假单孢菌20#-5菌株代谢产物对马铃薯晚疫病菌的抑制作用

为了深入研究抗生菌假单胞菌20#-5菌株的有关性状，采用固体平板抑菌法调查了其代谢产物的抗菌谱，用甲醇浸提和色谱分离法对其活性成分进行了分离纯化，并初步优化了其发酵条件。结果表明，该菌的代谢产物在固体培养基上对马铃薯晚疫病菌、苏云金芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、蜡质芽孢杆菌等有较强的抑制作用，抑菌直径大于20mm；对耶尔森氏菌有微弱的抑制作用，抑菌直径小于10mm；对小麦赤霉病菌、柑橘溃疡病菌、亚利桑那沙门氏菌、克雷伯氏菌等没有抑制作用。浓缩液经AcA202凝胶过滤和C-18反相色谱分离，结果显示该菌代谢产物中有多种抗菌活性成分。该菌株的最佳发酵条件是100ml的三角瓶中装10ml初始pH8．0的LB培养液，28℃摇床发酵4天。     

农用抗生素的筛选策略

微生物是具有农用生物活性的代谢产物的重要来源。本文将就筛选策略对近年来从微生物中筛选具有农用生物活性代谢产物即农用抗茸素所取得的进展进行综述，其中包括分离新的或稀有微生物类群、发酵技术的改进、建立新的筛选模型及高通量筛选技术及色谱-光谱联用技术等方面。新的微生物类群是产生新的具有农用生物活性的代谢产物的重要目标；发酵技术的改进将会提高新的代谢产物出现的机会和检测的机率；新的筛选模型的创建和改进有助于发现新的代谢产物；高通量筛选技术有助于提高筛选的速度;而色谱-光谱联用技术的运用将避免不必要的重复工作，加快化合物的早期鉴别速度。     

万隆霉素的高效液相色谱法测定

采用反相高效液相色谱(HPLC)法测定发酵产物中万隆霉素的含量,色谱柱为C18反向分析柱(3.9mm×150mm),柱温为40℃,流动相为甲醇∶水(20∶80),检测波长为280nm,流速为1ml/min。结果表明万隆霉素在上述条件下能从发酵产物中获得很好地分离,万隆霉素浓度在17.5~280μg/ml范围内线性良好,线性回归方程为:y=17343x-164139,相关系数R2=0.9998(n=5)。     

MNNG对多杀菌素产生菌的诱变效应

多杀菌素(spinosad)是刺糖多孢菌 Saccharopolyspora spinosa发酵产生的次级代谢产物,有显著杀虫活性.采用N-甲基-N′硝基-N-亚硝基胍(MNNG)作为诱变因子对刺糖多孢菌的孢子进行诱变处理,以高效液相色谱方法检测多杀菌素的发酵产量.研究结果表明:诱变剂量为2mg/ml,诱变40min时多杀菌素产量有较大幅度提高.通过诱变最终得到5株产量分别比出发菌株提高61.1%、80.3%、128.1%、69.9%和77.8%的突变株.     

农用抗生素120有效成份的研究

刺孢吸水链霉菌北京变种（即农抗１２０产生菌）发酵代谢产物具有多种成份，脂溶性成份是其中一类活性物质。作者采用溶媒提取法，一次性提取收率超过５０％。分离纯化后的纯品（Ａ）的紫外、红外光谱图与Ａｎｉｓｏｍｙｃｉｎ相同。（Ｂ）为四烯类物质。（Ａ）对水稻纹枯病等几种作物病原真菌，在平皿中抑菌测定有很高活性     

微生物源农药申嗪霉素的研制与应用

申嗪霉素是中国自主研发的一种新型微生物源农药,具有高效、安全、广谱等特点,其主要成分是甜瓜根际促生菌M18产生的次级代谢产物吩嗪-1-羧酸。文章重点就申嗪霉素产生菌M18的分离及其代谢产物的鉴定、申嗪霉素生物合成及调控机理最新研究进展、申嗪霉素高产工程菌株的构建和产业化、以及申嗪霉素大田防病试验结果及推广应用情况等进行详细综述,并对其抗菌作用机理进行探讨,旨在为申嗪霉素的生物合成机理研究、遗传和代谢改造以及推广应用提供参考。     

农用抗生素120有效成份的研究

赖孢吸水链霉菌北京变种（即农抗１２０产生菌）发酵代谢产物具有多种成份，脂溶性成份是其中一类活性物质。作者采用溶媒提取法，一次性提取收率超过５０％。分离纯化后的纯品（Ａ）的紫外，红外光谱图与Ａｎｉｓｏｍｙｃｉｎ相同。（Ｂ）为四烯类物质。（Ａ）对水稻纹枯病等几种作物病原真菌，在平皿中抑菌测定有很高活性。     

假单胞菌代谢产物藤黄绿菌素化学结构、生物合成途径、调控机制及应用研究进展

藤黄绿菌素（pyoluteorin，Plt）是假单胞菌产生的次级代谢产物，具有广谱抑菌活性。本文系统介绍了Plt产生菌、化学结构、生物合成途径及其调控机制等方面的研究进展。在此基础上，总结了构建高产Plt工程菌株的策略和成果。最后，展望了Plt成为新型代谢产物农药的潜力和未来的研究方向。     

内生真菌ZJUF0986代谢的抗菌活性物质特性

内生真菌紫杉木霉ZJUF0986菌株产生的活性代谢产物Ⅰ对植物病原真菌具有广谱抑菌活性。通过紫外吸收、薄层色谱、捷克八溶剂系统纸色谱、pH纸色谱及不同pH和温度处理手段,研究了该活性代谢产物Ⅰ的部分理化性质。结果表明,活性代谢产物Ⅰ的最大紫外吸收峰为199nm;以石油醚∶ 乙酸乙酯=95∶ 5为展开剂薄层层析时,样品斑点的Rf值为0.58;捷克八溶剂系统纸色谱和pH纸色谱图谱与已知各类抗生素纸图谱相比较,活性代谢产物Ⅰ是一类低极性、弱酸性、非水溶性的抗生素;活性代谢产物Ⅰ在酸性至弱碱性和低于100℃的条件下相当稳定,在pH＞10和121℃下活性物质不稳定。     

土壤中有益放线菌的高效分离、筛选和生物测定技术

结合他人经验和近年作者的实际工作,本文系统介绍了土壤标本的采集、处理,放线菌的分离、纯化。放线菌分离物及其代谢产物对病原菌(真菌、细菌)、害虫和杂草的生物测定、评价,为研发微生物农药打下基础。     

一株虫生真菌杀线虫活性代谢产物的分离与结构鉴定

以生物活性为导向,利用硅胶、凝胶柱层析法以及高效液相色谱等技术对一株虫生真菌拟青霉菌Paecilomyces sp.的活性次生代谢产物进行了研究。从其活性组份中共分离得到2个杀线虫活性次生代谢产物,经质谱和核磁共振等波谱分析方法鉴定其结构分别为脑苷酯类化合物Cerebroside A( 1 )和 Cerebroside B( 2 )。活性测定结果显示,这2个化合物均具有杀松材线虫Bursaphelenchus xylophilus活性,其中化合物 1 在质量浓度分别为1 000,100和10 μ g/mL下对松材线虫的致死率分别为100%,100%和11.1%。     

海洋多粘类芽孢杆菌L1-9抗菌活性产物的分离与结构鉴定

 为了从海洋多粘类芽孢杆菌发酵液中分离鉴定抗菌活性产物,以对禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)的生物活性进行跟踪,采用硅胶柱层析、Sephadex LH-20柱层析、薄层层析和HPLC等技术,对海洋多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)L₁-9抗菌活性组分进行分离纯化,采用ESI-MS、¹H NMR、¹³C NMR等波谱分析技术,对活性组分进行结构鉴定。采用牛津杯法测定活性组分的抑菌谱。得到了2种具有强抗菌作用的组分B1和B2;认为组分B1和B2分别为邻苯二甲酸二丁酯(DBP)和邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)。DBP和DEHP对供试的5种病原真菌和细菌具有抑制作用。邻苯二甲酸二丁酯的抑制作用高于邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯。     

昆虫病原线虫共生细菌发酵液对棉铃虫和菜青虫的口服毒性

研究了昆虫病原线虫共生细菌4个种和1组未定名种28个菌株发酵液对棉铃虫、菜青虫幼虫的致死、抑制生长和拒食作用。嗜线虫致病杆菌对棉铃虫幼虫具有较高的口服毒性，含20％(V／W)嗜线虫致病杆菌CBl2、CB6、CB5、CB28菌株发酵液的人工饲料饲喂棉铃虫初孵幼虫6天后，幼虫校正死亡率分别为97．7％、88．7％、88．4％和88．4％，饲喂棉铃虫3龄幼虫5天后，相对生长抑制率分别为96.4％、95．1％、95．6％和93．8％，上述菌株发酵原液涂抹白菜叶片饲喂5龄棉铃虫幼虫24h后相对拒食率分别为87．6％、83．6％、91．4％和89．8％；光杆状菌CBl、cBl52菌株、嗜线虫致病杆菌CB19菌株和波氏致病杆菌CB32菌株发酵原液涂抹白菜叶片饲喂菜青虫24h后，相对拒食率分别为82．7％、77．2％、75．8％和75．0％。     

昆虫病原线虫对小地老虎的致病力测定及防治效果

为探讨应用昆虫病原线虫防治小地老虎技术的可行性,采用培养皿滤纸法比较9个品系的昆虫病原线虫对小地老虎幼虫的致病力,同时通过盆栽试验验证了斯氏线虫属小卷蛾斯氏线虫Steinernema carpocapsae NC116品系、芫菁夜蛾斯氏线虫S.feltiae SF-SN品系和异小杆线虫属嗜菌异小杆线虫Heterorhabditis bacteriphora H06品系的保苗效果和防治效果,并测定了苦参碱与NC116品系混用对小地老虎3龄幼虫的联合作用效果。结果表明,NC116品系对小地老虎3龄幼虫致病力最高,其对3龄、4龄和5龄的LD50分别为2.4、7.5、和31.2条/头,表明随小地老虎幼虫龄期递增,其致病力下降。盆栽玉米苗上分别施用线虫100~200条/头时,对玉米保苗效果及对小地老虎3龄幼虫的控制效果依次为NC116H06SF-SN。0.8 mg/L苦参碱和NC116品系混用后,可使小地老虎3龄幼虫死亡率提高109.89%,二者表现增效作用。     

嗜线虫致病杆菌CB6菌株对小菜蛾幼虫生物活性的研究

用叶碟法测定了嗜线虫致病杆菌CB6菌株发酵液对小菜蛾幼虫的致死率、拒食活性以及对生长发育的影响。结果表明 ,其发酵液对幼虫有较高的生物活性 ,取食 3d后 ,1～3龄幼虫的校正死亡率分别为 84.75%、68.33%和 59.32%。 4龄幼虫取食量显著减少 ,选择性拒食率为 76.59% ,非选择性拒食率为 69.72%。 3龄幼虫取食发酵液处理的叶片后 ,生长极其缓慢 ,在 48h时体重抑制率达 100% ,化蛹率和羽化率均明显下降 ,其中化蛹率仅为 15.56% ,100%蛹不能羽化。     

Biological effects and metabolism of fenoxycarb after treatment of the fourth and the fifth instars of the tobacco budworm,Heliothis virescens F.

Treatment of 4th and 5th instar larvae of Heliothis virescens with different amounts of fenoxycarb induced an increase in weight of the 5th larval instar, prolongation of the 5th larval instar period, or the formation of dauer larvae. No effects were observed during the 4th instar and the moult to the 5th larval instar. To check whether these effects were due to persistence of fenoxycarb in treated larvae, metabolism of this chemical was analysed. Larvae were fed with radio-labelled fenoxycarb at the first day of the 4th or at the first day of the 5th larval instar. Behaviour of the radio-labelled compounds was followed during each instar. At the time of gut purge, the whole of the radio-labelled material was excreted. The effects observed during the 5th instar of 4th-instar-treated larvae do not appear to be due to the persistence of fenoxycarb. The main metabolites of fenoxycarb were identified using coupled gas chromatography and mass spectrometry.     

嗜线虫致病杆菌对棉铃虫的生物活性研究

嗜线虫致病杆菌HB310(Xenorhabdus nematophila HB310)菌液中主要的杀虫活性物质是一种高分子量的复合蛋白—毒素Ⅱ。以该菌液和毒素Ⅱ分别饲喂棉铃虫Helicoverpa armigera幼虫,检测其对棉铃虫生长发育的影响,同时通过生化分析研究了该毒素对幼虫中肠内几种蛋白酶活力的影响。结果表明:菌液和毒素Ⅱ对棉铃虫幼虫的取食量和生长发育均有显著的影响,取食拌有菌液和毒素Ⅱ的人工饲料的棉铃虫食量明显减少,发育速度延缓,发育历期比对照明显推迟;尽管一直取食混合原菌液(6.5×108 cells/mL)人工饲料的棉铃虫2龄幼虫前期死亡率很低,但是其生长发育几乎完全被抑制,该处理组所有幼虫均不能化蛹;原菌液对4龄幼虫的食量、发育历期、蛹重及化蛹率均有显著影响。菌液对棉铃虫幼虫的影响与菌液的浓度和幼虫的龄期成反比,稀释50倍的菌液对2龄和4龄幼虫的生长发育仍有一定影响;毒素Ⅱ(51.9 μg/mL)对4龄棉铃虫的生长发育也有明显的抑制作用。短时间(2 d)饲喂原菌液后更换正常饲料,仅延缓了棉铃虫幼虫的发育历期,而对其化蛹率、蛹重及羽化率均无明显影响。饲喂毒素Ⅱ的棉铃虫幼虫中肠主要蛋白酶的活性受到明显的抑制。     

黄柄曲霉ASD次生代谢产物的鉴定及抑菌活性

为明确土壤来源的黄柄曲霉ASD次生代谢产物中的抑菌物质及其生物活性，利用硅胶柱层析、凝胶柱层析和半制备高效液相色谱对ASD发酵液的二氯甲烷粗提物进行纯化，运用核磁共振及高分辨质谱技术，结合文献报道数据对化合物的结构进行鉴定，利用X-射线单晶衍射验证鉴定结果；采用含药稀释平板法及菌丝生长速率法测定化合物对辣椒疫霉菌、大斑凸脐蠕孢菌和禾生刺盘孢菌等9种病原真菌的抑菌活性。结果表明，从ASD发酵液中分离获得已知活性抑菌物质为sulochrin和4,5-二甲基间苯二酚。其中，sulochrin对辣椒疫霉菌、大斑凸脐蠕孢菌和禾生刺盘孢菌有较好的抑制作用，4,5-二甲基间苯二酚只对辣椒疫霉菌具有较好的抑制作用，两者对灰葡萄孢菌、玉蜀黍尾孢菌和新月弯孢菌等6株致菌抑菌效果不明显或无抑制作用。     

Mixed function oxidase and glutathione transferase activity in last instar Heliothis virescens larvae

Methyl parathion-resistant and -susceptible strains of Heliothis virescens were assayed for mixed function oxidase and glutathione transferase activity at four time periods within the last instar. No significant differences were found between the mixed function oxidase or glutathione transferase activities of the resistant and susceptible strains. However, significant differences did appear among time periods within the last instar. Larvae assayed during the postfeeding time period (60–80 hr) had the highest mixed function oxidase activity, which was 28 times that of last instar larvae assayed during the first time period (0–19 hr). Glutathione transferase activity appeared to be highest during the 20- to 39-hr and 40- to 59-hr time periods, but the differences among time periods were small. The importance of these findings to studies of insecticide resistance and plant herbivore interactions is discussed.     

寄主植物对棉铃虫生理代谢的影响

作者研究了取食不同寄主植物的棉铃虫(Heliothis armigera Hübner)在生长发育和生理代谢上的变化。结果表明:(1)取食不同寄主植物的幼虫发育天数差异较大,其顺序是:棉铃(14天)=人工饲料(14天)<扁豆(16天)<番茄(19天)<青椒(23天);(2)所有供试害虫均含有17种游离氨基酸,谷氨酸、甘氨酸和精氨酸是主要组成成份,第3龄期的差异比较显著;(3)多功能氧化酶和羧酸酯酶的活力随幼虫发育逐渐减小。3龄时期幼虫的活力较高于其他时期,取食青椒的棉铃虫酶活力高于其他4种植物。上述结果说明,幼虫第3龄期可能是解毒的关键时期,代谢过程是多酶系的复合反应,酶活力的变化与棉铃虫的生长发育不成正比,多功能氧化酶是重要的解毒酶,羧酸酯酶作为水解酶起到一定的辅助作用。