达显著水平。（3）联苯胺-过氧化氢法测定的芝麻柱头可授性的日变化表现为先升后降，早晨7:30时已有很高的可授性，随后稍有升高， 9:30时达到最高值，11:30后随时间推延呈显著下降趋势。（4）不同时间直接授粉法测得芝麻授粉时间越晚，结蒴率越低，7:30时具有最高的结蒴率；相对结实率在7:30-11:30时差异不明显，均处在较高状态，13:30后开始不断显著下降。（5）花粉活力、柱头可授性、结蒴率和相对结实率等4个指标的日变化值的相关分析结果表明，4个指标相互之间的相关性均呈极显著正相关，其中柱头可授性与相对结实率的相关系数最大，达 0.940。     

臭椿花粉生活力的测定方法及对比实验

利用氯化三苯基四氮唑(TTC)法、碘-碘化钾法、蓝墨水染色法、无机酸法、醋酸洋红染色法及离体萌发法测定了臭椿的花粉生活力.结果表明:碘-碘化钾法、蓝墨水染色法和醋酸洋红染色法都不适合臭椿花粉生活力的检测;TTC法,离体萌发法和无机酸法能有效快速地测定花粉生活力,但是TTC法与其它两种方法测得的结果差异显著.该实验结果认为离体萌发法和无机酸法更适合臭椿花粉生活力的检测.同时还讨论了6种测定方法的应用原理及优缺点.     

花龄对兰属4个栽培种花粉活力的影响

为探索观赏兰属植物杂交育种适宜的授粉时间,采用TTC染色法检测了大花蕙兰、春兰、蕙兰和墨兰各5个品种(材料)不同开花时间的花粉活性。大花蕙兰花龄设置为-2、3、8、13和18 d,春兰、蕙兰和墨兰花龄设置为-2、1、4、7和10 d。结果发现,大花蕙兰花粉的强活力时期为-2~8 d、蕙兰为-2~10 d、春兰和墨兰为-2~4 d;开花当天花粉活力最高、强活力花粉数比重最大,而后活力逐渐减弱;品种之间存在一定的差异。建议选择开花当天的花粉进行授粉,有利于提高受精成功率。     

不同光照条件对新疆猪牙花花粉生活力及柱头可授性的影响

[目的]探讨不同光照条件对新疆猪牙花花粉活力及柱头可授性的影响,以期为该物种的深入研究提供必要的参考依据.[方法]设置两种光照条件（遮阳和自然光照）,调查新疆猪牙花的开花参数;采用花粉培养法测定花粉活力;借助解剖镜观察柱头分泌粘液情况;利用联苯胺—过氧化氢法测定柱头可授性.[结果]自然光照条件下新疆猪牙花开花较遮阳条件早8d,但花期较短;自然光照条件下群体花期为15d左右,而遮阳条件下群体花期能持续20d左右;遮阳条件下在开花后28 h时花粉活力最高为76.54％,自然光照条件下在开花后26 h时花粉活力最高为62.15％;经过遮阳处理的柱头在开花后26～32 h分泌较多粘液,自然光照条件下在开花后24～30 h柱头有较多的粘液分泌;遮阳条件下开花后26～30 h柱头具有最强可授性,而自然光照条件下可授性仅在开花后26 h最强.[结论]对新疆猪牙花进行遮阳处理可以延长授粉时间和提高结实率,最终提高新疆猪牙花的产量.     

云南黄连花粉活力和柱头可授性研究

 通过扫描电子显微镜观察花粉粒的形态特征,采用I2-KI染色法测定云南黄连花粉活力,并通过联苯胺+过氧化氢反应液和3%的过氧化氢测定其柱头可授性。结果表明：云南黄连的花粉粒为近圆球形,具有萌发孔,表面具有刺状雕纹;花粉活力一天中最强的时间段是13∶30—15∶30,最强的时期是散粉时期;I型（雌蕊长于雄蕊）的云南黄连柱头可授性高于II型（雄蕊长于雌蕊）的。在散粉初期,云南黄连普遍具有较高的柱头可授性。     

穿龙薯蓣花粉活力及柱头可授性测定方法研究

[目的]确定穿龙薯蓣花粉活力及柱头可授性的快速、有效测定方法。[方法]分别采用I2-KI染色法、TTC染色法、亚甲基蓝染色法、MTT染色法和无机盐培养法测定穿龙薯蓣的花粉活力,采用联苯胺-过氧化氢法和MTT染色法测定其柱头的可授性。[结果]I2-KI和TTC染色法对穿龙薯蓣花粉的染色效果不理想,不适于观测其花粉活力;亚甲基蓝染色法使花粉生活力的测定值偏高;MTT染色法使花粉细胞出现紫色、淡红色、无色3种颜色反应,利于分辨花粉生活力的有无。联苯胺-过氧化氢法不适于观测穿龙薯蓣柱头的可授性;MTT染色法能较准确地观测出不同时期柱头可授性的动态变化。[结论]MTT染色法适于检测穿龙薯蓣的花粉活力及柱头可授性。     

沙棘开花动态、花粉生活力和柱头可授性研究

[目的]为沙棘的配伍雄株选择、杂交育种及栽培品种选择提供理论依据。[方法]野外调查了引进沙棘品种的花期物候、风媒传粉特征,对其花粉生活力、柱头可授性及单花花粉量等进行了检测。【结果1沙棘风媒传粉发生在5月初,雌株花期10～12d,雄株花期12～15d;重力玻片法检测表明,离花粉源20m（无刺雄）和25m（阿列伊）左右远的地点花粉密度最大。刚开花时花粉生活力达到90％以上,在干、湿2种保存条件下,花粉生活力都随着保存时间的延长显著下降（P〈0．05）。干燥条件下,生活力能维持4d,从第4d开始生活力显著下降（P〈0．05）,在第10d时丧失生活力。而湿润条件下,花粉仅保存2d就完全丧失生活力。沙棘柱头的可授性是在开花后第2d,持续大约8d。[结论]雄株无刺雄和阿列伊是较为优良的授粉品种。     

野生绵枣儿的花粉活力与柱头可授性

以引种的野生绵枣儿(Scilla scilloides)为研究对象,对其进行花粉和柱头形态观察、花粉活力检测方法的筛选,同时研究了花粉活力和柱头可授性,探讨了两者与授粉成功的关系。结果表明:绵枣儿花药暴露于空气中20~40 min便开始开裂,花粉为单粒花粉,有1个萌发沟。最适花粉萌发培养液成分为ME_3+10 g·L~(-1)蔗糖+0.3g·L~(-1)硼酸+0.2 g·L~(-1)硝酸钙,始花期与盛花期的花粉活力在80%左右,末花期仅为20%左右。花粉在4℃条件下存活时间约为3 d,25℃条件下存活时间为2 d,而在35℃条件下存活时间只有1 d。柱头在散粉前就已经具备可授性,在开花后1~2 d可授性最强。有效花粉与柱头可有1 d的相遇期,但相遇期内柱头可授性不是很强,为异花传粉提供了机会。     

耧斗菜(Aquilegia viridiflora)开花生物学特性初步研究

对Aquilegia viridiflora的开花动态、花粉贮藏特性、柱头可授性及花粉在柱头萌发情况的观察等开花生物学特性进行观察研究。结果表明,Aquilegia viridiflora单朵花期为12~15 d左右;新鲜花粉较适宜萌发的培养液为10%蔗糖+0.05%氯化钙,萌发率可达到87.6%,-20℃条件下花粉保存3个月以后仍有活力;不同发育时期均具有不同程度的可授性,授粉最佳时期为开花后4~5 d;通过观察Aquilegiaviridiflo-ra的花粉在Aquilegia parviflora柱头上的萌发情况,花粉可在柱头上正常萌发并到达子房与胚珠结合,发现两者之间不存在不亲和的现象。     

鼠尾草属3种植物花粉活力与柱头可授性

用TTC法测定鼠尾草属3种植物花粉的活力,用联苯胺-过氧化氢法测定其柱头的可授性。结果表明,随着散粉时间的延长,贵州鼠尾草紫背变种、血盆草与黄花鼠尾草的花粉活力都是逐渐降低。散粉初期花粉活力最高的是血盆草,平均为76.8%;花粉活力最低的是黄花鼠尾草,平均为37.7%。3种鼠尾草属植物的花粉活力可持续3~7 d,最佳传粉期为开花后1 d。柱头在花冠刚开放时便具有可授性,可授性持续3~5 d,最佳授粉期为开花后1~2 d。     

甘蔗开花生物学特性及花粉活力研究

在温室内观察甘蔗开花动态,用TTC法测定甘蔗花粉活力,联苯胺-过氧化氢法测定柱头可授性。结果表明:花穗上小蠡花开放顺序,一般是自上而下,由外至内;ROC22和科五花粉活力于开花第1天达到80%以上,第2天有小幅度上升,之后迅速降低,第7天仅采到少许花粉,但活力仍在32%左右。甘蔗雌蕊柱头开花前1天具有可授性,自交授粉后的1~2 d内保持强可授性,之后柱头迅速变黑枯萎;未授粉柱头花开后的9 d内一直保持靓丽的艳红色,具强可授性。柱头可授性的最佳时期为开花后第1~9天,甘蔗的最佳授粉期为母本开花2 d后再授以父本花粉,4 d内即可完成杂交过程。