中华鳖对温和气单胞菌口服微球缓释疫苗的免疫应答

以中华鳖温和气单胞菌 (Aeromonas sobria,As) Z- 1株灭活全菌液 ,采用生物降解性高分子材料制成缓释微球疫苗 ,口服免疫中华鳖 ,测定血清中凝集抗体、血液中白细胞杀菌率以及对活菌攻击的免疫保护率。结果表明 ,中华鳖口服微球疫苗 ,其血清中凝集抗体效价和血液中白细胞杀菌百分率均可达到灭活菌液注射组相当的水平 (P>0 .0 5 ) ,显著高于对照组 (P<0 .0 1) ;微球疫苗口服组和灭活菌液注射组的免疫保护率分别为 94 .7%和 89.5 % ,两者差异不显著 (P>0 .0 5 ) ,而对照组小鼠 95 %死亡。采用可生物降解微球作为中华鳖气单胞菌口服疫苗的载体系统是可行的。     

四君子汤加减颗粒对腹腔巨噬细胞吞噬功能及ND和IBD疫苗免疫效果的影响

为探讨四君子汤加减颗粒对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能和肉用仔鸡免疫鸡新城疫(ND)疫苗、传染性囊病(IBD)疫苗后血清ND及IBD抗体效价的影响,选取40只小鼠,随机分为4组,对照组正常饮水,试验组在饮水中添加不同浓度的四君子汤加减颗粒,测定各组腹腔巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数;同时以肉用仔鸡为研究对象,考察四君子汤加减颗粒分别与ND Clone-30疫苗、ND油乳剂灭活苗和IBD冻干苗合用之后,肉用仔鸡血清中ND、IBD抗体效价的变化情况。结果显示,试验组小鼠的腹腔巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数均显著高于对照组(P<0.05);试验组鸡血清中的ND和IBD抗体效价均高于对照组。表明四君子汤加减颗粒可显著提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬活性并能显著增强ND、IBD疫苗对肉用仔鸡的免疫效果。     

稚鳖白点病致病菌灭活疫苗的研制(一)--灭活疫苗在实验动物上的运用

用致病性气单胞菌灭活疫苗免疫小鼠,可使其获得对该致病菌的免疫保护。免疫后二周抗体凝集效价可达１６０;二次免疫比一次免疫的效果更好,其抗体凝集效价,在５２ｄ仍维持在１６０,而一次免疫的已降低到１０。     

荧光假单胞菌疫苗对异育银鲫的免疫保护效应

为探讨荧光假单胞菌疫苗对异育银鲫的免疫保护作用,为其在赤皮病防治上的应用提供理论依据,以福尔马林灭活的荧光假单胞菌(Pseudamonas fluoroscens)全菌疫苗、菌体外膜蛋白(OMP)疫苗作为免疫原,以平均体重100.0g±15.0g的健康异育银鲫(Carassius auratus gibelio)为试验对象,通过腹腔注射免疫原(浓度分别为1.0×108/mL、0.2mg/mL)免疫,剂量为0.2mL/尾,对照组注射等量灭菌生理盐水。分别在免疫注射1、2、4、7、14、21、28、35d后对试验鱼尾静脉采血,进行外周血细胞计数、吞噬活性和抗体效价的测定。结果2种免疫原均可诱导异育银鲫外周血液红细胞、白细胞数量增加,吞噬细胞的吞噬活性和血清抗体效价均升高。免疫注射35d后活菌攻毒,福尔马林灭活荧光假单胞菌苗(F-PF)组的免疫保护率为61.1%,OMP组的免疫保护率为72.2%,OMP组的免疫保护效果优于F-PF组。证明2种免疫原均通过促进异育银鲫血细胞增殖,产生特异性抗体的方式提高机体的免疫保护力。     

复合抗菌肽在中华鳖养殖生产中的应用研究

抗菌肽又称抗微生物肽(antimicrobial peptide)或肽抗生素(Peptide antibiotics),是生物体内存在的一种具有抗菌活性的小分子多肽,是机体固有免疫系统中的重要效应分子,具有广谱杀菌、抗真菌、病毒、肿瘤以及消除体内突变细胞的作用。为研究复合抗菌肽对动物细菌病的防治效果,笔者采用3种不同药物即抗生素、灭活疫苗和抗菌肽对中华鳖进行试验。通过测定不同组中华鳖的血细胞吞噬功能、血清凝集效价和血清杀菌活力,比较3种药物对中华鳖的免疫力和抗病能力的效果。试验结果表明,3种药物的相对保护率介于80%~95%之间,均能有效地保护中华鳖。其中灭活疫苗的效果最为显著,但是该灭活的鳗氏气单胞菌疫苗只能针对该菌导致的中华鳖疾病起到预防作用。抗生素具有广谱抗菌性,但用药结束10d之后在中华鳖体内仍有残留。抗菌肽的预防效果虽然没有抗生素和疫苗的效果好,但其不会产生耐药性,在预防细菌性疾病方面有着广阔的应用前景。     

佐剂对嗜水气单胞菌灭活疫苗免疫效果的作用

制备嗜水气单胞菌J—1株福尔马林灭活疫苗，用浸浴法免疫银鲫。设疫苗加IMS1312佐剂免疫组、不加佐剂疫苗免疫组及未免疫对照组，每组20尾。18～20℃水温饲养35d，检测银鲫血清嗜水气单胞菌凝集抗体。佐剂组抗体效价达1：64，相对保护率为67％。不加佐剂免疫组抗体效价为1：32，相对保护率达56％。对照组抗体效价为1：4，相对保护率为10％。试验结果表明浸浴免疫对银鲫具有较好的保护力，佐剂IMS1312可增强鱼体的免疫应答。     

微囊化大肠杆菌口服灭活疫苗对大鼠免疫效果的研究

不同血清型的致病性大肠杆菌是引起幼畜腹泻的主要病因之一。笔者拟对采用微囊包被技术制备的羊大肠杆菌灭活口服疫苗对大鼠的免疫效果进行评价。将制备的羊大肠杆菌蜂胶佐剂灭活苗作为芯材,天然高分子材料海藻酸钠为壁材,采用喷雾干燥法制备微囊化口服疫苗。微囊化口服疫苗的含菌量为7.52×1011菌·g-1。100只成年健康大鼠随机分为对照组、注射组和微囊包被口服疫苗组(再分为基础剂量、10倍基础剂量和20倍基础剂量三组),免疫后采用微量凝集试验和本室建立的间接ELISA方法检测免疫血清抗体效价并对细胞和黏膜免疫进行检测。微量凝集试验检测结果显示,免疫后7d各试验组即可产生抗体,免疫后28d时抗体效价达到高峰,随后开始下降。间接ELISA方法检测结果显示,免疫后14d各试验组特异抗体转阳,并持续到28d。口服组的抗体效价均显著高于对照组(P0.05),而与注射组无差异(P0.05),且各口服剂量组之间差异不显著(P0.05)。免疫后35d口服试验组特异抗体转为阴性,而注射组可维持到35d;T淋巴细胞转化结果显示,免疫7d后,三个口服剂量组的SI值均显著高于对照组和注射组(P0.05)。免疫后口服各剂量组的肠黏膜分泌型免疫球蛋白A(sIgA)含量均高于同期的对照组和注射组,21d后sIgA含量达到高峰。微囊包被口服疫苗能够产生与注射组同样的体液免疫,同时还可以刺激大鼠机体产生较好的细胞免疫和黏膜免疫。     

牛磺鹅去氧胆酸对免疫抑制小鼠免疫功能的影响

本试验旨在研究牛磺鹅去氧胆酸（taurochenodeoxycholic acid,TCDCA）对环磷酰胺致免疫抑制小鼠免疫功能的影响。给小鼠腹腔注射环磷酰胺(CTX,50 mg/kg),建立免疫功能抑制模型,灌服TCDCA（100 mg/（kg·d））,共灌服7 d。采用重量法和分光光度法分别测定TCDCA对免疫器官指数及对血清中抗体含量、单核—巨噬细胞吞噬功能和溶菌酶含量的影响。〖JP2〗TCDCA对免疫抑制小鼠胸腺指数、脾指数和血清溶血素水平无显著性影响;TCDCA可显著提高免疫抑制小鼠单核—巨噬细胞吞噬功能和血清中溶菌酶含量。TCDCA能够增强CTX免疫抑制小鼠的免疫功能,对免疫失衡机体具有一定的保护作用。     

益生菌基因组DNA为疫苗佐剂对鸡免疫效果的影响

一次试验选用1株益生茵的基因组作为禽流感病毒(AIV)H5N1亚型灭活油乳苗的佐剂,设不同剂量,分口服和同位点注射佐剂、疫苗的途径免疫鸡群;二次试验扩大菌株类型,以5株益生菌的基因组作为佐剂同位点注射鸡群,定期检测特异性抗体水平.一次试验显示在所有检测时间点上,疫苗对照组的抗体效价高于(P》0.05)或者显著高于(P《0.05)益生菌基因组的,且注射佐剂组的抗体效价高于口服佐剂的效价;二次试验显示疫苗对照组的抗体效价在前期高于(P》0.05)或者显著高于(P《0.05)益生茵基因组的效价,后期略低于某些益生菌组的(P》0.05),且各种益生菌基因组不同程度的推迟了抗体高峰期.     

松乳菇菌丝多糖对小鼠免疫调节作用研究

为了探讨松乳菇菌丝多糖对小鼠免疫功能的影响,试验将小鼠分为4组,试验组每日分别灌胃3种剂量的松乳菇菌丝多糖,对照组灌胃等量的生理盐水,连续灌胃14 d。于第15天,称取胸腺和脾脏的重量,测定小鼠的胸腺指数和脾脏指数;以碳廓清法测定小鼠单核-巨噬细胞的吞噬功能;采用MTT法检测脾脏T淋巴细胞增殖能力;采用鸡红细胞免疫小鼠法检测血清溶血素效价。结果表明:与对照组相比,试验组胸腺指数和脾脏指数均明显升高,且中、高剂量组胸腺指数和脾脏指数差异极显著(P0.01);中、高剂量组能显著提高小鼠单核-巨噬细胞吞噬活性(P0.05);中剂量组能显著提高小鼠脾脏淋巴细胞增殖能力(P0.05),高剂量组能极显著提高小鼠脾脏淋巴细胞增殖能力(P0.01);3个剂量组均能进一步提高小鼠血清溶血素效价,且中、高剂量组能极显著提高(P0.01)。说明松乳菇菌丝多糖能增强小鼠的免疫功能。     

The immune response and protective efficacy of oral alginate microparticle Aeromonas sobria vaccine in soft-shelled turtles (Trionyx sinensis)

Aeromonas sobria is an important bacterial pathogen of soft-shelled turtles (Trionyx sinensis). The effect of an oral alginate microparticle A. sobria vaccine (MAV) on immune response and protection efficacy of soft-shelled turtles was investigated. The formalin-killed cultures of A. sobria strain Z-1 (FKC) were incorporated into alginate microparticles, and the encapsulated vaccine was orally used for immunizing turtles. The serum agglutinating antibody titers, bactericidal activity of blood leucocytes and relative percent survival (RPS) post-challenge with virulent live bacteria of control and immunized turtles were detected. The serum agglutinating antibody titers and bactericidal activity of the leucocytes in the turtles orally immunized with MAV reached a level equivalent to those of the turtles injected with FKC and were significantly higher than those of control group. The RPS of turtles immunized orally with the MAV and intraperitoneally with FKC was 89.5 and 94.7%, respectively, while 95% of the control turtles had died. These results demonstrated that oral alginate microparticle A. sobria vaccine was immunogenic, and could confer protective immunity in soft-shelled turtles.     

团头鲂对3种致病菌外膜蛋白(OMP)的免疫应答

利用从柱状黄杆菌(Flavobacterium columnare)、嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)和温和气单胞菌(Aeromonas sobria)中提取的外膜蛋白(outer membrane protein,OMP)作为免疫原,注射接种团头鲂(Megalobrama amblycephala)后,通过测定受免鱼的交叉凝集抗体效价、肾脏和血液中吞噬细胞的吞噬活性和采用A.hydrophila活菌攻毒方法,比较了3种致病菌OMP对团头鲂的免疫原性。试验结果表明,从3种致病菌中提取的OMP对团头鲂均具有较强的免疫原性,受免鱼的血清中存在对3种致病菌的交叉凝集抗体,与对照鱼相比,肾脏和血液中吞噬细胞对吞噬原的吞噬活性和对A.hy-drophila活菌攻毒的相对免疫保护率(relative percent survival,RPS)明显上升。说明在3种致病菌的OMP上不同程度地存在共同保护性抗原。     

白花蛇舌草多糖对小鼠免疫功能和生长发育的影响

为探讨白花蛇舌草多糖对小鼠免疫功能和生长发育的影响,本研究将60只雌性昆明小鼠随机等分为4组,1~3组分别以50、100和150 mg/kg 体重的白花蛇舌草多糖粗提物灌胃小鼠,连续给药7 d,第4组以等量的生理盐水灌胃,作为空白对照组。最后一次给药12 h后,各组小鼠用鸡新城疫弱毒疫苗接种,2头份/只,分别于给药结束后的7、14和21 d采小鼠外周血并分离淋巴细胞和血清。用淋巴细胞转化试验(CCK-8法)测定外周血淋巴细胞增殖能力;微量血凝抑制试验评价血清中新城疫抗体水平;测定各组小鼠体重;21 d测定小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力,并测定脾脏指数。统计学分析结果显示,白花蛇舌草多糖组小鼠的外周血淋巴细胞增殖能力、免疫抗体水平、腹腔巨噬细胞吞噬能力、脾脏指数和体重均显著高于对照组(P<0.05),且具有量效关系。结果表明,白花蛇舌草多糖能显著提高机体的特异性免疫和非特异性免疫功能,促进机体的生长发育。本试验结果为利用白花蛇舌草多糖开发保健产品提供了参考。     

二乙烯亚胺对猪细小病毒的灭活作用

使用新型灭活剂二乙烯亚胺(binary ethylenimine,BEI)对猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)进行了灭活试验,通过ST传代细胞接种法观察病毒灭活后是否出现细胞病变,并结合血凝试验检测灭活效果,确定最佳灭活方法。用3～5日龄乳鼠检测BEI灭活后的病毒培养物和相应制备疫苗的安全性,并用豚鼠检测该灭活工艺制备疫苗的效果,与传统甲醛灭活进行了比较。结果显示,终浓度为1‰的BEI在32℃情况下经20 h即可彻底灭活PPV病毒;BEI灭活的病毒制备的疫苗免疫豚鼠较甲醛灭活病毒产生较高的血凝抑制抗体。     

肽聚糖对鲫鱼嗜水气单胞菌灭活疫苗免疫增强效果的研究

为了探讨肽聚糖在鱼类抗嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila，AH）感染中的免疫佐剂作用，用添加A3a肽聚糖的饲料投喂接种F-AH疫苗的彭泽鲫（Carassius auratus var．pengze）；通过测定鲫白细胞吞噬活性、血清和体表黏液溶菌酶活性、抗体效价以及活菌攻毒后的免疫保护率，证明肽聚糖与F-AH疫苗联合使用，鲫体表黏液和血清溶菌酶活性、白细胞吞噬活性、抗体效价以及活菌攻毒后的免疫保护率均显著提高，表明A3a肽聚糖是F-AH疫苗的良好佐剂，能增强鱼类F-AH疫苗免疫应答。     

重组鸡IL-2对禽流感灭活苗免疫增强作用试验

使用重组鸡白介素-2作为免疫佐剂,检测chIL-2对禽流感病毒H9亚型灭活疫苗的免疫增强作用。将1日龄的AA肉雏鸡,随机分为7组,每组10只,采用胸部肌肉注射方式进行免疫,对照组仅接种H9亚型禽流感灭活疫苗,试验组分别同时接种H9亚型禽流感灭活疫苗O．5mL和不同剂量（0．01mg-1mg）的鸡IL-2。每7d静脉采血,采用血凝和血凝抑制方法检测机体中抗体水平变化情况。结果表明,接种重组鸡IL-2的试验组动物能在2月内保持高抗体水平,且在免疫后第10周,其平均抗体水平仍高于疫苗对照组3．6个～4．5个滴度,表明了重组鸡IL-2蛋白对H9亚型禽流感灭活疫苗具有免疫增强作用。     

新城疫分离株疫苗免疫保护试验

用经过鉴定的新城疫病毒分离株按国家兽医生物制品质量标准制备油乳剂灭活疫苗，与标准的La Sota疫苗分别免疫带有新城疫母源抗体的白来航鸡，免疫后每7d采血监测新城疫抗体，并于免疫后21，28，35d用鸡新城疫分离毒和F48E9分别进行人工感染试验。结果显示，分离株灭活苗对鸡新城疫分离株的免疫保护效力优于La Sota灭活苗。     

人参茎叶总皂苷联合亚硒酸钠对猪伪狂犬病灭活疫苗免疫的增强作用

为了探讨人参茎叶总皂苷(ginseng stem-leaf saponins,GSLS)联合亚硒酸钠(Na2SeO3,简称Se)对伪狂犬病病毒(PRV)灭活疫苗免疫的增强作用,本试验给小鼠口服GSLS后,接种添加了Se的PRV灭活疫苗,并检测免疫后小鼠血清中PRV gB抗体及其亚类(IgG1和IgG2a)水平、淋巴细胞增殖水平、淋巴细胞分泌细胞因子(IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-6)水平以及野毒(fPRV)攻毒后小鼠的存活率。结果显示,与仅仅免疫PRV灭活疫苗的小鼠相比,口服GSLS联合疫苗中添加Se(GSLS-Se)能够显著提高小鼠血清中PRV gB抗体及其亚类(IgG1和IgG2a)水平,淋巴细胞增殖水平和细胞因子(IFN-γ、IL-2和IL-6)水平。此外,GSLS-Se还提高了免疫小鼠对野毒感染的抵抗力。结果表明,GSLS-Se对PRV灭活疫苗具有免疫增强作用,值得在本动物上进一步研究。     

Bordetella rhinitis in pigs: serum and nasal antibody response to Bordetella bacterins.

The nasal and serum antibody response of two groups of pigs, vaccinated with adjuvant containing formalinized or sonicated Bordetella bronchiseptica bacterins was compared with the response of a nonvaccinated group. The tube agglutination test was used to determine agglutinin titers. Following vaccination, all pigs were challenged intranasally with the vaccine strain of Bordetella, after which the nasal Bordetella flora of vaccinated and nonvaccinated pigs was investigated. Sera and nasal secretions from both vaccinated groups exhibited markedly higher agglutinin titers than the control group and serum titers were higher than those in nasal secretions. No differences in agglutinating antibody response were evident between the two vaccines. Serum antibody titers exceeded nasal titers and persisted over a longer period of time. Systemic vaccination resulted in an increased nasal clearance of the vaccine strain by the groups of pigs vaccinated with sonicated or formalined bacterin, whereas no such clearance was evident in the nonvaccinated control group.