液体菌种栽培蛹虫草的技术研究

通过菌种的选取、分离纯化、定期复壮得到性状稳定的优质菌种,采用单级液体发酵装置、摇瓶法、无菌水刮洗斜面菌种、稀疏大米培养基原种等方法制备蛹虫草液体菌种。以大米、玉米等复合培养基和蚕蛹为培养基或寄主,采用液体菌种接种,经过菌丝培养、转色催蕾、除草管理等程序栽培蚕蛹虫草。     

蛹虫草的高效培养方法

技术简介:本成果介绍了蛹虫草的一种高效培育方法,运用液体发酵技术结合通气培养设施,极大地提高蛹虫草菌种的培养效率:菌种培养效率提高数十倍,生产周期比固体培养缩短3-5天;所生产的菌种菌丝体含量高、培养规模大,适合规模化蛹虫草栽培生产。利用该菌种接种到蚕蛹或大米培养基上,在合适的温度、湿度和光照下,蛹虫草子实体生产快,比常规固体菌种快10天左右。     

不同栽培基质和培养周期对蛹虫草菌株QC04主要活性成分含量的影响（英文）

本研究以燕麦、大米和小麦为主要栽培基质对蛹虫草菌株QC04进行栽培,比较不同栽培基质和栽培周期对蛹虫草子实体生物量和活性成分的影响,以期为蛹虫草菌株QC04的生产及充分开发利用提供参考。结果表明：栽培时间为35～55 d时,随着栽培时间的延长,子实体干重不断增加且同一时期子实体干重由高到低为小麦培养基>燕麦培养基>大米培养基,燕麦培养基和大米培养基的剩余栽培料干重大于小麦培养基且剩余栽培料干重均大于子实体干重;燕麦和小麦培养基的子实体和栽培剩余物中虫草素和腺苷含量均高于大米培养基;55 d时子实体和栽培剩余物中虫草酸和腺苷含量达到最高;同一时期同一种培养基虫草素在子实体中的含量低于栽培剩余物,腺苷则相反;大米培养基的虫草酸含量普遍高于燕麦和小麦培养基,子实体后期生物量衰退时,子实体虫草酸含量有少量增加且在65 d时大米培养基的子实体虫草酸含量达到最大值,为195.18mg/100g。     

蛹虫草液体菌种培养和使用研究

[目的]明确碳氮源和培养方法对蛹虫草液体菌种的影响。[方法]配制不同碳氮源的培养液,接种蛹虫草菌种后分别进行振荡培养和静置培养,观察培养液中菌丝球的大小、多少和分生孢子数量,再进行栽培比较。[结果]碳源以玉米糁、玉米、小麦、小麦米为好,氮源以蛹汤和蛋白胨为好,培养方法则以振荡培养为好。[结论]选用适宜碳氮源进行蛹虫草的振荡培养,可获得优良的液体菌种。     

蛹虫草001号高产菌株栽培试验

对001号蛹虫草菌种与市售蛹虫草菌种进行了对比试验,并观察了菌株在人工培养基上的生长状况.结果表明,蛹虫草001号菌种生长良好,菌丝和子实体生长速度快,产量和质量均超过对照菌株.001号蛹虫草菌种适合人工栽培和工业化生产.     

蛹虫草001号高产菌株栽培试验

对001号蛹虫草菌种与市售蛹虫草菌种进行了对比试验,并观察了菌株在人工培养基上的生长状况。结果表明,蛹虫草001号菌种生长良好,菌丝和子实体生长速度快,产量和质量均超过对照菌株。001号蛹虫草菌种适合人工栽培和工业化生产。     

人工栽培蛹虫草液体菌种发酵工艺优化

近年,随着人工栽培蛹虫草面积逐年扩大,迫切需求大规模培育蛹虫草菌种,尤其是液体菌种来满足日益扩大的再生产的需要。采用正交试验设计,选取pH值、温度、通气量3个因素,每个因素设置3个水平,进行液体菌种发酵工艺试验,分析蛹虫草子实体生长影响及生物转化率变化情况。通过试验得到人工栽培蛹虫草液体菌种发酵的最佳组合条件。不同处理对蛹虫草子实体生长有明显变化,3种因素对蛹虫草的生物转化率影响为:温度通气量pH值,其最优组合为温度20℃、pH值5.5、通气量2 L/min。     

蛹虫草人工代料培育技术

从栽培房建设、培养基配方、菌种选育和制备、栽培工艺流程及管理等方面详细叙述了蛹虫草人工代料培育技术 ,为蛹虫草的人工代料规模化生产提供依据     

不同人工栽培培养基对蛹虫草子实体发育的影响及效益分析

[目的]蛹虫草(Cordyceps militaris)又名北虫草、北冬虫夏草,是一种药(食)用真菌,具有替代名贵中药冬虫夏草的潜力,目前已大规模开发利用;但在人工栽培过程中,仍存在栽培基质配方不佳、子实体形成及优质率不高等问题.[方法]从新疆天山区域采集野生蛹虫草子实体,经分离纯化,筛选出优良菌株,设计不同的人工栽培培养基配方,在恒温培养条件下,明确不同培养基对新疆蛹虫草的子实体生长影响.[结果]不同培养基对蛹虫草的菌丝生长及子实体形成发育具有差异性影响.与对照处理相比,其它处理对蛹虫草的子实体长度、鲜重、干重、鲜干比、生物转化率,以及每瓶投入、产出和净利润等方面均呈显著性差异(P＜0.05);不同的培养基配方对蛹虫草的菌丝、子实体形成具有重要的影响,处理1(大米培养基,20 9/瓶)和处理10(大米:小麦:水稻壳=6:3:1)表现最好.[结论]蛹虫草人工栽培可使用处理1或处理10配方培养基适宜新疆地区蛹虫草的规模化生产,丰富该地区人工栽培蛹虫草培养基配方,为伊犁乃至新疆大面积人工栽培蛹虫草提供技术支持.     

不同营养物对蛹虫草生长影响的研究

目的:以本实验室分离获得的蛹虫草菌株为实验对象,在其液体培养和栽培过程中添加不同的营养物,通过比较组别间形态学和生物转化率的差异,比较不同的营养物对其子实体生长及子代菌种的影响。方法:分别在菌种液体培养和栽培培养的过程中加入不同的营养物,通过比较子实体的表观形态和生物转化率确定可用于蛹虫草菌种培养过程的营养物质。并通过组织分离的方法获得子代菌种,与未添加营养物并进行组织分离的子代菌种相比较,比较子代菌种子实体的表观形态和生物转化率。结果:在液体培养阶段添加鸡脑浸出液、在栽培培养基中加入蛹粉,可获得表观形态和生物转化率均较优的子实体,生物转化率可提高16.3%,且该组合结合组织分离的方法获得的子代菌种表观形态和生物转化率最高。     

不同培养液对蛹虫草多糖及虫草酸含量的影响

[目的]明确不同碳氮源培养液对蛹虫草多糖及虫草酸含量的影响。[方法]以不同碳氮源培养液振荡培养蛹虫草,用苯酚-硫酸法测定虫草多糖含量,用高碘酸钠法测定虫草酸含量。[结果]培养液中多糖含量以米蛹配方最高,为6.48mg/ml,其次为玉米糁蛹的5.87mg/ml;虫草酸含量以玉米糁蛹配方最高,为5.21mg/ml,其次为米蛹的4.94mg/ml;菌丝体中多糖含量以玉米糁蛹配方最高,为68.32mg/g,其次为米蛹的57.91mg/g;虫草酸以麦米蛹配方最高,达186.29mg/g,其次为小麦蛹的180.32mg/g。[结论]选择适宜碳氮源进行蛹虫草的液体培养,可获得多糖和虫草酸含量很高的培养物。     

培养瓶透气性对蛹虫草生长的影响

用4种透气程度不同的材料封口培养瓶,进行蛹虫草培养试验,研究了培养瓶透气性对蛹虫草生长的影响。结果表明,培养瓶的透气性对蛹虫草菌丝体生长、原基形成、子实体生长速度及颜色等均有显著的影响。透气程度越高,菌丝体封面所需时间越短,原基形成越早,子实体平均生长速度越快,同时每瓶子实体的鲜重也越大,生物转化率也越高。蛹虫草菌丝体生长、原基分化及子实体生长需要良好的透气性,透气性最大的培养瓶无菌封口膜是适合蛹虫草培养瓶的封口材料。     

北冬虫夏草人工栽培条件的优化

通过单因素试验和主要因素的正交试验对北冬虫夏草人工栽培条件进行优化,结果表明:北冬虫夏草栽培的最适培养基为大米培养基,最佳接种量为20 ml,菌丝和子实体生长的最佳温度均为21℃,最佳光照时间为14 h/d。     

亚硒酸钠对蛹虫草生长及子座硒含量的影响

【目的】研究亚硒酸钠对蛹虫草菌落形态、子座产量及子座硒含量的影响,旨在为富硒蛹虫草产业化开发提供依据。【方法】以蛹虫草菌株CM003为试材,采用平板培养基探讨不同质量浓度（0,50,100,150,200,250,300,350,400和450 mg/L）亚硒酸钠对蛹虫草菌落形态的影响。在此基础上,采用常规瓶栽法研究不同质量浓度（0,50,100,150,200和250 mg/L）亚硒酸钠对蛹虫草长势、子座产量及子座硒含量的影响,并拟合了栽培营养液中亚硒酸钠质量浓度与蛹虫草长势评分、子座产量、子座硒含量之间的函数关系。【结果】在平板培养基上,当亚硒酸钠质量浓度≤100 mg/L 时,蛹虫草的菌落形态基本正常,菌落直径的变化幅度较小;当亚硒酸钠质量浓度为450 mg/L 时,蛹虫草菌丝仍能缓慢生长。采用常规瓶栽法栽培蛹虫草时,随着亚硒酸钠质量浓度的增加,蛹虫草的长势评分和子座产量呈先增加后减小的趋势,子座硒含量呈逐渐增加趋势。拟合方程显示,营养液中亚硒酸钠质量浓度为28.2 mg/L时,蛹虫草的长势最好;亚硒酸钠质量浓度为58.17 mg/L时,蛹虫草子座产量最高;亚硒酸钠质量浓度为200 mg/L时,子座硒含量最高达92.68 mg/kg。【结论】蛹虫草对亚硒酸钠不仅具有较强的耐受性,且具有较强的富硒能力,是人工生产富硒产品的优良载体。     

蛹虫草八宝粥的研制

[目的]将蛹虫草发酵液应用于八宝粥的生产中,为蛹虫草功能性食品的开发开拓新的思路。[方法]首先通过正交试验优化蛹虫草茵丝球的制备方法,再以得到的蛹虫草液体发酵产生的茵丝球为特色原料,配以传统材料糯米、玉米、绿豆、红豆、红芸豆、花生、红枣、桂圆、莲子、银耳得到成品。[结果]以4％的葡萄糖为碳源,1％的玉米粉汁为氮源,转速120r／min,接种量3％的条件下。生产直径6—8mm的茵球数量最多。各原料混合熬制的八宝粥色泽鲜艳、质软香甜、清香诱人、滑而不腻,且产品各理化指标和微生物指标均符合要求。[结论]蛹虫草八宝粥富舍虫草素、虫草酸、虫草多糖等活性物质,是一种新型的蛹虫草功能性食品。     

蛹虫草多糖提取及纯化工艺研究

采用以大米、蚕蛹为主原料的培养基培养蛹虫草子实体。通过正交实验对蛹虫草水溶性多糖的提取工艺进行了研究,利用蒽酮-硫酸法来测定多糖含量。发现90℃、加水20倍、分3次提取、每次3 h为最佳提取条件。同时考查了不同除蛋白方法对虫草多糖的蛋白去除效果。     

蛹虫草液体培养基的优化试验研究

本试验对蛹虫草液体培养基进行优化研究。通过碳源、氮源单因素对比试验,筛选出蛹虫草液体培养基最佳碳源为蔗糖,其次为麦芽糖;最佳氮源为酵母膏,其次为蛋白胨。通过正交试验筛选出蛹虫革液体培养基最佳配方为：蔗糖3％、酵母膏3％、KH2PO40．1％、MgSO40．15％。该研究为蛹虫草液体培养提供理论依据。     

家蚕蛹虫草子实体及大米培养基多糖的提取和纯化

[目的]为家蚕蛹虫草大米培养基的应用和提高养蚕业的综合经济效益提供基础数据。[方法]分别对家蚕蛹虫草子实体及其大米培养基残基进行脱脂、热水浸提、脱蛋白、醇沉、干燥后得到粗多糖,用同种方法提取、纯化,并比较提取、纯化结果。[结果]家蚕蛹虫草子实体提取粗多糖得率为25.75%,培养基为12.85%。家蚕蛹虫草子实体和培养基粗多糖经DEAE-纤维素柱纯化,得到相似单一峰;家蚕蛹虫草子实体多糖的洗脱峰部分多糖含量占上样多糖总量的82%;培养基多糖的洗脱峰部分多糖含量占上样多糖总量的74%。两者所含多糖类似,大米培养基粗多糖得率较低,可不提取,有直接作为添加剂等生产应用价值。[结论]家蚕蛹虫草大米培养基可以作为一种新型添加剂加入饲料或调味品酿制原料中。     

磁处理对蛹虫草胞外多糖的影响

[目的]探明磁处理对蛹虫草（Cordyceps militaris）产生胞外多糖的影响,为蛹虫草胞外多糖的进一步研究奠定基础。[方法]采用不同磁场强度及不同处理时间对蛹虫草的液体菌种进行处理,采用乙醇沉淀法提取其胞外多糖。[结果]不同梯度的磁场强度处理对蛹虫草胞外多糖的影响明显,随着磁处理强度的增大,蛹虫草产胞外多糖的量呈上升趋势,但均低于对照。[结论]磁处理对蛹虫草胞外多糖的产生起抑制作用。