同步接毒法生产鸡传染性法氏囊病细胞苗的试验

鸡传染性法氏囊病细胞苗生产过程中,在制备鸡胚成纤维细胞(CEF)的同时接入种毒(称同步接毒法),与细胞形成致密单层后再接入种毒(称异步接毒法)两种方法相比较,同步接毒法比异步接毒法的病毒含量略高,且缩短了培养时间,简化了生产工艺。     

水貂病毒性肠炎弱毒疫苗株的选育及实验免疫研究

从自然发病死亡貂体内分离到１株水貂病毒性肠炎（ＭＶＦ）强毒株－ＭＥＶ，将该株病毒在犊牛睾丸（ＣＴ）细胞和猫肾传代细胞（ＣＲＦＫ）上混合培养进行适应。当传至５６代时，在ＣＴ细胞上出现细胞病变（ＣＰＥ），而后单独在ＣＴ细胞上传至７０代，经终点稀释克隆和鉴定获得一弱毒株。以其制备的ＣＴ细胞弱毒疫苗，给每只貂注射或口服１～５ｍＬ均未见任何不良反应。注苗后１２、６０、７２、１８０ｄ攻毒，保护率均为１００％。     

传染性法氏囊病超强毒致弱株的一些特性

某些传染性法氏囊病强毒株（ＨＶ－ＩＢＤＶ）通过鸡胚连续传代适应于鸡胚，鸡胚适应的ＨＶ－ＩＢＤＶ成功地在鸡胚成纤维（ＣＥＦ）细胞上生长，表现致细胞病变作用，鸡胚－细胞适应株对实验感染雏鸡的致病性大大降低，无一只死亡，法氏囊病变与标准株的相似，交叉病毒中和试验表明，细胞培养适应与标准株的抗原性有差异，免疫学试验表明，适应株免疫鸡后，对ＨＶ－ＩＢＤＶ强毒感染有很好保护作用，特别是免疫接种后３天攻强毒，适     

不同接毒方法对猪圆环病毒2型增殖的影响

本试验对比了不同的接毒方法,观察猪圆环病毒2型的繁殖情况.试验分为同步接毒(A组、B组)和异步接毒(C组、D组):同步接毒A组为在消化分装好的细胞悬液中同步接入5%(V/V)的PCV2种毒,B组为在消化分装好的细胞悬液中同步接入3%(V/V)的PCV2种毒,24 h后再接种2%种毒;异步接毒C组为在生长良好、 培养24 h的单层细胞中接种5%(V/V)的PCV2种毒,D组为在生长良好、培养48 h的PK15单层细胞中接种5%(V/V)的PCV2种毒.四组均在接种后培养72 h收获,进行病毒含量检测.试验结果显示:A组的病毒含量为107.0~7.25TCID50/mL,B组病毒含量为106.75~7.0TCID50/mL,C组的病毒含量为106.4~6.5TCID50/mL,D组的病毒含量为106.25~6.5TCID50/mL.试验结果表明,采用同步接毒法的病毒含量明显高于异步接毒法,在细胞悬液中同步一次性接入5%种毒,病毒的增殖量最高.     

雏鸡接种传染性喉气管炎病毒细胞结合弱毒疫苗的免疫应答…

用细胞结合疫苗（ＣＡ）接种的雏鸡对传染性喉气管炎（ＩＬＴ）可获得很高的免疫保护力，用ＣＡ疫苗或无细胞（ＣＦ）疫苗接种的雏鸡，可分别在血清中检出病毒中和抗体及ＩｇＧ和ＩｇＭＥＬＩＳＡ抗体。但在接苗雏鸡的气管冲洗液中未检出抗体，接种ＣＡ疫苗的银鸡比接种ＣＦ疫苗的雏鸡能产生更明显的抗体应答，抗体效价与ＩＬＴ强毒攻击产生的保护不呈正相关，皮下接种ＣＡ苗或ＣＦ苗后，可于接种后１～６天从肝，脾，胸腺，肺或其它     

犬瘟热,细小病毒,腺病毒三联弱毒疫苗的研究

以犬瘟热（ＣＤＶＡ）、猫细小病毒（ＦＰＶ）、犬腺病毒（ＣＡＶ１）三个弱毒株为毒种,用ＳＰＦ鸡胚成纤维细胞、ＣＲＦＫ细胞、ＭＤＣＫ细胞分别增毒制苗,按一定比例与冻干保护剂混合,经冻干工艺精制成冻干三联弱毒疫苗。试验对制苗工艺参数、半成品与成品的检验、疫苗的安全性与免疫原性、疫苗的临床应用等内容进行了研究。结果显示：三联苗对犬、貉、狐等动物预防三种病毒性传染病效果显著。     

鸡法氏囊国外弱毒病毒的分离与鉴定（初报）

我们对国外引入的ＩＢＤ弱毒疫苗进行了分离，复制和测定，该病毒可接种ＳＰＦ鸡胚增殖，致难胚死亡，并产生ＩＢＤ病变；在ＳＰＦ鸡胚ＣＦＦ上繁殖，产生ＣＰＥ变化，并可被行异性ＩＢＤ抗血清中和；琼脂扩散与ＩＢＤ（＋）血清有明显的沉淀线，因此说明所分离的毒株是ＩＢＤ病毒，并测得其毒价为１０＾－６ＴＣＩＤ５０。     

应用Dot-ELISA检测鸡毒支原体血清抗体

应用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测鸡毒支原体血清抗体＠郭建华＠陈明勇＠陈德威￥中国农业大学实验动物研究所应用Ｄｏｔ┐ＥＬＩＳＡ检测鸡毒支原体血清抗体郭建华＊陈明勇陈德威（中国农业大学实验动物研究所,北京海淀１０００９４）鸡毒支原体（ＭＧ）为慢性呼吸道病（ＣＲＤ）的...     

鸡新城疫,支气管炎,法氏囊病三联细胞弱毒的培育及免疫原性研究

根据某些不同类型的病毒能感染同一宿主细胞不同部位，并产生各自特征性病变和独立复制的原理＾⑴，笔者将鸡新城疫（ＮＤ）、支气管炎（ＩＢ）、法氏囊病（ＩＢＤ）三株弱毒以不同的接种剂量、接种比较和接种程序，成功地共同感染鸡全胚细胞（ＣＥ），达到了在同一宿主细胞上同时增殖三株弱毒的目的。三联细胞毒中三株弱毒的半数感染价：新城疫病毒（ＮＤＶ）鸡胚半数感染价（ＥＩＤ５０）为１０＾７．２３／０．１ｍｌ，细数半数感     

鸡痘鹌鹑化弱毒细胞苗接毒培养工艺探索

在鸡胚成纤维细胞(CEF)培养鸡痘鹌鹑化弱毒细胞苗的工艺中,采用同步接毒工艺,通过调整单位细胞浓度和单位病毒含量,以细胞单层形成时间和收获时间分别为24 h和96 h为标准,确定细胞浓度和接毒浓度分别为1.2×106 ～1.5×106个/mL和102 ～103 EID50/mL较为合适.     

新城疫病毒融合蛋白裂解位点基因的分离克隆及在原核细胞中的…

用ＳＰＦ鸡胚繁殖新城疫病毒（ＮＤＶ）Ｆ４６Ｅ９株（强毒）、ＬａＳｏｔａＥ４株（弱毒）、对病毒进行纯一提ＲＮＡ。用１对均为２７个碱基的引物进行ＲＴ－ＰＣＲ，扩增出了２个毒株的融合蛋白裂解位点（Ｆｃ）基因。将Ｆｃ基因定向克隆人ｐＵＣＬａＦｃ，用ＥｃｏＲＩ／Ｓａｌ Ｉ双酶切法、ＰｓｔＩ单酶切法、ＰＣＲ法和核酸探针法对其进行了鉴定。将鉴定好的ＬａＳｏｔａＥ４Ｆｃ基因定向导入表达载体质粒ｐＢＶ２２１，ａｑｔ     

抗℃型肉毒毒素单克隆抗体的研究

用透村培养法制备的Ｃ型肉毒毒素的类毒素，免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞系ＳＰ２／０融合。经ＨＡＴ选择培养基选择培养，其细胞融合率平均为７４．５％。用间按ＥＬＩＳＡ法筛选后，共获得９４孔产生抗Ｃ型肉毒毒素抗体的杂交瘤阳性孔。选其中１Ｃ２、１Ｄ１２、１Ｅ８、１Ｇ６、１Ｇ１１、２Ｂ１２、２Ｃ１１、２Ｅ１２、２Ｇ１１、２Ｈ３、３Ａ４、３Ｃ５、３Ｄ３、３Ｆ７、３Ｈ６共１５孔用有限稀释法进行     

不同接毒方法对猪繁殖与呼吸综合征病毒增殖效果比较

通过对猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）感染Marc-145细胞4种不同接毒方法的比较研究,筛选出一种在规模化生产中既能保证毒价,又能减少工艺流程,提高工作效率,降低污染几率及生产成本的接种方法。结果表明,与其他方法相比,同步接毒法效果最佳,不仅毒价最高,而且繁殖毒液时间缩短,减轻了工作量,节省生产成本。     

火鸡疱疹病毒种毒的保存期试验

火鸡疱疹病毒种毒的保存期试验李慧姣孙荣改吴贤福缪从容刘效文李启红中国兽药监察所，北京１０００８１收稿日期：１９９７－０９－１８根据中华人民共和国兽用生物制品规程（１９９２年版）规定，鸡马立克氏病冻干疫苗的毒种（火鸡疱疹病毒ＦＣ－１２６株）在－１５℃以...     

应用单克隆抗体ＡＣ—ＥＬＩＳＡ检测鸡蛋卵黄中鸡毒支原体

采用抗鸡毒支原体阳性血清包被酶标板作为捉抗体，以４株鸡毒支原体特异单克隆抗体作为第二抗体和酶标羊抗鼠ＩgG作为指示体建立了一种检测鸡蛋卵黄中鸡毒支原体的双夹心ＡＣ－ＥＬＩＳＡ。该法具有简便、灵敏、快速等优点，从采样到获得结果６小时内完成，检出率高于分离培养法，且重复性良好，该方法的建立鸡群毒支原体感染的检测和净化提供了一种新的可靠方法。     

鸡传染性法氏囊炎二价细胞苗最佳培养条件的选择

本试验对鸡传染性法氏囊炎（ＩＢＤ）二价细胞苗在鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）上培养所用条件进行了系统研究。对ＣＥＦ的制作，抗生素的选用，血清的浓度，接毒时间，接毒量，收获时间等进行了测定，其最佳条件为：用０．２５％的胰蛋白酶消化１０分钟制得的ＣＥＦ最好；在使用的ＰＢＳ缓冲液中加入１０００Ｕ／ｍｌ的庆大霉素可有效地防止污染；生长液用５％的小牛血清、维持液用１％的小牛血清最佳；接毒时间为生长２４小时的ＣＥＦ     

京—1株鸡马立克氏病强毒对BWEL—SPF鸡群的感染试验

用京－１株鸡马立克氏病（ＭＤ）强毒感染１￣１０个家系１日龄的ＢＷＥＬ－ＳＰＦ鸡,观察比较临床症状和剖检病变及病理切片,以此评估该ＢＷＥＬ－ＳＰＦ鸡群每个家系鸡对京－１株ＭＤ强毒的敏感性。结果,１,５,８,９号家系的ＢＷＥＬ－ＳＰＦ鸡对京－１株ＭＤ强毒最敏感;３,４,５,６,１０号家庭系次之,２、７号家系敏感性相对较差。     

几种动物血清作为CEF培养天然培养基的比较研究

测试了６种不同动物血清作为鸡胚成纤维细胞（ＣｈｉｃｋｅｎＥｍｂｒｙｏＦｉｂｒｏｂｌａｓｔＣＥＦ）培养天然培养基的效果。其结果为：所试各血清对ＣＥＦ均具有促细胞贴壁作用。胎牛血清、鸡血清、兔血清促细胞生长作用较强，２４ｈ可使ＣＥＦ长满单层；胎牛血清支持细胞生存期最长（２０ｄ），其次是成牛血清和山羊血清（１７ｄ）。     

鸡痘鹌鹑化弱毒活疫苗生产工艺改进试验

优化鸡胚成纤维细胞(CEF)培养鸡痘鹌鹑化弱毒细胞苗的生产工艺中,采用同步接毒法即在制备鸡胚成纤维细胞时同时接毒和异步接毒法即鸡胚成纤维细胞形成单层以后接毒,两种方法进行对比。结果以同步接毒法可以降低生产成本,缩短细胞培养的时间,简化工艺。     

中国株猪瘟兔化弱毒克隆毒的研究

采用终点稀释单细胞微量培养法对中国株猪瘟哆化弱毒（Ｃ株）进行克隆，获１０个克隆株；保持原Ｃ株的免疫原性和其他优良特性；在某些方面并有所提高。随机取６号克隆毒（Ｃ６）进行系列试验，结果表明：（１）对牛睾丸细胞敏感，共收毒批次和合格批次为１５／１９（７９．９％）（２）用兔增殖毒共归兔６４只，发率为９０．６％，用睾丸细胞增殖毒对３８只兔热反应率为８９．４７％，（３）按“规程”安检和增大一倍量对猪均无不良