江西铅山红芽芋超低温疗法脱毒苗的离体保存

以江西铅山红芽芋超低温疗法脱毒苗为试验材料,从温度、培养基养分水平、培养基物理状态、渗透压调节剂、生长抑制剂、活性炭等方面对铅山红芽芋超低温疗法脱毒苗进行离体保存,从DNA分子标记、气孔参数、光合参数和叶绿素荧光参数等方面衡量江西铅山红芽芋超低温疗法脱毒苗离体保存后的遗传稳定性,并对江西铅山红芽芋超低温疗法脱毒苗离体保存后相关基因表达水平进行qRT-PCR检测.结果表明,5℃低温、1 mg/L多效唑(PP333)、18 g/L蔗糖、0.6 g/L琼脂、1/8 MS、2 g/L活性炭、20 g/L甘露醇、0.5 mg/L脱落酸均有利于江西铅山红芽芋超低温疗法脱毒苗的离体保存,并且可以显著提高其离体保存过程中蔗糖合成酶、超氧化物歧化酶[Cu-Zn]、过氧化物酶、多胺氧化酶、衰老相关半胱氨酸蛋白酶、L-抗坏血酸氧化酶等基因的表达水平.与常温继代苗对照组相比,江西铅山红芽芋超低温疗法脱毒苗离体保存后复苏苗经SSR检测,电泳峰型一致,遗传距离为0,遗传相似系数为1,可以聚为一类;铅山红芽芋超低温疗法脱毒苗离体保存后复苏苗和常温继代苗对照组的气孔长径、短径、周长、气孔数量、气孔密度、净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、细胞间CO2浓度(Ci)、蒸腾速率(Tr)、实际光化学效率ΦPSⅡ、捕获激发能效率Fv′/Fm′、光化学猝灭系数(qP)、非光化学猝灭系数NPQ均无显著差异.由此可见,铅山红芽芋超低温疗法脱毒苗离体保存可以保证其种质遗传稳定性.     

超低温疗法在薯芋类蔬菜脱毒中的应用进展

超低温疗法相对传统脱毒方法具有操作相对容易、时间周期短、脱毒率高等优势。从超低温疗法原理、种类及优势等方面进行了阐述,并展望了通过处理材料不同生理状态研究、优化预培养因子等技术,可有效提高超低温疗法在薯芋类蔬菜脱毒上应用。     

提高芋外植体灭菌效果的研究

研究了芋脱毒培养时降低外植体污染率的方法。结果表明,芋茎尖脱毒时,通过调整灭菌前芽的长度和灭菌时间,能达到比较理想的灭菌效果,大幅度降低污染率,获得较高的转绿率。即灭菌前剥去外部叶鞘,仅保留2-3层,芋芽长度小于1cm,氯化汞灭菌时间缩短为8rain,污染率可降至26.6％以下,转绿率提高至66.7％以上。     

江西铅山红芽芋抗病蛋白基因克隆和表达分析

对江西铅山红芽芋抗病蛋白基因进行克隆和表达分析，以期为解析江西铅山红芽芋的抗病机制奠定基础，同时为江西铅山红芽芋的遗传改良提供候选基因。通过江西铅山红芽芋试管苗转录组数据库筛选到江西铅山红芽芋抗病蛋白基因的核心片段，利用RT-PCR技术克隆江西铅山红芽芋抗病蛋白基因，并用生物信息学方法和实时定量PCR进行序列分析和器官表达分析。结果表明，江西铅山红芽芋抗病蛋白基因cDNA总长度为264 bp, G+C含量为46.59%;江西铅山红芽芋抗病蛋白由88个氨基酸组成，分子量为10 116.53 u,等电点为6.42,为亲水性蛋白；二级结构由α-螺旋(23.68%)、β-片层(14.77%)、无规则卷曲(61.36%)构成；三级结构为单体；江西铅山红芽芋抗病蛋白主要存在于叶绿体和细胞核中；江西铅山红芽芋抗病蛋白在进化上与芋(Colocasia esculenta)的亲缘关系较近，尤其是与芋的hypothetical peotein Taro＿046555(MQM13626.1)、hypothetical peotein Taro＿046554(MQM13625.1)和hypothetical ...     

六月红早熟芋茎尖脱毒研究初报

对福建永定县六月红早熟芋的茎尖脱毒技术进行了初步研究.采用正交设计试验,分析了6-BA与NAA互作对茎尖组培快繁效果的影响,筛选出适宜六月红早熟芋茎尖诱导、增殖的培养基分别为MS 6-BA1.0 mg/L NAA0.5 mg/L和MS 6-BA1.0 mg/L NAA0.2 mg/L;芋花叶病毒检测结果表明,获得的茎尖组培苗脱毒率达91.24%.     

宁糯芋1号茎尖组培快繁及种芋生产

为调整福建省芋栽培品种结构,加快优良品种推广应用,以宁糯芋1号田间生长的块茎顶芽或侧芽为外植体,运用茎尖分生组织培养进行了不同TDZ浓度处理试验获得脱毒苗,结果发现,与6-BA相比,TDZ更适于芋茎尖诱导成芽,在MS培养基中附加0.1～0.2 mg/L的TDZ能显著促进芋茎尖的萌动,产生丛生芽。茎尖初代培养基为MS+TDZ 0.2 mg/L时成苗率达78%,继代增殖培养基MS+TDZ 0.3 mg/L繁殖系数达7.88,生根壮苗培养基1/2MS+NAA 0.5 mg/L+活性炭0.2 mg/L。脱毒芋种产量比对照原品种提高29.7%,达到极显著差异水平。     

靖江香沙芋脱毒组培技术效应及种芋扩繁要点

对靖江香沙芋植株田间感病情况随机进行调查,发现具有明显感病症状的植株达到63.3%。利用芋茎尖脱毒技术,培育靖江香沙芋脱毒组培苗,并采用花叶病毒(DMV)酶联免疫分析法进行芋花叶病毒检测,组培苗脱毒率达48%。脱毒组培苗移栽于全基质苗床,成活率为100%,且当代芋头产量达到52 500 kg/hm2。此外,提出了靖江香沙芋脱毒种芋扩繁体系的技术要点。     

催芽措施对红芽芋生长及产量的影响

研究催芽措施对红芽芋生长及产量的影响，结果表明：采用大棚加地膜覆盖对红芽芋催芽效果最好。催芽处理植株高、整齐度好，叶片抽生速度快，能提高红芽芋产量，比未催芽处理增产26．1％，增产达极显著水平。     

园艺植物脱毒技术方法研究进展

植物脱毒的方法有热处理脱毒法、化学疗法、组织培养脱毒法、微体嫁接离体培养脱毒法和超低温脱毒法。超低温脱毒以其操作简便,将成为下一个应用最广泛的脱毒方法;组织培养脱毒法中的花药培养脱毒的脱毒率为100%,是植物脱毒的又一个新的趋势。文中对这些脱毒方法在园艺植物中的研究进展进行了综述。     

红芽密节香沙芋

红芽密节香沙芋顾名思义,红芽、密节是它最典型的外部特征。红芽是指它的芋芽呈红色,这一外部特征是不同的香沙芋品种都普遍具备的一个特征。而密节则是这种香沙芋独有的,它是指球茎表皮间距小于10mm,而其它香沙芋品种的球茎表皮间距都大于10mm,这也是红芽密节香沙芋与其它香沙     

基于间歇浸没式生物反应器的荔浦芋组培快繁体系优化

[目的]优化基于间歇浸没式生物反应器系统(TIBs)的荔浦芋组培快繁体系,为荔浦芋脱毒组培苗的工厂化、自动化生产提供技术支持.[方法]以荔浦芋新品种桂芋2号茎尖分生组织脱毒诱导获得的不定芽为外植体,利用TIBs培养系统筛选出适合组培苗增殖及生根的最佳激素组合,并分析不同继代材料、接种密度及浸没间歇频率对组培苗增殖和生根效果的影响.[结果]利用TIBs培养系统可有效提高荔浦芋组培苗的增殖效果,增殖倍数达28.96倍,约是传统固体培养方法(2.87倍)的10倍,且组培苗的株高和生根数均极显著高于传统固体培养植株(P<0.01).在TIBs培养系统中,含4.00 mg/L 6-苄氨基嘌呤(6-BA)+0.05 mg/L萘乙酸(NAA)的培养基最适合荔浦芋组培苗增殖和生长,其组培苗增殖倍数为32.04倍.当接种材料为第4代荔浦芋继代材料、接种密度为10株/L、浸没间歇频率为5 min/6 h时,最有利于组培苗增殖和生长,增殖倍数均在30.00倍以上,可缩短萌芽时间,组培苗长势良好,且培养基污染率为0.[结论]利用TIBs培养系统对荔浦芋继代材料进行高效快繁具有可行性,可为实现及推动荔浦芋健康种苗繁育的工厂化生产提供技术支持.     

江西铅山红芽芋和青秆芋的转录组比较分析

为探究江西铅山红芽芋和江西铅山青秆芋之间的分子差异,以江西铅山红芽芋(HYY组)和江西铅山青秆芋(QGY组)的试管苗为试验材料进行转录组分析。结果表明:HYY组Clean reads为41 298 676,GC含量为53.09%;QGY组Clean reads为45 551 860,GC含量为51.17%。HYY组和QGY组表达量FPKM的对数值在0~2,表达量密度在0~0.7。HYY组和QGY组表达的共有基因数为14 038,HYY组单独表达的基因数为17 843,QGY组单独表达的基因数为18 634。HYY组和QGY组表达量的相关系数为0.035,样本间相关性较差。HYY组和QGY组共产生差异表达基因32 555个,与QGY组比较,HYY组上调基因15 887,下调基因16 668。GO 富集分析显示,差异基因主要注释到多糖代谢过程、基因沉默、果胶分解代谢过程、碳水化合物代谢过程、生长素激活的信号通路、细胞外区、膜的固有成分、膜的组成成分、膜部件、凋亡细胞、作用于糖基键水解酶活性、水解O-糖基化合物的水解酶活性、蛋白质二聚活性、DNA结合、氧化还原酶活性对二酚及其相关物质的作用等功能。KEGG富集分析显示,差异基因主要注释到植物激素信号转导、植物病原相互作用、半胱氨酸与蛋氨酸代谢、苯丙酸生物合成、皮质醇合成与分泌、过氧化物酶体、植物MAPK信号途径、不匹配修复、淀粉和蔗糖代谢、硫代谢、戊糖和葡萄糖醛酸相互转化、C型凝集素受体信号通路、甘油酯代谢、不饱和脂肪酸的生物合成、α-亚麻酸代谢、二萜生物合成、类黄酮生物合成、脂肪酸延长、光合作用、吲哚生物碱生物合成等途径。     

芋芽继代培养中激素、水解乳蛋白、碳源的调节研究

在继代培养中,为提高芋组培苗的增殖效果,降低组培苗生产成本,获得健壮的芋头组培苗。实验从激素、水解乳蛋白、碳源三个方面研究了其对芋组培芽继代培养的调节作用。结果表明:BA 4.0 mg/L NAA 0.1~0.2 mg/L的激素配比有利于芋芽的增殖,但当NAA的浓度为0.1 mg/L时,可大大抑制多次继代后根的发生。不同浓度水解乳蛋白(LH)对芋芽的分化率无显著差异,但添加LH可提高芋芽的生长速度,当LH为500 mg/L时,芋苗最高。蔗糖、食用白糖、葡萄糖对芋芽的增殖和生根效果较好,麦芽糖稍差;从降低生产成本度考虑,可选用食用白糖作为芋芽继代培养的碳源。     

马铃薯脱病毒与快繁技术研究

[目的]获得马铃薯脱毒试管苗及使长期保存导致生长势退化的试管苗复壮。[方法]设置不同的灭菌方法和不同的培养基进行马铃薯茎尖脱病毒及脱毒苗的快繁技术研究。[结果]芽外植体灭菌效果以质量分数5%的NaClO灭菌时间2 min与0.1%的HgCl2灭菌时间3 min组合效果最佳;茎尖诱导的最佳培养基为MS+GA30.1 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+IBA 0.2 mg/L,平均诱导率为58.25%;从MS液体和MS固体2种不同的培养基来看,MS液体培养基可以起到壮苗的作用;从扦插和平铺2种不同接种方式来看,平铺的接种方式可以加快脱毒苗繁殖速度。[结论]为马铃薯的组织培养快繁提供了参考依据。     

怀地黄脱毒试管苗生根移栽技术的研究

怀地黄为传统大宗中药材,为探究其脱毒试管苗生根移栽的最佳条件,提高移栽成活率,以怀地黄脱毒试管苗85-5为材料,探索了不同因子对地黄试管苗管内和管外生根的影响以及适宜于试管苗移栽的基质配比。结果表明:管内生根最适的PP333质量浓度为0.10mg/L,此时试管苗的根数达到28条,株高为4.0cm;接种密度为6个/瓶时,株高、叶片数、根数、根长都达到了较为理想的状态,根数达38条,株高为3.3cm;接种部位为顶芽时根数较多,达到38条,株高达到3.5cm,与侧芽相比有显著性差异;管外生根NAA生根效果明显优于IBA,2种激素最适浓度和处理时间分别为:NAA 50mg/L处理60min,苗存活率100%,生根率90%;IBA 50mg/L处理15min,苗的存活率95%,生根率85%;移栽基质的最适质量比例为草炭土∶蛭石=1∶2。     

我国马铃薯主产区病毒病发生情况调查

为了解我国马铃薯病毒病发生情况,在马铃薯主产区黑龙江、内蒙古、甘肃、云南等马铃薯田采集了具有典型病毒病症状的样品、疑似样品和随机无症样品,试管苗和原原种为随机样品,共649份。应用DASELISA方法筛查6种马铃薯主要病毒:PVX、PVY、PVS、PLRV、PVM和PVA。结果表明:129份样品为阳性,PVY的检出率最高,为9.86%,PVS次之,为6.47%;试管苗PVS检出最多,为32份,原原种PVX检出最多,为10份,大田样品PVY病毒发生比例最高,为54份;有38份样品是由多种病毒复合侵染造成的,大田PVY+PVS复合侵染率最高,为2.93%,PVS+PVY+PLRV次之,为0.98%,试管苗PVS+PVM复合侵染率最高,为4.85%。通过历年的检测结果比较,试管苗中PVS病毒检出率最高,原原种中PVX和PLRV病毒成为危害最为严重的病害,大田样品中PVY检出率一直居高不下。     

草莓脱毒试管苗炼苗及移栽技术研究

对草莓脱毒试管苗炼苗移栽技术及其影响因素进行了探讨研究,结果表明:培养瓶的开口方法、组培苗的根部冲洗、组培苗定植移栽的密度和方法,以及栽培棚室的温度、湿度等,均能影响草莓脱毒试管苗的成活及生长状况。通过试验,总结出一套适宜于草莓脱毒试管苗炼苗移栽的技术和方法。     

吲哚3-丁酸诱导马铃薯脱毒试管苗生根研究

通过设置2个浓度的吲哚3-丁酸,加入常规的MS培养基中,与常规的MS培养基做对比试验.探讨吲哚3-丁酸对马铃薯脱毒试管苗生根的影响及最佳使用浓度.结果表明0.01mg/L和0.1mg/L的吲哚3-丁酸都能有效地促进脱毒组培苗的生根及植株的生长,其中0.01mg/L的浓度对促进植株的生长上有更好的效果,0.1mg/L浓度的对植株的生长有更好的促进作用.此试验为进一步探讨吲哚3-丁酸在马铃薯脱毒苗上的促生根的应用打下基础.     

蓝莓芽诱导与再生研究

采用改良WPM为基本培养基,研究蓝莓的组培育苗技术。结果表明：以当年生绿枝茎段为外植体可有效获得无菌苗;蓝莓茎段的离体增殖率受到培养基中细胞分裂素的调控,ZT 1-2mg／Li和2ip 10～20mg／L的效果较好,初代培养增殖率3-6倍。继代培养时茎段和叶片也可分别再生无菌苗6-8周继代1次,增殖率可达10倍以上。蓝莓试管苗瓶内生根率不高,0．02～0．2mg／L IBA可诱导蓝莓生根,正常生根率30％～50％。