滇西北地区羊肚菌的分子鉴定及ITS序列分析

应用rDNA-ITS(Internal Transcribed Spacer)序列比对技术分析了根据形态特征挑选的8株野生羊肚菌子实体(其中7株来自滇西北,1株来自四川)。结果表明,8株羊肚菌归属为4种:粗柄羊肚菌(Morchella crassipes)、美味羊肚菌(Morchella esculenta)、黑脉羊肚菌(Morchella angusticeps)和高羊肚菌(Morchella elata)。羊肚菌属种间的ITS1序列变异很大,ITS2序列较为保守,5.8S rDNA序列最为保守,变异主要发生在ITS1序列。结合系统发育树确定滇西北地区羊肚菌的分类归属。     

郑州市粗柄羊肚菌生境调查分析

调查了郑州市郊区自然发生的粗柄羊肚菌的生态环境,测定了土壤的含水量、pH值、有机质、总磷和总氮含量。结果表明,郑州市粗柄羊肚菌发生于持续高温后突然降温,然后是连续阴雨天气。在子实体下方土壤中首次观察到了假菌核,发现野草和野菜根系,以及蝇蛆等昆虫活动,暗示与子实体的发生有一定联系。郑州市粗柄羊肚菌,特别是体积较大子实体下方的土壤有机质比较丰富,总氮含量较高。但土壤中总磷含量与子实体发生的关系比较复杂。     

贵州羊肚菌的分子系统发育分析

本研究以贵州省贵阳市、六盘水、遵义和铜仁等地采集的羊肚菌样本中挑选出24份子实体样本,采用五个基因片段(ITS、LSU、EF1-a、RPB1、RPB2)联合分析,结合子实体形态特征对其进行了物种鉴定。研究结果表明:贵州省境内共分布有8个野生羊肚菌物种,包括黑色羊肚菌和黄色羊肚菌两个类群,黑色羊肚菌有梯棱羊肚菌(M.importuna)、Mel-19、Mel-21,黄色羊肚菌有Mes-15、Mes-19、Mes-22、Mes-23、Mes-27。野生羊肚菌的发生时间为3—5月,具有喜湿喜阴的生长特性,Mes-15是首次报道具有火烧地偏好性的黄色种。     

两种新疆羊肚菌的分类学鉴定

[目的]对新疆霍城县大西沟采集的两种形异羊肚菌(XJURML4和XJURML5)进行分类鉴定.[方法]用真菌专一引物ITS1f和ITS4扩增两菌ITS区并进行序列分析.[结果]XJURML4 ITS片段1 130 bp( EU086775),XJURML5 ITS片段1 127 bp(EU086776).两菌的ITS2区100;相似,而ITS1区仅有4 bp差异.BLAST比对测序结果发现XJURML4和XJURML5与近缘种宽圆羊肚菌(MorcheLLa esculenta (L.:Fr.)Pers.var.rotunda Pers.:Fr.)的同源性为99.28;和98.65;;NJ法构建进化树分析ITS序列,两菌也跟宽圆羊肚菌类聚在一起.随机引物OPA3进行RAPD扩增,共产生出六条带,二条相同,剩余四条为多态性条带,表明两菌基因组上也有差异.[结论]ITS区序列和进化树分析、OPA3 - RAPD标记技术均表明两菌是宽圆羊肚菌种内的新变种,而与传统形态学鉴定结果不一致.     

采自甘南州的21株野生羊肚菌的分子学鉴定

甘南藏族自治州境内高寒阴湿温差大,土壤肥力高,适宜羊肚菌生长。经对采自甘南藏族自治州的野生羊肚菌进行组织分离,获得21份菌丝培养物,并对其采用ITS、ef1-α、rpb1以及rpb2片段联合矩阵序列分析鉴定。结果表明,21个供试菌株均属黑色羊肚菌支系,其中19株为三地羊肚菌(Morchella eohespera),2株为羊肚菌属Mel-13,且这2种羊肚菌目前已实现人工栽培。     

氧化应激对粗柄羊肚菌菌丝生长和菌核发生的影响

采用平板覆盖玻璃纸培养法,初步探讨了甘露醇、二甲基亚砜(DMSO)、苯甲酸钠和N,N-二甲基对亚硝基苯胺等4种羟基自由基清除剂,L-半胱氨酸、还原型谷胱甘肽和β-巯基乙醇等3种巯基化合物和抗坏血酸对粗柄羊肚菌(Morchella crassipes)菌丝生长和菌核发生的影响。结果表明,作为可以降低真菌胞内氧化应激的活性氧自由基清除剂,测试药剂对菌丝生长和菌核发生具有抑制作用,且该抑制作用随着药剂浓度的增加而增强,较高浓度的添加药剂可完全抑制菌核发生。随着测试药剂的羟基自由基清除能力增强,完全抑制粗柄羊肚菌菌核发生的浓度相应降低,菌丝生长也大致表现出类似的趋势。测试的较强自由基清除剂苯甲酸钠、N,N-二甲基对亚硝基苯胺、3种巯基化合物和抗坏血酸改变了粗柄羊肚菌菌落的色泽,表明打破了粗柄羊肚菌正常的生理活动。     

羊肚菌霉菌性枯萎病病原真菌的分离鉴定及其生物学特性

为明确羊肚菌霉菌性枯萎病的病原菌种类及其生物学特性，通过组织分离法获得羊肚菌霉菌性枯萎病病原菌纯培养物，进行菌落形态、孢子特征及致病性分析，结合ITS序列比对和构建系统发育树对病原菌进行鉴定，并明确该病原菌的最适培养pH、温度和碳源。结果表明：从羊肚菌病样中共分离出4株病原真菌Y1、Y2、Y3和Y6，该4株病原真菌的菌落形态一致，菌丝呈白色绒毛状、较致密，微凸起，菌体生长较慢，不分泌色素。分生孢子无色透明、长棒状、具1个隔膜，大小（3～5） μm ×（19～25） μm，菌丝无色、具分隔、直径约2～4 μm。对菌株Y1、Y2、Y3和Y6（登录号分别为MW922714、MW922715、MW922716、MW922717）的ITS序列进行扩增测序，大小分别为550 bp、545 bp、552 bp和556 bp，经BLAST序列比对和系统发育树分析，菌株Y1、Y2、Y3和Y6与Diploospora longispora和Paecilomyces penicillatus在自举值99%水平上聚在同一个进化分支。综合菌体形态和分子鉴定结果，菌株Y1、Y2、Y3和Y6鉴定为长孢卵单隔孢霉（Diploospora longispora）。该菌的最适生长温度为25 ℃，最佳pH 5.5～6.5，并在碱性条件下具有一定的耐受能力，最佳利用碳源为蔗糖。     

基于ITS和ISSR的羊肚菌种质资源遗传多样性分析

【目的】目前羊肚菌栽培菌种品性退化,羊肚菌种质资源的筛选评价对于选育优质新品质具有重要意义。【方法】本研究采用核糖体DNA转录间隔区(Internal Transcribed Spacer,ITS)序列分析技术,对收集到的18个羊肚菌菌株进行菌株鉴定和系统发育分析,同时应用ISSR(inter-simple sequence repeat)分子标记手段,进行遗传多样性以及亲缘关系分析。【结果】10个菌株为梯棱羊肚菌(Morchella importuna),2个为六妹羊肚菌(Morchella sextelata),4个为高羊肚菌(Morchella elata),2个野生羊肚菌为粗柄羊肚菌(Morchella crassipes)。ISSR聚类分析显示出供试菌株的总体相似性为0.52,相似系数为0.54时聚为两大类群。【结论】18株菌株间具有明显的遗传多样性。     

基于rDNA-ITS序列的甘肃甘南野生羊肚菌遗传多样性分析

通过对采自甘肃甘南藏区的16株野生羊肚菌菌株进行分子生物学分析,对rDNA基因内转录间隔区(ITS)片段进行PCR扩增并测序,测序结果在GenBank中进行BLAST比对,鉴定得知,16株供试羊肚菌共归纳为5种,分别为黑脉羊肚菌(Morchella angusticeps)、羊肚菌(Morchella esculenta)、高羊肚菌(Morchella elata)、粗腿羊肚菌(Morchella crapssipes)和尖顶羊肚菌(Morchella conica)。根据采用最大简约法(MP)和邻接法(NJ)构建的分子进化树得知,2种分子进化树拓扑结构相似,并且Bootstrap验证显示,系统发育树各分支都有很高的支持率,说明其系统关系有很高的可信度。结果可为该地区羊肚菌(Morchella spp.)的系统分类提供较为准确的分子性状依据。     

一株采自四川南充的羊肚菌生境调查与鉴定

为调查四川南充羊肚菌资源并考察其发生地环境,于2014年3月31日在南充市西充县金泉乡双桥子村采集到1株羊肚菌.通过菌丝体培养,镜检观察完成形态鉴定,基于ITS、LSU、ef1-α、rpb1和rpb2序列分析构建的系统发育树完成分子鉴定,确定为Morchella sp.(Mes-16),归入黄色羊肚菌支系(Esculenta Clade),进一步结合样地环境及土壤理化性质分析了羊肚菌在当季发生的可能的机制.     

陕北风沙区羊肚菌不同设施高效栽培模式研究

为了探索出适合陕北风沙区不同设施水平下最优的羊肚菌栽培品种与栽培茬口,开展了日光温室、钢架棉被拱棚、遮阳大棚三种设施下羊肚菌不同播种时间与不同品种的出菇田间试验。结果表明日光温室内适宜秋冬茬、早春茬和冬春茬,以冬春茬七妹羊肚菌产量为佳;钢架棉被拱棚内早春茬和越冬茬均适宜,以七妹羊肚菌越冬茬产量最高;遮阳大棚内适宜越冬茬,而不适宜早春茬,越冬茬以六妹和七妹羊肚菌为宜。总之,陕北风沙区羊肚菌种植应结合现有的设施条件,选择有利的栽培茬口和适宜品种,相对而言,三种设施条件下以越冬茬模式为佳,以七妹羊肚菌为适宜栽培品种。     

不同配方培养基对羊肚菌菌丝生长及菌核和子实体形成的影响

[目的]研究羊肚菌(Morchella esculenta)菌丝生长及菌核和子实体形成的最佳培养基。[方法]对羊肚菌的3个重要菌株采用5种不同的培养基(核桃树浸出液、羊肚菌子实体浸出液、香樟木浸出液、新鲜蒜苗浸出液和当年发生过羊肚菌的基脚土浸出液培养基)进行室内人工仿生栽培试验,并观察不同菌株在不同培养基中产核的阶段性表现以及菌核的培养特征。[结果]在未覆土的条件下,M3菌株未产生菌核,覆土之后,M3菌株产生了大量的菌核,且M3菌株在新鲜蒜苗浸出液培养基中形成了一定数量的原基。[结论]与其他菌株相比,M3菌株可能存在进一步分化形成子实体的潜力。     

陕西关中地区羊肚菌属一新记录种:粗腿羊肚菌

论文论述了新近在陕西、杨陵区农田首次采集到的粗腿羊肚菌[MorchellaCrassipes(Vent)Pers.]的特点。此种羊肚菌在杨陵区属首次记载,是一种很有价值的食品。     

Extracellular Enzyme Activity of Sclerotia-forming and Non-Sclerotia-forming Morchella Strains

The extracellular enzyme activities of sclerotia-forming and nonsclerotia- forming single spore strains of Morchella conica and M. crasspies were determined and compared. The non sclerotia-forming strains of M. conica exhibited higher aver- age activities of protease, catalase and xylanase but lower laccase activity than those of sclerotia-forming strains. However, the differences did not reach significance level. The soluble amylases activity of M. crasspies was significantly higher than that of M. conica, while the mean activity of other enzymes had differences between them, but the differences did not reach significance level.     

羊肚菌驯化栽培试验初报

研究了两个羊肚菌种在6种栽培料上菌丝的生长情况和菌核的培养特征。结果表明,普通羊肚菌在菌丝生长和菌核形成方面都优于黑脉羊肚菌;以北芪渣为辅料的栽培料效果最佳,菌丝生长快,菌核形成多,其次是杨树根土和草木灰栽培料。     

羊肚菌生态位及其培养技术研究

对我国野生羊肚菌的形态、营养成分、种类构成和资源分布、生长条件、生态位及人工培养技术和方法进行了阐述,对国内外羊肚菌开发利用的现状作了介绍,阐明了人工栽培研究羊肚菌的重要作用和发展前景。     

羊肚菌种质资源及人工栽培研究进展

羊肚菌为珍稀食用菌品种,商品羊肚菌主要来源于人工栽培。介绍了羊肚菌人工栽培的菌种种质资源情况及国内外羊肚菌室内外栽培技术,认为在菌种种质资源方面,多以当地野生菌种为母体,经分离驯化作为待选种质资源。在人工栽培方面,室外栽培技术水平已有较大提升,在地势开阔地区可实现大田栽培的迁移应用,但仍受季节限制;室内栽培虽可打破季节限制,快速满足市场需求,但其可迁移性小,投资过大。通过对近年来有关羊肚菌种质资源及人工栽培研究进行综述,以期为羊肚菌人工栽培以及菌种选育技术的深入研究提供参考。     

河北省燕山区羊肚菌资源调查及开发利用

[目的]为了开发和利用河北省燕山区羊肚菌资源。[方法]通过普查法对河北省燕山区羊肚菌的资源进行调查,并对野生羊肚菌进行菌种分离及原生地补菌试验。[结果]燕山区羊肚菌资源调查表明：燕山区目前存在3种野生羊肚菌,分别为羊肚菌、褐赭色羊肚菌及粗腿羊肚菌。3种羊肚菌多生长在杨树林、果园、草地、河滩、榆树林、槐树林及上述林边的路旁河边。单个或成片生长,土质一般为沙碱性或略偏碱性。一般5月上旬至6月上旬出菇较多,属于喜冷凉型食（药）用菌。野生羊肚菌的菌种分离,采用浓度为0．1％的升汞溶液浸泡,最佳消毒时间为60s。3种羊肚菌菌丝培养的最佳温度为26～30℃,补菌试验效果良好。[结论]为野生羊肚菌的半人工栽培提供了基础。     

云南省德钦县野生羊肚菌资源初探

通过对云南德钦县羊肚菌资源的调查研究,发现该地区内有羊肚菌8种,其中2种国内外未见报道,同时对其相应分布生态类型作了介绍。