新城疫病毒分子生物学及其疫苗的研究进展

新城疫是当今全球范围内最严重的家禽传染病之一,特别是对养鸡业造成重大经济损失。利用分子生物技术已研究出了很多基因工程疫苗用于预防鸡新城疫,比如基因工程活载体疫苗、亚单位疫苗和DNA疫苗等。近年来随着反向遗传操作技术的发展,新城疫病毒已经被开发成病毒载体,可以携带外源基因研制新城疫病毒活载体疫苗,表达IBDV和IBV的新城疫活载体疫苗已经成功研制。本文将从新城疫病毒的分子生物学及疫苗方面进行综述。     

鹅新城疫新型疫苗研究进展

结合新城疫病毒的保护性抗原,就近年鹅新城疫的DNA疫苗、基因工程亚单位疫苗、重组活载体疫苗、减毒活疫苗等新型疫苗的研究现状进行了综述,为鹅新城疫疫苗研制提供参考.     

这些新型兽用疫苗,你认识吗

<正> 1 基因工程疫苗1.1 重组活载体疫苗病毒活载体疫苗的研究较多,如用鸡痘病毒作为载体,表达成功的保护性抗原基因就有新城疫病毒、传染性法氏囊病病毒、马立克氏病病毒、禽网状内皮组织增生症病毒、狂犬病病毒、传染性支气管炎病毒、艾美尔球虫等。2005年12月24日,农业部在北京宣布,我国已成功研制出禽流感--新城疫重组二联活疫苗,并正式批准生产。1.2 基因工程亚单位疫苗已经制成并用于生产的主要有口蹄疫基因工程亚单位疫苗、鸡传染性法氏囊病基因工程亚单位疫苗,用于预防仔猪     

基因工程活载体疫苗的研究进展

作为分子生物技术发展的新兴产物,基因工程疫苗与传统疫苗相比,具有生产成本低、免疫途径广泛、安全性高等优点,已成为生物制品产业发展的一种趋势。而基因工程活载体疫苗具有其独特的优点,是当今与未来疫苗研制与开发的重要方向之一。根据选用的载体类型,基因工程活载体疫苗分为病毒活载体疫苗和细菌活载体疫苗。简要概述了病毒活载体疫苗和细菌活载体疫苗的特点及研究进展。     

介绍几类兽用新疫苗

(一)基因工程疫苗 1.重组活载体疫苗.病毒活载体疫苗研究得较多,如用鸡痘病毒作为载体,表达成功的保护性抗原基因就有新城疫病毒、传染性法氏囊病病毒、马立克氏病病毒、禽网状内皮组织增生症病毒、狂犬病病毒、传染性支气管炎病毒、艾美尔球虫等.2005年12月24日,农业部在北京宣布,我国已成功研制出禽流感--新城疫重组二联活疫苗,并正式批准生产,这使得我国在高致病性禽流感防控技术方面继续走在世界前列.     

禽流感-新城疫重组活载体疫苗研究进展

禽流感和新城疫是严重危害养禽业发展的两种主要病毒性传染病。由于禽流感病毒和新城疫病毒(NDV)流行毒株复杂、感染宿主范围广及传播途径多样,给防制带来很大困难。目前,对这两种疾病的防制主要依赖疫苗。近年来,随着反向遗传技术的发展成熟,NDV常被作为病毒载体,用以携带外源基因,研制重组活载体疫苗,其中,用以表达禽流感病毒保护性抗原的研究成为热点之一。本文从多方面分析了NDV作为疫苗载体的优点,并就禽流感和新城疫重组活载体疫苗的研究进展作一综述。     

介绍几类兽用新疫苗

(一)基因工程疫苗1.重组活载体疫苗。病毒活载体疫苗研究得较多,如用鸡痘病毒作为载体,表达成功的保护性抗原基因就有新城疫病毒、传染性法氏囊病病毒、马立克氏病病毒、禽网状内皮组织增生症病毒、狂犬病病毒、传染性支气管炎病毒、艾美尔球虫等。2005年12月24日,农业部在北京     

现代生物技术带来的生物安全问题

随着生物技术的不断进步与发展,生物工程产品在农业领域应用越来越多。随之带来的转基因生物安全问题也越来越引起人们的关注。生物工程技术在兽用生物制品的应用主要体现在基因工程疫苗的开发与研究。基因工程疫苗主要是指用重组DNA技术研制的疫苗,包括将保护性抗原基因在原核或真核细胞中表达的生物合成亚单位疫苗;以某些病毒或细菌为外源基因载体的活载体疫苗和通过基因组突变、缺失或插入的基因缺失疫苗;质粒DNA疫苗;现代细胞生物学技术的应用等。虽然目前世界上已经注册并正式投放市场的基因工程疫苗产品并不多,但是它代表疫苗研究的新途径,为克服一些常规疫苗的缺陷带来希望,因此越来越受到重视。生物工程技术给兽用生物制品带来的生物安全问题主要有以下几个方面：     

猪瘟病毒E2基因活载体疫苗研究进展

猪瘟病毒(CSFV)E2囊膜蛋白是猪瘟病毒的主要保护性抗原蛋白,也是研究猪瘟基因工程疫苗的首选抗原。常用的猪瘟病毒E2基因活载体主要有腺病毒载体、逆转录病毒载体、痘病毒载体、伪狂犬病病毒载体、杆状病毒载体等,且每种病毒载体各有其优势特点。国际上应用病毒载体已成功研制出猪瘟新型疫苗并应用于临床。论文主要介绍了目前常用的病毒载体,并分别列举了使用这些表达载体进行猪瘟基因工程疫苗研究的进展情况。     

腺病毒载体的研究进展与展望

随着重组技术在生物领域上的应用,病毒活载体疫苗的研制成为基因工程疫苗研制的热点,其中,腺病毒由于其具有独特的优势,成为疫苗载体应用中的不可缺少部分,本文就腺病毒载体的研究进展作一简要综述,旨在为其进一步应用提供参考依据。     

新城疫病毒囊膜糖蛋白生物学特性的研究进展

新城疫是当今全球范围内最严重的禽类传染病之一。其病原新城疫病毒是单股负链RNA病毒,编码NP、P、M、F、HN和L 6种结构蛋白,其中最主要的是位于囊膜上的F和HN两种糖蛋白。F蛋白具有使病毒囊膜与宿主细胞膜融合,致使病毒穿入宿主细胞膜的作用,是决定病毒毒力的关键因子;HN蛋白具有血凝素和神经氨酸酶两种活性,这两种活性对于NDV侵染细胞具有重要的作用。这两种糖蛋白不仅对NDV的毒力及致病性方面起着决定性作用,而且也是诱导产生保护性抗体的蛋白。作者主要对这两种蛋白的结构与功能作一概述。     

新城疫病毒载体研究进展

随着反向遗传学操作技术的发展,重组新城疫病毒载体成为当今病毒载体系统研究的热点之一.论文在综述了新城疫病毒的安全性评价、分子生物学特性的基础上,着重介绍了以新城疫病毒作为病毒载体表达外源基因应用于基础研究、疫苗研究和作为基因治疗载体等研究概况.     

A fowlpox virus vaccine vector with insertion sites in the terminal repeats: demonstration of its efficacy using the fusion gene of Newcastle disease virus

In this paper we report the development and testing of a fowlpox virus vector system. Insertion sites in non-essential regions within the terminal inverted repeats of the virus have been characterised. Foreign genes inserted into these sites are shown to be present in two copies in the resultant recombinant virus. To test the potential use of this vector as a live vaccine the fusion gene of Newcastle disease virus (NDV) has been inserted into a vaccine strain of fowlpox virus, and inoculated into chickens. The experiments demonstrate the ability of the recombinant to protect chickens against challenge by a virulent strain of NDV and to elicit the formation of anti-fusion protein antibody.     

鸡瘟毒清对鸡新城疫病毒的抑制作用

采用中药制剂鸡瘟毒清(由金银花、黄芩、黄芪、黄连、丹皮等10余味中草药组成)对鸡新城疫病毒进行体内和体外抑制实验。体内抑毒实验选用21日龄艾拔益加肉鸡,随机分为5组,每组32只,直接攻毒,攻毒前7 d开始给药,直至35 d,测定治愈率;体外抑毒实验选用11日龄SPF鸡胚,随机分为3组,每组12枚,攻毒给药后感作30 min,继续孵化,测定保护率。结果显示,中药制剂鸡瘟毒清对鸡新城疫病毒有较好的抑制作用,其中体内抑毒实验高剂量组治愈率高达91%,体外抑毒实验保护率达66.7%。     

Evaluation of a modified-live virus vaccine administered in ovo to protect chickens against Newcastle disease.

The B1 strain of Newcastle disease virus (NDV-B1), which is nonpathogenic for newly hatched chickens, killed embryos when it was used to inoculate chicken eggs at embryonation day 18. Treatment of NDV-B1 with an alkylating agent, ethylmethane sulfonate (EMS) markedly reduced the pathogenicity of the virus for 18-day-old chicken embryos. Eggs inoculated with the modified virus (NDV-B1-EMS) hatched, and the virus was isolated from lungs and spleen of 1-day-old chickens. The hatched chickens developed antibody to NDV and were protected against challenge exposure (at 4 weeks of age) with a highly virulent GB-Texas strain of NDV. Presence of maternal antibody to NDV in embryonating eggs did not influence the protective ability of NDV-B1-EMS, which also induced protective immunity when administered to 4-week-old chickens. The 50% protective dose of NDV-B1-EMS in maternal antibody-negative and -positive embryos was calculated to be 10.77 and 17.70 embryo 50% lethal doses, respectively. Results of the study indicated that NDV-B1-EMS may be used as an embryo vaccine to protect chickens against Newcastle disease.     

I类新城疫病毒NDV08-004株微型基因组的构建及其功能鉴定

目的本研究旨在构建Ⅰ类新城疫病毒NDV08-004的微型基因组和辅助质粒,为构建病毒拯救体系奠定基础。方法根据Ⅰ类新城疫病毒NDV08-004的全基因组序列,采用SOE方法将增强绿色荧光蛋白基因(eGFP)插入NDV08-004的3’-Leader和5’-Trailer区域之间后反向插入转录载体pOLTV5中,构建了NDV08-004的微型基因组pLGT-03。将pLGT-03转染辅助病毒NDV08-004感染的表达T7RNA聚合酶BSRT7/5细胞进行功能鉴定。采用RT-PCR将NDV08-004的NP、P和L蛋白基因亚克隆入表达载体pCI-neo中,分别构建了三个辅助质粒pCI-NP、pCI-P、pCI-L。通过构建的微型基因组pLGT-03和三个辅助质粒按照一定的比例共转染BSRT7/5细胞来验证辅助质粒的功能。结果微型基因组pLGT-03转染辅助病毒感染的BSRT7/5细胞后可见明显荧光,表明微型基因组构建成功。微型基因组和辅助质粒共转染可见荧光表达,表明三个辅助质粒均具有相应的功能。结论表明微型基因组和辅助质粒均具有相应的功能,为建立NDV08-004的反向遗传操作平台奠定了基础。     

新城疫病毒在肿瘤治疗中的研究进展

新城疫病毒(NDV)是一种新兴的肿瘤生物治疗因子,反向遗传学操作技术的成熟使其在肿瘤治疗中的应用研究越来越深入。NDV能够通过其直接的溶瘤作用杀死肿瘤细胞,也可通过感染自体肿瘤细胞制成疫苗对患者进行主动特异性免疫治疗。但直接溶瘤效应会对患者产生一定的负面影响,自体肿瘤疫苗的免疫治疗也不能彻底杀死肿瘤细胞。目前,以NDV为复制型病毒载体的肿瘤基因治疗已成为该病毒肿瘤生物治疗的研究热点,这种基因治疗方法被认为是人类征服癌症的潜在手段。论文综述了NDV在肿瘤治疗中的研究与应用,对其溶瘤及抗肿瘤免疫学机制进行了分析,并对NDV作为载体的肿瘤基因治疗前景进行展望。     

鹅源新城疫病毒ZJ1株拯救体系相关因素的探索

在构建了鹅源新城疫病毒(NewcastleDiseaseVirus,NDV)ZJ1毒株的微型基因组和表达该病毒NP、P与L蛋白的辅助质粒的基础上,通过对该病毒拯救体系中的重要影响因素如ZJ1在易感细胞的增殖、热休克对拯救效率的影响、表达T7RNA聚合酶的重组痘苗的感染复数、胞嘧啶阿拉伯呋喃糖苷(Arac)对重组痘苗复制的影响以及共转染质粒的比例和量等进行了探索。以上研究为该病毒的成功拯救及开展其它相关研究奠定了基础。