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1.
2.
本研究旨在建立水貂生长激素(mink growth hormone,mGH)的原核高效表达体系,探索mGH蛋白规模化生产方法,利用获得的目的蛋白制备特异抗血清。将已构建的原核表达载体pET28b-mGH转化大肠杆菌Rosetta(DE3)TMpLysS感受态细胞,经IPTG诱导表达,超声破碎菌体后离心获得包涵体蛋白,利用8mol/L尿素对其进行溶解和复性,经Ni-NTA树脂亲和层析纯化获得重组蛋白。通过Western blotting检测及MALDI-TOFMS质谱分析对获得的蛋白进行鉴定。用SDS-PAGE电泳法检测蛋白纯度,用BCA法测定其浓度。复性mGH蛋白与完全弗氏佐剂或不完全弗氏佐剂乳化制备免疫抗原,采用皮下多点注射法免疫3只新西兰大白兔,首次免疫剂量为600μg/只,二免剂量为600μg/只,三免剂量为400μg/只。三免10d后分离制备血清,Western blotting法检测其特异性,间接ELISA法检测其效价。结果表明,原核表达的包涵体经Ni-NTA柱纯化后所得蛋白鉴定为mGH融合蛋白;SDS-PAGE电泳鉴定复性mGH蛋白条带单一,纯度达90%以上,BCA法计算蛋白浓度为669μg/mL,均达到了免疫动物的要求;制备的抗血清经Western blotting检测具有良好的结合特异性,间接ELISA法测定其抗体效价达1∶256 000以上。上述结果表明,原核表达载体pET28b-mGH可在大肠杆菌Rosetta(DE3)TMpLysS细胞中高效表达mGH融合蛋白,表达蛋白经变性、复性和纯化后免疫新西兰大白兔,可制备高效价特异性抗血清。 相似文献
3.
4.
通过对太谷县退耕还林工程实施情况的总体分析,剖析了工程实施中存在的主要问题、产生背景以及围绕针对如何切实巩固退耕还林工程成果等问题提出了一些相关思考。 相似文献
6.
正近年来,常德市委市政府认真落实新发展理念,以建设国际湿地城市为载体,全力推进湿地大保护,着力打造绿色发展新名片,厚植绿色发展新优势。目前,常德市8公顷以上的湿地面积达19万公顷,湿地保护率达71.66%。2018年10月成功入选全球首批国际湿 相似文献
7.
通过盆栽方式,采用不同体积混合配比的泥炭、椰糠、陶粒、树皮基质试验,以N、P、K3元素3水平设置了正交施肥试验,测定植株的生长状况、叶片养分及发病情况,分析了不同栽培基质和施肥处理对‘霞光’生长特性的影响。结果表明,混合栽培基质对虎雪兰‘霞光’的生长较单一的基质效果好,以1/4树皮4-1/4泥炭+1/4椰糠+1/4陶粒混合基质植株的株高、假鳞茎、叶面积和根系生长效果最佳;外施氮、磷、钾肥最佳组合为N1P2K3,即NH4N03、NaH2P04和KCl含量分别为1.25mmol/L、0.456mmol/L和2.62mmol/L,有利于虎雪兰‘霞光’植株的营养生长,且设施栽培中发病率较低。 相似文献
8.
9.
以毛白杨为试验材料,研究模拟干旱胁迫对其叶片相对含水量(RWC)、POD活性、脯氨酸含量的影响。结果表明:在模拟干旱胁迫条件下,叶片相对含水量较对照组均出现了不同程度的下降,其中模拟干旱胁迫最严重的试验组(PEG-6000浓度为30%)叶片相对含水量下降最为明显;叶片POD的活性较对照组均出现了上升,其中中度干旱胁迫(PEG-6000浓度为20%)的POD活性上升最为显著;脯氨酸的含量较对照组出现了不同程度的上升,并且模拟干旱胁迫越严重,脯氨酸含量上升的越显著。 相似文献
10.
[目的]对新疆霍城县大西沟采集的两种形异羊肚菌(XJURML4和XJURML5)进行分类鉴定.[方法]用真菌专一引物ITS1f和ITS4扩增两菌ITS区并进行序列分析.[结果]XJURML4 ITS片段1 130 bp( EU086775),XJURML5 ITS片段1 127 bp(EU086776).两菌的ITS2区100;相似,而ITS1区仅有4 bp差异.BLAST比对测序结果发现XJURML4和XJURML5与近缘种宽圆羊肚菌(MorcheLLa esculenta (L.:Fr.)Pers.var.rotunda Pers.:Fr.)的同源性为99.28;和98.65;;NJ法构建进化树分析ITS序列,两菌也跟宽圆羊肚菌类聚在一起.随机引物OPA3进行RAPD扩增,共产生出六条带,二条相同,剩余四条为多态性条带,表明两菌基因组上也有差异.[结论]ITS区序列和进化树分析、OPA3 - RAPD标记技术均表明两菌是宽圆羊肚菌种内的新变种,而与传统形态学鉴定结果不一致. 相似文献