725杨组培繁殖技术研究

以美洲黑杨725杨树（Populus deltoides cl.‘725’）叶片为材料,对其再生体系的建立及其分化和生根苗对潮霉素B的浓度筛选进行了研究。结果表明,叶片的最佳消毒体系为75%的酒精消毒时间8 s,0.1%的升汞消毒3 min,最佳诱导愈伤的培养基是MS+6-BA 0.2 mg·L^-1+2,4-D 1.5 mg·L^-1+蔗糖25 g·L^-1+琼脂6 g·L^-1;最佳诱导分化培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.3 mg·L^-1+KT 0.3 mg·L^-1+蔗糖25 g·L^-1+琼脂6 g·L^-1;适宜的继代增殖培养基为MS+6-BA 0.3 mg·L^-1+ NAA 0.05 mg·L^-1+蔗糖25 g·L^-1+琼脂6 g·L^-1;最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.01 mg·L^-1+ IBA 0.7 mg·L^-1+蔗糖20 g·L^-1+琼脂6 g·L^-1;对725杨叶片分化和不定芽生根进行了潮霉素B的敏感性试验,确定叶片分化的临界浓度为2.5 mg·L^-1,生根的临界浓度为1.5 mg·L^-1。     

天台鹅耳枥的组织培养与快速繁殖

为了首次建立天台鹅耳枥的组织培养与植株再生体系,以其茎段、未萌发的新芽及萌发后的嫩芽、叶片等为外植体进行离体培养试验。结果表明,以新生的嫩芽为外植体,成功诱导不定芽的分化与增殖,最佳培养基配方为1/2 MS+6-BA 2.0 mg·L^-1+NAA 0.2 mg·L^-1+PVP 0.2%。壮苗培养基配方为1/2MS+6-BA 0.5 mg·L^-1+NAA 0.05 mg·L^-1;最佳生根培养基配方为1/4 MS+IBA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1。     

金钱松植物愈伤组织诱导和快速增殖条件研究

筛选金钱松产生愈伤组织的最佳外植体和愈伤组织快速增殖的最佳培养条件。以金钱松的叶原基、芽轴和芽为外植体,从不同激素配比、培养温度和光照时间等方面筛选出金钱松产生愈伤组织的最佳培养条件。金钱松植物叶原基是产生愈伤组织的最佳外植体,愈伤组织增殖的最佳培养基为MS+6 BA1.0 mg·L^-1+NAA0.5 mg·L^-1,最适光照时间为每天12 h,最佳培养温度为25 ℃。     

‘傲雪’金银木组培快繁技术研究

以‘傲雪’金银木带腋芽的半木质化茎段为材料,研究外植体消毒方法、不同植物生长调节剂对其继代增殖与生根的影响。结果表明：（1）先用75%的乙醇浸泡30 s,无菌水冲洗4 ~ 6次,然后加入0.1% HgCl₂杀菌7 min,褐化与污染率较低;（2）增殖最佳培养基为MS + 6-BA 1.0 mg·L^-1 + NAA 0.15 mg·L^-1 + GA₃ 0.5 mg·L^-1,增殖系数可达2.93;（3）生根最佳培养基为1/2MS+ IBA1.5 mg·L^-1,生根率达93.9%。以上培养基均添加蔗糖30 g·L^-1,琼脂7 g·L^-1,pH值为6.0。     

激素对金鱼草茎尖快繁及对后期叶序形成的影响

采用组织培养技术,在金鱼草生长至第四或第五节位时取茎尖作为外植体,探讨不同激素对金鱼草快繁及叶序发育的影响。结果表明：（1）配方为MS+1 mg·L^-1 6-BA+0.1 mg·L^-1 NAA的增殖培养基能诱导出大量丛生芽;（2）在不添加激素的1/2MS培养基上,蔗糖浓度为20 g·L^-1时,丛生芽的根系质量最好;（3）外源激素可以调控金鱼草对生叶原基转换为互生叶原基。     

黄山松成熟胚培养与植株再生技术研究

以黄山松(Pinus taiwanensis Hayata)成熟胚为试验材料,进行离体培养与植株再生条件的初步研究。结果表明,黄山松成熟胚外植体表面灭菌以75%的乙醇处理1 min,3%的次氯酸钠处理10 min为适宜;愈伤组织诱导培养基以MS + 1.0 mg·L^-1 6-BA + 0.2 mg·L^-1 NAA为最佳;适宜的不定芽分化培养基为DCR + 1.0 mg·L^-1 6-BA + 0.05 mg·L^-1 NAA;不定芽伸长以DCR + 0.1 mg·L^-1 6-BA + 0.05 mg·L^-1 NAA为适宜;生根培养基以1/2 DCR + 2.0 mg·L^-1 IBA + 0.05 mg·L^-1 NAA为适宜。建立的植株再生体系为黄山松种质资源的保存、遗传改良及优质种苗繁殖等研究提供了参考。     

早中晚熟结球甘蓝不同部位组织的再生特性

对3种不同熟性甘蓝进行培养,以探讨品种不同熟性、不同外植体、不同培养基激素水平等因素对结球甘蓝不定芽诱导、不定芽增殖的影响。结果表明,3种培养基中MS培养基最适于甘蓝组织培养,在MS培养基上京丰甘蓝的下胚轴在激素水平为NAA 0.45 mg·L^-1和6 BA 3.0 mg·L^-1时的不定芽分化率最高（76.7%）,中甘十一的下胚轴和晚丰甘蓝带柄子叶在NAA 0.6 mg·L^-1和6 BA 4.5 mg·L^-1时不定芽分化率最高,分别为83.3%和90%;京丰、晚丰和中甘十一的不定芽在激素分别为NAA 0.3 mg·L^-1和 6 BA 7.5 mg·L^-1、NAA 0.6 mg·L^-1和6 BA 7.5 mg·L^-1、NAA 0.3 mg·L^-1和6 BA 1.5 mg·L^-1时增殖系数分别达到3.69、4.125和3.45。可见,不同熟性甘蓝的不同部位组织不定芽的产生对基础培养基和激素配比具有比较严格的选择性。     

掌叶覆盆子离体培养适宜外植体的筛选及脱分化条件研究

以安徽地区掌叶覆盆子（Rubus chingii Hu）为试验材料，MS培养基为基本的培养基，研究了在不同外植体和不同植物生长调节剂水平下对其愈伤形成率的影响和不同因素的抗氧化试验对其污染率与褐化率的影响，筛选出能稳定形成健康的愈伤组织的培养条件。结果表明，最适合掌叶覆盆子愈伤组织形成的外植体为腋芽；最佳外植体的表面灭菌条件为75 %乙醇溶液处理30 s和0.1 %HgCl₂溶液处理8 min；最优掌叶覆盆子愈伤形成的培养基为MS + 5.0 g·L ^-1 PVP + 0.5 mg·L ^-1 6-BA + 0.1 mg·L ^-1 NAA + 0.5 mg·L ^-1 GA₃ + 25 g·L ^-1蔗糖 + 6.0 g·L ^-1琼脂；最适合暗培养时间为7 d；最适合的抗氧化剂为PVP。在上述条件下，掌叶覆盆子的愈伤组织形成率为96.67%，且能基本抑制外植体的褐化现象。该研究结果为掌叶覆盆子的种苗快繁及后期开展覆盆子次生物质代谢途径的研究提供了材料基础。     

魔芋愈伤组织诱导、分化及植株再生的初步研究

采用白魔芋(Amorphophallusalbus)块茎为外植体,以MS培养基为基本培养基,在不同生长调节剂组合的诱导培养基和分化培养基上进行培养。试验结果显示,在MS+0.5mg·L-16 BA+0.5mg·L-1NAA、MS+0.5mg·L-16 BA+0.5mg·L-12,4 D及MS+1.0mg·L-16-BA+1.0mg·L-12,4 D的培养基上容易诱导愈伤组织(诱导效率分别为92%、96%和93%),且愈伤组织容易分化;在分化培养基MS+1.0mg·L-16 BA+0.1mg·L-1NAA及MS+1.0mg·L-16 BA+0.5mg·L-1NAA上,愈伤组织容易分化(分化效率分别为86%和52%)。将在MS+1.0mg·L-16 BA+0.1mg·L-1NAA培养基上分化出的不定根和不定芽转至MS培养基上,30d后培养出完整植株。     

北青兰(Dracocephalum argunense)叶片组织培养的研究

对北青兰叶片的组织培养过程中的外植体不同消毒时间 ,愈伤诱导及芽丛形成、生根培养基进行筛选。结果表明 ,用 0 .10 %升汞对叶片消毒 3m in效果最好 ,污染率为 2 6 .70 % ,并且萌发率达到 90 %以上 ;最佳愈伤诱导培养基为 MS+2 .0 0 mg· L- 1 6 - BA +0 .5 0 m g· L- 1 NAA;最佳分化与增殖培养基为 MS+2 .0 0 mg· L- 1 6 - BA +0 .2 0mg· L- 1 NAA;最佳生根培养基为 1/2 MS+0 .0 5 m g· L- 1 NAA     

黄精的组织培养与植株再生

研究离体条件下黄精不同外植体的愈伤组织诱导及其植株再生。结果表明,黄精的根茎、嫩茎及幼嫩的组培叶片在MS+6-BA 2.0 mg.L-1+2,4-D 1.0 mg.L-1和MS+6-BA 2.0 mg.L-1+NAA 1.0mg.L-1的培养基中均诱导产生愈伤组织,并在MS+6-BA2.0 mg.L-1+2,4-D2.0 mg.L-1和MS+6-BA2.0 mg.L-1+NAA2.0 mg.L-1的培养基上继代增殖良好。黄精愈伤组织在MS+6-BA3.0 mg.L-1+IAA1.0 mg.L-1的培养基上可诱导出不定芽,出芽率达66.33%,平均每块愈伤组织可分化出5.2个芽。试管苗在MS附加IAA0.5 mg.L-1培养基上诱导生根,生根率达86.67%。     

不同有机添加物及柠檬酸钠组合对春兰根状茎增殖的影响

通过添加不同浓度猕猴桃汁、香蕉汁、梨汁、苹果汁、白萝卜汁、胡萝卜汁、土豆汁、红薯汁等8种有机物及柠檬酸钠组合,研究其对春兰根状茎增殖及抗褐化效果的影响。结果表明,单独添加猕猴桃汁100.0 g·L-1、梨汁100.0 g·L-1或柠檬酸钠1.0 g·L-1比对照能显著促进根状茎增殖,增殖中生长倍数分别为3.9、2.4和2.2,梨汁和猕猴桃汁处理中,根状茎中细胞分裂相关基因CgCki、CgCKS、CgClins、CgE2F和CgRb表达量显著提高。1/2MS+NAA5.0 mg·L-1+活性炭1.0 g·L-1+猕猴桃汁100.0 g·L-1+柠檬酸钠1.0 g·L-1组合对春兰根状茎增殖及抗褐化效果最好,根状茎增殖的生长倍数为4.2,细胞分裂相关基因CgCDKS、CgCki、CgCKS、CgClins、CgE2F和CgRb表达显著提高。因此,在春兰组培快繁过程中猕猴桃汁+柠檬酸钠组合可以有效地促进根状茎增殖,并防止根状茎褐化。     

大花蕙兰原球茎增殖、分化与离体保存的研究

以大花蕙兰原球茎为材料,从培养时间、基本培养基、糖浓度、培养方式及切割方式5个方面探讨了原球茎增殖、分化及离体保存的问题。结果表明,2个月内随着培养时间的延长,原球茎增殖与分化越显著,但培养2个月后,原球茎增殖不明显,分化却持续增加;1/2MS基本培养基利于原球茎增殖与分化,而3MS基本培养基利于原球茎保存;糖浓度的高低对原球茎增殖与分化影响显著,20 g·L~(-1)蔗糖适于原球茎保存,50 g·L~(-1)蔗糖适于原球茎增殖,而原球茎分化成苗应选用30 g·L~(-1)白糖;在3种培养方式中,固体培养利于原球茎分化,液体振荡培养利于原球茎增殖,液体静置培养利于原球茎离体保存;片状切割法利于原球茎增殖与分化,整体剥离接种法利于原球茎保存。即以2.0 mg·L~(-1) 6-BA+0.1 mg·L~(-1) NAA为激素组合时,以片状切割法接种原球茎于1/2MS+50 g·L~(-1)蔗糖的培养基中并以液体振荡方式培养时利于原球茎增殖;以片状切割法接种原球茎于1/2MS+30 g·L~(-1)白糖的培养基添中并以固体方式培养时利于原球茎分化成试管苗;以整体剥离法接种原球茎于3MS+20 g·L~(-1)蔗糖培养基中并以液体静置方式培养时利于原球茎保存。上述结论为大花蕙兰试管苗快速繁殖与离体保存提供了有效的技术支持。     

圆齿野鸦椿种子外植体的快繁体系

以圆齿野鸦椿的成熟种子为外植体,研究组培繁殖育苗技术,以筛选最适的培养基配方.结果表明:(1)激素种类和含量对种子无菌株系建立的影响不同,BA含量为0.5-2.5 mg.L-1时,种子的成活率随BA含量的升高而下降,而NAA对其影响不大,种子无菌株系建立的最佳培养基为MS+0.5 mg.L-1BA+0.3 mg.L-1NAA+7.5 g.L-1琼脂+20 g.L-1蔗糖;(2)在细胞分裂素含量相同的情况下,芽的增殖系数随着生长素含量的增加呈先增大后减小的趋势,在MS+1.0 mg.L-1BA+0.5 mg.L-1NAA+1.0 mg.L-1IAA+7.5 g.L-1琼脂+20 g.L-1蔗糖培育基上,发芽率达50%,增殖系数为3.70,芽饱满健壮;(3)细胞分裂素和生长素适当的配比是芽增殖的关键,最佳培养基为MS+2.0 mg.L-1BA+0.3 mg.L-1NAA+1.0 mg.L-1IAA+7.5 g.L-1琼脂+20 g.L-1蔗糖,增殖倍数达5.0;(4)一定含量的NAA有利于诱导长根,而IBA则不同,培养基中NAA的含量为0.1 mg.L-1,IBA的含量为0.5 mg.L-1时,生根率达95%,根长为3.51 cm.     

绒毛狼尾草幼穗的愈伤组织诱导与植株再生

以绒毛狼尾草幼嫩花穗为材料,研究了培养基种类和2,4-D对愈伤组织诱导以及6-BA对分化的影响。结果表明,MS较N6培养基适合绒毛狼尾草的组织培养。在附加3 mg·L-1 2,4-D的MS培养基中愈伤组织诱导率最高,达到100%。分化培养基以附加1.0 mg·L-1 6-BA的MS培养基为最佳,分化率为44.0%。在1/2MS培养基中附加0.5 mg·L-1 NAA和0.3 mg·L-1活性炭进行生根培养,根系生长健壮,生根率达100%。     

猕猴桃体外快繁条件优化及高效再生体系的建立

为进一步优化‘红阳’猕猴桃（Actinidia chinensis cv. Hongyang）组织培养育苗技术体系,采用‘红阳’猕猴桃无菌组培苗的茎尖和叶片为材料,以ZT 1.5 mg·L^-1为外源激素,筛选适宜的基本培养基,并研究不同外源激素及组合对‘红阳’猕猴桃间接、直接器官发生及植株再生的影响。结果表明,适合‘红阳’猕猴桃生长的基本培养基为OM。在OM + 2.0 mg·L^-1 6-BA + 0.5 mg·L^-1 NAA + 0.01 mg·L^-1 2, 4-D培养基中,叶片愈伤诱导率为100%,不定芽发生系数为3.68;而带叶茎尖在OM + 1.5 mg·L^-1 6-BA + 0.5 mg·L^-1 NAA + 1.0 mg·L^-1 KT培养基中培养60 d后,通过直接器官产生基茎丛生芽,其增殖系数可达7.65。试管苗适宜的生根培养基为1/2 OM + 0.5 mg·L^-1 NAA,60 d后平均不定根数为4.87,驯化移栽后成活率为90%以上。选择出了适宜‘红阳’猕猴桃生长的基本培养基,解决了组培苗叶片黄化、植株矮小和畸形的问题,且大幅提高了增殖系数。优化了‘红阳’猕猴桃的人工快繁体系,可为猕猴桃其他品种的研究提供参考。     

Adventitious shoot regeneration from the leaves of some pear varieties (Pyrus spp.) grown in vitro

The pear (Pyrus spp.) is one of the most important temperate fruit crops. A complete protocol for adventitious shoot regeneration was developed from the leaves of four pear varieties grown in vitro: Abbe Fetel, Yali, Packham’s Triumph and Aikansui, and the Chinese rootstock variety Duli. Shoot explants were collected from the field and cultured in vitro in Murashige and Skoog (MS) media supplemented with 1.0 mg·L⁻¹ 6-benzylaminopurine (BA) and 0.1 mg·L⁻¹ indole-3-butyric acid (IBA). After four weeks, leaf explants of all 5 varieties grown in vitro were excised and cultured in MS media supplemented with 0.0 mg·L⁻¹, 0.2mg·L⁻¹, 0.5 mg·L⁻¹, 1.0 mg·L⁻¹ and 2.0 mg·L⁻¹ naphthaleneacetic acid (NAA) and 5.0 mg·L⁻¹ BA or with 1.0 mg·L⁻¹, 2.0 mg·L⁻¹ and 4.0 mg·L⁻¹ thidiazuron (TDZ). The cultures were maintained in darkness for 21 days for shoot induction in the shoot induction medium (IM), then transferred to the shoot expression medium (EM) in 1.0 mg·L⁻¹ TDZ without any auxins and kept in a growth room at (25±2)°C under a 16/8 h light/dark photoperiod regime for 8 weeks. Finally, the shoots were transferred to the MS shoot elongation medium (SEM) supplemented with 0.2 mg·L⁻¹ BA, 0.1 mg·L⁻¹ IBA and 0.2 mg·L⁻¹ gibberellic acid (GA₃). A combination of TDZ and NAA had a significant effect on the number of shoot regenerations in all 5 tested varieties. The maximum mean number of shoots and maximum number of shoots per leaf obtained from Yali variety were 11.8 (P⩽0.001) and 22, followed by Aikansui with 6.6 (P⩽0.001) and 4.6, and Duli with 8 (P⩽0.001) and 12, all arising from the combination of 0.2 mg·L⁻¹ NAA with 1.0 mg·L⁻¹ TDZ. For Packham’s Triumph and Abbe Fetel, the maximum mean number of shoots and maximum number of shoots per leaf were 5.6 (P⩽0.001), 4.8 and 8 (P⩽0.001), and 11, respectively, from the combination of NAA (1.0 mg·L⁻¹) and TDZ (2.0 mg·L⁻¹). Abbe Fetel was the only variety which produced significantly higher adventitious shoots from the two different combinations of 1.0 mg·L⁻¹ NAA and 5.0 mg·L⁻¹ BA (P⩽0.05), and 2.0 mg·L⁻¹ NAA and 5.0 mg·L⁻¹ BA (P⩽0.01). Some of the most prominent problems associated with shoot proliferation and regeneration were also observed and discussed in this paper.