雌激素诱导小鼠胸腺萎缩过程中细胞因子及凋亡相关蛋白基因表达的变化

本试验应用光镜、电镜、流式细胞术、实时定量PCR技术研究了雌激素诱导小鼠胸腺萎缩过程中胸腺指数、胸腺显微和超微结构、胸腺细胞凋亡率及部分细胞因子和凋亡相关蛋白基因表达的变化。结果注射雌激素后,小鼠胸腺指数显著下降,胸腺中凋亡细胞数量显著上升,细胞因子TGF-β1表达量显著升高,IL-6表达量略为升高,而IL-7表达量显著降低;凋亡相关蛋白Caspase-3、Caspase-9、FADD表达量显著上升,FasL表达量略有上升,而Bcl-2表达量显著降低。表明雌激素可能一方面通过调节胸腺细胞因子抑制胸腺上皮细胞的增殖,另一方面通过激活Caspase级联程序的启动和执行阶段及Fas/FasL凋亡信号通路促进胸腺细胞的凋亡,从而诱导小鼠胸腺萎缩。     

高致病性PRRSV HuN4株不同代次病毒对仔猪胸腺损伤的研究

为研究高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)不同致弱代次病毒对断奶仔猪胸腺的损伤,本研究选用HP-PRRSV HuN4株在Marc-145细胞中传代致弱的F5、F15、F23、F30代及弱毒疫苗HuN4 F112代分别接种30日龄的PRRSV抗原及抗体阴性健康断奶仔猪。实验结果显示:HuN4 F30感染组胸腺的眼观病变、胸腺重量、病理组织学变化、病毒载量及胸腺细胞凋亡比例均与F23感染组有显著差别(p<0.05)。本实验结果表明,HuN4 F23代仍然能够引起仔猪胸腺萎缩并导致机体免疫抑制,而F30代已不能引起断奶仔猪胸腺萎缩现象。因此,HP-PRRSV HuN4 F23、F30代可以作为研究HP-PRRSV HuN4致胸腺萎缩的分子机制的关键代次。本研究为进一步研究HP-PRRSV感染诱导仔猪胸腺萎缩和胸腺细胞凋亡的分子机制奠定了基础。     

高致病性PRRSV感染对仔猪骨髓细胞影响的初步鉴定

为了研究高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)感染对仔猪骨髓细胞的影响,本研究体外培养仔猪骨髓细胞后感染HP-PRRSV,采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)法检测骨髓细胞生长情况,并通过流式细胞分析技术检测病毒感染骨髓内细胞的类型。实验结果显示:HP-PRRSV HuN4感染骨髓细胞72h后病毒感染率达到峰值,骨髓细胞存活率显著下降;流式细胞分析结果显示,HP-PRRSV感染的骨髓细胞为髓系前体细胞(SWC3~LSWC8~-)与巨噬细胞(SWC3~HSWC8~-)。本实验结果表明:HP-PRRSV在骨髓内除能够感染巨噬细胞外,还能感染髓系前体细胞,引起仔猪骨髓损伤并影响机体的正常免疫反应。本研究为进一步探究HP-PRRSV感染机体免疫抑制机制奠定了前期基础。     

死亡受体通路在黄曲霉毒素B_1致雏鸡胸腺细胞凋亡中的作用

旨在探究摄食黄曲霉毒素(AF)后,死亡受体通路活化对雏鸡胸腺细胞过度凋亡的信号调控机制。将90只1日龄健康雏鸡随机分为两组,分别饲喂对照日粮和AFB_1日粮(在对照日粮中添加0.6mg·kg~(-1) AFB_1)。于7、14和21日龄时,检测雏鸡胸腺的脏器指数、T淋巴细胞亚群、细胞凋亡率及死亡受体通路上相关基因的mRNA相对转录量。结果显示,与对照组比较,AFB_1组雏鸡胸腺的脏器指数降低,CD3~+、CD3~+CD4~+和CD3~+CD8~+T淋巴细胞的百分率减少,胸腺细胞凋亡率升高,死亡受体通路上RIP1、Caspase-8、Caspase-9、Caspase-3、Fas、FasL、ASK1、IKIP和JNK的mRNA相对转录量升高,Bcl-2、NF-κB_1和Bid的mRNA相对转录量降低。本试验中,雏鸡胸腺细胞凋亡上调的过程中,死亡受体通路上的三条下游信号途径均有参与:(1)通过Fas-FasL-FADD-Caspase-8-Caspase-3途径直接诱导凋亡;(2)通过Fas-ASK1-JNK-Bcl-2途径,并在线粒体的介导下,启动下游调控因子Caspase-9和Caspase-3诱导细胞凋亡;(3)通过TNF-α-RIP1-IKIP-NF-κB_1-Caspase-3信号途径诱导凋亡。     

山羊副流感病毒3型通过Caspase途径诱导气管上皮细胞凋亡

旨在揭示山羊副流感病毒3型(CPIV3)感染气管上皮细胞后是否可诱导细胞发生凋亡,并对细胞凋亡的信号通路进行初步探究。本研究将CPIV3病毒液接种气管上皮细胞,在12、24、36、48、72和96 h收集培养物上清检测病毒增殖滴度;通过形态学观察CPIV3诱导气管上皮细胞病变(CPE)情况;采用Annexin V-FITC/PI双染细胞凋亡检测试剂盒和Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9活性检测试剂盒检测凋亡水平及相关指标;荧光定量PCR检测细胞凋亡分子mRNA表达水平;Western blot分析激活型Caspase-3蛋白表达变化情况。结果显示,CPIV3在气管上皮细胞中的增殖呈上升趋势,96 h能达到10~(4.50)TCID_(50)·mL~(-1);形态学观察发现,病毒接种后48 h出现细胞收缩变圆、脱落等CPE现象;流式细胞术检测及Caspase活性检测表明,感染组细胞出现细胞凋亡,48 h后细胞凋亡率达19.66%,且Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9活性随着时间延长逐渐升高;死亡受体凋亡途径和线粒体凋亡途径细胞凋亡因子mRNA表达上调。Western blot分析揭示,激活型Caspase-3蛋白在病毒感染过程中被活化。本研究证实CPIV3感染可诱导气管上皮细胞凋亡,且Caspase途径在病毒诱导细胞凋亡的过程中发挥重要作用。     

牛化脓隐秘杆菌病肾脏Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、Bax和Bcl-2的表达

通过研究牛化脓隐秘杆菌感染牛肾脏组织的病理学变化及检测Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、Bax和Bcl-2的表达,来确定牛肾脏组织的坏死和细胞凋亡情况。本研究首先筛检5头自然感染化脓隐秘杆菌病牛和2头阴性健康对照牛,采集其肾脏组织样本。采用H.E.染色法观察病理组织学变化;采用免疫组织化学方法来检测肾脏组织中与细胞正负凋亡有关的调节基因Bax和Bcl-2的表达情况以及凋亡通路蛋白Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9的表达情况。结果显示,感染牛肾脏组织有坏死,间质有中性粒细胞浸润;感染组牛肾脏肾小球内皮细胞和肾小管上皮细胞Bax、Caspase-3和Caspase-9表达呈阳性,与对照组相比,差异显著;有少量肾小管上皮细胞、肾小球内皮细胞Caspase-8和Bcl-2表达呈阳性,但与对照组相比差异不显著。结果表明,化脓隐秘杆菌能够引起牛肾脏组织实质细胞发生坏死和凋亡,且以线粒体凋亡途径为主。     

地塞米松对高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒感染仔猪的影响

为研究地塞米松(DEX)对高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)感染仔猪造成的免疫系统和呼吸系统损伤的影响,本实验在断奶仔猪感染HP-PRRSV Hu N4株前后,肌肉注射不同剂量的DEX,观察临床症状,检测其免疫系统相关指标的变化。结果显示:不同剂量DEX注射组实验猪均表现典型临床症状,虽然其外周血中的促炎性细胞因子IL-1β、IL-6及TNF-α水平降低,CD4+CD8-T淋巴细胞亚群比例较Hu N4单独感染组升高,CD8+CD4-T细胞比例较Hu N4单独感染组降低,但DEX注射组仔猪体温始终维持在40℃~42℃,肺部、胸腺和淋巴组织病变加重,死亡率达到100%(10/10),而Hu N4单独感染组仔猪死亡率仅为25%(1/4)。表明DEX对HP-PRRSV感染的断奶仔猪虽具有一定的抑制炎症反应作用,但加重了HP-PRRSV感染的不利影响。本研究为全面防控HP-PRRSV提供新的实验依据。     

C_(17)-吡唑琳基甾体衍生物诱导Hela细胞凋亡研究

通过电镜、AO/EB染色检测细胞形态学变化,应用流式细胞仪检测细胞凋亡率,通过检测Caspase活性及相关凋亡蛋白的变化确定C17-吡唑琳基甾体衍生物1诱导细胞凋亡的机制。经化合物1处理后的Hela细胞出现典型的凋亡特征,细胞凋亡率与处理时间呈正相关,同时Caspase-3与Caspase-9活性也逐渐增加,而促凋亡蛋白Bax表达量上升,抑凋亡蛋白分子Bcl-2表达量显著下降。说明C17-吡唑琳基甾体衍生物1通过线粒体通路诱导Hela细胞凋亡。     

玉米赤霉烯酮对大鼠子宫内膜细胞Caspase-3和Caspase-8表达的影响

探讨玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEA)对雌性大鼠子宫内膜细胞凋亡与Caspase-3和Caspase-8蛋白表达的关系,进而揭示其导致子宫损伤的作用机制。应用HE染色观察组织病理变化,免疫组化SP法检测注射玉米赤霉烯酮后6个时间点大鼠子宫内膜细胞Caspase-3和Caspase-8蛋白的表达。病理组织学观察发现,试验组子宫组织出现不同程度损伤,子宫内膜细胞发生凋亡。免疫组化结果显示,试验组子宫内膜上皮细胞与间质细胞Caspase-3和Caspase-8蛋白表达量均明显高于对照组(P0.05)。不同时间点相比,Caspase-3在内膜上皮细胞中12h表达量最高,而在内膜间质细胞中18h表达量最高;Caspase8在内膜上皮细胞中18h表达量达到峰值,而在内膜间质细胞中24h表达量最高,之后缓慢下降。结果表明,ZEA可能通过上调Casepase-3和Caspase-8的表达从而引起子宫内膜细胞凋亡。     

SPF雏鸡感染REV后中枢免疫器官细胞凋亡及相关因子的变化

为探索禽网状内皮组织增生病病毒(REV)感染对雏鸡中枢免疫器官细胞凋亡及其相关酶活性和基因表达的影响,将70只1日龄SPF雏鸡随机分为REV感染组(I)和对照组(C),应用酶活性检测、荧光定量PCR、ELISA、TUNEL等方法对中枢免疫器官细胞的Caspase-3和Caspase-9活性、Bcl-2mRNA及其蛋白质表达和凋亡细胞的动态变化进行了检测。结果发现,SPF雏鸡感染REV后,其胸腺中Caspase-3和Caspase-9活性、Bcl-2mRNA及其蛋白质含量、凋亡细胞数量均于7~28d内不同程度(P0.05或P0.01)高于对照组雏鸡;法氏囊中上述被检指标均于7~35d内显著(P0.05)或极显著(P0.01)高于对照组雏鸡。研究表明REV感染引起SPF雏鸡中枢免疫器官Caspase-3和Caspase-9活性增强、Bcl-2mRNA及其蛋白质表达上调所致的细胞凋亡与雏鸡免疫器官功能抑制密切相关。     

高精料日粮对奶牛肝脏细胞凋亡的影响

选用12头安装瘤胃瘘管和肝、门静脉血管插管的泌乳中期荷斯坦奶牛,研究高精料日粮对反刍动物肝脏细胞凋亡的影响。试验随机分成2组:高精料组(HC)和低精料组(LC)。饲喂后通过瘤胃瘘管采集0~12 h瘤胃液,测定瘤胃p H值;生化分析法检测外周血中谷草转氨酶(GOT)、谷丙转氨酶(GPT)、乳酸脱氢酶(LDH)、白蛋白(ALB)和总蛋白(T-Pro)含量;检测肝、门静脉血液中脂多糖(LPS)的含量;采用RT-q PCR法检测肝脏中凋亡相关基因的表达;分光光度计法测定肝脏细胞中Caspase-3、Caspase-8的活性;Western blot法测定NF-κB的蛋白表达量。结果:20周后,高精料组瘤胃内p H低于5.6且每天持续3 h以上,显示奶牛发生SARA。与低精料组相比,高精料组门静脉LPS的浓度显著升高,肝功能受到影响,肝脏中促凋亡基因表达上调,抑凋亡基因表达下调,NF-κB的蛋白表达量升高,Caspase-3、Caspase-8的酶活性均表达上调,且Caspase-3有显著性的差异。结果表明,长期饲喂高精料,使消化道中的LPS由门静脉进入肝脏,引起肝脏的炎性损伤,增加肝细胞的细胞凋亡程度。     

miR-10b对牛卵巢颗粒细胞凋亡的影响

颗粒细胞是卵巢中必需的体细胞,在卵泡发育过程中起重要作用。为探究miR-10b对牛卵巢颗粒细胞凋亡的影响,本实验中2个处理组分别转染miR-10b模拟物(miR-10b mimics)和miRNA模拟物(mimics NC),转染48h后,通过Quantitativereal-timePCR(qRT-PCR)检测内源miR-10b表达量,明确miR-10b mimics转染成功。利用qRT-PCR和Western Blot检测凋亡相关蛋白Caspase-3、Bcl-2和Bax表达量的变化;利用流式细胞术检测颗粒细胞凋亡率。结果显示:与mimics NC组相比,miR-10b mimics组Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平显著降低,Bax和Caspase-3 mRNA和蛋白表达水平显著升高;同时miR-10b mimics组的细胞凋亡率较mimics NC组显著升高。结果表明,miR-10b可促进牛卵巢颗粒细胞凋亡。     

化脓隐秘杆菌病牛肺脏中Caspase-8、Caspase-9和Caspase-3蛋白表达

为了研究化脓隐秘杆菌致牛肺脏细胞凋亡途径,试验对自然感染奶牛肺脏和阴性对照牛肺脏进行取样,并制作病理组织切片和进行苏木素伊红染色,观察肺脏的病理组织学变化;同时采用免疫组织化学的方法检测肺脏中Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9蛋白的表达情况。结果表明:化脓隐秘杆菌可以引起牛肺脏发生化脓和坏死;与阴性对照牛肺脏相比,奶牛化脓隐秘杆菌病肺脏的Caspase-9和Caspase-3蛋白表达差异显著(P0.05),Caspase-8蛋白表达差异不显著(P0.05)。说明化脓隐秘杆菌能够引起奶牛肺脏化脓、肺脏细胞坏死和凋亡,并且以线粒体信号途径介导的凋亡途径占主导。     

热休克蛋白70上调表达对热应激猪小肠上皮细胞凋亡的影响

本试验以谷氨酰胺作为热休克蛋白70(HSP70)诱导剂,从细胞凋亡线粒体信号转导途径探讨HSP70对热应激猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)凋亡相关因子的影响。试验以体外培养的猪小肠上皮细胞为模型,分别加入不同浓度(1、2、4、6、8、10 mmol/L)谷氨酰胺的培养基中培养24 h,提取总RNA和总蛋白,用实时荧光定量PCR和Western blot检测HSP70 mRNA和蛋白的相对表达量,筛选出谷氨酰胺诱导HSP70表达的最佳浓度。取对数生长期的细胞分为3组,分别为对照组(Con组,37℃培养12 h)、热应激组(Hs组,42℃培养12 h)、谷氨酰胺组(Gln组,6 mmol/L谷氨酰胺、42℃培养12 h)。采用Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡水平,实时荧光定量PCR和Western blot分别检测HSP70、凋亡酶激活因子-1(Apaf-1)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-9(Caspase-9)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)的mRNA和蛋白的相对表达量。结果表明:谷氨酰胺对HSP70上调表达呈先上升后下降的趋势,6 mmol/L的谷氨酰胺诱导时HSP70 mRNA和蛋白相对表达量最高,显著高于其他浓度(P<0.05),作为后续试验中Gln组的诱导条件。与Con组相比,Hs组细胞凋亡率极显著增加(P<0.01),HSP70、Apaf-1、Caspase-3、Caspase-9 mRNA和蛋白的相对表达量极显著升高(P<0.01),而Bcl-2 mRNA和蛋白的相对表达量极显著降低(P<0.01)。与Hs组相比,Gln组细胞凋亡率极显著降低(P<0.01),但仍极显著高于Con组(P<0.01);Gln组HSP70 mRNA和蛋白的相对表达量极显著升高(P<0.01);Gln组Apaf-1、Caspase-3、Caspase-9 mRNA和蛋白的相对表达量极显著降低(P<0.01),但极显著高于Con组(P<0.01);Gln组Bcl-2 mRNA和蛋白的相对表达量极显著升高(P<0.01),但极显著低于Con组(P<0.01)。由此可见,上调HSP70的表达可有效缓解热应激导致的猪小肠上皮细胞凋亡。     

猪流行性腹泻病毒诱导Vero E6细胞凋亡的动态研究

为研究猪流行性腹泻病毒(PEDV)诱导体外细胞产生病变及细胞凋亡的动态变化,本研究应用western blot、间接免疫荧光、细胞活性计数(CCK-8)等方法检测PEDV感染Vero E6细胞后不同时间点细胞内病毒含量、细胞活性、凋亡小体的形成,以及相关凋亡因子的变化。结果表明,感染后24 h细胞内病毒含量开始明显升高,48 h时达到峰值。同时在病毒感染24 h后出现明显的细胞病变,感染48 h后出现典型的凋亡特征,细胞聚堆,细胞核内染色质固缩,形成凋亡小体。CCK-8分析检测结果显示,与对照组相比感染病毒细胞活性明显降低。另外,western blot结果表明促凋亡因子蛋白水解酶Caspase-3在病毒感染过程中被活化。该研究结果进一步证实了PEDV感染可以诱导细胞凋亡,其中Caspase-3的激活在病毒诱导细胞凋亡的过程中发挥重要作用。     

水牛BMP1基因对颗粒细胞增殖与凋亡的功能研究

本研究旨在探讨BMP1基因对体外培养水牛颗粒细胞增殖与凋亡的影响,采用qRT-PCR检测体外培养0、24、48、72和96h水牛颗粒细胞中BMP1基因的表达规律,通过在水牛颗粒细胞培养液中添加BMP1基因重组蛋白和抗BMP1抗体,观察其对体外培养水牛颗粒细胞增殖变化的影响,并应用qRT-PCR和Western blotting方法检测与细胞增殖和细胞凋亡相关因子表达的变化规律。结果显示,随着颗粒细胞体外培养时间的延长,BMP1基因的相对表达量显著上调(P0.05),96h培养组BMP1表达最高。添加BMP1重组蛋白可显著促进水牛颗粒细胞的体外增殖(P0.05),并能够显著上调细胞周期关键蛋白Cyclin D1、Cyclin D2和PCNA mRNA表达水平(P0.05),同时显著抑制了细胞凋亡信号通路中促凋亡相关因子(Fas、FasL、TNFR1、TNF-α、Cytochrome C、Apaf1、Chop、Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9)mRNA表达(P0.05)。Western blotting检测结果表明,BMP1重组蛋白能够抑制Fas、Bax和Caspase-9蛋白表达,蛋白与mRNA表达一致。而添加抗BMP1抗体的试验则得出相反的结果。综上表明,BMP1基因能通过调控相关基因的表达促进体外培养水牛颗粒细胞的增殖并抑制其凋亡,在水牛卵泡发生过程中具有重要的调控功能,为阐明BMP1基因参与家畜卵泡发生的分子机制奠定基础。     

禽流感病毒与番鸭呼肠病毒感染番鸭免疫器官细胞凋亡的研究

应用原位末端标记法和免疫组化SABC法,分别以H9亚型禽流感和番鸭呼肠病毒单独感染或混合感染雏番鸭后1、3、5、7、10d对胸腺、法氏囊、脾脏细胞凋亡和P53的动态变化进行检测。结果显示,H9亚型AIV,MDRV单独感染和混合感染均可导致雏番鸭胸腺、法氏囊和脾脏出现淋巴细胞凋亡增多;病毒感染早期各免疫器官组织细胞凋亡明显,感染后期细胞凋亡量逐渐减少;混合感染组脾脏、胸腺细胞凋亡更为显著。P53表达的变化与细胞凋亡呈现相同变化规律,表明P53表达与病毒诱导的细胞凋亡机制密切相关。     

牛坏死杆菌对EPH4细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用

为探究牛坏死杆菌对小鼠乳腺上皮细胞系(EPH4细胞)增殖和凋亡的影响，本研究将坏死杆菌(牛A25菌株)以感染复数(MOI)为100感染EPH4细胞，用EdU细胞增殖法检测细胞增殖率，用Hoechst染色以及DNA Ladder检测细胞凋亡，并用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测凋亡基因的mRNA相对表达量变化。EdU检测结果显示，坏死杆菌可抑制EPH4细胞增殖；Hoechst染色以及DNA Ladder检测结果均显示，坏死杆菌可促进细胞凋亡的发生；RT-qPCR结果显示，与对照组相比，坏死杆菌感染EPH4细胞2 h时，促凋亡基因Bax、Bax/Bcl-2的mRNA相对表达量显著上调(P<0.05),感染4 h时，促凋亡基因Caspase-3和Caspase-9的mRNA相对表达量极显著上调(P<0.001),感染6 h时，促凋亡基因AIF的mRNA相对表达量极显著上调(P<0.001)。由此可见，牛坏死杆菌能够抑制EPH4细胞增殖且诱导细胞凋亡，为进一步研究坏死杆菌致病机制提供了相关数据支持。     

连梅提取液对湿热泻痢仔猪的血清抗氧化指标、胃肠调节酶及十二指肠凋亡基因表达的影响

为了探索连梅提取液对湿热泻痢仔猪的抗氧化功能、胃肠调节酶及十二指肠凋亡基因表达的影响,试验采用了人工模拟高湿高热的环境,给仔猪灌服大肠杆菌辅助致使泻痢,选择泻痢仔猪分为模型组、阳性药物组和连梅提取液高、中、低剂量组,以正常环境下正常饲喂的仔猪作为对照,通过检测仔猪血清抗氧化酶、胃肠调节酶、肝ATP酶以及十二指肠凋亡基因Caspase-3、-8、-9 mRNA转录变化以分析连梅提取液治疗泻痢仔猪的作用机制。结果显示,湿热泻痢仔猪经连梅提取液进行治疗后,血清T-SOD、GSH-Px活力升高,LDH、MDA含量减少,与模型组相比较差异极显著(P0.01);乙酰胆碱酯酶、淀粉酶、肝Na+-K+-ATPase和Ca2+-Mg2+-ATPase活力较模型组显著增强(P0.05);T3、T4和GH分泌量显著升高(P0.05),GC分泌量显著降低(P0.05);同时各药物组仔猪十二指肠凋亡基因得到了不同程度的恢复,Caspase-8 mRNA表达量只有中剂量组较模型组极显著降低至2.62倍(P0.01);Caspase-3mRNA表达中,高、中剂量组分别降至正常组的5.82、3.29倍,较模型组差异显著(P0.05)或极显著(P0.01);Caspase-9mRNA表达量均显著降低(P0.05),且降低量与药物浓度成正比。由此可知,连梅提取液可以通过增强湿热泻痢仔猪抗氧化损伤能力,改善胃肠道的消化吸收,促进生长激素的分泌和降低凋亡基因的表达而达到治疗仔猪湿热泻痢。     

Caspase-3参与调节孕鼠中后期胎盘细胞凋亡的机制研究

为了观察孕鼠中后期胎盘组织中细胞凋亡相关蛋白Caspase-3、Caspase-8的表达情况,探讨胎盘细胞凋亡的相关机制,试验首先称取孕鼠15~19 d胎盘和胚胎重量,随后采用苏木精-伊红(H.E.)染色方法观察胎盘形态学变化,免疫组化检测孕鼠中晚期胎盘中凋亡相关因子Caspase-3和Caspase-8的表达规律。结果表明:随着妊娠天数增加,胚胎重量逐渐增加,第15天、第17天胎盘重量处于水平状态,第19天时胎盘重量稍有下降。H.E.染色结果显示,随着妊娠天数的增加,成胶质细胞层的结构变得稀疏,同时失去了海绵状结构,滋养细胞数目呈现出逐渐减少的趋势。孕鼠中后期胎盘中只表达Caspase-3,不表达Caspase-8,第19天胎盘迷路区中Caspase-3阳性细胞的累积光密度(IOD)值与第15天和第17天迷路区Caspase-3阳性细胞的IOD值相比极显著增加(P0.01)。说明Caspase家族通过Caspase-3可能参与调节孕鼠中后期胎盘细胞的凋亡过程。