犬腺病毒Ⅱ型病毒株的致弱及狐狸脑炎弱毒苗的研究

 将犬腺病毒Ⅱ型（CAV-2）病毒株用PK#-15细胞继代53代后毒力减弱，然后用A#-72细胞继续继代20代。经对继代毒的毒力测定和抗原稳定性试验证明，53-73代毒对狐无致病性，而且毒力稳定。我们选用60-69代毒做制苗种毒，成功地研制出狐狸脑炎弱毒苗。试验表明，该苗具有使用安全、免疫原性好等优点。狐免疫接种10#+(4、5)TCID50/ml疫苗，保护率可达100%，该苗免疫21天后狐狸能耐受10#+2CAV-1强毒的攻击，免疫期为一年。现场应用26754头份均取得良好的免疫效果。     

鸭肝炎病毒A_(66)弱毒株的研究

鸭肝炎病毒I型A_(66)鸡胚化弱毒株,对雏鸭安全、稳定.鸡胚混合毒滴度为10~(7.36-8.09)CELD50/0.1毫升.以1.8万DLD50/0.1毫升的强毒攻击,其半数免疫量为10~(6.16)MID50/0.1毫升;皮下注射的免疫产生期为接种后48小时.免疫持续期测至45天,全部保护.用本弱毒苗免疫雏鸭,可预防I型鸭病毒性肝炎的发生.以该弱毒苗高度免疫成年鸭或猪血制备的抗血清,对雏鸭能产生坚强的被动免疫力.     

鸭副粘病毒弱毒株的选育

应用SPF鸡胚成纤维细胞(CEF)连续传代培育出鸭副粘病毒弱毒疫苗株,并测定该弱毒株的部分生物学特性.结果显示:该弱毒株已失去对无母源抗体番鸭的致病性,在雏番鸭体内连续肓传5代,未见毒力返强现象;对CEF的TCID50稳定在10-6.0～10-6.5·(0.1 mL)-1;无母源抗体的番鸭免疫不同代次弱毒后7 d攻击鸭副粘病毒强毒,保护率均在90％以上.结果表明该弱毒株安全性好、遗传性稳定、免疫原性强,可用于制备鸭副粘病毒病疫苗.     

猪轮状病毒的分离及弱毒株的培育

从济宁地区猪场采集表现有腹泻症状的病猪粪便 ,经胰蛋白酶 (2 0 μg/ml)处理 ,接种已长满单层的PK15细胞 ,培养至第 3代细胞边缘变模糊 ,细胞融合、堆积、变圆 ,最后细胞脱落。经过动物回归试验、电子显微镜观察、血清学等试验结果表明 ,分离获得的病毒为猪轮状病毒 (PRV) ,命名为SD2 2毒株。将分离的PRV经PK15细胞连续传 10 0代 ,获得 1株免疫原性好的弱毒株 ,免疫仔猪 ,强毒攻击保护率为 90 %。     

鸡传染性支气管炎弱毒苗的毒力返强检测

将鸡传染性支气管炎疫苗毒接种10日龄鸡胚,并传至12代,观察鸡胚病变,于72 h收集尿囊液进行负染电镜观察和血凝试验.透射电镜观察到典型的冠状病毒颗粒,致鸡胚的典型病变作用和血凝活性随培养代次的增加显著增强.结果表明,该弱毒苗病毒毒力返强,存在安全隐患.     

番鸭呼肠孤病毒弱毒株选育研究

应用番鸭胚成纤维细胞和鸡胚成纤维细胞(CEF)交替传代选育出适应CEF繁殖的番鸭呼肠孤病毒弱毒疫苗株。该弱毒株已失去对1日龄雏番鸭的致病性,对CEF的TCID50稳定在10-5~10-5.5;在雏番鸭体内连续盲传5代,未见毒力返强现象;1日龄雏番鸭免疫不同代次弱毒后7 d攻击番鸭呼肠孤病毒强毒,保护率均在88%以上,且不同代次弱毒的外源病毒检验结果均为阴性。上述结果表明该弱毒株无外源病毒污染、安全性好、遗传性稳定、免疫原性强,可用于制备番鸭呼肠孤病毒病活疫苗。     

弓形虫紫外线弱毒虫株的培育及免疫研究（第二报）

本文报道了弓形虫NT强毒虫株,经紫外线全暴露垂直连续照射,通过细胞致弱培养筛选出抗辐射变异虫株NTA-Ⅲ系。本虫对猪、兔和小鼠的毒力均明显减弱。猪安全试验116头,21头出现弱反应,占18.1％,无重病或死亡;非带虫免疫试验36头,连续测35128天,均末查到虫体和包囊。用含虫数10~5/毫升弱毒虫苗每头猪接种1毫升,6个月免疫保护力为100％。     

Ⅰ型鸭肝炎病毒鸡胚致弱毒MY株的培育及实验研究

将I型鸭肝炎分离株XC-1适应鸡胚,培育成1株毒力弱而稳定、免疫原性良好的鸭肝炎鸡胚化MY弱毒株.该毒株毒力为1011.40ELD50/0.1mL,1013.62TCID50/0.1mL;对雏鸭无致病性;在雏鸭体内连续盲传5代未见毒力返强;1日龄雏鸭用8,000 ELD)50/0.1mL的MY株致弱毒腿部肌注0.2ml免疫后3d强毒原液0.5mL/只攻击,可产生2/5的保护,第6d-21d产生完全保护,免疫后第3d、5d、6d、7d、9d、14d、21d抗DHV I的中和抗体滴度分别为10-1.38、10-1.55、10-1.64、10-1.65、10-1.68、10-1.8、10-1.89,表明MY是1株理想的鸡胚弱毒疫苗后备株;通过MY株的鸡胚的繁殖规律观察,确定该病毒的最佳收毒时间为接胚后的72h～84h,为疫苗生产条件的建立提供了依据.     

猪轮状病毒免疫初探——Ⅰ.用强毒进行非肠道途径免疫

根据何家惠等试验证实,猪轮状病毒经肌肉或腹腔注射不会引起肠道排毒。为了加快免疫工作的进展,在弱毒株未培育成功之前,用强毒通过非肠道途径对母猪及仔猪进行了免疫试验。 材料和方法 1.猪轮状病毒株 用本组从自然病例中分离到的南86号毒株MA104细胞上连续传代繁殖至35～37代。 2.猪轮状病毒苗的组成 (1)母猪免疫疫苗:用南86号毒株的35代或37代MA104细胞培养毒(MA86F_(35)或MA86F_(37)),蚀斑滴度10~(-7),临用前,加入20%氢氧化铝及0.05％皂素,充分混合。     

猪源伪狂犬病病毒变异株传代致弱株LA2017株的获得与鉴定

将猪源伪狂犬病毒(Pseudorabies virus, PRV)的强毒变异株AH02LA株在鸡胚成纤维细胞上进行连续传代,获得了不同代次的弱毒株,检测其安全性、免疫效力、生长特性及稳定性,并对其gE基因上、下游片段进行测序。对PRV AH02LA株的F_(151)代进行3轮挑斑纯化,获得了1个毒株并将其命名为PRV LA2017株。用该毒株接种(剂量为10^{(6.00 )}TCID_(50)/头)试验猪,在接种后14 d内无任何临床症状;在免疫(10(6.00 )TCID_(50)/头)试验猪,在接种后14 d内无任何临床症状;在免疫(10^{(6.00 )}TCID_(50)/头)后21 d攻毒(10(6.00 )TCID_(50)/头)后21 d攻毒(10^{(6.50 )}TCID_(50)/头),所有试验猪未出现任何猪伪狂犬病症状,体温正常,没有排毒。在攻毒前用ELISA检测,PRV gB抗体全部为阳性,PRV gE抗体全部为阴性;在攻毒后14 d这两种抗体均为阳性,体现出良好的安全性与保护性。对照组BarthaK61在攻毒后试验猪全部发病,体温高至40.5℃以上,且均检出排毒。测序结果显示LA2017株的gI部分基因与gE全部基因缺失。该毒株在CEF细胞及ST细胞上生长良好,在CEF上的滴度达到10(6.50 )TCID_(50)/头),所有试验猪未出现任何猪伪狂犬病症状,体温正常,没有排毒。在攻毒前用ELISA检测,PRV gB抗体全部为阳性,PRV gE抗体全部为阴性;在攻毒后14 d这两种抗体均为阳性,体现出良好的安全性与保护性。对照组BarthaK61在攻毒后试验猪全部发病,体温高至40.5℃以上,且均检出排毒。测序结果显示LA2017株的gI部分基因与gE全部基因缺失。该毒株在CEF细胞及ST细胞上生长良好,在CEF上的滴度达到10^{(8.0 )}TCID_(50)/mL,在ST细胞上的滴度最高达10(8.0 )TCID_(50)/mL,在ST细胞上的滴度最高达10^{(9.5 )}TCID_(50)/mL,能满足活疫苗生产的要求。LA2017株安全性好,免疫效力强,生长滴度高,可以作为研制针对PRV变异株疫苗的候选毒株。     

不同免疫途径对鸡新城疫弱毒活疫苗免疫效果的影响

将1 200羽1日龄皖江黄雏鸡(商品代)随机分为对照组和试验Ⅰ组、试验Ⅱ组、试验Ⅲ组,对照组未免疫鸡新城疫弱毒活疫苗,试验Ⅰ组、试验Ⅱ组、试验Ⅲ组分别通过喷雾、点眼和滴鼻途径免疫鸡新城疫弱毒活疫苗,免疫剂量均为1羽份,试验期22 d,研究不同免疫途径产生的新城疫抗体效价。1~22日龄,每3 d每组取鸡30羽,心脏采血,分离血清,检测鸡新城疫抗体,共取样本8次。结果表明,1~13日龄,试验Ⅰ组、试验Ⅱ组、试验Ⅲ组的鸡新城疫抗体随着雏鸡日龄的增加均呈现上升趋势;13~22日龄,试验Ⅰ组、试验Ⅱ组、试验Ⅲ组的抗体呈下降趋势。而试验Ⅰ组、试验Ⅱ组、试验Ⅲ组组间抗体效价差异不显著(P≥0.05),说明通过喷雾、点眼和滴鼻3种不同途径免疫雏鸡,新城疫弱毒活疫苗诱导产生的抗体效价相似。因此,从生产效率和劳动成本角度考虑,推荐规模肉鸡养殖采用喷雾途径免疫鸡新城疫弱毒活疫苗。     

异于肼弱毒鼻疽杆菌的变异性与对小动物的免疫试验

关于鼻疽予防的研究试验,从本世纪初到现在50余年来,曾进行了许多工作,其中一个主要方向是应用不同环境条件培育弱毒的鼻疽杆菌.所采用的方法可概括为: 1.通过含有各种特殊成分的培养基:??用甘油与马铃薯培育出有一定程度抗原性的Ⅰ苗和Ⅱ苗,??氏用牛胆汁培育出毒力致弱的鼻疽杆菌. 2.通过各种动物继代接种方法:??氏用鸽体继代接种;Nicolli氏用豚     

鸭胚化小鹅瘟弱毒苗的培育及初步测定

本项研究,企图用鸭胚致弱的小鹅瘟弱毒苗直接免疫雏鹅以防止小鹅瘟的流行。材料和方法种毒:采用我院1961年分离的小鹅瘟疫苗毒株YG_(25),即扬州株小鹅瘟病毒鹅胚继代第25次的毒株。鸭胚:健康邵鸭或麻鸭蛋,孵化10—12天,发育良好。     

猪瘟综合防控措施

正一、加强免疫是预防猪瘟的有效措施首先,应选用适宜的疫苗进行有效免疫注射,并制定合理的免疫程序和免疫剂量。目前,采用的疫苗有中国的兔化弱毒、脾淋苗,牛(羊)睾丸细胞苗,兔化弱毒克隆株苗及日本的细胞弱毒苗,免疫效果均较好。(一)免疫程序猪瘟免疫程序应根据本场及本地情况进行选择,目前常用程序有:仔猪出生后吮初乳前接种疫苗,注苗后2 h吃初乳,40日龄再免疫1     

地高辛标记质粒探针监测卡那霉素耐药性的研究

雏鸡 1日龄人工感染鸡贫血病毒 (CAV) ,于 8日龄接种 L asota疫苗 ,免疫后 2 8d进行新城疫强毒 (v NDV)攻击 ,以同龄未感染 CAV和用 L asota疫苗免疫并经 v NDV攻毒雏鸡为对照 ,检测其免疫保护效应 ,胸腺和脾脏 T细胞数量及 T细胞增殖反应 ,法氏囊和脾脏 Ig G+、Ig M+、Ig A+抗体生成细胞数量 ,血清免疫球蛋白 Ig G、Ig M、Ig A含量 ,血凝抑制抗体 (HI)滴度等。结果表明 ,CAV人工感染并用新城疫 (ND)疫苗免疫雏鸡经 v NDV攻击     

鸭肝炎病毒A66弱毒株的水平传播感染

取10倍免疫剂量的鸭肝炎弱毒活疫苗(A66株),分别经皮下注射和口服途径接种1日龄易感雏鸭20只,5d后每组取出接种鸭10只分别与20只1d龄易感雏鸭共同饲养进行第1代同居感染试验,5d后取第1代同居感染试验鸭10只再与20只1d龄易感雏鸭共同饲养进行第2代同居感染试验,如此进行5次同居感染试验.定时采集各代次同居感染...     

鸡传染性喉气管炎(ILT)病毒弱毒G80株的免疫原性

从广州市郊鸡场分离出一株ILT病毒,暂定名为G_(80)株。经CAM(鸡胚绒毛尿膜)和CEKC(鸡胚肾单层细胞)连续传13代之后,对鸡的毒力已减弱,以此减弱毒株经鼻眼途径免疫鸡只,每鸡接种0.3ml,测得其最大安全浓度(LD—O.max)为10~(4.95)EID50/0.2ml以上,获得100％保护的最小有效浓度处于10~(3.25)和10~(3.75)EID_(50)/0.2ml之间(相当于最大安全浓度的1/28～1/15),取其不致引起任何临床反应的浓度10~(2.25)EID_(50)/0.2ml(相当于最大安全浓度的1/500)对鸡免疫,保护率为16/21(76％)。免疫发生期短于4天,能产生同居感染和接触免疫,但不会引起IIT的临床症状。经鸡体连续通过5代证明毒力稳定。本弱毒株可进一步进行其它有关试验和大田试验,以评价其作为疫苗的使用价值。     

猪繁殖与呼吸综合征弱毒苗阴道免疫对母猪子宫IgA和IgG分泌细胞的影响

用猪繁殖与呼吸综合征 (PRRS) 弱毒苗分别通过生殖道黏膜免疫和肌肉注射免疫母猪 (各 4头 ), 另 4头经生殖道接种生理盐水作为对照, 运用免疫组化技术显示子宫局部IgA分泌细胞和IgG分泌细胞的分布。结果表明, 对照组子宫中IgA分泌细胞和IgG分泌细胞主要分布于黏膜固有层浅层, 子宫颈中的IgA分泌细胞数量多于子宫角, 而子宫角中IgG分泌细胞数量多于子宫颈。生殖道免疫后, 与对照组相比, 子宫角IgA分泌细胞数量极显著增多 (P<0 01), 子宫颈IgA分泌细胞数量无显著增加; 子宫角IgG分泌细胞数量有所增加, 但差异不显著, 子宫颈IgG分泌细胞数量无显著变化。肌肉注射后, 子宫中IgA和IgG抗体分泌细胞数量与对照组间无明显变化。表明用PRRS弱毒苗经生殖道黏膜免疫可增加子宫局部抗体分泌细胞数量, 而全身免疫对子宫抗体分泌细胞无显著影响。     

免疫禽脑脊髓炎弱毒疫苗后肉种鸡琼扩抗体的动态变化

为探讨肉种鸡免疫禽脑脊髓炎(AE)弱毒疫苗的抗体变化规律及其与后裔雏鸡对禽脑脊髓炎病毒(AEV)易感性的相互关系，本研究用琼脂扩散试验对14周龄免疫禽脑脊髓炎(AE)弱毒疫苗的5群艾维茵父母代肉种鸡，其中1群于34周龄加免AE油乳剂灭活苗，从20至60周龄对其AE抗体进行动态监测。结果发现：1)单免弱毒疫苗的4群种鸡，其AE抗体阳性率呈双低谷曲线变化规律，32周龄之前较高，为95％～83.4％；36～40周龄降至67.5％～71．1％，最低可至56．7％；44周龄转而升至80％以上，48～52周龄再度降至59．1％～67．5％：56周龄以后又呈上升(84．2％)。2)AE抗体低谷期间种鸡产蛋率明显降低，其后裔雏鸡AE母源抗体明显降低，而且衰减快。14日龄颈部皮下注射AEV Van Roekel，50％的雏鸡在攻毒后13d发生AE。有些雏鸡在14～21日龄自然发生AE。3)加免AE油乳剂灭活苗可避免种鸡AE抗体低谷期的出现。以上结果表明，在我国养鸡实际生产中种鸡开产前免疫1次AE弱毒疫苗，不足以为整个产蛋期提供有效保护，AE弱毒疫苗和灭活油苗联合应用是预防AE的有效措施。     

鸡减蛋综合征油乳灭活苗的制备及其免疫效果的测定

本研究以鸡减蛋综合征(EDS—76)当地流行毒株做为种毒培养病毒,配以油佐剂制奋了鸡减蛋综合征油乳灭活苗。经实验室免疫试验和大田免疫试验证明,该苗在免疫后第10天即可产生坚强的免疫力(HI效价为8.5log2),到第30天血清中HI效价达到高峰(11.25log2),直到第150天,其HI效价仍为(7.5log2)。对所有用苗鸡群(10万余只)跟踪调查10个月,未发现有发病鸡群,免疫效果普遍反映良好。保存期试验证明,该苗在4℃可保存18个月以上,室温阴暗处可保存10个月以上,这些均证明该苗产生免疫力快,强而且持久,可以有效地控制鸡减蛋综合征在本地区的流行,应进行大面积的推广应用。