大鳍鳠蛋白酶活力的研究

以嘉陵江野生大鳍鳠(Mystus macropterus)为材料，对其蛋白酶的酶活力影响因素、酶解动力学、体外消化率进行综合研究。结果表明，(1)大鳍鳠胃、肠、肝胰脏的蛋白酶最适温度分别为36、40、40℃，最适pH分别为2．2、7．0、7．0，温度对胃、肠蛋白酶的影响大于肝胰脏，pH对胃蛋白酶的影响大于肠和肝胰脏；(2)肠蛋白酶的酶解能力最强，对鱼粉和豆粕酶解产生氨基酸，速度分别为52．288mg／h和33．352mg／h，胃、肝胰脏蛋白酶的酶解能力差异不显著，对鱼粉和豆粕酶解产生氨基酸，速度分别为24．328mg／h、25．275mg／h和19．843mg／h、17．535mg／h；(3)大鳍鳠蛋白酶对色粉或豆粕的干物质或粗蛋白消化率均以胃最大，肠次之，肝胰脏最小；色粉的体外消化率均大于豆粕的体外消化率。从总体消化能力来看，大鳍鳠蛋白酶对色粉和豆粕都有较强的消化能力。     

鱼消化酶活性的研究

以体重320～350 g的(鱼免)鱼(Miichthys miiuy)为实验材料,研究(鱼免)鱼消化酶的分布及不同pH值条件下胃、肝胰脏、幽门、前肠、后肠中蛋白酶的活性.结果表明,蛋白酶在各消化器官的比活力顺序胃＞肝胰脏＞前肠＞幽门＞后肠,数值分别为439.75±6.82、404.46±11.64、255.42±2.41、123.23±0.46、49.39±2.81;淀粉酶比活力顺序为幽门＞肝胰脏＞前肠＞胃＞后肠,数值分别为3 107.82±84.57、2 420.72±52.85、2 336.15±10.57、1 617.34±31.71、1 247.36±21.14;脂肪酶比活力顺序肝胰脏＞幽门＞前肠＞后肠,数值分别为177.99±0.23、80.79±6.97、46.69±5.06、42.76±2.25.胃、肝胰脏、前肠、幽门、后肠的蛋白酶最适pH值分别是1.9、9.0、8.4、9.0、8.0.研究表明(鱼免)鱼的胃含有较高的胃蛋白酶及淀粉酶活性,在食物消化中起了重要作用.肝胰脏的蛋白酶、淀粉酶及脂肪酶的总酶活比其它消化器官都高,因此认为肝胰脏是消化酶的主要分泌器官.     

野生和养殖鲻消化酶活性的比较研究

对野生鲻(Mugil cephalus)和养殖鲻的消化道指数及淀粉酶和蛋白酶活性分布进行了比较研究,并探讨了不同温度和pH对离体状态下消化道淀粉酶和蛋白酶的影响.结果表明,野生鲻和养殖鲻的比内脏重、比肝重、比胃重、比肠长分别为0.043±0.001和0.0480±0.004,0.009±0.001和0.007±0.000,0.008±0.002和0.007±0.000,2.886±0.301和3.158±0.141.野生鲻的蛋白酶和淀粉酶活力在各消化器官中的分布与养殖鲻间存在差异.野生鲻和养殖鲻比较,野生鲻各消化器官中淀粉酶活力均极显著高于养殖鲻(P<0.01);蛋白酶活力在肝胰脏和胃中差异不显著(P>0.05),在中肠差异显著(P<0.05),在前肠和后肠差异极显著(P<0.01).在肝胰脏、胃、前肠、中肠、后肠和幽门盲囊6部位,野生鲻淀粉酶的最适温度分别是40℃、45℃、45℃、45℃、40℃、45℃;养殖鲻淀粉酶的最适温度分别是40℃、40℃、40℃、45℃、40℃、40℃.野生鲻淀粉酶最适pH在肝胰脏为6.2,在其余各部分均是7.2;养殖鲻淀粉酶最适pH在胃和前肠为2.2和8.0,在其余各部分均为7.2.野生鲻蛋白酶最适温度在肝胰脏、胃、前肠和后肠均为45℃,在中肠为50℃;养殖鲻蛋白酶最适温度在肝胰脏、胃和中肠为40℃,前肠和后肠为45℃.野生和养殖鲻蛋白酶的最适pH胃部为3.2,其余各部分的最适pH均是7.2.     

中华绒螯蟹胃、肠及肝、胰脏蛋白酶初探

以酪蛋白为底物,研究了中华绒螯蟹胃、肠及肝、胰脏蛋白酶的最适pH值和最适底物浓度。研究结果表明:河蟹消化道蛋白酶的最适pH值在5.4～5.8和7.2～7.6;蛋白酶的最适底物酪蛋白的浓度为:胃,0.8mg/ml;肠,1.6mg/ml;肝、胰脏,1.2mg/ml。     

饥饿对养殖鲈蛋白酶活力的影响

对饥饿 1～ 4周的养殖鲈的比肝重、比胃重、比盲囊重和比肠重以及这些器官的蛋白酶活力的变化进行了研究。结果表明饥饿 1～ 4周对养殖鲈比胃重、比盲囊重和比肠重均没有影响 ,但比肝重显著下降 (p<0 0 1)。饥饿使胃、盲囊、肠道和肝脏的蛋白酶活力均有明显下降 ,饥饿 4周后 ,胃、盲囊、肠道和肝脏蛋白梅活力分别为正常组的 2 9 80 % ,2 4 14 % ,2 4 72 %和 14 71%。     

黄鳍鲷主要消化酶活性在消化道不同部位的比较研究

研究了黄鳍鲷（Sparus latus Houttuyn）主要消化酶（蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶）在消化道不同部位（肝胰脏、胃、前肠、中肠、后肠）的分布情况。结果表明，蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶比活最高的部位分别是胃、肝胰脏和前肠，酶活性明显高于其他部分（P〈0．01）。从肠道消化酶的比活大小来看，蛋白酶比活是前肠、中肠、后肠依次降低，淀粉酶比活是中肠〉前肠〉后肠，脂肪酶比活是前肠〉后肠〉中肠。     

温度和pH对美国红鱼蛋白酶和淀粉酶活力的影响

用酶学方法,研究了温度和pH对美国红鱼(Sciaenops ocellatus)胃、肠、肝胰脏和幽门盲囊等4部位的蛋白酶和淀粉酶活力。结果表明:温度和pH对美国红鱼胃、肠、肝胰脏和幽门盲囊等4部位的蛋白酶和淀粉酶活力影响均较显著,蛋白酶最适温度分别为25℃、25℃、30℃和40℃,淀粉酶最适温度分别为25℃、35℃、25℃和25℃;蛋白酶最适pH分别为7.2、6.8、8.0和8.0,淀粉酶最适pH分别为7.2、8.4、7.2和7.2。     

pH对红鳍东方纯（Takifugu rubripes）消化酶活力的影响

本文研究了pH对红鳍东方纯消化道和肝胰脏中蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活力的影响。结果表明：红鳍东方纯前肠蛋白酶和淀粉酶最适pH分别为：5．4和5．0;中肠蛋白酶和淀粉酶的最适pH分别为：8．7和7．0;后肠蛋白酶和淀粉酶的最适pH分别为：6．5和7．0;肝胰脏蛋白酶和淀粉酶的最适pH均为7．0;肠和肝胰脏的脂肪酶的最适pH均为7．0。     

长薄鳅幼鱼消化道指数和消化酶活性研究

测定了长薄鳅(Leptobotia elongate Bleeker)幼鱼(8.0～110.1 g)的消化道指数和不同体重组(10 g、30 g、50 g)幼鱼的胃、肝胰脏、前肠、中肠、后肠的淀粉酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶及脂肪酶活性。结果:(1)长薄鳅幼鱼肝指数平均为(1.400±0.004)%,比肠长平均为(0.418±0.080),体重与体长呈幂函数相关,相关式为:W=0.019L2.818 1(R2=0.948,P<0.01,n=43);鱼体肥满度在30 g组中最高。(2)各部位消化酶活性均以蛋白酶>脂肪酶>淀粉酶;各体重组淀粉酶活性在肝胰脏中最高(P<0.05);蛋白酶活性在胃和中肠中较高;脂肪酶活性沿消化道从前至后升高;(3)各部位淀粉酶活性在各体重组间变化不大,胃蛋白酶、肠段胰蛋白酶和脂肪酶活性随体重增加而下降。本研究认为长薄鳅幼鱼为杂食、偏肉食性,其消化酶活性存在组织特异性,体重30 g左右是其营养需求转变或者生长发育的重要时期。     

温度和pH值对斜带髭鲷蛋白酶、淀粉酶活性的影响

研究了温度和pH值对斜带髭鲷Hapalogenys nitens蛋白酶、淀粉酶活力的影响。结果表明,斜带髭鲷胃内pH值范围为4.9～5.4;肝胰脏pH值为5.8～6.2;肠道pH值为6.5～6.9。蛋白酶活性随温度的上升而增加,在40℃达最大,40℃以上酶活性随温度的上升而下降。在不同消化器官中,蛋白酶活性大小顺序为：胃〉前肠〉幽门盲囊〉后肠〉肝胰脏。在15～50℃范围内,斜带髭鲷消化道不同部位淀粉酶活性的最适温度均为35℃,淀粉酶活性由高到低顺序为：肝胰脏〉幽门盲囊〉前肠〉后肠〉胃。在pH值为2.2～7.6范围内,胃蛋白酶活性的最适pH值为2.8;在pH值为4.8～8.0范围内,其他消化器官蛋白酶的最适pH值均为7.2;在最适pH值下,各消化器官中的蛋白酶活性由高到低顺序为：前肠〉幽门盲囊〉后肠〉肝胰脏。在pH值为4.8～8.0范围内,胃淀粉酶活性的最适pH值为6.0,肠、肝胰脏与幽门盲囊淀粉酶的最适pH值均为6.8,活性由高到低顺序为：肝胰脏〉幽门盲囊〉前肠〉后肠〉胃。在最适温度和pH值下,蛋白酶活性由高到低顺序为：胃〉前肠〉幽门盲囊〉后肠〉肝胰脏;淀粉酶活性由高到低顺序为：肝胰脏〉幽门盲囊〉前肠〉后肠〉胃。     

越冬期间黄颡鱼、大鳍组织器官含脂量变化的研究

通过对嘉陵江北碚江段黄颡鱼，大鳍Hu越冬期间其胃，肠，肝胰脏，肌肉含脂量变化的研究。表明：1．黄颡鱼，大鳍Hu内脏各器官（胃,肠，肝胰脏）含脂量以越立中期为最低，肌肉则相反，表现出越立饥饿期间，该鱼主要利用内脏脂肪作用为主要能量来源而不用大量肌肉脂肪；2，越冬期间，黄颡锺，大鳍Hu内脏各器官（胃，肠，肝胰脏）含脂量与含水量的变化有负相关关系存在。     

Effect of substitution of dietary fish meal by soybean meal on different sizes of gibel carp (Carassius auratus gibelio): digestive enzyme gene expressions and activities,and intestinal and hepatic histology

A 7‐week growth trial was conducted to evaluate the effects of dietary soybean meal (SBM) on digestive enzyme activity of intestinal mucosa, mRNA levels of digestive enzymes in hepatopancreas, and the mid‐intestinal and hepatopancreas histology of gibel carp CAS III (Carassius auratus gibelio). Four different growth phases of gibel carp (initial body weight: fry, 0.8 g; juvenile, 5.0 g; 1‐year‐old, 62.7 g; and broodstock, 135.6 g) were tested. Seven isonitrogenous and iso‐energetic diets were formulated to contain different SBM replacement levels (0%, 20%, 40%, 60%, 80% and 100% of dietary fish meal protein), and another diet (SBMAA) contained all SBM protein and supplied crystalline amino acids. The results showed that the activities of mid‐intestine trypsin, α‐amylase and gamma glutamyl transpeptidase reduced with increased dietary SBM, while the chymotrypsin activity increased first and then decreased. The ultrastructures of intestinal epithelial cells and hepatopancreas cells in fry and broodstock fish were distinctly affected by 200 g kg^‐1 dietary SBM. Supplementation of dietary amino acid to the highest replacement groups was not sufficient to improve digestive and absorptive capacities and growth performance. Gibel carp may be adapted to dietary SBM through increase in gene expression of hepatopancreas digestive enzymes and has potential to utilize proceeded SBM as feedstuffs.     

大鳍鳠 IL-1β基因cDNA克隆及表达分析

白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)作为炎症反应的关键介导物,通过开启基因的表达来调控免疫反应。为了丰富鱼类该基因的研究,实验采用RT-PCR和RACE-PCR技术,首次从鲇形目鱼类大鳍鳠中获得IL-1β基因cDNA的全序列。大鳍鳠IL-1β基因cDNA全长1 194 bp,包括3’非编码区域(UTR)为224 bp,5’UTR为82 bp,开放阅读框(ORF)为888 bp,编码296个氨基酸。预测的蛋白质分子量为33.843 43 ku,等电点为5.00。与斑点叉尾等其他8种脊椎动物进行同源性分析发现,大鳍鳠IL-1β氨基酸序列与斑点叉尾相似性最高,为79.0%,与原鸡的相似性最低,为22.0%。进化树分析表明,大鳍鳠IL-1β与斑点叉尾聚为一支。半定量PCR显示,大鳍鳠IL-1β基因在肌肉、脑、脾脏、头肾、体肾、胃、皮肤、肝脏及肠等组织中都有不同程度的表达;经嗜水气单胞菌刺激后大鳍鳠IL-1β基因在头肾和脾脏的转录表达显示,1 d后该基因在头肾与脾脏中的表达量都达到最大,15 d后恢复到刺激前的水平。研究显示,大鳍鳠IL-1β在抵御病原感染过程中发挥重要作用。     

鲤、鲢、鳙、草鱼消化道结构与食性的研究

本文通过组织解剖与切片法测量了鲤、草、鲢、鳙的相关生物学参数,系统观察了四种鱼的消化道肌肉层、肠绒毛以及粘液细胞的显微结构及分布特点,探究其与食性的相互关系。结果显示：鲤比肠长1.0,环行肌较纵行肌发达,肠绒毛丰富,粘液细胞均匀分布在整个消化道中;草鱼比肠长2.13,消化道组织结构均一,肌肉壁中纵行肌所占比例高,粘液细胞体积小,分散于整个消化道中,肠绒毛极发达;鲢比肠长8.49,环行肌极发达,粘液细胞集中于消化道前段,肠绒毛由前至后逐渐呈短粗状;鳙比肠长4.58,环行肌极为发达,粘液细胞数量多且均匀地分布于消化道前、中段,肠绒毛较为稀疏短粗,粘液细胞较少。这四种鱼消化道的组织结构特征与各自食性密切相关。     

建鲤仔鱼的形态特征及肠道指数分析

对建鲤鱼(Cyprinus carpiovar.ian)形态特征参数及肠道指数进行了测量分析。结果表明:建鲤体重、体长、头长、尾鳍长、肠道重、肠道长之间呈正相关关系,其中体重与肠道重、体重与体长相关性较强;建鲤的比肠重、比肠长分别为0.020±0.005和1.633±0.349,表明建鲤是一种杂食性鱼类。     

消化酶活力在千年笛鲷幼鱼不同消化器官中的比较研究

测定和比较了千年笛鲷(Lutjanussebae)幼鱼不同消化器官的消化酶活性。结果表明,蛋白酶比活力为:肠>胃>肝胰脏(P<0·01);淀粉酶比活力为:肠>肝胰脏>胃(P<0·01);脂肪酶比活力为:肠>肝胰脏>胃,胃和肝胰脏间差异不显著(P>0·05),但二者和肠之间差异极显著(P<0·01)。千年笛鲷幼鱼肠道对食物的整体消化能力始终较强,肝胰脏和胃是消化食物的辅助器官。     

大鳍鳠免疫球蛋白轻链3型基因cDNA的克隆及表达

应用同源克隆和RACE-PCR方法获得大鳍鳠免疫球蛋白轻链3型(IgL3)基因的全长cDNA序列,并分析了该基因在组织中的表达。大鳍鳠IgL3的cDNA全长为947 bp,包含5非编码区58 bp,3非编码区184 bp,开放阅读框705 bp,编码234个氨基酸。推测的蛋白质序列分为可变区(VL)和恒定区(CL)。VL被进一步划分为4个骨架区(FR)和3个互补决定区(CDR)。大鳍鳠与其它6种硬骨鱼类免疫球蛋白轻链L3氨基酸序列比对分析表明,大鳍鳠氨基酸序列与斑点叉尾IgL3型(F型)的相似性最高,为68.8%,与南极鱼IgL3型的相似性最低,为47.2%。进化树分析表明,大鳍鳠IgL与斑点叉尾IgL3型(F型)聚为一支并与其它硬骨鱼类IgL3型聚为一簇,明显与L1和L2进化支不同。实时荧光定量PCR显示,大鳍鳠IgL3基因主要在头肾、脾脏和血细胞中转录表达;注射嗜水气单胞菌后,头肾、脾脏和血细胞IgL3基因转录表达量有显著上升。研究表明,头肾、脾脏和血液是大鳍鳠IgL3型基因主要的表达器官,在免疫反应中起重要作用。     

太湖秀丽白虾不同生长阶段主要消化酶活性研究

研究了太湖秀丽白虾（Exopalaemon modestus）不同生长阶段的消化酶活性。结果表明,太湖秀丽白虾的生长可分为3个阶段,体质量小于0．1g时,蛋白酶活性维持在较高水平;体质量介于0．1～0．3g之间时,蛋白酶活性呈现不同程度的下降;体质量大于0．4g以后,蛋白酶活性进一步降低;其中脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶活性均很低。成虾肝胰腺、胃和肠3种不同消化器官的消化酶活性差异显著,蛋白酶活性依次为胃〉肝胰腺〉肠,淀粉酶活性则为胃〉肠、肝胰腺。     

Effects of polysaccharide from fermented wheat bran on growth performance,muscle composition,digestive enzyme activities and intestinal microbiota in juvenile common carp

The present study evaluated the effect of dietary polysaccharide from fermented wheat bran on growth performance, muscle composition, digestive enzyme activities and intestinal microbiota of juvenile common carp (Cyprinus carpio L.). Four diets supplemented with 0 (D0), 1.0 (D1), 2.0 (D2) and 4.0 (D3) g/kg fermented wheat bran polysaccharide (FWBP) were prepared. Fish were randomly assigned into four groups, each group having four replicates (30 fish/replicate) and fed with experimental diets for 8 weeks. Compared with the D0 group, the D3 group had higher final body weight and weight gain (p < .05). The amylase activity in the intestine and hepatopancreas of D1 and D2 groups and pepsin and trypsin activities in the hepatopancreas of D2 and D3 groups were significantly higher than D0 group. Significantly increased muscle protein and lipid content while reduced moisture content was observed in D1 group; additionally, D3 group had significantly lower muscle lipid content. The population of Bifidobacterium spp. in the intestine digesta of D1 and D2 groups was significantly increased, whereas lactic acid bacteria (LAB) and Escherichia coli were unaffected. Collectively, dietary FWBP supplementation could enhance digestive enzyme activities and Bifidobacterium population and change the muscle composition and improve growth performance of common carp.