榅桲离体培养繁殖的研究

利用榅桲茎尖进行继代培养,建立了榅桲的离体再生体系。结果表明,适合离体叶片愈伤组织诱导的培养基为1／2MS＋KT0．5mg／L＋2,4-D1．0mg／L＋蔗糖30．0g／L＋琼脂6．5g／L;适合愈伤组织分化不定芽的培养基为MS＋TDZ3．0mg,／L＋NAA0．3mg／L＋蔗糖30．0g／L＋琼脂6．5g／L;适合叶片再生不定芽的培养基为MS＋TDZ2．0mg／L＋NAA0．1mg／L＋蔗糖30．0g／L＋琼脂6．5g／L;适合榅桲茎段生根的培养基为1／2MS＋IAA0．3mg／L＋蔗糖30．0g／L＋琼脂6．5g／L。     

欧洲黑杨‘N46’组培再生体系的建立

以欧洲黑杨N46无性系(Populus nigra‘N46’)的腋芽无菌萌发的幼嫩叶片为试验材料,对影响其不定芽分化和生根的关键因子进行了研究,建立了高效稳定的不定芽诱导和植株再生体系。结果表明:欧洲黑杨N46无性系幼嫩叶片进行不定芽分化诱导的最适培养基为MS+6-BA 0.5 mg·L-1+NAA0.03 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1+琼脂粉5 g·L-1,诱导最佳温度为27℃,每个叶片平均分化不定芽数量可达45.20个;不定芽生根的最佳培养基为1/2MS+IBA0.01 mg·L-1+NAA0.01 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1+琼脂粉5 g·L-1,生根最佳温度为25℃,生根率可达93.33%,生根小植株移栽成活率达98%。     

欧美杨POR组培再生系统研究

以欧美杨POR(Populus×euramericana)幼嫩茎段、叶片2种外植体为材料,研究诱导不定芽、茎伸长和生根的合适培养条件。结果表明,TDZ在芽诱导过程中有显著的促进作用,不定芽诱导最适培养基为MS+TDZ 0.05mg·L-1+6-BA 0.05 mg·L-1+NAA 0.05 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1,茎段和叶片分化率分别为97.3%和88.6%;丛生芽的茎伸长诱导最适培养基为MS+KT 0.5 mg·L-1+GA31 mg·L-1+果糖30 g·L-1,茎段和叶片来源的丛生芽的茎伸长率分别为95.5%和90%,茎伸长培养20 d,每个外植体超过3 cm的芽有3个以上。抽茎芽可直接转入生根培养基,在培养基1/2 MS+IBA 0.05 mg·L-1+NAA 0.05 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1中生根率可达92.2%,生根数量多,苗体健康。     

瓦松快繁体系的构建研究

以瓦松为研究材料, 系统地研究了丛生芽的诱导、增殖及生根培养等,探索瓦松快繁的最佳途径并构建其快繁体系,结果表明: 茎段接种于MS+10 mg·L-16\|BA+02 mg·L-1IBA+20 g·L-1蔗糖培养基上,茎段增殖倍数可达1169,叶片接种于MS+15 mg·L-16\|BA+01 mg·L-1IBA+30 g·L-1蔗糖培养基上,能产生很好的不定芽,其再生芽数达971。在1/2 MS+02 mg·L-1IBA+005 mg·L-1NAA培养基中,生根率达100%,平均每株能产生123条根,植株生长健壮。     

拂子茅组培再生体系的建立

为建立拂子茅植株再生体系,以茎尖为外植体,对拂子茅花叶灭菌方式以及愈伤组织诱导和植株再生培养条件进行分析与筛选。结果表明:用75%乙醇灭菌30 s,再用0.1%升汞灭菌12 min,灭菌效果最佳,去污染率达到90%;在MS+6-BA 0.2 mg/L+2,4-D 4 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L的培养基上进行愈伤组织诱导,诱导率达33.4%;用MS+6-BA 2mg/L+NAA 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L培养基诱导不定芽再生,诱导率最高、可达76.9%;用MS基本培养基诱导不定芽生根,生根率达到100%。     

匍茎百合再生体系的建立及多倍体诱导

为了保护匍茎百合(Lilium lankongense)的野生种质资源并提供简单有效的快繁方法,以匍茎百合为植物材料,建立以鳞茎为外植体的高效再生体系,并利用秋水仙素处理种子,诱导出多倍体植株。通过调节培养基中的植物生长激素和蔗糖的质量浓度,确定了匍茎百合不定芽诱导、小鳞茎膨大和生根的最佳培养基。结果表明：最佳不定芽诱导培养基为MS培养基+6-苄氨基嘌呤(6-BA)1.0 mg·L^-1+萘乙酸(NAA)0.7 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1,不定芽诱导系数为2.33,显著高于其他处理组合;最佳小鳞茎膨大培养基为MS培养基+蔗糖60 g·L^-1,可显著提高小鳞茎的直径和鲜质量;最佳生根培养基为0.5倍浓度的MS培养基+萘乙酸(NAA)0.4 mg·L^-1+吲哚丁酸(IBA)0.1 mg·L^-1,可显著增加根长和根数。用质量分数为0.03%的秋水仙素浸泡18 h,种子的成活率最高,为93.15%,再通过形态学、生理学和流式细胞仪鉴定,最终鉴定出4个四倍体植...     

尾赤桉叶片及茎段的离体培养与植株再生

以无菌生根苗的叶片和茎段为外植体进行了尾赤桉无性系DH201-2不定芽的诱导及植株再生。通过对外植体的筛选、激素种类和浓度的调整、培养条件的选择,结果表明,取自生根培养基上培养30 d植株的上部和中部的茎段在改良MS+TDZ 0.05 mg.L-1+NAA 0.50 mg.L-1的培养基中获得高达57.0%的丛生芽诱导;取在生根培养基上培养20 d的植株,顶端叶片在改良MS+TDZ 0.05 mg.L-1+IBA 0.10 mg.L-1的培养基中获得48.3%的植株再生;适合于茎段和叶片不定芽分化的Ca(NO3)2浓度为0.706 0 g.L-1。     

秦党茎段的组织培养研究

试验研究了利用秦党茎段进行组织培养的方法,结果表明:在光照强度1600 1x,温度25℃的条件下,秦党幼茎诱导愈伤组织及芽较快的初代培养基是MS+2,4-D 0.5 mg·L-1+蔗糖20 g·L-1+琼脂8 g·L-1及MS+BA 2.0 mg··L-1+IAA 1.0 mg·L-1+蔗糖20 g·L-1+琼脂8 g·L-1;继代培养基为MS+BA 1.5 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1+琼脂8 g·L-1直接分化形成幼苗,或MS+IBA 1.0 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1+琼脂8 g·L-1诱导形成无根苗再进行生根培养.     

青花菜高频离体再生体系的研究

以青花菜04J-20、04J-19和04J-21带柄子叶为外植体,研究其高频离体再生体系.比较了不同基因型、不同质量浓度植物生长调节剂、不同时期苗龄外植体对不定芽再生频率的影响.结果表明:04J-20 8 d苗龄外植体不定芽的再生频率最高为100%(MS 0.10 mg·L-1 NAA 6.0 mg·L-1 6-BA 8 g·L-1琼脂 30 g·L-1蔗糖),继代培养增殖系数达8～9(MS 0.2 mg·L-1 NAA 2.0 mg·L-1 6-BA 7 g·L-1琼脂 30 g·L-1蔗糖),生根培养诱导生根率为100%(1/2MS 0.1 mg·L-1 NAA 7 g·L-1琼脂 30 g·L-1蔗糖),驯化移栽成活率达95%,获得增殖200倍的田间再生植株.     

2001杨组培再生体系建立

以2001杨的春季新发嫩枝茎段、叶柄、叶片为外植体,尝试在MS和WPM基本培养基中添加多种组合激素,探索不定芽诱导、丛生芽伸长和生根最优条件,建立组织培养与植株再生系统。结果表明:MS培养基的诱导分化效果比WPM好;在MS+TDZ 0.025 mg·L^-1+6-BA 0.05 mg·L^-1+NAA 0.05 mg·L^-1+蔗糖30.00 g·L^-1的培养基上,不定芽诱导分化效果最好,茎段和叶柄诱导分化率可达90%,叶片诱导分化率 60%;丛生芽转入MS+KT 0.25 mg·L^-1+GA3 1.00 mg·L^-1+果糖30.00 g·L^-1的培养基中茎伸长效果最佳;每个叶片外植体诱导茎伸长的芽平均达6.4个,芽数量最多;不定芽在1/2MS+IAA 0.02 mg·L^-1+IBA 0.02 mg·L^-1+AC 3.00 g·L^-1+蔗糖30.00 g·L^-1培养基上形成的根条数多,生根率达90%。     

黄精的组织培养与植株再生

研究离体条件下黄精不同外植体的愈伤组织诱导及其植株再生。结果表明,黄精的根茎、嫩茎及幼嫩的组培叶片在MS+6-BA 2.0 mg.L-1+2,4-D 1.0 mg.L-1和MS+6-BA 2.0 mg.L-1+NAA 1.0mg.L-1的培养基中均诱导产生愈伤组织,并在MS+6-BA2.0 mg.L-1+2,4-D2.0 mg.L-1和MS+6-BA2.0 mg.L-1+NAA2.0 mg.L-1的培养基上继代增殖良好。黄精愈伤组织在MS+6-BA3.0 mg.L-1+IAA1.0 mg.L-1的培养基上可诱导出不定芽,出芽率达66.33%,平均每块愈伤组织可分化出5.2个芽。试管苗在MS附加IAA0.5 mg.L-1培养基上诱导生根,生根率达86.67%。     

天台鹅耳枥的组织培养与快速繁殖

为了首次建立天台鹅耳枥的组织培养与植株再生体系,以其茎段、未萌发的新芽及萌发后的嫩芽、叶片等为外植体进行离体培养试验。结果表明,以新生的嫩芽为外植体,成功诱导不定芽的分化与增殖,最佳培养基配方为1/2 MS+6-BA 2.0 mg·L^-1+NAA 0.2 mg·L^-1+PVP 0.2%。壮苗培养基配方为1/2MS+6-BA 0.5 mg·L^-1+NAA 0.05 mg·L^-1;最佳生根培养基配方为1/4 MS+IBA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1。     

黄山松成熟胚培养与植株再生技术研究

以黄山松(Pinus taiwanensis Hayata)成熟胚为试验材料,进行离体培养与植株再生条件的初步研究。结果表明,黄山松成熟胚外植体表面灭菌以75%的乙醇处理1 min,3%的次氯酸钠处理10 min为适宜;愈伤组织诱导培养基以MS + 1.0 mg·L^-1 6-BA + 0.2 mg·L^-1 NAA为最佳;适宜的不定芽分化培养基为DCR + 1.0 mg·L^-1 6-BA + 0.05 mg·L^-1 NAA;不定芽伸长以DCR + 0.1 mg·L^-1 6-BA + 0.05 mg·L^-1 NAA为适宜;生根培养基以1/2 DCR + 2.0 mg·L^-1 IBA + 0.05 mg·L^-1 NAA为适宜。建立的植株再生体系为黄山松种质资源的保存、遗传改良及优质种苗繁殖等研究提供了参考。     

Adventitious shoot regeneration from the leaves of some pear varieties (Pyrus spp.) grown in vitro

The pear (Pyrus spp.) is one of the most important temperate fruit crops. A complete protocol for adventitious shoot regeneration was developed from the leaves of four pear varieties grown in vitro: Abbe Fetel, Yali, Packham’s Triumph and Aikansui, and the Chinese rootstock variety Duli. Shoot explants were collected from the field and cultured in vitro in Murashige and Skoog (MS) media supplemented with 1.0 mg·L⁻¹ 6-benzylaminopurine (BA) and 0.1 mg·L⁻¹ indole-3-butyric acid (IBA). After four weeks, leaf explants of all 5 varieties grown in vitro were excised and cultured in MS media supplemented with 0.0 mg·L⁻¹, 0.2mg·L⁻¹, 0.5 mg·L⁻¹, 1.0 mg·L⁻¹ and 2.0 mg·L⁻¹ naphthaleneacetic acid (NAA) and 5.0 mg·L⁻¹ BA or with 1.0 mg·L⁻¹, 2.0 mg·L⁻¹ and 4.0 mg·L⁻¹ thidiazuron (TDZ). The cultures were maintained in darkness for 21 days for shoot induction in the shoot induction medium (IM), then transferred to the shoot expression medium (EM) in 1.0 mg·L⁻¹ TDZ without any auxins and kept in a growth room at (25±2)°C under a 16/8 h light/dark photoperiod regime for 8 weeks. Finally, the shoots were transferred to the MS shoot elongation medium (SEM) supplemented with 0.2 mg·L⁻¹ BA, 0.1 mg·L⁻¹ IBA and 0.2 mg·L⁻¹ gibberellic acid (GA₃). A combination of TDZ and NAA had a significant effect on the number of shoot regenerations in all 5 tested varieties. The maximum mean number of shoots and maximum number of shoots per leaf obtained from Yali variety were 11.8 (P⩽0.001) and 22, followed by Aikansui with 6.6 (P⩽0.001) and 4.6, and Duli with 8 (P⩽0.001) and 12, all arising from the combination of 0.2 mg·L⁻¹ NAA with 1.0 mg·L⁻¹ TDZ. For Packham’s Triumph and Abbe Fetel, the maximum mean number of shoots and maximum number of shoots per leaf were 5.6 (P⩽0.001), 4.8 and 8 (P⩽0.001), and 11, respectively, from the combination of NAA (1.0 mg·L⁻¹) and TDZ (2.0 mg·L⁻¹). Abbe Fetel was the only variety which produced significantly higher adventitious shoots from the two different combinations of 1.0 mg·L⁻¹ NAA and 5.0 mg·L⁻¹ BA (P⩽0.05), and 2.0 mg·L⁻¹ NAA and 5.0 mg·L⁻¹ BA (P⩽0.01). Some of the most prominent problems associated with shoot proliferation and regeneration were also observed and discussed in this paper.     

玻璃化法超低温保存荔枝胚性愈伤组织及其植株再生

采用玻璃化法对荔枝胚性愈伤组织超低温保存及植株再生进行了初步探讨.将继代保存15 d的荔枝胚性愈伤组织转接到预培养基[MS+50 mL.L-1二甲基亚砜(DMSO)+1 mg.L-12,4-D+20 g.L-1蔗糖+6 g.L-1琼脂糖]中,在5℃低温下预培养.将预培养后的愈伤组织于常温下用体积分数为60%玻璃化溶液(2PVS2)装载20 min,再于0℃下用PVS2溶液平衡40 min;换新鲜的PVS2溶液,迅速投入液氮中保存.1周后取出,于40℃温水浴中化冻,弃PVS2,用1.2 mol.L-1蔗糖液+MS基本培养基的洗涤液洗涤3次,再接种到新鲜的培养基中恢复培养,恢复培养后的胚性愈伤组织能正常进行体细胞胚胎发生、成熟和植株再生.     

猕猴桃体外快繁条件优化及高效再生体系的建立

为进一步优化‘红阳’猕猴桃（Actinidia chinensis cv. Hongyang）组织培养育苗技术体系,采用‘红阳’猕猴桃无菌组培苗的茎尖和叶片为材料,以ZT 1.5 mg·L^-1为外源激素,筛选适宜的基本培养基,并研究不同外源激素及组合对‘红阳’猕猴桃间接、直接器官发生及植株再生的影响。结果表明,适合‘红阳’猕猴桃生长的基本培养基为OM。在OM + 2.0 mg·L^-1 6-BA + 0.5 mg·L^-1 NAA + 0.01 mg·L^-1 2, 4-D培养基中,叶片愈伤诱导率为100%,不定芽发生系数为3.68;而带叶茎尖在OM + 1.5 mg·L^-1 6-BA + 0.5 mg·L^-1 NAA + 1.0 mg·L^-1 KT培养基中培养60 d后,通过直接器官产生基茎丛生芽,其增殖系数可达7.65。试管苗适宜的生根培养基为1/2 OM + 0.5 mg·L^-1 NAA,60 d后平均不定根数为4.87,驯化移栽后成活率为90%以上。选择出了适宜‘红阳’猕猴桃生长的基本培养基,解决了组培苗叶片黄化、植株矮小和畸形的问题,且大幅提高了增殖系数。优化了‘红阳’猕猴桃的人工快繁体系,可为猕猴桃其他品种的研究提供参考。     

蕙兰种子根状茎培养与愈伤组织诱导

以蕙兰种子无菌萌发的根状茎为材料,采用不同的激素配比以及不同的有机添加物,研究根状茎增殖和蕙兰愈伤组织诱导的适宜配方。研究结果表明:在蕙兰根状茎增殖的研究中添加100 g·L^-1香蕉泥在增殖率、分支数以及增加长度上均优于添加100 g·L^-1土豆泥;蕙兰根状茎出芽最佳的培养基:MS+2.0 mg·L^-1 NAA+4.0 mg·L^-1 6 BA+1.0 g·L^-1酪蛋白+1.0 g·L^-1蛋白胨+15 g·L^-1蔗糖+15 g·L^-1葡萄糖;诱导愈伤组织活力好并且诱导率高的培养基配方为MS+0.5 mg·L^-1 2,4 D + 1.0 mg·L^-1 NAA+1.0 mg·L^-1 6 BA+100 g·L^-1椰汁+30 g·L^-1 蔗糖。     

GR24和IAA及互作对甜瓜胚根和不定根生长的影响

为探求促进甜瓜根系生长的有效方法,以种子和幼苗为试材,研究独脚金内酯人工合成类似物（GR24）和吲哚乙酸（IAA）及互作对胚根和不定根生长的影响。结果表明,在0.1~5  mg·L^-1 GR24和  0.01~10 mg·L^-1IAA单一或互作处理下,胚根生长呈先升高后降低趋势,以1  mg·L^-1 GR24+0.1  mg·L^-1 IAA处理效果显著,根长、根数和体积分别为对照的4.32、4.47和4.44倍;胚轴不定根生长在  0.01~1 mg·L^-1GR24和75~500  mg·L^-1 IAA单一或互作处理下也呈先升高后降低趋势,以0.1  mg·L^-1 GR24+250  mg·L^-1 IAA处理的根数、表面积和体积提高幅度最大,分别为对照的2.34、3.97和10.27倍。方差分析表明,GR24和IAA对根系生长均有显著促进作用,且互作效应明显。证明GR24和IAA影响胚根和不定根生长,且存在明显互作和累积效应,但胚根和不定根适宜质量浓度存在差异,结果为瓜类蔬菜根系生长调控提供理论依据和技术支撑。     

北海道黄杨下胚轴的离体培养及植株再生

 以北海道黄杨(Euonymus japonicus 'Cu zhi')下胚轴为外植体进行离体培养，以MS和B5为基本培养基，附加不同浓度的细胞分裂素（6-BA，KT）及生长素（NAA，IBA）诱导下胚轴直接再生不定芽。结果表明，不定芽未经过愈伤组织而直接产生于下胚轴的表皮或近表皮等表层细胞；不同的激素浓度和组合以及不同的培养基对不定芽的分化有影响；下胚轴的不同部位不定芽的分化能力差异显著。适宜不定芽分化的最佳培养体系为MS+1.5 mg·L-16-BA+0.05 mg·L-1NAA，最佳外植体为靠近子叶端的下胚轴部分，其分化率最高达63.64%；不定芽增殖培养基为MS+2.0 mg·L-16-BA+0.2 mg·L-1NAA，增殖系数为3～5；1/2MS+1.0 mg·L-1IBA+100 mg·L-1活性炭适于再生幼苗的生根，生根苗经移栽成活。